Analize fizico - chimice

9. Spectroscopia de absorbtie
moleculara

Spectroscopia de absorbtie
moleculara in domeniu in UV-Vis

1
 Spectroscopia de absorbtie moleculara - introducere

• Cuantificarea energiei moleculare se realizeaza prin

insumarea a patru tipuri de energie:

- energia de translatie (necuantificata) - corespunde

deplasarii globale a moleculei datorita agitatiei termice

- energia electronica (cuantificata) = energia electronilor in

orbitalii moleculari

- energia de vibratie (cuantificata) – corespunde fiecarui

nivel de energie electronica permis
si
- energia de rotatie – fiecare nivel de vibratie este subdivizat
in nivele de rotatie
2
 Cu exceptia energiei de translatie care variaza
continuu, celelalte tipuri de energie nu pot lua decat
valorile unei succesiuni de nivele de energie permise
care se succed intr-o ordine foarte stransa

Modificarea unui moment de dipol molecular (µm) prin:

a) rotatie b) vibratie c) excitare electronica

(-) (-) (-)

µm µm µm
(+) (+) (+)

a) νrot b) νvibr c) νel

3
  Spectrele de absorbtie moleculara - descriu variatia
absorbtiei in functie de lungimea de unda a radiatiei
electromagnetice

A  Alura unui spectru UV-Vis

(D,E) – spectru electronic cu benzi largi

0.8

0.4

0.2

0
200 240 260 280 320 λ (nm)
4
 Spectre de absorbtie moleculara
 Alura unui spectru IR
- spectru de rotatie-vibratie
A%
 Alura unui IR indepartat si
microunde- spectru de rotatie

ν (cm-1)

- Spectru de benzi inguste

- Spectru de linii

5
 Spectroscopia de absorbtie
moleculara in ultraviolet si vizibil
UV-Vis

6
 Principii

• Spectrele de absorbtie UV-Vis descriu tranzitia electronilor de la o

stare de energie joasa la o stare cu o energie mai ridicata (stare
excitata)
• Gama lungimilor de unda utilizabile:
UV λ=100-380 nm
Vis λ=380-800nm
Aceasta gama este limitata de aparatele si materialele utilizate
la:
- 200 – 780 nm pentru aparatele obisnuite
- 200 – 3000 nm pentru aparatele performante

7
 Tranzitii de energie electronica
• Presupun promovarea electronilor implicati in tranzitie dintr-un
orbital de legatura (liant) σ sau π, ocupat cu electroni in stare
fundamentala, intr-un orbital de antilegatura (antiliant) σ* sau
π*, ocupabil in stare excitata

• In aceste tranzitii sunt implicati si electronii neparticipanti n (de

nelegatura)

• Intre acesti orbitali pot avea loc urmatoarele tipuri de tranzitii:

σ → σ*
n → σ*
π → π*
n → π*

8
 Orbitali σ*
(antilianti)

1
Orbitali π*
(antilianti)
n π* n σ*
R CH2-Cl σ σ*
ΔE=hν=hc/λ C=O Spre 170 nm CH2
π→π*
R CH2=CH2 Spre 120 nm
Spre 280 nm Spre 160 nm
Orbitali n
(nelianti)

Orbitali π
(lianti)
2

Orbitali σ
(lianti)

1 – stari excitate
2 – stari fundamentale
9
 Notiuni specifice spectroscopiei in UV-VIS
• Grupare cromofora – grupare functionala care absoarbe o
radiatie luminoasa din domeniul UV-VIS si poate da nastere unui
spectru electronic
Cromofor Exemplu compus λmax εmax Solvent
>C=C< etilena 171 15530 faza de vapori

-C≡C- octena 1 177 12600 heptan

>C=O acetaldehida 160 20000 faza de vapori
- CO2H acid acetic 208 32 etanol
- COCl clorura acida 220 100 hexan
- CONH2 acetamida 178 9500 hexan
- CO2R acetat de etil 211 57 etanol
- ONO2 nitrat de butil 270 17 etanol
- NO nitrozobutan 300 100 eter 10
• Grupare auxocroma – grupare functionala saturata de tipul
– OH, - NH2, - Cl care, atasata unui cromofor, determina
modificarea lungimii de unda (λmax) la care are loc absorbtia,
precum si a intensitatii maximului de absorbtie

