LP 11

Determinarea activitii peptidice. Reacia Timol

(metoda Mac Langan) i reacia cu sulfat de zinc
(testul Kunkel / 3 ore
Teste de disproteinemie
Introducere
Dintre principalele fractiuni proteice ale sangelui, albumina reprezinta 2/3
iar globulinele 1/3. Cand acest raport se mentine incluzand si concentratia
de proteina totala, vorbim despre euproteinemie.
Disproteinemie modificarea cantitativa si calitativa a proteinelor
plasmatice cauzata de diferite afectiuni ca urmare a unui mecanism
fiziopatologic.
Paraproteinemia reprezinta aparitia de proteine atipice - paraproteine,
anormale, absente in plasma normala. Disproteinemia este totdeauna
insotita de aparitia acestor tipuri de proteine.
Albuminele reprezinta proteinele majoritare in plasma - circa doua treimi
din totalul proteinelor plasmatice. Albuminele au un rol de a stabiliza din
punct de vedere coloidal in timp ce globulinele au un efect contrar. In
starile patologice asociate inflamatiilor cronice tendinta este de scadere a
albuminelor si de crestere a globulinelor.
Cand echilibrul proteic, cantitativ si calitativ, se modifica in sensul scaderii
A (factor stabilizant) si cresterii G (factor precipitant) se produce un
dezechilibru in sistemul coloidal al serului instabilitate sau labilitate
coloidala.
Testele de disproteinemie se mai numesc teste de labilitate serica sau
de labilitate coloidala. Exista un numar mare de astfel de teste, cele mai
folosite sunt testele cu timol si sulfat de zinc. Principiul acestora se
bazeaza pe faptul ca starea de echilibru a coloizilor proteici din plasma
este dependenta si influentata de modificarea raportului dintre albumine si
globuline. In mod normal acest raport este supra unitar de aproximativ
1,2 - 1,5.

Testele de disproteinemie sunt folosite de catre laboratoarele mai putin

dotate pentru a evalua functia ficatului in principal, dar si disproteinemiile
care apar in diferite infectii,
cancere, boli autoimune, boli renale,
dislipidemii sau alte situatii cu inflamatie persistenta.
Testele de disproteinemie au avantajul ca prezinta un cost redus si nu
necesita echipamente sofisticate. Ele pot fi folosite ca teste de rutina
rapide, accesibile oricarui tip de laborator. Cu toate acestea, sunt lipsitede
specificitate si nu sunt utile diagnosticului unei anumite afectiuni. In
schimb pot fi utile pentru monitorizarea evolutiei bolii respective, daca
aceasta este cunoscuta.
Testele de disproteinemie au fost initial denumite teste hepatice. Aceasta
denumire este improprie, deoarece, acestea nu sunt specifice bolilor
hepatice, ele fiind teste orientative ale functiei hepatice. In hepatitele
cronice si cirozele hepatice valorile testelor de disproteinemie sunt mult
crescute. In hepatita acuta cu virus A testele cu timol si sulfat de zinc
cresc rapid dar se normalizeaza la fel de rapid. In hepatitele acute cu virus
B si C valorile cresc mai tardiv si se normalizeaza lent.
TESTUL TIMOL (metoda Mac Lagan)
Pp metodei
O solutie de timol la pH 7,4, pp. precipit proteinele serice, dac exist o
labilitate a echilibrului coloidal datorit creterii gamma-globulinelor, a
beta-lipoproteinelor sau a scderii albuminelor. Precipitarea insotita de
turbiditate apare datorita formarii unui complex timol-globulinefosfolipide.
Gradul de turbiditate se determina fotometric la 660 nm.
Reactivi
Reactiv timol
Proba
Se utilizeaz seruri proaspete, limpezi, fr hemoliz.

Mod de lucru
Intr-o eprubeta se adauga:
0,05 ml ser
3 ml reactiv timol in tampon veronal 7,4
Se agita si se lasa 30 min. la temp camerei.
Se apreciaza turbiditatea utilizand o scala de etalonare sau prin citire la
Spekol la 660nm, factor de panta 35, fata de apa distilata sau reactivul
timol.
Rezultatul se exprima in unitati Mac Lagan (UML).
Valori normale 0 4 UML
Variatii patologice
Valori crescute:
- Hepatopatii difuze (infectioase, toxice)
- Ciroza hepatica
- Inflamatii cronice poliartrita reumatoida, reumatism articular
- Colagenoze
- TBC pulmonar
- Neoplasm
- Mielom multiplu
- Infectii virale
TESTUL CU SULFAT DE ZINC (TESTUL KUNKEL)
Pp.
O solutie de ZnSO4 la pH 7,4, adaugata la o proba de ser determina
cresterea turbiditatii serului in cazul prezentei gama-G in cantitate
crescuta. Turbiditatea aparuta se datoreaza formarii unui complex metal
gama-G urme de beta-G (complex insolubil)
Reactivi
Reactiv Kunkel (sulfat de zinc tamponat)
Proba
Ser

Mod de lucru
Intr-o eprubeta se adauga
0,05 ml ser proaspat
3 ml rectiv Kunkel
Se amesteca prin rasturnare de cateva ori.
Se lasa 30 min la temp camerei.
Se evalueaza turbiditatea prin comparare cu scala turbidimetrica de
etalonare de la timol sau citire la spekol la 650 nm, fata de apa distilata.
Rezultatul se exprima in unitati turbidimetrice.
Valori normale
2 9 unitati turbidimetrice
Variatii fiziologice
Valori crescute la persoane in varsta (pana la 12 unit) sau valori scazute
la fat in primele 6 luni de viata extrauterina.
Variatii patologice
Testul este mai specific ca testul timol pt gama-G si este important pt
diagnosticul de hepatita infectioasa.