COLEGIUL

FARMACITILOR
DIN ROMNIA

LIPOZOMII - VECTORI
MEDICAMENTOI I
COSMETICI
Prof. univ. Dumitru Lupuliasa, Prof. univ.
Victoria Hrju

Organizator:

Parten
eri:

NOVARTIS
Consumer Health

Martie 2011

1. Introducere
Cercetrile extinse din domeniul tiinelor farmaceutice au condus n ultimele decenii la
dezvoltarea unor sisteme inovative de eliberare a ingredientelor active, capabile s
mbogeasc posibilitile de tratament aflate n prezent la dispoziia farmacoterapiei.
n acest sens, se pot meniona sistemele de transport i eliberare la int (vectorizate) de tip
micro- i nanoparticule, microemulsii, emulsii multiple, cristale lichide, lipozomi etc.
Lipozomii sunt sisteme veziculare sferice constituite din unul sau mai multe straturi duble de
lipide amfifile (n principal fosfolipide) dispuse concentric, care nglobeaz un numr egal de
spaii sau compartimente apoase.
Au dimensiuni ce pot fi cuprinse de la 30-50 nm pn la civa p,m.
Denumirea provine din limba greac (lipos = grsime i soma = corpuscul), cu referire la
compoziia i forma lor.
Figura 1. Seciune transversal n structura unui lipozom unilamelar
Figura 2. Reprezentarea schematic a structurii unui lipozom multilamelar
Lipozomii au fost inventai de Alec Bangham n anii '70, fiind folosii ca modele ale
membranelor biologice n studii de biofizic. nc de la nceput, asemenea structuri de
dimensiuni coloidale au fost considerate de farmacologi ca fiind sisteme mai mult sau mai puin
biomimetice, capabile s serveasc la administrarea unor substane medicamentoase.
Ulterior, lipozomii au fost extensiv cercetai ca sisteme de eliberare sau ca sisteme de transport
i eliberare la int (vectori medicamentoi) a unei game largi de ageni terapeutici de mare
interes medical, utili n tratamentul unor boli, prin modularea farmacocineticii i/sau a
biodistribuiei substanei active, n beneficiul cii de administrare.
ncercrile iniiale de folosire a lipozomilor ca sisteme de eliberare a substanelor
medicamentoase au scos n eviden principalul dezavantaj al acestora, i anume clearance-ul
nespecific i rapid din circulaia sistemic de celulele sistemului reticulo-endotelial (SRE).
S-a considerat ns c recunoaterea de macrofagele SRE ar putea fi util pentru transportul
antigenelor, activarea macrofagelor i combaterea infeciilor parazitare.
Ulterior, prin controlul caracteristicilor fizico-chimice ale straturilor duble lipidice i a
interaciilor cu mediul biologic s-au investigat i obinut diverse tipuri de lipozomi, care pot
prezenta interes i pentru alte aplicaii n terapeutic.
Tabel 1. Domenii de cercetare i aplicare terapeutic a lipozomilor

Domeniu de aplicare

Compui ncapsulai

Deficiene enzimatice
Lizozim, a-glucozidaz, -glucozidaz
Inginerie genetic
Chimioterapia cancerului
Coadjuvani pentru creterea
imunitii
Terapia antimicrobian

Cromozomii care exprim sinteza de HGPRT

Citozin-arabinoz, vinblastin, actinomicin D,
daunorubicin, metotrexat
Virus influenzae, antigen pentru hepatita B, toxin difteric
Antibiotice beta-lactamice, cloramfenicol

