Tehnica imunoenzimatic ELISA este bazat pe reacia Ag-Ac.

Sistemul de analiz const din mai multe reacii:

- Ag sau Ac este imobilizat pe suport solid (plci de pastic cu godeuri)

- Ag sau Ac din proba de testat se leag specific de reactantul imobilizat

- reactantul marcat enzimatic reacioneaz cu complexul reactant imobilizat-Ag (sau Ac) din prob.

Reactantul marcat enzimatic format din Ag (sau Ac) conjugat cu o enzim este activ att imunologic ct
i enzimatic i reacioneaz att cu Ag (sau Ac) din prob imobilizat pe suportul solid ct i cu substratul
corespunztor enzimei.

Vizualizarea reaciei dintre reactantul enzimatic i complexul Ag-Ac iniial se realizeaz prin adugarea
unui substrat corespunztor enzimei utilizate.

Formarea complexului este identificat prin reacia de culoare care apare la adugarea substratului
specific (p-nitrofenilfosfat disodic pentru fosfataza alcalin i tetrametilbenzidina pentru peroxidaz).

Intensitatea culorii indic prezena sau absena Ag, respectiv Ac din prob (se citete spectrofotometric
folosind un cititor de plci ELISA).

Tehnica ELISA se poate folosi pentru evidenierea Ac (boliinfecioase, autoimune) sau a Ag (boli
infecioase, neoplazice, endocrinologice, farmacologie).

Tehnica ELISA este o metoda calitativa sau cantitativa, foarte sensibila(pg/ml) de detectare a
moleculelor carbohidrai sau proteinecu ajutoru complexelor antigen-anticorp conjugate cu o
enzima.

Testele ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay): reprezinta o metoda sensibila deoarece

fiecare molecula de enzima poate converti multe molecule de substrat servind ca amplificator al
reactiei. Enzimele produc produsi colorati care precipita, astfel incat nu difuzeaza de la locul de
formare.