122312799-Cursuri-Microbiologie T PDF

INTRODUCERE IN
MICROBIOLOGIE
Dr. Carmen Costache

Medicina - obiective
diagnosticul
tratamentul
prevenirea bolilor umane =>
cunoaterea etiologiei (cauza)
i
patogeniei (mecanismul de producere)
MICROBIOLOGIA
studiul microorganismelor
Microorganisme
invizibile cu ochiul liber
Lumea microorganismelor: divers
organisme celulare:
monocelulare: protozoare, fungi i bacterii
pluricelulare: helmini
STRUCTURI acelulare: virusurile, viroizi, prioni,
PARTICULARITILE
MICROORGANISMELOR
1.ubiquitare
2.ageni etiologici
bolile infecioase: nu se transmit de la o persoan
la alta (ex. panaritiu, furuncul).
bolile infecto - contagioase: se transmit de la o
persoan la alta.
3.lume model n cercetri fundamentale
PARTICULARITILE
MICROORGANISMELOR
4.model simplu de difereniere
celular.
sporulare germinare
PARTICULARITILE
MICROORGANISMELOR
5.celule ancestrale
PARTICULARITILE
MICROORGANISMELOR
6.arm biologic
To help protect your privacy, PowerPoint has blocked automatic download of this picture.
PARTICULARITILE
MICROORGANISMELOR
PARTICULARITILE
MICROORGANISMELOR
7.competitoare al omului pentru
supremaie biologica
variola eradicata 1977-1978;
HIV: 1981-1982
Microorganisme=Microbi = Germeni
BACTERII
VIRUSURI
FUNGI
PARAZITI
TOTAL DIFERITI INTRE EI !!
STRUCTURA
DIAGNOSTIC
TRATAMENT
Incadrare
Regn protista: alge, protozoare
Regn Myceta: fungi
Regn Prokariota (Monera): bacterii
Archaebacerii
Cianobacterii
Eubacterii = bacteriile adevarate
Bacteriile = prokariote
celula prokariota celula eukariota

Structura (morfologie)
Functie
Metabolism
Multiplicare
Virusurile
NU sunt celule
sunt structuri acelulare
Bacteriile = prokariote
Corpul uman/animal = eukariote
DIFERENIERE NTRE CELULE DE TIP
EUKARIOT I PROKARIOT
Nucleu
nucleu adevrat: echivalent nuclear,

nucleoli, nucleoid
membrana nuclear.
nu prezint
nucleoli,
mb. nuclear
Materialul genetic =genom.
Eukariote Prokariote
ADN Material genetic
cz, cromozomial
mitocondrial, extracrozomial.
cloroplastelor Cz = molecul dublu
elemente transpozabile catenar de ADN circular
(mobile) => un singur cromozom.
uneori plasmide. Extra-cz
Cz = perechi plasmide
bacteriofagi
Cz = ADN + histone informaie genetic
neesenial pentru
supravieuirea i
multiplicarea bacteriilor,
ORGANIZAREA CITOPLASMEI
compartimentat. Necompartimentat,
organite => (mezozomi).
ribozomi 80 S, Ribozomi 70 S
su 60 S 50 S (Large)
Su 40 S 30 S (Small).
MEMBRANA CITOPLASMATIC
complexa nu exist steroli,
excepie
Mycoplasma
NVELIURILE CELULARE
lipsesc nveliurile perete celular,
celulare responsabil de
Exist la meninerea formei
levuri rigiditate,
plante,
are peptidiglican
sunt bogate n celuloz.
(murein).
MULTIPLICARE
sexualitate. divizarea asexual
primete o dubl Amitotic
informaie genetic sciziparitale sau
de la parentali fiziune binar.
care se reasociaz n Informatia =
meioz. Haploid.
MORFOLOGIE BACTERIAN
Microscopia optic
evidenierea formei,
Dimensiunilor
900-1000 X.
0,2 - 2m 2-20 mm
Microscopia electronic
Evidentierea structurii
bacteriilor.
Morfologia =>
preparate
microscopice:
preparat nativ,
frotiu
efectuate din:
produse patologice
cultur bacterian pur.
Frotiul - preparat microscopic
colorat,
Informaii:
forma
dimensiunile
dispoziia bacteriilor,
afinitatea tinctorial,
prezena structurilor facultative,
numar (prod.patol.)
Frotiul - preparat microscopic
colorat,
Forme fundamentale
sfer - coci (1)
Cilindru, bastonas - bacili (3-7);
cilindru helicoidal forma spiralat
COCI
Dispoziia rezult n urma diviziunii
diplo: diplococi
Pneumococi:
coci Gram pozitivi,
ovoizi cu aspect de flacre de lumnare (diviziune pe vertical),
Neisserii:
coci Gram negativi
cu aspect reniform, concav convex (diviziune pe orizontal),
tetrade: Micrococi: 4 coci reunii
octade: Sarcina: 8 coci.
lanuri: Streptococi.
grmezi: Stafilococi
BACILI
Capete bacililor pot fi:
rotunjite la Enterobacterii
b.coli i ali bacili Gram negativi
ascuite la Fusobacterium
bacili Gram negativi
drepte
bacilii din genul Bacillus (bacili Gram pozitivi)
Grosimea cilindrului poate fi diferit: deformai prin endospori, incluzii

Endosporii nu se coloreaz n coloraia Gram = zone necolorate, albe,
sferice,
endospori cu diam. < dect diam. f. vegetative, Bacillus (bacili Gram
pozitivi)
endospori cu diam. > dect diam.f.vegetative, Clostridium, Gram
pozitivi.
terminal, Clostridium tetani
subterminal-rachet de tenis: Clostridium botulinicum
central-brcu sau de fus: Clostridium septicum, sporogenes
BACILI
Dispoziia n frotiu:
bacili izolai:
Enterobacterii: bacil colii (bacili Gram negativi)
diplobacili:
Bacilul crbunos n frotiurile efectuate din produs patologic
streptobacili:
Bacillus (bacili Gram pozitivi): Bacil subtilis, bacil cereus, bacil
crbunos (n frotiurile din cultur pur).
bacili unii la capete:
Mycobacterium tuberculosis aspect de majuscule (X, Y, W)
Corynebacterium diphteriae aspect de litere chinezeti (bacili
ncurbai, deformai la capete Gram pozitivi).
bacili dispui n palisade:
Bacili pseudodifterici (bacili Gram pozitivi)
COCOBACILI
bacili scuri, subiri,
1,5 - 2 lungime
0,6 - 0,8 lime
Gram negativi.
Ex:
Haemophyllus,
Brucella,
Bordetella
FORME SPIRALATE
BACILI NCURBAI: numr mic de ture de spir

Vibrion holeric
bacil ncurbat mobil,
aspect de virgul,
Gram negativ
Campylobacter
2 bacili ncurbai unii la capete, aspect de liter S
Helicobacter
mai muli bacili ncurbai unii la capete (2-5)
produc gastrite, ulcer duodenal
FORME SPIRALATE
Spirochete: bacterii spiralate
lungi 5 - 10,
Subiri 0,2 - 0,3 ,
mobile prin aparat locomotor;
Ex. Treponema pallidum, Leptospira,
Borrellia
Spirili: bacterii spiralate rigide, neimplicate n

patologia uman;
Forma: meninut datorita peretelui celular.
Bacterii fr perete celular : Mycoplasma
culturi vechi 48-72 ore = pleomorfismul
bacterian
Bacterii necolorabile prin coloratia Gram
=>
Bacterii spiralate
Treponema pallidum, Leptospira, Borrellia
Necesita coloraii speciale: Fontana, Burri, Giemsa
genul Mycobacteria
coloraia Ziehl Neelsen
Bacterii intracelulare:
Rickettsia, Chlamydia
coloraia Giemsa, Machiavello, Giemenez
Treponema pallidum
Burri Fontana
genul Mycobacteria
coloraia Ziehl Neelsen
Chlamydii, Rickettii
Giemsa, Gimenez
Macchiavello
Taxonomie
clasificare, nomenclatura, identificare
Clasificare
Diviziuni bacteriene = unitati taxonomice
phyllum - clase - ordine - familii genuri/triburi specii
Specia = unitatea de baza a clasificarii
~ Reflecta proprietate
Var
Tip (biotip, serotip)
Nomenclatura: latinizata (reguli internationale)
proprietati
Ex. Mycobacterium tuberculosis
ordinele ales
familiile - aceae
Triburi/genuri eae
Identificare importanta practica a clasificarii
IDENTIFICAREA
Deosebeste
Microorganismele bune
Rele = patogene
Proprietati specifice
Morfologice
De cultura
izolare si identificare
agent cauzator = etiologic al unei imbolnaviri
CLASIFICAREA BACTERIILOR
Clasificarea Linn nu dup nrudirea
natural ci dup unele proprieti
fenotipice:
structura peretelui celular,
afinitatea morfotinctorial,
proprieti metabolice,
rezistena la diverse condiii de mediu
Bergeys Manual of Systematic
Bacteriology
International Commission of Bacterial Systematic 1980
Adansoniana numerica
Prezenta/absenta: pigmenti, enzime
Complicata
statistica
Filogenetica 1980
Tehnici moleculare si genetice
hybridizarea acizilor nucleici
Analiza secventelor ARN-ului ribozomal (rRNA)
inrudirea evolutiva
Peretele celular => 4 divizii
editia 9-a
I. Gracillicutes Bacterii Gram negative
Grup 1: Spirochete:
Treponema, Borrelia, Leptospira
Grup 2: Aerobe/micro-aerofile, mobile, helicoidale
Cam pylobacter, Helicobacter
Grup 3:
Bacterii incurbate, imobile sau rar mobile
Group 4: Aerobe/ micro-aerofile, bacili si coci:
Bordetella
Brucella, Francisella
Legionella, Moraxella
Neisseria, P seudom onas
Bacteroides
I. Gracillicutes Bacterii Gram negative
Grup 5: bacili facultativ anaerobi
Escherichia, K lebsiella
P roteus, P rovidencia
Salm onella, Shigella
Yersinia, Vibrio
Haem ophilus, Pasteurella
Grup 6: bacili incurbati sau helicoidali, anaerobi
Fusobacterium
Group 7: bacterii reducatoare de sulf
Group 8: coci anaerobi
Group 9: Rickettsiae and Chlamydiae:
Rick ettsia
Chlam ydia
Cox iella
Grup 10-16 - fara importanta medicala
II. Firmicutes: bacterii Gram pozitive
Grup 17:
Enterococcus
Peptostreptococcus
Staphylococcus
Streptococcus
Grup 18: bacili formatori de endospori:
Bacillus
Clostridium
Grup 19: bacili nesporulati
Listeria
ClasaThallobacteria
Grup 20: bacili neregulati, nesporulati :
Actinomyces
Corynebacterium
Grup 21: Mycobacteria: Mycobacterium
Grup 22-29: Actinomycete:
Nocardia, Streptomyces, Rhodococcus
III. Tenericutes
Bacterii fara perete celular
Group 30:
M ycoplasm a, Ureaplasm a
IV. Mendosicutes:
Archaebacteria
GRUPE DE
HAZARD
RISC INFECIOS: 4 grupe

gradul de pericol la locul de munc.
Criterii
patogenitatea pentru om
risc pentru personalul de laborator
transmisie n colectiviti
exista
profilaxie
tratament corespunztor
I. Microorganisme care nu par a determina boli
umane
II. Microorganisme care:
pot cauza boli umane
prezint risc pentru personalul de laborator
nu par a se rspndi n colectivitate
exist msuri de profilaxie, tratament
Bacterii: Bacillus cereus, Bordetella pertussis, Campylobacter,

Clostridium botulinicum i alte clostridii, Bacil difteric, Enterobacter,
Eschericia coli, Stafilococ aureus, Streptococ, Treponema pallidum,
Klebsiella, Mycobacterii netuberculoase, Proteus, Vibrio holeric,
Shigella.
Virusuri: Adenovirus, Coronavirus, Herpesvirus, virusuri Coxackie,
Echo, virusul hepatitei A, virusuri poliomielitice, Rhinovirus,
Rotavirus, virusul rubeolei, virus gripal, Paramyxovirus
III. Microorganisme care:
determin boli severe
prezint risc serios pentru personalul de laborator
prezint risc de rspndire n colectiviti
exist profilaxie i tratament corespunztor
Bacterii: Bacil crbunos, Brucella, Chlamydia
psittaci, bacilul TBC, bacilul leprei, Rickettsii,
Salmonella typhi, Salmonella paratyphi A,B,C.
Virusuri: CMV, Bunyavirusuri, Hepatita B,D,
Enterovirus, HIV, Virusul rabic
IV. Microorganisme care:
determin boli serioase la om
prezint risc serios pentru personalul de laborator
prezint risc crescut de rspndire n colectiviti
nu au profilaxie i tratament eficient
Virusuri: Arenavirusuri (virusurile Lassa, Junin, Machupo),
Bunyavirusuri (v. febrei de Crimeea Congo), Filoviridae (virusurile
Ebola, Marburg);
Poxviridae (virusul variolei)
Produsele patologice
nu se cunoate coninutul microbian
trebuie prelucrate cu respectarea normelor de
protecie.
Morfologie bacteriana
Dr. Carmen Costache
STRUCTURA
1.Structuri obligatorii: 2.Structuri facultative
Nucleoid, * neeseniale pentru
Citoplasma, multiplicare
Membran citoplasmatic, * confer proprieti de
Perete celular
patogenitatea
Capsul, Glicocalix;
Pili comuni, pili de sex,
Flageli (Cili),
Spori
NUCLEOID
nu are
nucleoli,
membrana nuclear.
Se evideniaz:
prin coloraii speciale:
coloraia Feulgen,
acridin orange;
microscopia electronic (aspect fibrilar).
NUCLEOID
Un singur cromozom = o molecul dublu catenar de
ADN circular
50-65 bucle supraspiralizate, pliat, rsucit,
fibrilar, de arici sau ghem
legat de membrana citoplasmatic prin mezozomi
Informaia genetic - haploid
(gene pentru un caracter ntr-un singur exemplar).
contact direct ntre ADN i ARN,
important pentru transcrierea i traducerea inf.genetice
sediul de aciune al unor AB:

