LP_ Analiza vitaminei C

Vitamina C sau acidul ascorbic face parte din clasa vitaminelor hidrosolubile. Datorită
prezenţei în molecula sa a două grupe enolice, acidul ascorbic se oxidează uşor şi trece în
acidul dehidroascorbic:
OH OH
HO O HO O
O -2H O
+2H
HO OH O O
acid ascorbic acid dehidroascorbic

1. Identificarea acidului ascorbic cu fericianura de potasiu

Principiul metodei
În mediu acid, vitamina C reduce fericianura de potasiu până la ferocianură de potasiu
(reacţia 1), care în prezenţa ionilor de fier trivalent formează ferocianura ferică, sau albastru
de Berlin (reacţia 2):
OH OH

HO O HO O
O O
2 + 3 K4[Fe(CN)6] (1)
2 + 4 K3[Fe(CN)6]
- H2
HO OH O O

acid L-ascorbic acid L-dehidroascorbic

(2)
3 K4[Fe(CN)6] + 4 FeCl 3 Fe4[Fe(CN)6]3 + 12 KCl
precipitat albastru

Reactivi
1) soluţie tampon cu pH 3,69. Se obţine prin amestecarea unui volum de soluţie de HCl
0,1n cu un volum egal de soluţie de citrat trisodic 0,1n;
2) soluţie de fericianură de potasiu 1%;
3) soluţie de fluorură de sodiu 2%;
4) soluţie de acid ascorbic 0,02%;
5) soluţie de clorură ferică 2%.

Mod de lucru:
4-5 g material vegetal se mojarează cu nisip de cuarţ şi acid clorhidric soluţie 2%.
Amestecul se filtrează prin hârtie de filtru. Din filtrat se vor pipeta 5 mL într-o eprubetă, unde
se vor trata cu 1-2 picături soluţie de fericianură de potasiu şi o picătură de soluţie de clorură
ferică. Apare un precipitat sau o coloraţie albastră.
 2. Dozarea acidului ascorbic prin titrare cu 2, 6 - diclorfenolindofenol

Principiul metodei
Acidul ascorbic are proprietatea de a reduce 2, 6 - diclorfenolindofenolul (reactiv
Tillmans) în leucoderivatul corespunzător:
O OH
Cl Cl Cl Cl

OH OH
HO O HO O
O O
+ N + NH

HO OH O O

OH OH

2, 6 - diclorfenolindofenol leucoderivat

Mod de lucru
Extractia se face cu acid oxalic, soluţie 2% sau soluţie de acid metafosforic şi acid
acetic.
Într-un vas erlenmeyer de 50 mL se introduc 5 - 10 mL (V4) din extract şi se titrează
repede cu soluţie de colorant indofenolic (V0), agitând continuu, până la apariţia coloraţiei
roz, care persistă minimum 20 secunde.
În acelaşi mod se face şi proba martor, în care proba de analizat a fost înlocuită cu
acelaşi volum de soluţie de extracţie, şi se titrează cu o soluţie de colorant (V1).

Calculul rezultatelor
Conţinutul de acid ascorbic, exprimat în miligrame la 100 g produs, se calculează cu
formula:
V  V1  V3  C
Vit.C  0  100 (mg/100 g)
V4  m0
în care:
m0 = masa probei luate pentru determinare (grame);
C = cantitatea de acid ascorbic corespunzătoare unui mL soluţie de colorant indofenolic
(miligrame);
V0 = volumul soluţiei de colorant indofenolic folosit pentru titrarea probei (mL);
V1 = volumul soluţiei de colorant indofenolic folosit pentru titrarea probei martor (mL);
V3 = volumul la care a fost adusă proba luată pentru analiză (mL);
V4 = volumul extractului acid al probei luate pentru analiză (mL).