Tratamentul intoxicaiei cu metale

EDTA-fosfatidiletanolamin, desferioxamina

Tratamentul artritei reumatoide

Corticosteroizi

Coadjuvani pentru absorbie oral

Insulin, heparin

Tratamentul infeciilor parazitare

Primachin, clorochin, ketoconazol, compui cu stibiu di- i

trivalent

2. Avantajele lipozomilor ca sisteme de eliberare a substanelor medicamentoase

Avantajele principale ale lipozomilor ca vectori medicamentai sunt urmtoarele:
-

au structur versatil care poate fi uor adaptat prin formulare i/ sau preparare, n
scopul conferirii unor proprieti necesare pentru o aplicaie specific;

pot fi utilizai pentru a include numeroase substane medicamentoase lipofile (n

stratul dublu lipidic), hidrofile (n compartimentul apos) sau amfifile (n ambele);

sunt ineri din punct de vedere biologic i complet biodegradabili, deoarece

fosfolipidele din structura lor sunt constitueni naturali ai membranelor celulare;

prin ncapsulare n straturile duble lipidice sau n compartimentele apoase, substanele

medicamentoase sunt protejate fa de aciunea distructiv a unor factori de mediu
extern (aer, lumina) sau intern (enzime sau inhibitori prezeni n mediile biologice);

ofer noi posibiliti pentru furnizarea agenilor terapeutici ncapsulai la inta vizat
din organism (organ, esut, celul), acetia avnd aceeai evoluie ca lipozomii i fiind
eliberai doar la locul lor de desfacere;

ca vectori medicamentoi permit administrarea unor compui activi a cror

administrare ridic probleme: indice terapeutic sczut, specificitate redus, numeroase
efecte secundare (antitumorale), stabilitate redus (proteine), inaccesibilitatea locului

de aciune (ADN).
3. Dezvantajele lipozomilor ca sisteme de eliberare a substanelor medicamentoase
Lipozomii prezint i unele dezavantaje poteniale comparativ cu alte sisteme farmaceutice,
care le limiteaz folosirea i anume:
-

prepararea poate fi mai costisitoare;

pstrarea mai dificil i de scurt durat;

incapacitatea de a traversa peretele capilar (cu excepia esuturilor inflamate), avnd

predispoziia de a se acumula la nivelul SRE;

capacitate de ncapsulare redus a substanelor active;

tropism accentuat pentru ficat i splin, dup injectare intravenoas;

dirijarea selectiv dificil a substanei medicamentoase ctre esuturi-int;

nu constituie un sistem transportor (cru) medicamentos universal, ci prezint avantaje

specifice doar pentru anumite aplicaii farmaceutice i cosmetice.

4. Obiectivele utilizrii lipozomilor

Avantajele menionate anterior justific pe deplin obiectivele urmrite prin folosirea
lipozomilor ca vectori medicamentai:
-

dirijarea (intirea, vectorizarea) substanei active ctre locul de aciune din organism,
crescndu-i eficacitatea terapeutic;

prelungirea duratei de eliberare a substanei active ncorporate; lipozomii constituie un

fel de rezervor care cedeaz n timp respectivul compus, fapt ce menine nivelele terapeutice
plasmatice sau tisulare ale substanei active un timp mai ndelungat i permite reducerea
frecvenei administrrilor;

protejarea compusului activ, n special a celui nglobat n compartimentul intern apos al

lipozomilor, fa de poteniale degradri sub aciunea unor factori ostili din mediul ambiental;

protejarea pacientului de efectele toxice ale unor substane active (nefrotoxicitate,

cardiotoxicitate etc.) ca urmare a eliberrii acestora chiar n aria patologic/la locul de aciune;

posibilitatea eliberrii intracelulare a unor molecule active ca urmare a interaciunii

lipozomilor cu celulele int, molecule care n mod normal nu pot ptrunde ca atare n celule
din cauza unor proprieti fizico-chimice restrictive (de exemplu, o mas molecular mare);

amplificarea rspunsului imun; lipozomii se pot comporta ca adjuvani imunologici n

formulrile vaccinurilor.

5. Clasificarea lipozomilor
Se pot distinge mai multe criterii de clasificare a lipozomilor:
-

dup dimensiune i organizare;

dup natura lipidelor care formeaz stratul dublu lipidic;

dup sarcina superficial a veziculei lipozomale;

dup metoda de preparare;

dup comportamentul in vivo.

n continuare sunt prezentate clasificrile n funcie de dimensiune i organizare i dup
aplicaiile in vivo.

5.1.