Quinolone
Nitrofurani, imidazoli
Rifamicine
NUCLEOID
studii recente => Cz lineari
Borrellia burgdorferi,
Streptomyces spp
Nr. copii de AND/cz la un moment dat
Depind de stadiul ciclului celular
Material genetic extracromozomial
autonom sau integrat n cz bacterian

Plasmidele
Bacteriofagii
Plasmidele
molecule de ADN circulare.
se pot transmite de la o bacterie la alta =
conjugarea bacterian
Codifica nr variabil de gene
virulenta.
Feuelgen pozitiv
Bacteriofagii
Structuri virale
infecteaza bacteriile.
2 tipuri:
litici, capabili de replicare => liza bacteriei
lizogeni (temperai)
se pot integra n cz. = profag => proprieti noi:
ex. producerea unor toxine.
CITOPLASMA BACTERIILOR
necompartimentat,
fr organite:
reticul endoplasmatic,
aparat Golgi,
mitocondrii,
2 zone distincte
Periferica, amorfa
Interna (nucleoidul)
1.Ribozomi: mii, 70 S
subunitile : 50 S (Large) i 30 S (Small)
sediul sintezei proteice
inta de aciune a unor antibiotice => inhiba selectiv
sinteza proteica bacteriana dar nu si cea eukariota !
Chloramfenicol,
Erithromicina (M) 50 S
Clindamicin,
Tetracicline
Aminoglicozide 30 S
2.Granule/Incluzii:
mas lichid de substane nutritive,
delimitate de membran
Colorate specific de anumiti coloranti
Ex. Volutina = corpuscul metacromatic (albastru
de metilen=> rosu)
3. ARN n cantitate mare,
reprezentat de r ARN (9%), m ARN, t ARN.
4. Molecule: 3000 4000 molecule
diferite;
ap, sruri minerale, ioni, acizi nucleici
5. Incluzii: material nutritiv de rezerv,
format n condiii nefavorabile de mediu
6. Plasmide
MEMBRANA CITOPLASMATICA
strat subire (10 -20 nm)
sub peretele celular => greu de evideniat.
Structura membranei citoplasmatice
modelul mozaicului Singer:
mas fosfolipidic,
plutesc insule de proteine,
dispuse spre interior, exterior
sau n masa fosfolipidic.
model dinamic => reciclat permanent.
MEMBRANA CITOPLASMATICA
Prelungiri n citoplasm:
1. Mezozomi
Rol:
diviziunea bacteriilor;
replicare ADN-ului;
formarea endosporilor
2. Oxizomi: prelungiri scurte
Rol:
procesele bioenergetice la bacteriile capabile de respiraie:
aerobe,
aerob anaerobe facultative,
microaerofile.
FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE
1. Permeabilitate selectiv i
transport de substane:
transport pasiv = difuzia simpl, substane cu
GM mic
transportul activ
contra gradient de concentraie,
cu consum de energie
2. Funcie bioenergetic:
sediul transportului de electroni, a fosforilrii
oxidative (Oxizomii).
3. Funcie biosintetic: precursori PC
4. Sediul enzimelor hidrolazice
hidrolizeaz polimeri organici: proteine,
zaharuri, lipide n nutrieni, care pot ptrunde
n bacterie.
5.inta de aciune pentru detergeni

i antibiotice (bactericid.)
6. Replicarea ADN cromozomial,
plasmidic:
prin mezozomii septali
7. Sediul motorului ciliar
8. Import de macromolecule
ex. fragment de ADN, de la bacterii
donatoare = transformare
9. Sediul receptorilor chemotactici:

deplasarea spre substanele nutritive
PERETELE CELULAR BACTERIAN
prezent la majoritatea bacteriilor, cu excepia genului Mycoplasma.
PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM POZITIVE
gros (15- 50 nm), dar simplu structurat:
straturi suprapuse de peptidoglican (40) i acizi teichoici
ataai
1.Acizi teichoici sunt heteropolimeri repetitivi,
Rol - aderarea bacteriilor de celulele epiteliale ale
mucoaselor
ex. streptococ hemolitic.
- antigene de suprafa
- captarea unor nutrieni: ex. Mg.
2.Polizaharide de perete
3.Proteine de perete
(excepional-ex proteina A a Stafilococului aureus
Lipidele sunt n cantitate mic (<1%);
excepie Mycobacterium,
PERETELE CELULAR LA
BACTERII GRAM NEGATIVE
subire (10 -15 nm) dar complex structurat
1. Peptidoglicanul :
1- 2 straturi de peptidoglican, bidimensional
2. Stratul lipoproteic Formeaz un schelet
3. Membrana extern
mas fosfolipidic fluid, n care noat proteine.
Proteinele majore (70%) i minore (30%)
Proteine majore: Porine, Nonporine
Proteine minore (Outer membrane proteins - OMP)
NBP (nutrient binding protein),
PBP (penicillin binding protein),
FeBP (siderofor)
PERETELE CELULAR LA
4. Lipopolizaharidul (LPZ)
Lipidul A
este endotoxina bacteriilor Gram negative
responsabil de fenomenele toxice:
febr, diaree, greuri, vrsturi, scderea tensiunii arteriale,
oc endotoxic i deces.
Componenta polizaharidic intern (core,
smbure polizaharidic):
structur comun la bacteriile Gram negative
Lanurile oligozaharidice laterale:
proemin la suprafaa bacteriei, ca spini i sunt n numr mare
este antigenul O, responsabil de specificitate
PERETELE CELULAR LA
5. Spatiul periplasmic
ntre membrana extern i membrana
citoplasmatic.
Deine oligozaharide i protein-enzime:
distrugerea bacteriilor btrne/moarte -autoliza
scindeaz substanele nutritive cu G.M. mare,
(polimeri organici) n monomeri: nutrieni care pot
ptrunde n bacterie.
FUNCIILE PERETELUI
CELULAR
1. Menine forma
2. delimitarea bacteriilor n 2 grupe Gram.
3. responsabil de acido - alcoolorezisten,
4. creterea i diviziunea bacteriilor - primer
pentru propria sintez
6. Intervine n nutriia bacterian
7. Intervine n metabolismul bacterian,
sit molecular
transportor de ioni
import i export de proteine
8. Este o barier selectiv i are rol protector.
FORMATIUNI FACULTATIVE
Confer bacteriilor proprieti importante n natur
aderena,
rezisten la fagocitoz ( unele fiind factori de patogenitate.)
CAPSULA
strat amorf de nveli
3 structuri :
Capsula microscopic :poate nconjura 1-2 bacterii.
Ex. Pneumococi, Meningococi, Hemofili, Bacilul crbunos, Klebsiella,
Clostridium perfringers.
Microcapsul: antigenul K / antigen Vi la Salmonella.
se evideniaz doar n microscopie electronic
poate nconjura doar parial peretele celular.
Stratul mucos produs doar n condiii naturale =>patogene
Capsula se evideniaz
1. n frotiuri prin:
coloraii negative,
nu coloreaz capsula,
vizibil ca un halou alb n jurul bacteriilor:
coloraia Gram (prod. patologic),
Burri (culturi pure)
coloraii pozitive: coloraia Muir
2. Prin reacii antigen - anticorp:
reacia de precipitare i reacia de umflare a capsulei
3. Dup aspectul coloniilor pe medii de cultur:
foarte mucoase
CAPSULA
Compoziie chimic
polizaharidic,
majoritatea bacteriilor capsulate (Pneumococ, Meningococ,
Hemofili).
polipeptidic:
polimer al acidului D - Glutamic, la bacilul crbunos.
proteic
Yersinia pestis,
polimer de acid hialuronic la Streptococ - hemolitic.
Rol
1. antigen bacterian.
2. factor de patogenitate bacterian:
se opune fagocitrii bacteriilor.
GLICOCALIXUL
strat de suprafa sintetizat de bacterii n mediul lor
natural.
structurat,
fibre polizaharidice lungi (dextran sau levan)
se poate evidenia doar n microscopie electronic
Rol
1.adezina polizaharidic
2.factor de colonizare
Ex. Mutanul ( Streptococus mutans) - ader de smalul dentar
cu formarea cariei dentare. Bacteriile produc metabolii acizi,
care atac smalul dentar.
PILII COMUNI (FIMBRII)
Pleac din membrana citoplasmic, strbat PC
formaiuni filamentoase, tubulare scurte

numr mare (aproximativ 100 - 200 pili).
natur proteic (pilein ).
determinism cromozomial
mai rar determinism plasmidic.
ntlnii la bacteriile Gram negative
PILII
Rol
1. adezinele proteice ale bacteriilor:
aderarea nespecific pe suprafee inerte,
aderarea specific pe mucoase, epitelii, endotelii,
hematii, fagocite.
2. factor de patogenitate
Gonococii, E. coli- (ETEC),
3. antigene
posibilitatea modificarea structurii antigenice
PILII DE SEX
formaiuni tubulare lungi

numr mic (1-4 )
prezeni la bacteriile G negative
au determinism extracromozomial
(plasmidic)
Rol: conjugarea bacterian
FLAGELI (CILI)
aprox. 20 m lungime/20 nm lime.
organite de locomoie ale bacteriilor
Structur proteic = flagelin
Ultrasctructura la ME:
corpuscul bazal
cilindru proteic (filament axial).
Evidentierea cililor :
n preparate microscopice:
coloraii speciale
indirect n preparate native (mobilitatea bacterian) .
pe medii de cultur, prin nsmnarea bacteriilor prin nepare:
bacteriile imobile se dezvolt doar pe traiectul de nepare,
cele mobile se dezvolt n tot mediul.
Rol:
1. mobilitate, spre locurile unde exist
atractani:
chimiotaxie (deplasarea spre substane chimice);
fototaxie (deplasare spre locurile cu lumin); etc
2.antigen bacterian - antigenul H,
Weil - Felix a evideniat la Proteus,
nsmnat ntr-un punct dintr-un mediu, se dezvolt pe tot
mediul sub forma unor vluri concentrice (hauch).
SPORII
forme de rezisten - condiii nefavorabile de temperatur, nutriie, pH,
oxigen,
form primitiv de difereniere celular la bacterii.
Sporularea:
iniial endospori ulteior - spori liberi = exospori
Germinare
Revenire la forma vegetativ cnd ntlnesc condiii favorabile
Evidenierea sporilor
coloraii negative: Gram (formaiuni ovalare, necolorate, n interiorul bacteriilor).
coloraii pozitive: verde malachit i safranin
Ultrastructura sporilor (ME) din interior spre exterior:
Protoplastul sporal
Peretele sporal
Cortexul
nveliurile sporale si exosporium
Rol:
1. identificarea bacteriilor.
2.alegerea metodelor de sterilizare i dezinfecie capabile s distrug
sporii
SPORI
IMPORTANA CUNOTINELOR DE
I. Pentru unele boli infecioase, examenul

microscopic = singura posibilitate
diagnostic.
Ex. Sifilis - Treponema pallidum,
nu exist posibilitatea de a izola, cultiva =>
evidenierea i identificarea n preparat nativ sau n
frotiuri prin coloraii speciale (impregnarea
argentic) = forma spiralat.
II. Pentru alte boli infectioase, exist
posibilitatea cultivrii i izolrii agentului
etiologic, dar examenul microscopic ofer
informaii preioase.
gonoree - Neisseria gonnorhoeae (gonococ)
imaginea microscopic: PMN, diplococi intra i extracelulari.
tuberculoz, bacilul Koch se dezvolt lent,
frotiu din produs patologic: evidenierea de bacili acido -
alcoolorezisteni prin coloraia Ziehl - Neelsen,
III. Pentru alte boli infecioase- informaii orientative.
Frotiu din puroi, colorat Gram:
coci Gram pozitivi dispui n grmezi - infecie stafilococic
coci Gram pozitivi, dispui n lanuri - infecie streptococic
diplobacili Gram pozitivi, capsulai - etiologie crbunoas
bacili G pozitivi deformai - tetanos ( Clostridium tetani)
bacili G negativi capsulai - Klebsiella
Frotiu din sput:
diplococi Gram pozitivi capsulai - pneumonie pneumococic
bacili Gram negativi capsulai Klebsiella pn.
Frotiu din LCR:
diplococi G negativi - etiologie meningococic.
diplococi G pozitivi capsulai - etiologie pneumococic
Morfologie bacteriana
FORMATIUNI
FACULTATIVE
Dr. Carmen Costache
FORMATIUNI FACULTATIVE
Confer bacteriilor proprieti importante n natur
aderena,
rezisten la fagocitoz ( unele fiind factori de patogenitate.)
CAPSULA
strat amorf de nveli
3 structuri :
Capsula microscopic : poate nconjura 1-2 bacterii.
Ex. Pneumococi, Meningococi, Hemofili, Bacilul crbunos, Klebsiella,
Clostridium perfringers.
Microcapsul: antigenul K / antigen Vi la Salmonella.
se evideniaz doar n microscopie electronic
poate nconjura doar parial peretele celular.
Stratul mucos produs doar n condiii naturale =>patogene
Capsula se evideniaz
1. n frotiuri prin:
coloraii negative,
nu coloreaz capsula,
vizibil ca un halou alb n jurul bacteriilor:
coloraia Gram (prod. patologic),
Burri (culturi pure)
coloraii pozitive: coloraia Muir
2. Prin reacii antigen - anticorp:
reacia de precipitare i reacia de umflare a capsulei
3. Dup aspectul coloniilor pe medii de cultur:
foarte mucoase
CAPSULA
Compoziie chimic
polizaharidic,
majoritatea bacteriilor capsulate (Pneumococ, Meningococ,
Hemofili).
polipeptidic:
polimer al acidului D - Glutamic, la bacilul crbunos.
proteic
Yersinia pestis,
polimer de acid hialuronic la Streptococ - hemolitic.
Rol
1. antigen bacterian.
2. factor de patogenitate bacterian:
se opune fagocitrii bacteriilor.
GLICOCALIXUL
strat de suprafa sintetizat de bacterii n mediul lor
natural.
structurat,
fibre polizaharidice lungi (dextran sau levan)
se poate evidenia doar n microscopie electronic
Rol
1.adezina polizaharidic
2.factor de colonizare
Ex. Mutanul ( Streptococus mutans) - ader de smalul dentar
cu formarea cariei dentare. Bacteriile produc metabolii acizi,
care atac smalul dentar.
PILII COMUNI (FIMBRII)
Pleac din membrana citoplasmic, strbat PC
formaiuni filamentoase, tubulare scurte

