ANALIZE

FIZICO - CHIMICE
ELECTROFOREZA

Electroforeza = metoda ce se bazeaza pe

migrarea componentilor dintr-o proba, supusa
unei diferente de potential, intr-o solutie sau
printr-un suport solid poros (hartie
cromatografica, gel), separarea explicandu-se
prin vitezele de migrare diferite ale
componentilor incarcati electric pozitiv sau
negativ, care sunt atrasi de polii opusi ai
campului electric, proportional cu natura,
marimea si sarcina lor.

Mobilitatea electroforetica
= viteza cu care se deplaseaza particulele
purtatoare de sarcini electrice, in camp electric in
conditiile experimentale date
d
0
tE

In care:
d = distanta de migrare parcursa in timpul t (m);
E = gradientul de potential (V/m);
0 = mobilitatea electroforetica (m2/V/s).
3

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :

Factori ce depind de particula:
marimea
natura
forma
sarcina
gradul de hidratare si disociere
coeficientul de frecare

Mobilitatea electroforetica vatriaza functie de :

Factori ce depind de solutia de electrolit:
natura
concentratia
forta ionica
pH-ul
vascozitatea
temperatura

Factori care influenteaza electroforeza

Natura moleculelor separate
Marimea moleculelor
Mobilitatea
Natura
Sarcina
Aparatura
suportul

Factori care influenteaza electroforeza

Curentul electric
Deplasarea electroforetica este proportionala cu
Mobilitatea
Campul electric
Timpul de trecere a campului electric

d U0 E t

d = distanta parcursa de particula

U0 = mobilitatea particulei (V/cm)
E = tensiunea (V)
t = timpul de trecere al curentului
7

Factori care influenteaza electroforeza

pH - ul
In cazul acizilor si bazelor tari (electroliti tari)
pH-ul nu influenteaza migrarea
Natura solutiei
natura sarurilor
natura acizilor
influenteaza
natura bazelor
mobilitatea
natura altor substante
existente in solutie
8

Electroforeza capilara
Cea mai noua si mai utilizata tehnica electroforetica
utilizata pentru separarea speciilor incarcate cu sarcini
electrice
Pentru efectuarea separarilor se efectueaza un
montaj automatizat ale carui elemente principale sunt:

tub capilar
sistem de introducere a probei
sistem de detectie
electrozi de platina
sursa de alimentare cu curent
9

Electroforeza capilara
Detector UV

Tubul din silice : capilarul

L = 50 cm = 0,05 mm
Anod
(Pt)

Lampa
(D2)

Catod
(Pt)

Solutia conductoare
+ molecula gazda

30 kV
100 A

10

Avantajele electroforezei capilare:

timpi de analiza relativ scurti;
volume mici de proba;
cantitati mici de solventi (tampon);
posibilitatea automatizarii intregului ciclu de
analiza;
poate opera atat in medii apoase cat si in medii
neapoase;
detectia se face in capilar (UV);
sensibilitate inalta.
11

Miscarea unui analit incarcat pozitiv

+

Uep= mobilitatea electroforetica

UR = mobilitatea rezultanta
Ueo = mobilitatea electroosmotica

Miscarea unui analit neutru

-

Miscarea unui analit incarcat negativ

+

12

Separarea unui amestec de cationi

13

Separarea unui amestec de compusi

aromatici

14

Separarea unui amestec de medicamente

15