Clasificarea dup dimensiune i organizare

n funcie de numrul de bistraturi (lamelaritate) i de mrime, se disting lipozomi
multilamelari i unilamelari.
Lipozomi multilamelari (MLV- multilamellar vesicles)
Sunt alctuii din mai multe starturi duble (lamele) concentrice lipidice ce nconjoar un
compartiment intern apos relativ mic. Au un diametru cuprins ntre 0,4 i 3,5 pm.

Figura 3. Seciune n structura schematic a unui lipozom multilamelar

Lipozomi unilamelari (ULV- unilamellar vesicles)
n aceti lipozomi exist doar o singur structur bistratificat ce nconjoar un nucleu apos
intern.

Figura 4. Seciune n structura schematic a unui lipozom multilamelar

n cadrul acestui grup se disting cteva subcategorii, n funcie de mrime:
- lipozomi unilamelari mici (SUV - small unilamellar vesicles), cu o dimensiune a veziculelor
cuprins ntre 20 i 40 nm; au o capacitate redus de ncapsulare (0,1-1%), dependent de
concentraia lipidic, care le limiteaz aplicabilitatea ca sisteme de eliberare a substanelor
medicamentoase;
-

lipozomi unilamelari medii (MUV - medium unilamellar vesicles), cu o mrime a veziculelor

cuprins n domeniul 40-80 nm;

lipozomi unilamelari mari (LUV - large unilamellar vesicles), cu un nucleu intern apos mare,
avnd o dimensiune de la 10 la 1.000 nm , fapt ce permite ncapsularea unor cantiti mai mari
de substane active dect SUV;

lipozomi unilamelari gigani (GUV - giant unilamellar vesicles), a cror dimensiune depete
1.000 nm i care sunt, probabil, cei mai instabili din considerente fizico-mecanice.
Lipozomi multiveziculari (MVV - multivesicullar vesicles)
- n care o vezicul mare conine vezicule mai mici, n mod obinuit unilamelare.
Figura 5. Tablou sinoptic al reprezentrii structurilor lipozomale
Mrimea i modul de organizare ale lipozomilor sunt determinate de metoda folosit pentru
obinerea lor.

5.2.

Dup compoziie i aplicaiile in vivo

Se disting:
-

lipozomi convenionali;

lipozomi de lung circulaie (PEG-ylai , ascuni, disimulai);

imunolipozomi;
- lipozomi cationici.

Ultimele trei tipuri de lipozomi au fost concepui pentru a rspunde unor cerine terapeutice
specifice prin schimbarea caracteristicilor lor structurale i fizico-chimice. Aceste schimbri
permit modificarea comportamentului in vivo al lipozomilor cu scopul de a atinge obiective
bine definite.