numr mare (aproximativ 100 - 200 pili).
natur proteic (pilein ).
determinism cromozomial
mai rar determinism plasmidic.
ntlnii la bacteriile Gram negative
PILII
Rol
1. adezinele proteice ale bacteriilor:
aderarea nespecific pe suprafee inerte,
aderarea specific pe mucoase, epitelii, endotelii,
hematii, fagocite.
2. factor de patogenitate
Gonococii, E. coli- (ETEC),
3. antigene
posibilitatea modificarea structurii antigenice
PILII DE SEX
numr mic (1-4 )
prezeni la bacteriile G negative
au determinism extracromozomial
(plasmidic)
Rol: conjugarea bacterian
FLAGELI (CILI)
aprox. 20 m lungime/20 nm lime.
organite de locomoie ale bacteriilor
Structur proteic = flagelin
Ultrasctructura la ME:
corpuscul bazal
cilindru proteic (filament axial).
Evidentierea cililor :
n preparate microscopice:
coloraii speciale
indirect n preparate native (mobilitatea bacterian) .
pe medii de cultur, prin nsmnarea bacteriilor prin nepare:
bacteriile imobile se dezvolt doar pe traiectul de nepare,
cele mobile se dezvolt n tot mediul.
Rol:
1. mobilitate, spre locurile unde exist
atractani:
chimiotaxie (deplasarea spre substane chimice);
fototaxie (deplasare spre locurile cu lumin); etc
2.antigen bacterian - antigenul H,
Weil - Felix a evideniat la Proteus,
nsmnat ntr-un punct dintr-un mediu, se dezvolt pe tot
mediul sub forma unor vluri concentrice (hauch).
SPORII
forme de rezisten - condiii nefavorabile de
temperatur, nutriie, pH, oxigen,
form primitiv de difereniere celular la bacterii.
Sporularea:
iniial endospori ulteior - spori liberi = exospori
Germinare
Revenire la forma vegetativ cnd ntlnesc condiii favorabile
SPORII
Evidenierea sporilor
coloraii negative: Gram (formaiuni ovalare, necolorate, n interiorul
bacteriilor).
coloraii pozitive: verde malachit i safranin
Ultrastructura sporilor (ME) din interior spre exterior:

Protoplastul sporal
Peretele sporal
Cortexul
nveliurile sporale si exosporium
SPORII
Rol:
1. Forma de rezisten pentru bacterii
2. identificarea bacteriilor.
3. alegerea metodelor de sterilizare i dezinfecie capabile s distrug
sporii
IMPORTANA CUNOTINELOR DE MORFOLOGIE
BACTERIAN
Unele boli infecioase - examenul microscopic = singura
posibilitate diagnostic.
Ex. Sifilis - Treponema pallidum
NU crete pe mediile de cultur => evidenierea i
identificarea n preparat nativ sau n frotiuri
BACTERIAN
Unele boli infectioase - examenul
microscopic ofer informaii
preioase
gonoree - Neisseria
gennorhoeae
(gonococ)
imaginea microscopic:
diplococi intra i
extracelulari.
BACTERIAN
Unele boli infectioase - examenul
microscopic ofer informaii
preioase
- tuberculoz, bacilul Koch se
dezvolt lent
frotiu din produs patologic:
bacili acido alcoolorezisteni,
coloraia Ziehl - Neelsen
BACTERIAN
Unele boli infecioase-

informaii orientative.
Frotiu din puroi, colorat

Gram:
coci Gram pozitivi dispui
n grmezi - infecie
stafilococic
BACTERIAN

Frotiu din puroi, colorat

Gram:
coci Gram pozitivi,
dispui n lanuri -
infecie streptococic
BACTERIAN
Frotiu din sput:

diplococi Gram pozitivi
capsulai - pneumonie
pneumococic
BACTERIAN
Unele boli infecioase- informaii orientative.
Frotiu din sput:

bacili Gram negativi capsulai Klebsiella
BACTERIAN
Frotiu din LCR:

diplococi G negativi - etiologie meningococic.
BACTERIAN
Frotiu din LCR:

diplococi G pozitivi capsulai - etiologie
pneumococic.
Metabolism bacterian
Dr. Carmen Costache
METABOLISM BACTERIAN
Planul cursului
Definiie, Efectul unor substane

Anabolism, chimice
Catabolism O2
Efectul factorilor fizici Clasificare
asupra dezvoltrii CO2

bacteriene Nutriia bacterian
Efectul temperaturii Bacteriile de importan
Efectul pH-ului medical
Efectul presiunii osmotice Metabolismul energetic
Efectul radiaiilor bacterian
Efectul deshidratrii
Curba de multiplicare
(cretere) a bacteriilor
Metabolism bacterian
Definiie:
Suma tuturor proceselor
chimice
1. Anabolism:
Sinteza de compui
compleci,
cu consum energetic.
2. Catabolism:
- descompunerea
compuilor compleci
- producere de energie
Efectul factorilor fizici asupra dezvoltrii bacteriene
Efectul temperaturii
dezvoltare bacterian
izvoarele cu ap fierbinte din Yellowstone National
Park 120C.
Soluii apose pn la -20C,
Gheari din Antarctica,
Congelatoare casnice: 0 C.
Clasificarea bacteriilor n funcie de temperatura de
cretere
Microorganisme: limite de T, definite prin 3 valori:

T min, T o, T max
T min = < NU se dezvolt
T o = cretere i multiplicare optim
T max= > NU se pot dezvolta, mor
Clasificarea bacteriilor=f(T)
Criofile
Mezofile
Termofile
Criofile (fr importan medical)

T : 0 20C
To: 10-15C
Mri, oceane, soluri reci, frigidere
Termofile (fr importan medical)

T: 45-90C
T o: 60-70C
Soluri calde, izvoare termale
Mezofile - importan medical !!!

T o aproape de 37C
T: 20-45C
Efectul temperaturii asupra dezvoltrii bacteriene
Inghearea =>
stoparea multiplicrii unor bacterii
DAR
multe din ele nu sunt omorte la
temperaturile din congelatoarele casnice !
Investigarea unei epidemii de
toxinfecie alimentar salmonelozic:
Ingheat contaminat cu Salmonella
luni de zile inghetata
nc avea bacterii vii
In laboratoare bacteriile (tulpini de
referin, tulpini izolate de la pacieni)
pstrate pentru studii ulterioare n
frigidere/congelatoare.
Efectul pH-ului asupra
bacteriilor
pH = concentraia ionilor de
hidrogen, [H+]
pH optim = neutru (6,8-7)
Limite: 6-8
bulion nutritiv: pH = 6,8 !
Acidofile: prefer pH acid
Helicobacter pylori
Alcalifile: prefer mediile
alcaline
Vibrio cholerae: pH > 8
Efectul presiunii osmotice asupra
bacteriilor
Apa srat - hiperton => ucide multe

microorganisme.
Majoritatea: soluii izotone
NaCl exist n natur (concentraii variabile)
Clasificarea bacteriilor n funcie de

concentraia de sare tolerat
Halotolerante = concentraii
moderate de sare
ex. Staphylococcus crete pe mediu cu
7,5% NaCl (Chapman = mediu selectiv)
Halofile = necesit 15-30%

NaCl
Efectul presiunii osmotice asupra
bacteriilor
Saramura: folosit pentru conservarea

alimentelor
DAR
Stafilococi- halotolerani=> contaminare
=> stricarea alimentelor
Levurile i mucegaiurile tolereaz

presiuni osmotice crescute => cresc pe
carne, gemuri, etc.
Efectul radiaiilor asupra
bacteriilor
UV, gamma
bactericide
Bacterii din aer
Suprafee, inclusiv
suprafaa apei
Instrumentar medical
(raze gamma)
Mecanism
Energia radiant =>
nucleoproteine
=>dimeri de timin
lezare celular =>
moarte
Penetrare redus =>
aplicaie limitat n
sterilizare
Efectul desicaiei
(deshidratarea, uscarea)
Desicaia = letal
pentru bacterii
Practic: conservarea
alimentelor
Efectul desicaiei
(deshidratarea, uscarea)
Revers: persistenta microorganismelor in

picaturi mici de apa (aerosoli) => afectiuni
cu poarta de intrare respiratorie !
Efectul unor substane chimice asupra bacteriilor
Dezinfecia: efectul substanelor chimice folosite pe suprafee
Antisepsia: efectul sustanelor chimice folosite pentru decontaminarea
esuturilor.
Molecule chimice folosite de bacterii pentru cretere i dezvoltare:
CO2 and O2
CO2 - bacterii capneice

5-10% CO2
termostate cu atmosfer de CO2
E.g. Neisseria gonorrheae (gonococci)
Clasificarea bacteriilor n funcie de efectul oxigenului
asupra lor
Obligat aerobe = strict aerobe

Obligat anaerobe = strict anaerobe
Aerob facultativ anaerobe
Microaerofile
Anaerob-aerotolerante
asupra lor
Obligat aerobe
Oxigenul molecur (O2) indispensabil pentru cretere
Acceptorul final de electroni n lanul respirator: oxigenul
Respiraie => energie
Ex. Mycobacterium tuberculosis; genul Bacillus
asupra lor
Obligat anaerobe
O2 = toxic
fermentaie => energie
Ex. Clostridium spp.
asupra lor
Aerobe facultativ anaerobe
Cresc n prezena SAU absena O2
respiratie (aerob, anaerob) sau fermentaie => energie
Ex. Enterobacteriile
asupra lor
Microaerofile
Necesit O2 conc.< conc. atmosferic
O2 n concentraia atmosferic = toxic
Respiraie => energie
Ex. Neisseria spp. (gonococci, meningococci)
Clasificarea bacteriilor n funcie de efectul oxigenului asupra lor
Anaerob-aerotolerante
pot crete n prezena O2
DAR
Fermentaie => energie
Ex. Streptococcus
Toate organismele care cresc n prezena O2 au superoxid dismutaz.
Clasificarea bacteriilor n funcie de efectul oxigenului asupra lor
Obligat anaerobe (Clostridium) NU au

superoxid dismutaz
catalaz i/sau peroxidaz, => sunt supuse aciunii radicalilor
liberi rezultai n prezena oxigenului, pe care nu au cum s i
neutralizeze => efect letal asupra bacteriilor
Aciunea superoxid dismutazei, catalazei i peroxidazei

neutralizeaz radicalii de oxigen care sunt generai inevitabil n
prezena O2 n orice sistem viu.
Nutriia bacterian
Sursa de energie
Sursa de C: bacterii chimioorganotrofe
Bacterii C autotrofe: substane chimice organice
CO2
fr importan medical.
bacteriile fototrofe - lumina