• Deplasare batocroma (spre rosu) – deplasarea maximului de

absorbtie spre lungimi de unda mai mari

• Deplasare hipsocroma (spre albastru) – deplasarea maximului

de absorbtie spre lungimi de unda mai mici

• Efect hipocromic – scaderea intensitatii absorbtiei

• Efect hieprcromic – cresterea intensitatii absorbtiei

11
 Efect

ε sau hipercromic
lg ε
hipsocromic batocromic

hipocromic

λmax λ

12
 Aparatura
• Principalele componente:
- Sursa de radiatie
• lampa cu descarcare in deuteriu pentru UV
• lampa de halogen-wolfram pentru Vis si IR apropiat
- Monocromator – dispozitiv optic (prisma) – separa radiatia
policromatica in radiatie monocromatica
- Suport pentru proba- cuva cu o dimensiune cunoscuta (uzual
1cm grosime), din material transparent in domeniul lungimii de
unda utilizate:
• cuart pentru domeniu UV
• sticla optica sau cuart pentru domeniu Vis
- Detector – fotocelule/fotomultiplicator etc.
- Amplificator
- Inregistrator
13
• Pregatirea probei
 Criterii pentru alegerea solventului:
- capacitatea de dizolvare a substantei analizate
- transparenta pentru domeniul lungimii de unda utilizate (nu
trebuie sa absoarba radiatia din zona studiata)
- volatilitate redusa
- grad de puritate ridicat(PA)

https://www.multilab.ro/spectrometre/cuve_spectrofotometre.html
14
 Utilizarea spectrelor UV-Vis
• analize calitative si cantitative

A ε= A/lxc
λmax εmax

λmax εmax
λmax εmax

• Pentru fiecare maxim de absorbtie este necesar sa se defineasca:

- lungimea de unda maxima λmax
- valoarea coeficientului molar de absorbtie maxim εmax sau a
logaritmului acestuia lg εmax
15
 Utilizarea spectrelor UV-Vis

Exemplu :
- analiza pigmentilor
carotenoidici si clorofilieni
din uleiul de masline

V. Domenici, D. Ancora, M. Cifelli, A. Serani, C. A. Veracini, M. Zandomeneghi, Extraction of Pigment Information from
Near-UV Vis Absorption Spectra of Extra Virgin Olive Oils, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 2014, 62(38)
https://www.researchgate.net/publication/265213606_Extraction_of_Pigment_Information_from_Near-
UV_Vis_Absorption_Spectra_of_Extra_Virgin_Olive_Oils/link/5e0359779
16
 Pentru analize cantitative se aplica legea Lambert - Beer
A – absorbanta
I0 I0 – intensitatea luminii incidente
A  lg    c  l I – intensitatea luminii transmise
I c – concentratia solutiei (moli/L)
Logaritmul zecimal (abreviat lg(x) l – grosimea stratului solutiei (cm)
sau log10(x)) al unui număr este ε – absorbtivitate molara
logaritmul său în baza 10;

Logaritmul natural (abreviat ln(x)) este

logaritmul în baza e (≈ 2,718). T – transmitanta

I
Pentru absorbtie nula I  I0 ,  1  A  0; T  100%
I0

I0
Pentru absorbtie totala I  0,    A  ; T  0%
I
17
• Pentru solutiile care se supun legilor de baza ale absorbtiei, atat absorbanta
cat si transmitanta procentuala trebuie sa varieze liniar cu concentratia
• Se utilizeaza solutii dilute – max. 10-2M, la concentratii mai mari creste forta
ionica

Ai
A2

A1

c1 c2 ci concentratie (moli/L)

• Absorbanta este o marime aditiva (pentru solutii multicomponent-

se calculeaza absorbanta totala : A1+A2+A3……..)

18
 Bibliografie selectiva
1. FÎNARU Adriana – suport de curs PPT- format electronic;
2. FÎNARU Adriana – METODE FIZICO-CHIMICE cu aplicaţii în analiza
structurală organică şi controlul calităţii alimentelor, vol. I, Editura
ALMA MATER, Bacău , 1999;
3. LUCA C., DUCA Al., CRIŞAN I. Al. – Chimie analitică şi analiză
instrumentală, Ed. Didactică şi Pedagogică, Bucureşti, 1983;
4. PIETRZYIC D.J., FRANK C.W. - Chimie analitică, Ed. Tehnică,
Bucureşti, 1989;
5. NASCU H.I., JANTSCHI L.- Chimie analitică şi instrumentală,
Academic Pres & AcademicDirect, Cluj-Napoca, 2009.

***https://www.researchgate.net/publication/265213606_Extraction_of_Pigment_Information_fro
m_Near-UV_Vis_Absorption_Spectra_of_Extra_Virgin_Olive_Oils/link/5e0359779

***https://www.google.com/search?q=spectrofotometrie+uv+vis+aplicatii&source