Hibridarea artificial la via de vie se efectueaz respectndu-se strict
etapele i ordinea de lucru caracteristice speciei: alegerea genitorilor,
alegerea inflorescenelor i a florilor n inflorescene, izolarea i castrarea florilor genitorului matern, recoltarea polenului genitorului patern, polenizarea artificial, controlul polenizrii, recoltarea fructelor i extragerea seminelor din boabe. Pentru a exista premizele obinerii unor descendeni hibrizi valoroi, din care s se poat extrage plante elit, un rol hotrtor l joac alegerea genitorilor i a inflorescenelor ce urmeaz a fi utilizate. Se recomand ca, n hibridrile dirijate, soiurile cu cele mai multe caractere i nsuiri valoroase s fie utilizate ca genitori materni, ntruct multe din aceste caracteristici se transmit pe linie matern. n cadrul soiurilor genitoare, vor fi alei pentru a participa la hibridare doar butucii tipici soiului, neafectai de boli sau duntori, remarcai n anii precedeni prin rezultate bune de producie i calitate a strugurilor.
Pentru castrare i polenizare artificial se vor alege inflorescenele situate
pe internodiile 2-3 ale celor mai viguroi i mai fertili lstari de pe
butuc. Cu 4-5 zile nainte de deschiderea florilor, inflorescenele alese se fasoneaz, operaiune prin care, cu ajutorul unei forfecue, se elimin florile situate la baza i vrful inflorescenei, care se deschid primele i respectiv ultimele. Pe ciorchinii alei se las doar florile din zona de mijloc, ntr-un numr limitat (aproximativ 20-100 flori), care vor nflori relativ uniform, ntr-o perioad scurt de timp, i care urmeaz s fie castrate i polenizate artificial. Pentru protejarea inflorescenelor alese i evitarea eventualelor polenizri strine, ciorchinii astfel lucrai se izoleaz n pungi izolatoare (confecionate cel mai adesea din hrtie pergamentat), de dimensiuni adecvate. Izolatorii se vor deschide ulterior doar pe durata castrrii i polenizrii florilor, dup fiecare operaiune, executat n cel mai scurt timp posibil (pentru evitarea unor suprapolenizri accidentale, nedorite), pungile pergamentate fiind amplasate la loc.
Castrarea este obligatorie la genitorii materni cu flori hermafrodite, pentru
a se evita autopolenizarea, i nu este necesar la formele cu flori hermafrodite
funcional femele, ntruct la acestea nu apare riscul autofecundrii. Castrarea (sau emascularea) se execut cu 2-3 zile nainte de deschiderea florilor, cnd nc elementele sexuale din flori sunt imature i nu exist posibilitatea autopolenizrii. Se folosesc pensete cu vrful ascuit, cu care se prinde capionul (corola florii) format din petale i, prin micri fine, laterale i de ridicare, se smulge corola mpreun cu anterele, nedeschise nc. La soiurile cu flori mari (4-5 mm, cum sunt Italia sau Muscat Hamburg), lucrtorii cu experien pot executa castrarea i prin prinderea i detaarea capionului format de corol i a anterelor cu unghiile degetului mare i arttor. Dup castrare, se verific dac pe stigmatele florilor castrate nu au rmas fragmente de antere sau chiar antere ntregi. Verificarea se face cu ochiul liber sau cu lupa (la soiurile cu flori mici), iar n cazul n care se constat existena unor antere sau fragmente de antere care nu pot fi nlturate, se recurge la eliminarea florii respective.