Bacterii C heterotrofe bacterii chimiotrofe reacii
Substane chimice organice chimice de oxidoreducere
Importan medical
bacterii chimiolitotrofe
substane chimice
anorganice
Substante chimice organice:
Saruri, microelemente
Apa
Nutriia bacterian
Bacterii prototrofe: multiplicare pe un mediu
sintetic minimal (slbatice)
Bacterii auxotrofe
selectate n evoluie
au pierdut 1-2 ci metabolice
nu se multiplica pe medii sintetice minimale
necesit factori de cretere ~ vitamine bacteriene
(Nu pot fi sintetizai de bacterii)
ex. vitamine propriu-zise: K, B (B1, B2, B6, B12))
extract de drojdie
snge pentru bacterii pretenioase nutritiv (streptococi,
gonococi, meningococi)
Factor X, V pentru hemofili
Bacteriile paratrofe
parazitism intracelular: Rickettsia, Chlamydia.
METABOLISMUL ENERGETIC BACTERIAN
2 modaliti principale de
producere a energiei:
respiraia
fermentaia
1. Respiraia (metabolism
energetic respirator)
lan transportor de electroni;
fosforilare oxidativ = aerob
lan transportor de electroni,
fosforilare anoxibiotic =
anaerob
2. Fermentaia (metabolism
energetic fermentativ)
Dup natura produilor rezultai =>
diferite tipuri de fermentaie
Alcoolic
Lactic
acid mixt
Acetoinic
Propionic
Butiric
Tipuri de fermentaie
Fermentaia alcoolic => alcool etilic;
la drojdii, levuri (Sacharomyces cerrevisiae) => fermentaia vinului, berii.
Fermentaia lactic => acid lactic
Ex: streptococi, lactobacili
Normal flora of the vagina =
lactobacilli
Fermentaia acid mixt => acid lactic, succinic, formic
Enterobacterii
evideniata prin reacia rou metil.
Fermentaia acetoinic: acumulare de acetoin i
butilen-glicol
Klebsiella
evideniata prin r. Voges Proskauer.
Fermentaia propionic => acid
propionic
Corynebacterium, Neisserria
Fermentaia butiric => acid butiric,
acid caproic, acid amilic.
Clostridium i ali anaerobi.
Aplicabilitate practic => diagnosticul de laborator
(identificarea bacteriilor reacii chimice) !
Reacia Voges Proskauer
Reacia rou metil

CRETEREA I MULTIPLICAREA BACTERIILOR
temperatur i nutriie
optime =>
bacteriile cresc i se divid.
parental => 2 celule fiice
identice
cu parentalul
identice ntre ele.
Creterea i diviziunea
unei celule = ciclul celular
Creterea i multiplicarea
unei populaii bacteriene
= curba de cretere.
Curba de multiplicare (cretere) a
bacteriilor
n mediu de cultur lichid.
Perioadele (fazele) curbei de

cretere:
Faza de laten - lag
Faza de multiplicare
logaritmic - log
Faza staionar
Faza de declin
Curba de multiplicare (cretere) a bacteriilor
Faza de laten (lag)

numrul bacteriilor = nr. Bacteriilor
inoculate
NU se divid
cresc n volum
sunt n stare de adaptare metabolic
sunt induse enzimele necesare
degradrii substratului
Faza de multiplicare logaritmic
(log)
nr. bacteriilor crete n progresie
geometric
sunt tinere, active metabolic
sunt sensibile la aciunea AB, factorilor
fizici i chimici
utilizate la prepararea de antigene
bacteriene, vaccinuri.
Faza de ncetinire a
ritmului de
multiplicare
sfritul perioadei
logaritmice
consum substane
nutritive, O2
acumulare toxice
=> supravieuire
Faza staionar
Numr constant
reprogramat
activitatea metabolic
sintetizeaz proteine
de supravieuire
sporularea
devin mai rezistente
la AB.
Faza de declin
Bacteriile mor cu o rat ridicat
modificate morfologic: btrne (perete celular gros),
forme aberante, globuloase
starea fiziologic de rezisten la stres
rezistente la aciunea factorilor fizici, chimici, la
antibiotice.
Importana cunoaterii metabolismului bacterian
Clasificarea
Identificarea bacteriilor
Utilizarea bacteriilor:
preparare vaccinuri,
obinerea de antigene bacteriene,
n industria alimentar (lactate, pine, alcool),
n cercetarea fundamental
mediu.
Multiplicarea bacteriilor pe mediul solid
=> o colonie.
Colonie = populaie
bacterian pur din punct
de vedere genetic
deoarece provine de la
un singur parental.
GENETIC BACTERIAN I
Dr. Carmen Costache

Planul capitolului
Ereditatea = Metabolismul ADN-ului bacterian

Variabilitatea
Mutaia
Transfer de material genetic
Rolul materialulul genetic extracromozomial
Planul cursului
EREDITATEA - Metabolismul ADN-ului
Introducere - Dogma centrala
Structura ADN
Codul genetic
Genotip
Fenotip
Materialul genetic la bacterii
Cromozomial
Extracromozomial (Plasmide, Bacteriofagi)
Replicarea ADN
Repararea leziunilor ADN
Transcriere
Traducere
Gene
Operoni
INTRODUCERE
Toate organismsmele
au materialul genetic reprezentat de
ADN si ARN (Avery,1944, pneumococ)
folosesc aceleasi nucleotide
purine:
Adenina (A),
Guanina (G);
pirimidinice:
Citozina (C),
Timina (T)
Uracil (U)
Genetica= Ereditate + variabilitate
Ereditatea
Conservarea i transmiterea fidel a caracterelor unei
specii la descendeni
Stabilitatea f (ADN ) ~ metabolismul ADN
replicarea semiconservativ
repararea leziunilor ADN, restricie i modificare
transcrierea
traducerea informaiei genetice n proteine.
Genotipul = totalitatea informaiei genetice
Exprimarea fenotipic:
informaie genetice-ADN => ARN => proteine
reproducere
asexuala:
Fiziune
binara
Dogma centrala
ADN-ul este depozitarul informatiei genetice transcrisa in
ARN si apoi in proteine la nivelul ribozomilor
(Avery 1944, pneumococ)
Exceptie: retrovirusurile - Reverse Transcriptaza: ARN => ADN
Variabilitatea
Modificare caractere fenotipice microorganism
deosebesc
descendenii de parental
descendenii ntre ei.
St la baza evoluiei
Se produce prin modificri n genotip,
la nivel molecular.
Verticale: Mutatie
Transferului orizontal al ADN-ului:
transformare,
transpozitie,
transductie,
conjugare
STRUCTURA ADN
i modelul replicrii semiconservative
(Watson &Crick 1953)
Chimic = acid nucleic
schelet zahr - fosfat,
2 catene polinucleotidice => dublu-helix
5 -> 3
3-> 5
baze azotate
purinice adenin, guanin
pirimidinice (timin, citozin )
legturi de H, pe baza complementariti: (A=T; C=G).
Perechile de baze succesive => dublu helix
ARN
Zahar: riboza
Uracil <= Timina
STRUCTURA ADN
ADN
Functional (unitati de informatie genetica)

codon (ex. CCA) => gene => loci => Genom
Uman: perechi de baze 3.3 x 109 ~ 21.000 gene
Bacterii ~
perechi de baze: mil-5 mil
1000-5000 gene
STRUCTURA ADN - Codul genetic
Ordinea bazelor azotate n molecula de ADN
Codon
secven de 3 baze azotate-nucleotide (ex.CCA),
specific un anumit amino acid.
4 nucleotide, (4 3) = 64 codoni,
61 specific aminoacizi
3 = codoni stop TAA, TAG
Degenerat
Ex. Prolina (Pro) CCA, CCC, CCG, CCT
Exprimare fenotipica a informatiei
genetice:
ADN => ARN => AA - proteine
Genotip => Fenotip
Genotip = informatia codificata
stocata in ADN , mostenita, transmisa
descendentilor
instructiuni Limbaj codificat = codul genetic
copiat diviziune celulara
control
Formare de macromolecule proteice,
Reglarea metabolismului.
Fenotip = manifestarea fizica a acestei
informatii
STRUCTURA ADN
Molecula de ADN
continu din punct de vedere chimic.
Segmentat- funcional = gen.
structurale
reglatoare
secvene semnal.
A) Cromozomial - nucleoid
B) Extra-cromozomial
Plasmide
Bacteriofagi (fagi)
Transpozoni
Repliconi: Nucleoid, plasmide, fagi

A. Plasmide
1. Portiuni mici de ADN dublu catenare,
circulare
2. Repliconi (independent de cz)
3. 2 - 30 gene
Plasmide conjugante
F factor pilul de sex
R factor - multiple drug resistance (MDR
plasmid);
Hfr integrate in cz = recombinare
frecventa => prin conjugare => raspandire
The above is from
http://www.biosci.uga.edu/almanac/bio_103/notes/may_30.html.
structura bacteriofagi
Structure of phage T4
B. Bacteriofagi
1. Xl74 primul secventializat
2. litic => bacterioliza
Fara incorporarea ADN-ului exogen
3. lizogenic => profag - persistenta
Trigger => bacterioliza
REPLICAREA ADN
diviziunea
etape: iniiere, alungire, terminare.
despiralizarea moleculei superhelicoidale
de ADN,
realizat de ADN giraza (topoizomeraza 2).
punct de origine - zona ori ,
1-2 furci de replicare.
direcia 5' - 3'.
ter, 180, fa de punctul ori.
Replicarea ADN cromozomial i plasmidic:

bidirecional
semiconservativ
caten parental + caten progen
REPARAREA LEZIUNILOR ADN
erori de replicare
ADN polimeraza
funcie de corectare i exonucleazic
verific complementaritatea bazelor inserate i ndeprteaz
bazele incorect inserate
Exist sisteme de reparare:
constituitive sau inductibile (SOS)
prerepliactive, replicative, postreplicative
fidele, infidele (ex.SOS)
directe ( act. direct pe leziune),
indirecte (prin excizie)
Sistemul S.O.S (save our sequence)

codificat de un complex de gene, normal
represate.
leziuni ADN necorectate => se activeaz.
infidel
supravieuirea bacteriilor modificate morfologic i
funcional
Sistemul de modificare si restrictie
2 enzime complementare
E de moficare => metilarea nucleotidelor
Endonucleaze de restrictie: taie materialul
nerecunoscut
Prezervarea ADN-ului original
Folosite in ingineria genetica
Gena insulinei umaneHuman insulin gene
Gena hormonului de crestere
Prepararea antigenelor
Sistemul de modificare si restrictie
Metilarea
Marcarea catenei parentale
Gruparile metil adougate dupa replicare
Endonucleazele de restrictie
Taie ADN-ul in fragmente
Actiune site-specifica fiecarei endonucleaze in
parte
Molecule santinela => distrug ADN (ex. Viral)
ADN-ul metilat este rezistent la restrictie

TRANSCRIEREA INFORMAIEI GENETICE
gene structurale => mARN

tradus => lan polipeptidic
aproape concomitent
la nivelul ribozomilor
Etape:
iniierea,
alungirea mARN-ului
terminarea transcrierii.
TRANSCRIEREA INFORMAIEI GENETICE
Etape:
iniierea,
alungirea mARN-ului
terminarea transcrierii.
Iniierea transcrierii:
ARN polimeraza,
recunoaterea
promoterului: ataeaz,
despiralizeaz ADN.
Alungirea m ARN-ului:
copiat o singur caten a
ADN-ului: catena pozitiv
sau catena sens
TRADUCEREA INFORMAIEI GENETICE
= sinteza proteinelor, la nivelul ribozomilor.
Etape:
Iniierea
Alungirea
Terminarea
operonul = unitatea de transcriere a informaiei genetice
Structura operonului
gene structurale
alturate,
codific protein - enzime, implicate n aceai cale metabolic.
secvene semnal:
promoter, operator, activator;
Promoterul-dispus naintea genelor structurale
secvena semnal de care se prinde ARN polimeraza.
gena reglatoare:
la distan fa de genele structurale
nu face parte din operon, dar codific proteina reglatoare
operoni
constitutivi
inductibili: operonii catabolici, pentru enzimele cilor degradative,
represibili: operonii anabolici, pentru enzimele cilor anabolice
Reglai prin mecanisme de control pozitiv i negativ.
Biosinteza protein - enzimelor la bacterii este reglat prin:
inducie,
represie.
Operon model
Francois Jacob and Jacques Monod
Structure of a typical operon. Image from Purves et al., Life: The Science of Biology, 4th Edition, by
Sinauer Associates (www.sinauer.com) and WH Freeman (www.whfreeman.com)
Operonul lactozei
Gene structurale
-Galactozidaza ( Gal => Glu + Lac
-Galactozid permeaza (transport activ Lac)
-Galactozid transacetilaza
Operonul lactozei
Gena reglatoare => proteina reglatoare

Allosterica
Locus activ
recunoaste secvente semnal
Interactioneaza cu ADN
Locus efector - leaga efectori (zaharuri, aa)
modificare allosterica
Modificarea afinitatii pentru operator
Se prinde pe ADN
Se desprinde de pe ADN
codifica proteina represoare

Operonul lactozei (catabolic, inductibil).
Gene exprimate doar in prezenta lactozei (inductor)
Represor: legat de operator

( regiune adiacenta genelor structurale)
Nu se realizeaza transcrierea - control negativ
Inductor = Lac: se leaga de repressor =>
il tine ocupat
Are loc transcrierea
inductie prin control negativ (inductibil)
Operonul lactozei
Operonul lactozei
Control pozitiv prin proteina CAP

Dependenta de cAMP
fenomenul de diauxie Monod
Glu represie catabolica operon Lac
http://www.youtube.com/watch?v=T9Wszg7F
hxE
Operoni Biosintetici (represibili)
Operonul Triptofanului
Gene structurale: 5 => 3 enzime
Secvente semnal
promoter
operator
Gena reglatoare => represor
Control
Negativ
Atenuare
Control negativ
Nu Trp
=> represorul nu represeaza operatorul
=> operatorul transcrie genele structurale
=> se sintetizeaza Trp
Trp in mediu = co-repressor
Trp legat de represor => modificare conformatie
Se leaga de operator
Impiedica functionarea ARN polimerazei => stop
sinteza
Control prin atenuare = atenuarea

transcrierii in functie de cantitatea de Trp
din mediu
<iframe width="420" height="315"
src="http://www.youtube.com/embed/SiO
AQ-VjQQY" frameborder="0"
allowfullscreen></iframe>
GENETIC BACTERIAN II
Dr. Carmen Costache