Tabel 2. Clasificarea lipozomilor n funcie de evoluia in vivo

Tip de lipozomi
Utilizarea principal
intirea macrofagelor
Lipozomi convenionali

Depozit localizat
Vaccinare

Lipozomi cu circulaie ndelungat

intirea selectiv a ariei patologice

Imunolipozomi

Microrezervor circulant
intire specific; pilotai de anticorpi

Lipozomi cationici

Eliberarea la int a genelor

Lipozomi convenionali
Sunt lipozomi alctuii doar din fosfolipide (neutre i/sau ncrcate negativ) i/sau colesterol. Au
un
timp de circulaie n fluxul sangvin relativ scurt. Biodistribuia lor depinde n mare msur de
proprietile lor fizico-chimice (mrime, potenial zeta, compoziie) i de condiiile fiziologice
i patologice ale organismului. Aceti lipozomi realizeaz o intire pasiv a moleculelor
medicamentoase.
Cnd sunt administrai pe cile parenterale (foarte des pe cale i.v.) prezint o tendin puternic
de acumulare rapid n celulele sistemului fagocitar mononuclear (MPS) i frecvent, n sistemul
reticuloendotelial (SRE). Splina i ficatul, datorit abundenei de macrofage MPS i a unei
irigri sangvine bogate, reprezint organele principale de acumulare.
De aceea, acest tip de lipozomi sunt candidai potrivii pentru eliberarea substanelor
medicamentoase n macrofagele sistemului fagocitar mononuclear, putnd fi incrcai cu
substane antimicrobiene sau imunomodulatoare.
Au dezavantajul c sunt rapid eliminai din circulaie de macrofage, fapt ce compromite n
mare msur utilizarea lor n tratamentul bolilor care sunt extinse i la alte arii ale
organismului.
Lipozomi cu circulaie ndelungat (PEG-ylai, ascuni)
S-au dezvoltat cu scopul de a evita preluarea lor de SRE i implicit de a prelungi timpul de
circulaie a acestora n organism (T1/2 la om este de aproximativ 48 de ore).
S-au obinut prin grefarea pe suprafaa lor a unor lanuri liniare de polietilenglicoli (PEG-uri),
polimeri hidrofili ineri.

Figura 6. Reprezentarea schematic a lipozomilor cu circulaie lung

Lipozomii pe care sunt grefate moleculele de PEG (stabilizai steric) evit recunoaterea de
sistemul imunitar.
Stabilizarea steric rezult din concentrarea local la suprafaa lipozomilor a gruprilor PEG
nalt hidratate, care confer o barier steric ntre lipozomii pe care s-au grefat PEG-urile
mpotriva interaciunilor cu componentele moleculare i celulare din mediul biologic.
Moleculele de PEG neutralizeaz sarcina electric a veziculelor i previne astfel opsonizarea
lor. De asemenea, opsonizarea lipozomilor este redus din cauza inabilitii opsoninelor de a
lega de suprafee hidrofile. n plus, grosimea stratului de PEG (dependent de masa molecular
i de procentul ncorporat n compoziia lipozomilor) influeneaz interacia lipozomilor cu
macrofagele.
Apariia acestui tip de vezicule a dus la un reviriment al interesului fa de sistemele de
eliberare lipozomale i a deschis oportuniti terapeutice noi n raport cu lipozomii
convenionali.
Cea mai important caracteristic a lipozomilor de lung circulaie este faptul c sunt capabili
s extravazeze n locurile din organism n care permeabilitatea peretelui vascular este ridicat,
incluznd tumori solide i arii infectate sau inflamate.
Produsele autorizate pentru uz clinic, Doxil- doxorubicin i DaunoXome - daunorubicin,
reprezint exemple de formulri lipozomale de acest tip.
Imunolipozomii
Imunolipozomii conin pe suprafaa bistratului lipidic anticorpi specifici sau fragmente de
anticorpi, cu scopul de a mri legarea de locul-int.
Dei imunolipozomii au fost cercetai pentru diverse aplicaii terapeutice, interesul a fost n
principal centrat pe eliberarea la int a agenilor antitumorali.
Totui, accesul lor din circulaia sangvin n alte locuri dect ficatul i splina este dificil,
administrarea local n cavitile organismului prezentnd un interes mai mare.
Aceti lipozomi sunt potrivii pentru inducerea imunitii umorale i celulare in vivo, putnd fi
folosii n procedurile de imunizare ca vehicule ideale pentru vaccinuri.

Figura 7. Reprezentarea schematic a unui

imunolipozom
Lipozomi cationici
Lipozomii cationici, denumii i catezomi, sunt cei mai noi reprezentani, fiind cercetai pentru
mbuntirea cedrii materialului genetic. Sunt constituii dintr-un compus amfifil cationic i
lipide neutre.
Transferul genei este mediat de interacia electrostatic a lipozomilor ncrcai electric pozitiv
cu secvenele oligonucleotidice ale ADN-ului ncrcat negativ. Se formeaz compleci capabili
s ptrund n celul, unde ADN-ul este cedat lent nucleului acesteia.
Din aceast categorie sunt disponibile comercial produsele LipofectAMINE, LipofectAce,
Lipofectine (GIBCO/BRL), Transfectam (Promega) i DOTAP (Boeringer).
6. Formularea lipozomilor
n formularea lipozomilor se gsesc urmtoarele categorii de componente:
-

componentele stratului dublu lipidic;

componentele compartimentului apos;

substana activ.