De la florile genitorului patern se recolteaz polen, care se pstreaz n
condiii corespunztoare pn cnd stigmatul florilor mam ajunge la
maturitatea fiziologic, moment indicat de apariia unei secreii incolore, lipicioase pe stigmat (aa numita pictur de nectar). Polenizarea artificial const n depunerea polenului genitorului patern pe stigmatul florilor castrate ale genitorului matern, operaiune care se execut de cele mai multe ori cu ajutorul unei pensule fine, n primele 2-4 zile de la nceputul nfloririi, ntre orele 6 i 10 dimineaa, cnd se realizeaz cel mai ridicat procent de prindere. Recoltarea ciorchinilor rezultai n urma hibridrilor se face la maturitatea fiziologic a strugurilor, evitndu-se pierderile de boabe prin scuturare, strict pe combinaii hibride i inndu-se o eviden riguroas a materialului biologic i datelor de lucru. Seminele extrase din boabe se spal i se usuc, urmnd a fi postmaturate peste iarn i semnate primvara devreme pentru obinerea plantelor hibride care vor constitui materialul necesar seleciei
n lucrrile de ameliorare a viei de vie, cnd se obin semine hibride (sau
semine tratate cu ageni mutageni), se prefer ca, dup parcurgerea
perioadei de postmaturare a acestora (perioada rece a anului), seminele s fie semnate n sere nclzite, ntr-un amestec de pmnt, n ldie de lemn. Semnatul se poate efectua i direct n cmp, ns n acest caz pierderile sunt foarte mari, doar o mic parte din semine (30-40%) ajungnd s germineze i s formeze plante n sere, semnatul se face ct mai timpuriu, spre sfritul lunii februarie, nceputul lunii martie. Germinarea seminelor are loc n condiii optime la temperatura de 2528C, cnd nu dureaz mai mult de 8-10 zile. Perioada de la rsrirea plntuelor i pn la apariia primei frunze adevrate este destul de lung (20-30 de zile), de aceea, primul repicat (din ldie n ghivece mici) este bine s se execute n acest interval de timp, cnd plantele sufer mai puin prin transplantare.
n urmtoarele 3-4 sptmni se formeaz primele 5-6 frunze adevrate,
perioad la sfritul creia este recomandat s se fac cea dea doua
repicare (n ghivece mari, cu diametrul de 20 cm). Spre sfritul lunii mai, plantele aflate n ghivece se scot din ser n paturi reci, n vederea clirii. Dup aproximativ dou sptmni de clire, n prima jumtate a lunii iunie, plantele se transplanteaz la locul definitiv, n cmpurile de hibrizi (sau plante mutante), care devin i cmpuri de alegere (de identificare i alegere a plantelor elit). n condiii favorabile de temperatur, umiditate i nutriie, creterea plantelor tinere este destul de rapid, ajungnd s depeasc 80-100 cm pn toamna. Elementele caracteristice viei apar n mod treptat: crceii se dezvolt ncepnd din anul 1 sau 2, iar inflorescenele cu ncepere din anii 3-5. La prima apariie, aceste organe sunt slab dezvoltate devenind, apoi, tot mai tipice pe msura trecerii anilor.
La plantele obinute din semine, n primul i al doilea an de la rsrire,
creterea este redus, dup care, n anii urmtori, se nregistreaz un ritm
ascendent de cretere, care duce la o sporire rapid a masei vegetale, ntrun singur an lstarii putnd atinge creteri medii de la 2-3 m pn la 5-6 m. Durata perioadei juvenile a plantelor obinute din semine difer foarte mult comparativ cu cea a plantelor obinute pe cale vegetativ. Hibrizii pe rdcini proprii, obinui din semine, intr pe rod trziu, astfel c, dup 3-5 de la plantare, doar o proporie foarte redus formeaz flori i fructe (20-30%). n condiii de mediu i cultur similare, plantele nmulite vegetativ intr pe rod, n proporie mare, nc din anul doi de la plantare i aproape 100% n anul trei Lungimea perioadei juvenile a vielor nmulite prin semine (durata de timp de la obinerea plantelor din semine pn la primul an de fructificare) variaz mult n funcie de specie, soi i condiiile de mediu. n general, speciile americane intr cel mai devreme pe rod, unele nc din anul 3 de la obinerea din semine, cele asiatice dup 4-6 ani, iar cele europene dup 6-10 ani.
n funcie de posibilitile pe care le are amelioratorul,
perioada juvenil poate fi scurtat considerabil, prin creterea
hibrizilor pe rdcini proprii n sere, unde, n condiii optime de temperatur, umiditate i nutriie, fazele dezvoltrii generative sunt mult accelerate, intrarea pe rod realizndu-se mult mai devreme dect n condiii de cmp. n condiii de ser, fructificarea la unele plante obinute din semine poate avea loc chiar i n anul al doilea (Oprea, 2001). n plus, se evit i operaiunea de transferare a puieilor din ser n cmp, moment care cauzeaz aa numitul oc al transplantrii, care provoac o stagnare a creterii plantelor n anul respectiv i, prin urmare, ntrzierea intrrii pe rod.