Planul capitolului

Variabilitatea
Mutaia
Planul cursului
VARIABILITATEA
Mutatia
Definitie,
Proprietati
Mecanism molecular
Tipuri de mutatii
Tipuri de mutante
Soarta mutantelor in natura
Variabilitatea
= modificare caractere fenotipice

microorganisme
deosebesc
descendenii de parental
descendenii ntre ei.
st la baza evoluiei
se produce prin modificri n genotip, la nivel
molecular.
MUTAIA definitie
Modificare a unui caracter fenotipic

modificri n secvena de nucleotide
cromozomul bacterian,
plasmide.
spontan
brusc
transmisibil la descendeni
Rezultatul: Mutant
(fenotip diferit de parentali ) =>multiplicare
=> clone mutante
MUTAIA proprietati
Rata mutaiei: o celul din 1 milion - 10 milioane
Constanta: specie, caracter
Probabilitatea 2 mutaii concomitente: 10-12 pana la
10-14,
imposibil - ordinul de multiplicare a bacteriilor este
de 109.
Frecventa
Proportia de mutantii din populatie
F (rata, viteza mx, etapa multiplicarii)
Rata mutatiei Frecventa mutatiei
Momentul
e important !
Momentul este important !
perioada logaritmica
Numar mare de descendenti ai celulei mutante
in perioada stationara
Numarul descendentilor mutanti mai mic
DAR rata mutatiei este crescuta.
Sistem SOS
Proteine de supravietuire (defecte)
Predispune la mutatii pentru diverse caractere
Caracterul spontan al mutatiei
Nu se datorete factorilor de mediu,

DAR mediu = rol de selectare
Testul insamantarii replicative (Lederberg)
S- streptomicina => R- streptomicina
Testul fluctuatiei (Luria Delbruck)
S- bacteriofag => R-bacteriofag
Testul insamantarii replicative
(Lederberg)
Testul fluctuatiei (Luria Delbruck)
A) Daca mutatia ar aparea sub influenta factorilor de mediu, in fiecare
placa ar fi aproximativ acelasi numar de celule mutante.
B) Daca mutatia ar aparea spontan in timpul diviziunii celulare
anterioare insamintarii pe placa, numarul de clone mutante va fi foarte
variabil intre placi.
Tipuri de mutatii
Criterii de clasificare
Modificarile la nivelul genotipului mecanismele
moleculare ale mutatiei
Efectul asupra secventei de nucleotide
Efectul asupra polipeptidului codificat
Efectul asupra fenotipului
Tipuri de mutatii
Mecanismele moleculare ale mutatiei
Substitutii de baze azotate;

O pereche de baze azotate (bp) substituita de alta
A=T cu C=G
Deletii de baze azotate
Aditii de baze azotate
Inversii de baze azotate
Cel putin 2 bp isi schimba pozitia cu 180.
Cauza:
defecte de replicare,
reparatii insuficiente/incorecte
Tipuri de mutatii
Mecanismele moleculare ale mutatiei
Substitutia
tranzitie,
purinica purinica
Pirimidinica pirimidinica
transversion
purinica pirimidinica
Datorata
tautomerismului
corect : A-T, G-C
gresit :T-G or A-C
replicare eronata ADN
Tipuri de mutatii
Mecanismele moleculare ale mutatiei - amplitudine
punctiforme,
extinse
Punctiforme predominant
Substitutie
micro-deletii
micro-aditii
Afectata o pb,
Exinse,
macroaditie,
macrodeletie
inversie
Mai multe pb.
TIPURI DE MUTAII
Mutaii tcute
=> codoni cu acelai sens
=> neexprimat fenotipic.
Mutaii sens schimbat

=> ali codoni => ali aminoacizi.
Consecina diferit, dup
localizarea aminoacidului n
structura proteinei.
Mutatii cadru frameshift

Mutaii non sens => codoni stop.
pot fi letale pentru bacterie.
TIPURI DE MUTAII
Mutatii cadru frameshift
initial : AUGUUUCAUAGUGGU
AUG N Formil Metionine
UUU Fenil Alanine
CAU Histidine Microdeletie: C
AGU Serine
GGU Glycine
modificata: AUGUUUAUAGUGGUG;
AUG N Formyl Methionine
UUU Phenyl Alanine
AUA Isoleucine
GUG Valine
TIPURI DE MUTAII
Efectul asupra fenotipului
Comparnd fenotipul mutantului cu cel al bacteriei parentale:
1. Mutaii nainte: dobndesc proprieti noi fa de

parental
2. Mutaii napoi
Revers mutaie: revenirea la fenotipul bacteriei slbatice-rar
Supresoare (intragenica, intergenica)
3. Mutaiile condiionat letale - dirijate

(ex. mutaii termo - sensibile).
TIPURI DE MUTANTE
Mutante morfologice
Mutante de cultur
Mutante metabolice
Mutante antigenice
Mutante de patogenitate:
Mutante de rezisten la
antibiotice
Mutante de rezisten la
bacteriofagi litici
Mutante duble:
bacterii acapsulate devin
nepatogene
Mutante tcute (silenioase)
Mutante condiionat letale:
TIPURI DE MUTANTE
Mutante de patogenitate:
patogenitate crescut, care se rspndesc n
populaie
patogenitate sczut, folosite la prepararea
vaccinurilor.
TIPURI DE MUTANTE
Mutante condiionat letale:
ex. mutantele termo-sensibile, ale virusurilor gripale,
folosite pentru prepararea vaccinului antigripal

Proteina - AA schimbat
functioneaza normal la 32C dar nu la 37C
(alterarea configuratiei la T crescuta).
vaccin experimental
37C => cannot infect the lungs and cause pneumonia,
but
32C (nose) replicate and induce immunity
TIPURI DE MUTANTE
Mutante de rezisten la antibiotice prin modificarea :
proteinei de transport a antibioticului n bacterie,
a intei de aciune;
a afinitii enzimei de inactivare a AB:
ex. modificarea lactamazelor (penicilinaze,
cefalosporinaze), care inactiveaz lactaminele conduce la
dobndirea rezistenei bacteriilor la lactamine (peniciline,
cefalosporine);
modificri cantitative: ex. lactamazele devin din inductibile,
constitutive.
TIPURI DE MUTANTE
Mutante de rezisten la antibiotice
TIPURI DE MUTANTE
Soarta mutantelor in natura
tulpin, clon nou
eliminat
se multiplic paralel cu tulpina parental
se multiplic excesiv fa de tulpina parental
(condiii de mediu favorabile clonei modificate i
nefavorabile tulpinii parentale (ex. mediu cu
antibiotic).
GENETIC BACTERIAN III
Dr. Carmen Costache

Planul capitolului
Variabilitatea
Mutaia
Conjugare
Transformare
Transductie
Transpozitie (TGE)
Planul cursului
Conjugare
Plasmide
Transformarea
ADN liber
Transductie
Bacteriofagi
Transpozitie
Transpozoni = elemente genetice mobile (TGE)
CONJUGAREA BACTERIANA
= transfer de material genetic (plasmidic,

cromozomial) ntre bacterii donatoare (D) i
receptoare (R) prin:
pili de sex G(-)
feromoni G(+)
Plasmide
minicromozomi
Plasmide
Gene de control a replicrii proprii
Gene de interaciune cu alte molecule de ADN
plasmide episomale: capabile s existe autonom i/sau integrat.
recombinare situs specific
Sistem genetic de fertilitate sau de transfer
plasmide conjugante: au operonul Tra
plasmide neconjugante nu au operon Tra
Gene pentru proprieti fenotipice bacteriene:
gene structurale
rezisten la antibiotice, la sruri de metale grele (plumb,
mercur, argint, arsen), la detergeni, radiaii, bacteriofagi,
colicine
structuri bacteriene: ex. pili la tulpini enteropatogene
proprieti metabolice
codific factorii de patogenitate
invazivitate
toxine bacteriene ex.
Plasmide
criptice,
nu codific caracter bacterian,
intervin n transfer de material genetic
Importante: plasmidele F, R, col.

Plasmidele F
Episomale, criptice
Recombinare omoloaga
se poate integra n cromozomul bacterian rar
o bacterie din 105 bacterii F+.
Rezult o bacterie Hfr
CONJUGAREA BACTERIANA
Plasmidele R (de rezisten la AB)

se transmit epidemic n populaiile bacteriene.
pe vertical
pe orizontal - conjugare bacterian,
ntre specii / genuri diferite:
ex. de la bacil coli la bacil dizenteric
Conjugarea R+-R-
mecanismul primordial de dobndire a rezistenei
fa de antibiotice, la Gram negative
rezistena n bloc fa de antibiotice
Bacteriile multiplu rezistente la antibiotice se
selecteaz - mediul spitalicesc
Plasmide
Plasmidele col
gene pentru sinteza de colicine - bacteriocine
Bacteriocinele
proteine de tip antibiotic
B.productoare sunt imune
meninerea microbiocenozelor normale ale
organismului
Conjugarea la bacteriile Gram pozitive
feromoni de sex
produsi de bacterii receptoare
Structura chimica - peptidic
Efect afrodisiac
proteine de ataare
Produsi de bacteriile donatoare
Transformarea
transfer de ADN liber
de la o bacterie donatoare (D)- exogenot
la o bacterie receptoare (R) - endogenot
natural
autoliza bacteriilor
artificial
extracie chimic
fenomen rar ntlnit n natur
Transformarea
Griffith - 1928 virulena pneumococilor
Transformarea
Proteinele rec. A
gsirea zonei de omologie ntre exo i endogenot,
ruperea n anumite poziii i
reunirea catenelor,
Consecin: integrarea
endogenotul primete de la exogenot gen activ
pentru capsul
bacterii Gram pozitive si negative
fungi
Transformarea
starea de competen
accept fragmentul de ADN,
Tranzitorie
5-15 minute
protein de competen
alterez suprafaa bacteriei receptoare
Etapele transformrii
Absorbia
fragmentului de ADN pe suprafaa celulei
receptoare
Penetrarea
ADN-ului n bacteria receptoare
Eclips
Taiere, unire ADn exogenot-endogenot
Mecanism
recombinare omoloaga,
doar ntre celule ale aceleai specii sau specii strns
nrudite
Rolul natural al transformrii
m odificarea structurii antigenice a
pililor gonococilor i evoluia cronic
a gonoreei (uretrita gonococic)
TRANSDUCTIA
BACTERIOFAGI
entiti infecioase acelulare
Virusuri ale bacteriilor.
Structura:
o molecul de acid nucleic,
protejat de proteine - capsida.
multiplicare => doar prin
utilizarea mainriei de sintez
a celulei parazitate (bacteria)
Bacteriofagi
Form :
lineari - cilindric
filamentoi
icosaedrici
Bacteriofagii cu cap i coad
ROL:
Transducia
transfer de material genetic prin bacteriofagi
Conversia lizogen
conferirea unor proprieti bacteriene
TRANSDUCTIA
generalizat : localizat (specific):
orice fragment al doar anumite gene,
cromozomului bacterian. alturate bf. n cz.
prin bacteriofagi litici bacterian.
recombinare omoloag prin bf. temperai:
ex. bacteriofagul al E. coli
recombinare situs specific
Profag
Excizia incomplet =>
genom fagic defectiv
TRANSDUCIA
Conversia lizogena
proprieti fenotipice
prin bacteriofag temperat
transmisibil la descendeni
Factorii de patogenitate - tox ine bacteriene :
toxina difteric - bacteriofagul tox, la bacilul difteric
eritrotoxina - toxina scarlatinoas, la streptococul hemolitic
fibrinolizina stafilococic
toxina Shiga-like, la bacilul coli (asemntoare toxinei
bacilului difteric shiga)
Recombinarea
Omoloaga
Situs specifica
Situs nespecifica (ilegitima)
Recombinarea
- In timpul trasnferului de material genetic
Recombinarea
Omoloaga: noul ADN inlocuieste ADN-ul
existent
Depinde de proteina rec A
Intre secvente identice sau foarte asemanatoare de
ADN
Mecanismul molecular:
- Taiere
- Replicare segmentara a ADN-ului
- Unirea catenelor noi de cele vechi
- Rezolvarea: reunirea capetelor prin ligaze
Efect: detectabil / nedetectabil
Recombinare omoloaga
apare in transformare
Ex. Variatia antigenica pili gonococci
integrarea plasmidelor F n cromozomul
bacterian - conjugare
cointegrarea plamidelor
Recombinarea- Situs specifica
Intre molecule
diferite de ADN
care au in comun o secventa de 10-20 nucleotide
Ex cz + plasmida ; cz + fag
Rezultatul:
Secvente repetitive directe (repetitii directe),
Secvente repetitive inversate (repetari inversate) =>
inversie
Inversia => modificarea antigenului H la enterici
(variatia de faza)
Transpoziia
alt consecin a recombinrii situs specifice
Recombinarea
Situs nespecifica (nelegitima)