Componentele care intr n formularea lipozomilor joac un rol important n stabilizarea i

n modul lor de aciune.
6.1.

Componentele bistratului lipidic

Fosfolipide
Fosfolipidele reprezint componenta principal, elementul constructiv al lipozomilor. Sunt
biomacromolecule naturale care joac un rol important n fiziologia uman, fiind componente
structurale ale membranelor biologice.
Aceste molecule amfifile constau dintr-o parte polar, hidrofil, i una hidrofob, avnd
dimensiune i sarcin variabile, precum i un lan dublu hidrocarbonat saturat sau nesaturat
format din 12-24 de atomi de carbon.

n procesul de formare a lipozomilor, moleculele se autoorganizeaz prin orientarea prilor

polare ctre faza apoas, n timp ce lanurile hidrocarbonate ader unele de altele sub forma
unui bistrat. Aceasta se datoreaz probabil structurii lor constituit din lanuri de acizi grai
nesaturai, care imprim moleculei o form tubular adecvat pentru aranjarea n folii plane,
deosebindu-se de lipidele monocatenare care au tendina de a se organiza sub forma de micele

Isotropic
hexagonal I
Inverted cone
Micelles

Lame ar
(Cubic)
Cylinder
Bilayer

Reverse
micei es
hexagonal II

Lamellar

Figura 9. Modele geometrice de organizare a lipidelor la dispersarea n ap

n prezent, este disponibil un numr mare de lipide amfifilice naturale, de semisintez sau
sintez, care poate fi inclus n formularea lipozomilor, redate n tabelul urmtor:

Tabel 3
Abreviere

Denumire

DMPC

Dimiristoil-fosfatidilcolin

DPPC
DSPC

Dipalmitoil-fosfatidilcolin
Distearil-fosfatidilcolin

DLPC

Dilauril-fosfatidilcolin

DOPC

Dioleoil-fosfatidilcolin

DGPC
DMPE

Diglicerilil-fosfatidilcolin
Dimiristoil-fosfatidiletanolamin

DPPE
DSPE

Dipalmitoil-fosfatidiletanolamin
Distearil-fosfatidiletanolamin

DPPG
DSPG

Dipalmitoil-fosfatidilglicerol
Distearil-fosfatidilglicerol

DPPA

Acid dipalmitoil-fosfatidic

DPPS

Dipalmitoil-fosfatidilserin

DSPS

Distearil-fosfatidilserin

Dintre acestea, cele mai folosite sunt fosfatidilcolinele, cunoscute i sub denumirea de lecitine,
obinute din surse naturale sau prin sintez.
Dintre fosfolipide naturale, uzual se folosesc lecitina de ou i lecitina de soia, care sunt ieftine,
lipsite de sarcin i inerte chimic.
n tabelul urmtor sunt redate unele caracteristici ale unor lipide folosite la prepararea
lipozomilor.

Tabel 4. Caracteristicile unor fosfolipide utilizate n formularea

lipozomilor
Lipide

Caracteristici principale

Fosfatidilcolina din glbenu de ou (PC)

Dipalmitilfosfatidilcolina (DPPC)
Distearilfosfatidilcolina (DSPC)

- component majoritar utilizat frecvent

n formularea lipozomilor
- fosfolipid sintetic saturat
- fosfolipid sintetic saturat, mai puin
premeabil pentru faza apoas dect

Sfingomielina (SM)
Colesterol (CH)

fosfatidilcolina
- crete stabilitatea lipozomilor ,,in vitro
reduce permeabilitatea veziculelor de
fosfatidilcolin
proporia maxim de ncorporat este de 50
moli %

Stearilamina (SA)

confer suprafeei lipozomului sarcin

electric pozitiv
poate fi toxic pentru pereii celulari

Diacetilfosfat (DACP)

confer suprafeei lipozomului sarcin

electric negativ
poate fi toxic pentru pereii celulari

Acid fosfatidic (PA)