Insertii / deletii ambele
Pl + cz; Bf + cz
TRANSPOZIIA
(Vezi curs TGE)
ROLUL MATERIALULUL GENETIC EXTRACROMOZOMIAL
variabilitate a caracterelor
bacteriene,
proprieti noi,
patogenitatea bacterian,
modificarea structurii antigenice,
dobndirea unor proprieti metabolice,
rezistena la antibiotice/ali factori
antibacterieni
PATOGENITATE BACTERIAN
A. Toxine bacteriene
1. Codificate de bacteriofagii tem perai :
toxina difteric codificat de bacteriofagul tox, la bacilul difteric
enterotoxina stafilococic
toxina Shiga-like, la bacilul coli
2. Codificate de plasm ide :

toxina exfoliativ a stafilococilor
toxina bacilului crbunos
toxina bacilului tetanic
hemolizina bacilului coli
enterotoxina tulpinilor enterotoxigene de E. coli
B. Adezine bacteriene - plasm ide ,
proprietatea de aderare specific de epitelii, mucoase, prin pili de
aderare,
tulpinile enteropatogene ale bacilului coli, care ader prin pili de
mucoasa duodenojejunal,
tulpinile uropatogene ale bacilului coli, care ader de mucoasa urinar.
C. Invazivitate bacterian- plasm ide,

capacitatea de invazie i de colonizare a epiteliilor:
ex. invazia epiteliului colic de ctre bacilul dizenteric
tulpini enteroinvazive de E. coli (EIEC).
REZISTENA LA ACIUNEA UNOR FACTORI DE MEDIU
Plasm idele capacitatea de rezisten n diverse condiii

de mediu:
a) Rezisten la antibiotice
exist peste 60 plasmide cu gene de rezisten la lactamine;
b) Rezisten la sruri de metale grele
(Plumb, mercur, argint, arsen), utilizate ca antiseptice, rezultnd
bacterii rezistente la antiseptice;
c) Rezistena la detergeni; la radiaii; la bacteriofagi; la
colicine
TRANSPOZITIA
ELEMENTE GENETICE MOBILE
JUMPING GENES
TRANSPOSABLE GENETIC ELEMENTS (TGE)
Dr. Carmen Costache

Planul cursului
TGE Definitie
TGE clasificare
Transpozitia
Definitie
Nespecifica/Situs-specifica
Transpozoni
Clasificare, exemple
Integroni
Retroni
Rolul materialului extracromozomial
TGE
Segmente mobile de ADN
Responsabile de
transpozitie
Dependente de un replicon
Lipsite de fgmori
La capete au
ITR (inverted terminal
repeats)
Structura de atasare
5-9 bp
TGE - clasificare
1) Transpozoni (Tn)
2) Integroni
Zone de ADN care primesc
fgm de ADN, gene
3) Retropozoni (retroni)
Fragmente mobilizabile de ADN
Transcrise prin ARN
Au ADN reverse transcriptaza.
ARN-ADN hibrid
reverse transcriptase
Transpozitia
Mutarea TGE
Pe aceasi molecula ADN
in pozitii diferite
Intre molecule de ADN diferite
Cromozom bacterian plasmida
Cromozom bacterian bacteriofag
Transpozitie
Nespecifica / Site specifica
ilegitima / legitima
ITR scurte ITR lungi
Zona tinta de atasare: Zona tinta de atasare:
oriunde specifica
Transpozon inserat in transpozon inserat
zone diferite ale doar in zone specifice
moleculei de ADN. ale moleculei de ADN,
Recombinare situs
specifica.
Transpozoni (Tn): 3 clase
Clasa I : Cut & Paste (nereplicativa)
Tn Simpli = Secvente de insertie -IS
Tn compusi
Clasa II : Copy & Paste (replicativa)
Gena transpozaza
cointegrat-rezolvaza
2 IS
Gene de rezistenta antibiotice
Clasa III : Copy & Paste(replicativa)
Bacteriofagii mutatori
Clasa I : Secvente de insertie -IS
800-1400 bp
IS = ITR + gena transpozaza + ITR
Secvente de nucleotide identice
sau f.asemanatoare
Implicate in integrarea in ADN
receptor.
Efect: mutatie
Clasa I: Transpozoni Compusi
Domenii:
1 la fiecare capat ITR
2 gena transpozaza
3 gene structurale
Rezistenta la antibiotice "r"
Kanamicin, Cloramfenicol, Lactamine, Sulfamide
Factori de patogenitate
e.g.: toxine - enterotoxin
Exemple de
Transpozoni de rezistenta la antibiotice
Kanamicina = K Tn
Chlormafenicol = Tn 9
-lactamine: Amp transposon: AmpR
Tetraciclina: Tc transposon: TcR
Transpozoni Clasa II
Copy & Paste =
transpozitie replicativa
E: cointegrat-rezolvaza
fuziunea a 2 plasmide, una dintre
acestea deinnd un transpozon
Replicare
2 plasmide separate
Fiecare are transpozon
Cu gene de rezistenta
Plasmidele R = colectie
de Tn cu gene r
Transpozoni Clasa III
= bacteriofag mutator (Mu)
Capacitate mare de transpozitie replicativa.

~ 100 copii
=> mutatii cu frecventa ridicata
Inactivarea genei
Activarea genei alaturate
Deletii
Insertii
Integroni
Secventa de ADN stabila achizitioneaza Tn (gene r)
Pe plasmide
Pe cromozom
Integreaza in casete gene de rezistenta

pentru diferite tipuri de antibiotice
Prin recombinare site-specifica
3 tipuri de integraze
Casetele de gene cu gene de R la AB
exista autonom in citoplasma.
Casetele de gene =>

Mecanism pentru Rezistenta multipla la antibiotice,
Mechanisms of antibiotic resistance
Retronii (retropozoni)
secvente de ADN care codifica o revers transcriptaza

HIV = structura de retropozon (si alte retrovirusuri)
Asociate frecvent cu ADN profag
Exista la multe bacterii
Efectele revers transcriptiei
Introducerea unui ADN modificat
Defecte punctiforme dar potential
semnificative
Responsabile pentru schimbari importante
in genomul prokariot
Generarea multor copii de secvente de
ADN modificat
Cresc frecventa mutatiilor spontane
HIV si alte retrovirusuri
Au structura de retroni.
RT = revers transcriptaza
LTR = long terminal repeats
(repetari terminale lungi)
ROLUL MATERIALULUL GENETIC EXTRACROMOZOMIAL
variabilitatea caracterelor bacteriene,

proprieti noi:
patogenitatea bacterian,
modificarea structurii antigenice,
dobndirea unor proprieti metabolice,
rezistena la antibiotice/ali factori antibacterieni
1. Codificate de bacteriofagii tem perai :
toxina Shiga-like, la bacilul coli
2. Codificate de plasm ide :

B. Adezine bacteriene - plasm ide ,
aderare specific de epitelii, mucoase, prin pili de aderare:

tulpinile enteropatogene ale bacilului coli
ader prin pili de mucoasa duodenojejunal,
tulpinile uropatogene ale bacilului coli,
ader de mucoasa urinar.
C. Invazivitate bacterian - plasm ide,

capacitatea de invazie i de colonizare a epiteliilor:
ex. invazia epiteliului colic de ctre bacilul dizenteric
tulpini enteroinvazive de E. coli (EIEC).
REZISTENA LA ACIUNEA UNOR FACTORI DE MEDIU
Plasm idele capacitatea de rezisten n diverse condiii de

mediu:
Rezisten la antibiotice
exist peste 60 plasmide cu gene de rezisten la lactamine;
Rezisten la sruri de metale grele
Plumb, mercur, argint, arsen - utilizate ca antiseptice,
Rezistena la detergeni; la radiaii; la bacteriofagi; la

colicine
Patogenitate bacterian
Dr. Carmen Costache
Patogenitate bacterian
Planul cursului
Patogenitate definitie, proprietati

Virulena DL 100%, DL 50%
Relaia microorganism organismul uman
Flora normal (microbiocenoza)
Clasificarea patogenetica a microorganismelor
Postulatele lui Koch/Postulate moleculare
Microorganismele i patogeneza
Evitarea mecanismelor de aprare a gazdei
Producerea infeciei
Exotoxine
Endotoxine
= capacitatea unui microorganism de a produce o boal

infecioas.
Relatia: gen sau specie microbian specie animal
o specie bacterian mbolnvire la o anumit specie
Clasificare/nomenclatura
infecii la animale - zoonoze;
infecii umane - antroponoze
ex. gonoree, sifilis, febra tifoid
infecii la animale transmisibile la om - antropozoonoze
ex. leptospiroze, bruceloz.
Virulena
apreciere cantitativ a patogenitii
determinat n condiii de laborator
efectul microorganismului sau a unui produs al acestuia
n vivo, pe animale de laborator sau
n vitro, pe culturi de celule.
Se determin cantitatea cea mai mic de microorganism
sau produs, care produce mbolnvire sau moarte pe
sistemul de testare biologic.
Doza letal (DL) 100% = cantitatea cea mai mic de
microorganisme, sau de produs bacterian, capabil s
cauzeze moartea tuturor animalelor inoculate.
n practic: DL 50% (diferene mari legate de nivelul
rezistenei naturale a animalelor inoculate).
Virulena
Pasteur: posibilitatea de atenuare a
virulenei
(Pasteurrella - bacilii holerei ginilor)
ulterior atenuarea virulenei
bacilului crbunos => vaccinul anticrbunos.
n cadrul unei specii bacteriene exist:
tulpini cu virulena crescut: produc boli cu evoluie
clinic grav;
tulpini cu virulena diminuat: produc forme uoare
de boal;
tulpini cu virulena atenuat: sunt utilizate n
prepararea de vaccinuri.
Microorganismele patogene produc boal
cnd ptrund n organismul uman
(pathos = boal; gennan = a produce).
Prezena /creterea microorganismelor NU

determin ntotdeauna boal !!!!
Relaia microorganism organismul uman
Parazitism
obligatoriu
intracelular (ex. Chlamydia)
facultativ
in interiorul celulei, n afara celulei/ medii de
cultur
ex. Staphylococcus, Mycobacterium tuberculosis, Salmonella
Comensalism: flora normal (microbiocenoza)
Origine:
mam
personal medical/mediu spitalicesc
mediu nconjurtor
Flora normal (microbiocenoza)
Microorganisme comensale =
microorganisme care fac parte din flora
normal
microorganisme rezidente
microorganisme tranzitorii
Microbiocenoza = asociaie bacterii/levuri

echilibru
Site-uri (habitate)
cavitatea oral & tractul respirator superior
(Nazofaringe)
intestin
piele
vagin
uretra
Speciile microbiene patogene pot fi:
1. bacterii cu patogenitate cert (patogeni primari):

produc ntotdeauna boal la ptrunderea n
organismul uman.
Salmonella tiphy - febra tifoida;
Yersinia pestis (pesta, ciuma);
Shigella spp. (dizenteria bacilar)
Treponema pallidum (sifilis);
2. Conditionat patogeni
Produc imbolnaviri doar in anumite circumstane
uneori membri ai florei normale
Staphylococcus,
Candida spp.
Bacterii condiionat patogene

Conditionarea/Oportunitatea:
bacterie,
organismul uman,
condiiile de ntlnire dintre bacterie i organismul uman.
Bacterie: achiziia de material genetic, care codific factori de
patogenitate.
E.coli - tulpini enterotoxigene (ETEC),
tulpini enteroinvazive (EIEC);
Gazd:
leziuni preexistente: ex. persoane cu leziuni valvulare, la care
Streptococi viridans pot ajunge n snge (ex. dup extracii dentare) i
pot produce endocardit.
Circumstane de ntlnire bacterie- gazd:
cantitatea mare de bacterii,
bacteriile comensale ajung n alt situs dect habitatul lor
natural, prin manopere medicale

3. Microorganisme oportuniste:
la persoanele imunocompetente => infecii
asimptomatice sau cu evoluie clinic uoar
la imunodeprimai => infecii grave, uneori letale.
Bacterii saprofite
triesc n natur
ciclul natural al substanelor
Descompunerea organismelor moarte
componente organice => substane chimice anorganice
Postulatele lui Koch
Un microorganism = agent etiologic dac
respect postulatele lui Koch.
1. Agentul etiologic al unei boli infecioase
trebuie s fie prezent n toate cazurile de
boal.
2. Agentul etiologic trebuie s poat fi izolat pe
medii de cultur
3. Agentul etiologic izolat i meninut n
laborator n cultur pur trebuie s reproduc
infecia prin inocularea la animale de
experien, de la care trebuie s fie reizolat pe
mediu de cultur.
4. Trecerea printr-o infecie trebuie s conduc n
organismul bolnav la instalarea unei imuniti
specifice fa de agentul etiologic respectiv.
Postulate moleculare
Descriu factorii de virulen
1. Genele de virulen sau produii

acestora trebuie s fie prezeni
2. Prezena genelor de virulen
transform un non-patogen ntr-un
patogen
3. Genele de virulen trebuie s fie
exprimate n timpul infeciei
4. Anticorpii mpotriva produilor
genelor de virulen sunt
protectori.
Stagiile unei boli infecioase
Transmiterea:
Doza infectant 10-106 organisme
Perioada de incubaie :
variabil
Perioada de stare
Convalescena:
vindecare
laten
1. Modalitatea de transmitere:
fecal-oral (holera)
interuman (tuberculoza)
de la animale (rabia)
cu ajutorul unor vectori
Insecte artropode (pureci
capuse)
ciuma,
boala Lyme
Clinic= Perioada de incubatie
2. Aderena
Previne ndeprtarea rapid
Frecvent ader cu ajutorul pililor
Specificitate
Receptor prezent => infecie
NU receptor => NU infecie
Clinic = Perioada de incubatie
3. Colonizarea: multiplicarea i
continuarea infeciei
Competiia cu flora normal
Factori de rezisten mpotriva
colonizrii:
bila
pH-ul acid din stomac
peristaltismul intestinal
cilii tractului respirator
IgA (anticorpi de la nivelul mucoaselor)
Clinic: Perioada de stare
4. Afectarea gazdei
Invazivitate
Toxicitate
Interaciunea bacteriilor cu mucoasele.
(a) Asociere.
(b) Adeziune.
(c) Invazia.
Invazia = ruperea barierelor anatomice
1. Piele:
rni
insecte, vectori
2. Traversnd mucoasele
(ex. epiteliul celular intestinal)
Evitarea mecanismelor de aprare a gazdei
1. Ascunderea n celulele gazdei

intracelular: evitarea expunerii la anticorpi
2. Evitarea distrugerii de ctre complement

3. Evitare fagocitozei
Evitarea anticorpilor
1.Variaia antigenic
noi pili
2.IgA proteaze
Neisseria gonorrheae
3. Asemanatoare cu Ag proprii
capsula Streptococcus pyogenes = acid hialuronic,
secretat i de esuturile gazdei
Afectarea gazdei (producerea infeciei)
1. Exotoxine
necesit colonizare anterioar (holera)
toxiinfecii alimentare chiar i n absena
bacteriilor
Botulism
toxina Staphylococcus aureus
Sunt inte pentru anticorpii neutralizani
Vaccin
2. Toxine care afecteaz membranele
Hemolizine
Determin liz celular: Streptolizina O
Fosfolipaze
cliveaz lipidele membranare: Clostridium perfringens
gangrena gazoas
3. Superantigene
Superantigene
Hiperstimuleaz sistemul imun
Se leag direct de antigenele de clas II MHC
Activeaz limfocitele T
Elibereaz cantiti importante de interleukine (1,2)
Determin oc => Simptome de oc toxic
febr, grea, diaree, vrsturi
Insuficien de organe, colaps circulator
Cauz de sindrom oc toxic (TSST)
Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes
4. Endotoxine
parte structurala a celulei bacteriane - LPS
doar la bacteriile Gram negative
ENDOTOXINE EXOTOXINE
n peretele celular al G(-) Secretate de unele G(+) i G(-)
LPZ Lipid A Polipeptide
Cromozom Plasmide/bacteriofagi
Toxicitate scazut (MLD~100 ) Toxicitate nalt (MLD~ 1 g)
febr, oc Efecte variate
NU vaccin Anticorpi = antitoxine
Stabile la 100C pentru 1 h anatoxine => vaccin
Sepsis Distruse la 60C (excepie enterotoxina
stafilococic)
Tetanos, botulism, difteria, etc.
ENDOTOXINE
Mecanismul de aciune - nespecific

acioneaz identic
activare a diverselor celule (monocitelor,
macrofagelor, limfocitelor, plachetelor sanguine i
celulelor endoteliale)
stimuleaz producerea citokinelor proinflamatorii
febr, prin aciunea pirogenului endogen ( IL1)
modificri vasculare: vasodilataie, cretera
permeabilitii vasculare
n doze mari, endotoxina determin oc toxic,
coagulare intravascular diseminat, semne de suferin
organic
Potential: n orice infecie cu bacterii Gram negative
ENDOTOXINE
1. Toxine bacteriene codificate de bacteriofagii temperai:
toxine, la bacterii din genul Clostridium
toxina Shiga-like, la bacilul coli (asemntoare toxinei b. dizenteric Shiga)
2. Toxine bacteriene codificate de plasmide:

Exotoxine
Toxin difteric <= Corynebacterium diphteriae
bacteriofag temperat
subuniti A-B
B legare
A - enzim
Aciune: inhib sinteza proteinelor

ADP- ribozilarea factorului de elongare
EF-2 bacteria EF-2 uman
(diphthamide)
Aciune: Pseudomonas, E.coli,
Vibrio cholerae, Bordetella pertussis
Exotoxine
Toxina tetanic <= Clostridium tetani
Neurotoxin (tetanospasmina)
Codat plasmidic
Aciune: previne eliberarea
neurotransmitorului inhibitor glicina
=> spasm
rspndire: axon / snge
Mduva spinrii
Exotoxine
toxina botulinic <= Clostridium botulinum
Neurotoxin
Bacteriofag
Aciune: blochez eliberarea acetilcolinei la nivelul
sinapselor => paralizie
Cel mai toxic compus cunoscut
2 subuniti: legare aciune
Clostridium botulinum
Exotoxine
Bacillus anthracis => 3 exotoxine

factorul edem = adenilat ciclaz (AC)
factorul letal ????
antigen protector
Streptococcus pyogenes
toxina eritrogenic
Responsibil de erupia din scarlatin
Bacteriofag
Exotoxine
E.coli enterotoxina termo-labil

Codat plasmidic
activitate de adenilat-ciclaz => crete cAMP =>
inhibarea absorbiei Na
Pierderea de electrolii (Cl)
Diaree apoas
Aceeai aciune a toxinelor V. cholerae, B. cerreus
Exotoxine
Bordetella pertussis
Toxina pertusis inactiveaza inhibitorul
adenilat-ciclazei => creste AC
Cresterea cAMP
=> celulele devin foarte sensibile la stimuli
=> Tuse convulsiva
Antibiotice
Dr. Carmen Costache

Antibiotice
Planul cursului
Definiie
Antibiotice vs Chimioterapice
Antibiotice vs Antiseptice
Clasificare
Spectru de aciune
Tipuri de efect antibacterian
Combinatii de AB
Farmacocinetica
Familii de antibiotice
Mecanisme de aciune
Rezistena la antibiotice
Antibiotice / chimioterapice
Antibioticele (AB):
substane naturale, cu efect antibacterian,
produse de microorganisme.
Chimioterapicele (CH) :
substane chimice cu efect antibacterian.
Datorit apariiei rezistenei bacteriene:

=> modificarea structurii antibioticelor de baz dintr-o familie,
=> derivaii semisintetici ai antibioticelor.
AB/CH diferite dup
proveniena,
mod de producere,
dar au acelai efect.
Antibiotic Organisms
Penicillium
Penicillin
chrysogenum
Cephalosporium
Cephalosporin
acremonium
Penicillium
Griseofulvin
griseofulvum Penicillium Cephalosporium
Bacitracin Bacillus subtilis
Polymyxin B Bacillus polymyxa
Amphotericin B Streptomyces nodosus
Erythromycin Streptomyces erythreus

Neomycin Streptomyces fradiae
Streptomycin Streptomyces griseus
Tetracycline Streptomyces rimosus
Vancomycin Streptomyces orientalis
Micromonospora
Gentamicin
purpurea
Streptomyces
Rifamycin Streptomyces griseus
mediterranei
Antibioterapia
origini: antibioza i toxicitatea selectiv.
Antibioza Pasteur: cultur cu 2 microorganisme

producerea unei substane de ctre una din ele =>
oprete multiplicarea sau omoar cea de a 2-a
bacterie.
Toxicitatea selectiv:
fixarea selectiv, specific a substanelor de corpul
bacterian.
nu se fixeaz i nu este toxic asupra altei bacterii sau
asupra celulelor umane (eukariote)
Dezinfectante\Antiseptice
substane cu efect antibacterian,
active n concentraii mari
NU respect principiul toxicitii selective.

se utilizeaz doar extern =>
ndeprtarea microorganismelor de pe suprafee
Indicele terapeutic
IT = Doza toxica/doza efectiva.
Cu cat IT mai mare, cu atat AB este mai bun !
Spectrul de aciune al unui antibiotic
totalitatea genurilor i speciilor bacteriene

asupra crora acioneaz antibioticul:
coci Gram pozitivi i negativi,
bacili Gram pozitivi i negativi,
bacterii anaerobe,
spirochete,
Mycobacterii,
bacteri cu patogenitate intracelular:
Richettsia, Chlamydia, Mycoplasma.
Spectrul de aciune al Antibiotic Spectrum
unui antibiotic Penicillin Gram-positive bacteria
Bacitracin
Gram-positive bacteria
Spectru ngust => specie bacteriena
ex. antibioticele antistafilococice, Vancomycin
Gram-positive bacteria
Tuberculostatice
Spectru restrns => numr mic de Polymyxin B
Gram-negative bacteria
grupe, genuri bacteriene:
Ex. Acid nalidixic - activ doar pe bacili Gram Streptomycin
Gram-negative bacteria
negativi
Specru larg = active asupra majoritii Gram-positive negative
genurilor, speciilor bacteriene: Erythromycin cocci; some Gram
negative bacilli
Spectru ultralarg: active asupra Neomycin Broad-spectrum

bacteriilor din mediul spitalicesc, Tetracycline Broad-spectrum
multiplu rezistente la antibiotice. Cephalosporin
Broad-spectrum
Gentamicin Broad-spectrum
Rifamycin Tuberculosis
Spectrul de aciune al unui antibiotic
Efect antibacterian
Bacteriostatic: opresc multiplicarea

ex. Cicline (ex. Tetracicline), Cloramfenicol
Bactericide: omoar bacteriile, n
concentraii mici;
ex. Aminozide
Bacteristatice n concentraii mici i
bactericide n concentraii mari;
ex lactamine
Combinatii de AB
Sinergism
Antagonism
Indiferenta
Farmacocinetica unui antibiotic
In vitro in vivo
Localizarea infectiei
Capacitatea AB de a ajunge la situsul infectiei
Influentata de cinetica AB = disponbilitatea biologica
Intracelular, puroi, bariera hematoencefalica
Tipul infectiei
Inactivarea AB:
pH,
Tesut necrotic
Rezistenta bacteriei la AB exprimata in vivo (inductie)

ptrunderea antibioticelor n organism:

calea de administrare: oral
parenteral: intravenoas, intramuscular, subcutanat
Infectii severe, sistemice
Externa: crme, unguente, solutii (picaturi nazale,
oftalmice)
absorbia antibioticelor: rapid, lent
metabolizarea antibioticelor
distribuia n organism: n esuturi, organe,

penetrarea barierei hematoencefalice, penetrarea
intracelular.
toxicitatea antibioticelor (hepatic, renal,
medular, nervoas, etc)
calea de eliminare a antibioticelor: urinar,
digestiv
Condiii pentru un AB s fie activ
s ajung la bacterie
s ptrund n bacterie
s fie permeabil pentru antibiotice
s dispun de un transportor pentru antibioticul respectiv
s ating inta de aciune
s realizeze n bacterie o concentraie optim, care s
inactiveze reversibil sau ireversibil inta de aciune.
Tratamentul cu antibiotice
Familii de antibiotice
AB care au
structur chimic,
int de aciune
mecanism de aciune
comune.
Tinta de actiune nivel molecular
Structura/functie inactivata ireversibil/reversibil
de catre AB
inte ale antibioticelor
Perete celular:
Lactamine
Glicopeptide: Vancomicina, Teicoplanina
Ristocetina
Fosfomicina, Cicloserina, Bacitracina,
Membrana citoplasmatic:
Polipeptide ciclice: ex. Colistin, polimixina B
Gramicidina, Tirociclina, Defensine, L - Antibiotice

Acizi nucleici:
Quinolone,
Imidazoli,
Furani,
Rifamicine
Ribozomi: AB care inhib sinteza proteic
30 S: Aminoglicozide,Tetracicline, Spectinomicine
50 S: grupul MLS , Fenicoli
Macrolide, Lincosamide, Sinergistine
Acid fusidic: factorul de elongare (EF)
Inhib sinteza acidului folic:
Diaminopirimidine
inhiba folat reductaza: Trimetoprim
Pirimetamina
Sulfonamide
Inhiba folat sintetaza: Sulfametoxazol
Asocierea Trimetoprim + Sulfametoxazol = Co-trim-oxazol
(Biseptol)
Sulfone: Dapsone
PAS (acid paraaminosalicilic)
Familii de Antibiotice
Lactamine,
grup Monobactam i gamma () Lactamine
Aminoglicozide
grup MLS:
Macrolide, Lincosamide, Sinergistine
Tetraclicline
Fenicoli
Quinolone
Sulfamide
Polipeptide ciclice, Glicopeptide
Sulfamide
Imidazoli
Furani
Rifamicine
Tuberculostatice
AB nencadrate n familii:
Fosfomicina, Cicloserina, Novobiocina, Acid fusidic,
AB => peretele celular - Lactamine
inhib sinteza peptidoglicanului
n faza de polimerizare.
int de aciune: PBP-uri
inhibat funcia enzimatic : transpeptidarea,
transglicozidarea, carboxipeptidarea
inelul lactam = analog structural al
legturii sterice D Ala - D Ala.
Rezistena la -Lactamine
1. Modificarea permeabilitii bacteriene
2. Modificarea intei (PBP)
3. Inactivarea prin -lactamaze
1. Penicilinaze
2. Cefalosporinaze
3. BLSL
4. BLSE
4. Pompe de eflux
Familia -Lactaminelor
Grup I: Derivai ai acidului 6-aminopenicilinic
1. Penami (peniciline)
2. Carbapenemi
3. Oxapenami (Clavani)
Familia -Lactamine
Grup II - Cefalosporine derivati de acid 7 aminocefalosporanic
- Primele izolate din tulpini de Cephalosporium (fung
filamentos)
- Aceei aciune ca i Penicilinele
- Diferite generatii
Familia -Lactaminelor- Peniciline (Penami)
a) peniciline cu spectru ngust b) peniciline rezistente la

(Penicilin G i Penicilin V) penicilinaze - Peniciline M
- coci Gram pozitivi i negativ,
bacili Gram + i spirochete Meticilin
- Penicilina G adm. Oxacilin
parenterala Pentru tratamentul
- Penicilina V administrare infeciilor cu stafilococi.
p.o.
- Reactii alergice ! MRSA = methicillin
resistant Staphylococcus
Peniciline semiretard i retard: aureus
Propicilina;
- Procain Penicilin = Efitard;
- Benzantin Penicilin =
Moldamin
c) peniciline cu spectru larg :