- confer bistratului sarcin electric

negativ

Fosfatidilserina (PS)

- confer bistratului sarcin electric

negativ

Cardiolipida (CL)

- lipid antigenic care se utilizeaz n

aplicaii imunologice

Fosfatidildiletanolamina (PE)

nu formeaz vezicule nchise

se utilizeaz, cnd este necesar ca un
material capabil s se cupleze cu lipozomii
derivaii substituii se utilizeaz n studii
imunologice

Lizofosfatidilcolina (LPC)

crete permeabilitatea lipozomal

poate mri fuziunea lipozomilor cu
celulele

Ali aditivi n bistraturile lipidice

Lipozomii alctuii doar din fosfolipide nu sunt suficient de rigizi, n principal din cauza
temperaturilor de tranziie de faz mai joase i/sau nesaturrii lanurilor acil prezente n
structur, care determin imperfeciuni n aranjarea sub forma de bistraturi lipidice.
De aceea, din asemenea lipozomi are loc aproape ntotdeauna scurgerea (pierderea) substanei
medicamentoase ncapsulate n timpul conservrii.
Pentru a preveni acest neajuns, n compoziia lipozomilor sunt inclui unul sau mai muli aditivi
(de exemplu colesterol sau a-tocoferol) care mbuntesc rigiditatea i hidrofobicitatea
membranei, reducndu-i permeabilitatea. Colesterolul, cel mai utilizat sterol, poate fi uor
inserat n straturile duble lipidice, ca urmare a interaciilor cu fosfolipidele din membranele
lipidice, cu modificarea conformaiei lanului acil-lipidic din membrana lipozomal.
Colesterolul inserat n membrana lipozomal, datorit nucleului steroid rigid, realizeaz o
mpachetare strns a stratului dublu lipidic i o diminuare/evitare a scurgerii substanei active
nglobate n bistrat sau n compartimentul apos.
a-tocoferolul acioneaz att pentru consolidarea membranei, ct i ca antioxidant, protejnd
lipidele de procesul oxidativ.
S-au obinut i compui conjugai ai lipidelor cu polietilenglicoli, care se utilizeaz frecvent n
formulrile lipozomale.
De asemenea, se folosesc i fosfolipide funcionalizate (obinute prin conjugare, cu formarea de
legturi amidice, disulfidice sau tioeter) utilizate pentru ataarea covalent sau necovalent a
proteinelor, peptidelor sau a altor substane active la suprafaa lipozomilor.
6.2.

Componentele compartimentului apos

Aceasta faz poate fi reprezentat de ap distilat sau purificat sau de soluia apoas a unei
substane active.
n faza hidrofil se pot dizolva sisteme sau substane tampon, n cazul lipozomilor care se obin
printr-o metod bazat pe existena unui gradient de pH ori a formulrilor care necesit
ajustarea pH-ului pentru asigurarea stabilitii substanei medicamentoase i a lipozomilor.

6.3.

Alte componente

Pentru formarea i stabilizarea lipozomilor este deseori necesar adugarea i a altor

componente. Astfel, atunci cnd se prepar lipozomi cu sarcin superficial, se adaug, de
exemplu, stearilamin i dicetilfosfat.
Dac la preparare se folosesc lipide nesaturate, pot fi ncorporai antioxidani precum
butilhidroxitoluen, a-tocoferol i a-hidroxiacizi. Alegerea acestora se face cu atenie pentru a
nu interfera cu lipozomii i a nu ptrunde n interiorul lor.
Agenii de chelatare (EDTA) sunt inclui pentru a reduce oxidarea catalitic a lipidelor ce poate
fi indus de contaminarea cu ioni metalici.
Pentru a menine izotonicitatea este esenial adugarea clorurii de sodiu sau a unor sruri
similare.
Unele metode de preparare (liofilizarea sau criodesicarea) necesit aditivi speciali, precum
agenii crioprotectori, destinai s asigure stabilitatea lipidelor i a substanelor
medicamentoase instabile n ap n timpul preparrii (rehidratrii).
Agenii antifungici i antimicrobieni pot fi adugai cu scopul de a asigura stabilitatea
microbiologic a preparatelor lipozomale.
Parfumuri si colorani se pot include n lipozomi cosmetici.
Aadar, lipozomii sunt sisteme farmaceutice care prezint o mare flexibilitate n design prin
modificarea structurii i a proprietilor fizico-chimice.
Prin selectarea atent a componentelor incluse n formulare se pot modela unele proprieti ale
lipozomilor (sarcina superficial, randamentul de ncrcare cu substan activ etc.) ca i
comportarea in vivo, astfel nct acesta s satisfac o aciune terapeutic specific.
6.4 Substane active
Lipozomii pot conine i vehicula substane active diverse, cu caracter hidrofil, lipofil sau
amfifil.
n tabelul urmtor sunt trecute n revist exemple de substane active investigate pentru
includerea n lipozomi.