Amino peniciline
Ampicilin i bacili Gram
negativi (NU Pseudomonas)
Amoxicilin i unii bacili Gram
negativi (NU Pseudomonas)
Carboxy peniciline
Carbenicilin,
Ticarcilin
i bacili Gram negativi, inclusiv
Pseudomonas
Ureidopeniciline
Piperacilin
d) Inhibitori de -lactamaze penicilin sulfone

Sulbactam,
Tazobactam
In combinaie cu Peniciline cu spectru larg

Sulbactam + Ampicilin = Sultacilin (Unasyn)
Sulbactam + Becampicilin = Sultamicillin;
Tazobactam + Piperacilina = Tazocin
Familia -Lactamine
2. Carbapenemi 3. Oxapenemi sau

Clavami
Imipenem,
acid clavulanic = inhibitor
Meropenem de -lactamaze
Spectru larg de + peniciline cu spectru larg
aciune (Amoxicilin, Ticarcilin)
ex. Amoxicilin + acid
Bactericid, bacterii clavulanic = Augmentin
Gram + i , anaerobi.
Familia -Lactamine Cefalosporine
Generaia I Generaia a II-a

- Cefalexin, Cefalotin, Cefuroxim, Cefoxitin
Cefazolin - Spectru extins bacterii
- Spectru ngust - E.coli, Gram , unii anaerobi
Klebsiella, Proteus i
Gram + coci sensibili la
Oxacilin.
Familia -Lactamine Cefalosporine
Generaia a III-a Generaia a IV-a
Cefotaxim, Ceftazidim Cefepime, Cefpirom
- spectru larg, - Spectru extins :
- Enterobacteriaceae Pseudomonas, ali bacili
i Pseudomonas Gram negativi, coci Gram
aeruginosa pozitivi
- Traverseaz bariera
hemato-encefalic
Familia -Lactamine - GRUP III
Grup III Monobactami

- Aztreonam
- Spectru ngust
- Pseudomonas aeruginosa.
Familia LACTAMINE
asemntoare lactaminelor.
Reprezentani: Pirazolidinon,
Alte AB => peretelui celular bacterian
FOSFOMICINA
Spectru de aciune: ngust,
coci Gram + si MRSA, unii coci Gram (-).
bun difuzie n LCR.
bacteriostatic.
BACITRACIN
Spectru de aciune: ngust: doar pe bacteriile Gram pozitive.
inta de aciune: Bactoprenolul - inhib reciclarea.
Toxicitate: crescut => Administrare: local
CICLOSERIN
Spectru de aciune: Tuberculostatic
AB care acioneaz la nivelul peretelui celular bacterian
Glicopeptide: Vancomicin (activa pe MRSA), Teicoplanin

Polimixine
AB izolate din Bacillus polymyxa
Polimixin B
distrug membrana citoplasmatic efect bactericid
spectru ngust
Doar bacterii Gram , mai ales Pseudomonas aeruginosa
AB care acioneaz la nivelul acizilor nucleici bacterieni
Quinolone
Imidazoli
Furani
Rifamicine
Quinolone
inhib sinteza ADN bacterian
bactericid
Bacterii Gram + i Gram
Acid nalidixic, Ciprofloxacin, Norfloxacin, Ofloxacin
Inhibarea sintezei ADN bacterian
Nitrofurani Metronidazol
Spectru larg bactericid

Bacteriostatic/bactericida
~ doz bacterii anaerobe
Nitrofurantoin, Furazolidon Bacteroides fragilis
Clostridium
Protozoare:
Trichomonas vaginalis
amebiaza,
giardiaza
AB care inhib sinteza proteic bacterian
Ribozomi: sediul sintezei proteice

30 S 50 S
Aminoglicozide, grupul MLS
Tetracicline, Fenicoli
Acid fusidic
Aminoglicozide
bactericide
spectru larg: bacili Gram negativi
inhibirea sintezei proteice: subunitatea ribozomal 30 S
Streptomicin, Kanamicin, Gentamicin, Amikacin
Tetracicline
spectru larg,
bacteriostatic
coci Gram + i , bacili Gram +
Chlamydia, Mycoplasma i Rickettsia
Tetraciclin, Doxiciclin, Minociclin
Cloramfenicol
spectru larg
De elecie pentru febra tifoid (bacteriostatic pentru
Salmonella)
Bactericid: Neisseria meningitidis, Streptococcus pneumoniae
i Haemophilus influenzae
Efecte adverse numeroase
Macrolide Lincosamine
inhibirea sintezei proteice: Acioneaz pe

subunitatea ribozomal 50 S subunitatea ribozomal
Spectru larg 50 S
coci Gram (+) i (), bacili Gram (+) Clindamicin,
Mycoplasma, Legionella, Lincomicin
Chlamydia, Campylobacter ,
bacterii Gram + i Gram
Helicobacter
anaerobe:
pacieni alergici la Penicilin
(Clostridium perfringens,
Eritromicin, Azitromicin,
Bacteroides fragilis)
Claritromicin
Oxazolidine
Linezolid
Spectru ngust
DOAR bacterii G +,
VRE, MRSA
Subunitatea ribozomal 50 S
Antibiotice antituberculoase
Rifampicin
Izoniazid
Pirazinamid
Etambutol
Streptomicin
AB care inhib sinteza acidului folic
Sulfamide, Trimetoprim
Rezistena bacteriilor la antibiotice
Definiie
Bacterii rezistente = bacteriile care supravieuiesc
la concentraii mari de antibiotic, mult mai mari
dect cele din organismul uman.
Natural
Dobndit
Natural - caracter de Dobndit: cnd o tulpin

specie bacterian anterior sensibil
1. Absena intei de la un anumit antibiotic
aciune devine rezistent
Ex. Mycoplasma Caracter de tulpin
rezistent la -lactamine Ex. Staphylococcus aureus
NU are perete celular.
anterior sensibil la Penicilin,
2. Impermeabilitatea n prezent 90% dintre tulpinile de
bacteriei pentru Sa = tulpini rezistente la Penicilin
antibiotic
Ex. Mycobacterium
Mecanisme genetice
Rezistena apare indiferent de antibiotic
rolul antibioticelor : selecie a tulpinilor rezistente.
mecanisme cromozomiale
Mutaii
=> mutante rezistente => clon mutant
TIPURI DE MUTANTE
Mecanisme genetice
mecanisme extra-cromozomiale
Achiziia de material genetic extracromozomial
Ex. plasmide R
Mecanisme
modificarea permeabilitii bacteriene

modificarea transportului antibioticului in
bacterie
modificarea intei
Enzime de inactivare a antibioticului
Activarea pompelor de eflux
Combinaii ale acestor mecanisme.
Antibiotic Discovered Introduced Resistance
into Clinical Identified
Use
Penicillin 1940 1943 1940
Streptomycin 1944 1947 1947
Tetracycline 1948 1952 1956
Erythromycin 1952 1955 1956
Vancomycin 1956 1972 1987
Gentamycin 1963 1967 1970
Testarea sensibilitii bacteriilor la antibiotice
Antibiograma
Determinarea sensibilitatii/rezistentei
bacteriilor la antibiotice
Efect bacteriostatic
Efect bactericid
Testarea sensibilitii bacteriilor la antibiotice
Antibiograma
!!! Orice infectie bacteriana va fi tratata

numai dupa identificarea bacteriei si
efectuarea antibiogramei
Metode:
Metoda dilutiilor
Metoda difuzimetrica
E-test
Antibiograma
Metoda dilutiilor
Medii de cultura lichide
Dilutii de antibiotic intr-un
mediu de cultura favorabil
dezvoltarii bacteriilor
Cantitati egale din cultura
bacteriana testata
Incubare
Metoda de referin
Avantaj major: determinarea
valorii concentraie minime
inhibitorii (CMI)
Antibiograma - Metoda diluiilor
Citire si interpretare
Mediu de cultura
clar, limpede
tulbure
Se stabileste CMI
(concentraia minim
inhibitorie)
CMI valoare diferit
pentru fiecare bacterie i
antibiotic
Antibiograma
Metoda dilutiilor
!!!!! Reducerea timpului de citire al rezultatelor:
Indicator de pH (virarea culorii mediului apare
mai rapid decat tulburarea lui)
Antibiograma
Metoda difuzimetric
Medii de cultura solide - Mueller

Hinton
AB depuse pe placa nsmnat
cu tulpina bacterian difuzeaz
n mediu
Se msoar DIAMETRUL ZONEI
DE INHIBIIE (mm)
Rezultatul se compar cu tabele
standard
Testarea sensibilitii la antibiotice
Antibiograma prin metoda difuzimetric
Tehnica de lucru
Dup identificarea i izolarea tulpinii
bacteriene
Se nsmneaz cultura bacterian
(se prepar n prealabil o suspensie
bacterian=> trebuie sa aiba o
anumita densitate)
Se nsmneaz n pnz
Pe suprafata placii se depun AB
(rondele/ microcomprimate)
Termostat (24-48h)
Interpretare
Antibiograma prin metoda difuzimetric
Interpretarea rezultatelor
Cu o rigla se masoara
diametrul zonei de inhibitie a
dezvoltarii bacteriene
(exprimat in mm)
Se compara cu datele din
tabelele standard
Rezultatele se exprima:
Sensibil (S)
Intermediar sensibil
(IS)
Rezistent (R)
Antibiograma
E-testul
Combina avantajele cele doua
metode
Medii de cultura solide
Benzi impregnate cu AB n
concentraii descresctoare
!!! Citire: locul n care zona de
inhibitie intersecteaz banda =
CMI
Medii cu sange- pt.
streptococi
Lowenstein-Jensen-
pt. bacilul TBC
Pt anaerobi
!!Se pot studia

efectele asocierilor de
antibiotice
REZISTENA CLINIC = MULTIFACTORIAL
PACIENT
-STATUS IMUNITAR
MICROORGANISM
-SITUSUL INFECTIEI -REZISTENTA MICROBIOLOGICA
-DISPOZITIVE MEDICALE -PRODUCEREA DE BIOFILM
-CONTROL INEFICIENT -DENSITATEA INOCULULUI
ESEC TERAPEUTIC
ANTIBIOTIC/CHIMIOTERAPIC
- ACTIUNE
- POSOLOGIE
- FARMACOCINETICA
- INTERACTIUNI MEDICAMENTOASE

122312799-Cursuri-Microbiologie T PDF

Încărcat de

Informații document

Titlu original

Drepturi de autor

Formate disponibile

Partajați acest document

Partajați sau inserați document

Opțiuni de partajare

Vi se pare util acest document?

Este necorespunzător acest conținut?

Drepturi de autor:

Formate disponibile

122312799-Cursuri-Microbiologie T PDF

Încărcat de

Drepturi de autor:

Formate disponibile

INTRODUCERE IN

Dr. Carmen Costache

celula prokariota celula eukariota

nucleu adevrat: echivalent nuclear,

Grosimea cilindrului poate fi diferit: deformai prin endospori, incluzii

BACILI NCURBAI: numr mic de ture de spir

Spirili: bacterii spiralate rigide, neimplicate n

RISC INFECIOS: 4 grupe

Bacterii: Bacillus cereus, Bordetella pertussis, Campylobacter,

sediul de aciune al unor AB:

autonom sau integrat n cz bacterian

5.inta de aciune pentru detergeni

9. Sediul receptorilor chemotactici:

formaiuni filamentoase, tubulare scurte

formaiuni tubulare lungi

I. Pentru unele boli infecioase, examenul

formaiuni filamentoase, tubulare scurte

Ultrastructura sporilor (ME) din interior spre exterior:

Unele boli infecioase-

Frotiu din puroi, colorat

Unele boli infecioase-

Frotiu din puroi, colorat

Frotiu din sput:

Frotiu din sput:

Frotiu din LCR:

Frotiu din LCR:

Definiie, Efectul unor substane

asupra dezvoltrii CO2

Microorganisme: limite de T, definite prin 3 valori:

Criofile (fr importan medical)

Termofile (fr importan medical)

Mezofile - importan medical !!!

Apa srat - hiperton => ucide multe

Clasificarea bacteriilor n funcie de

Halofile = necesit 15-30%

Saramura: folosit pentru conservarea

Levurile i mucegaiurile tolereaz

Revers: persistenta microorganismelor in

CO2 - bacterii capneice

Obligat aerobe = strict aerobe

Obligat anaerobe (Clostridium) NU au

Aciunea superoxid dismutazei, catalazei i peroxidazei

bacteriile fototrofe - lumina

Reacia rou metil

n mediu de cultur lichid.

Perioadele (fazele) curbei de

Faza de laten (lag)

Dr. Carmen Costache

Ereditatea = Metabolismul ADN-ului bacterian

Functional (unitati de informatie genetica)

Repliconi: Nucleoid, plasmide, fagi

Replicarea ADN cromozomial i plasmidic:

Sistemul S.O.S (save our sequence)

ADN-ul metilat este rezistent la restrictie

gene structurale => mARN

Gena reglatoare => proteina reglatoare

codifica proteina represoare

Represor: legat de operator

Control pozitiv prin proteina CAP

Control prin atenuare = atenuarea

Dr. Carmen Costache

Ereditatea = Metabolismul ADN-ului bacterian

= modificare caractere fenotipice