Tabel 5. Substane medicamentoase investigate pentru a fi incorporate n lipozomi

Enzime
hexozaminidaza A, amiloglucozidaza, peroxidaza, dextranaza,
hexochinaza, P-galactozidaza, elastaza, ATP-sintetaza,
Substane
antitumorale

Vectori de

superoxid dismutaza, catalaze

actinomicina D, bleomicina, cisplatina, daunorubicina,
doxorubicina, amfotericina B, fluoxuridina, 5-fluorouracil,
mercaptopurina, metotrexat, vinblastina, vincristina
interferon, interleukine

imunomodulare
Insulinoterapice

insulina

Substane

derivai de antimoniu, grizeofulvin, amfotericina B, 5-

antiparazitare

fluorouracil

Ageni chelatani

EDTA

Antiinflamatoare

hidrocortizon, prednison, triamcinolon, dexametazon

Polinucleotide

interferon

Adjuvani de

antigeni, vaccinuri, anatoxin difteric, virus gripal, agentul HB

imunizare

al hepatitei virale, antigeni din Plasmodium falciparum antipaludic, antigeni din celule tumorale (limfocitomi)

Substane diverse:

antiinfecioase
interferon
hormoni steroidici
angiostensina II
heparin
substane pentru tratamentul infarctului miocardic
factor VIII
hemoglobin
substane pentru tratamentul insuficienei respiratorii
substane de contrast: acid diatrizoic (renografina),
hidroxitalamat de sodiu
produse radiofarmaceutice pentru diagnostic: 99Tc (n
limfoscintigrafie i studiul distribuiei lipidelor n organism)
produse ca: citocrom b5; hidroxicobalamina, clorura de litiu,
procaina

Vitamine

A, E, F, D, K ( mai ales n produsele cosmetice)

6.4.

Obiectivele principale ale formulrii lipozomilor

n ceea ce privete obiectivele principale ale formulrii lipozomilor, acestea constau n:

-

formarea i stabilizarea structurilor veziculare bistratificate;

ncorporarea i/sau ncapsularea substanelor active n lipozomi;

-

asigurarea stabilitii fizice, chimice, microbiologice i biologice pe perioada de

valabilitate a formulrii lipozomale;

realizarea unor caracteristici specifice formei farmaceutice, dependent de calea de

administrare;

asigurarea inocuitii, toleranei i eficacitii terapeutice.

6.5.1.

Formarea i stabilizarea lipozomilor

Formarea i stabilizarea lipozomilor au la baz proprietile unor lipide i a altor compui

amfifili care prin dispersare n ap pot produce, aa cum s-a menionat deja, structuri coloidale
diverse (vezicule, micele, nano-emulsii) n funcie de preponderena prii hidrofile sau lipofile
a moleculei.
Atunci cnd predomin partea hidrofil, exist tendina de formare a micelelor, iar dac
predomin partea lipofil (hidrofob), se manifest capacitatea de a forma n mod spontan
structuri bistratificate (lipozomi) atunci cnd se adaug cantiti mici de ap.
parte
hidrofil

+ ap

parte
lipofil

molecul
fosfolipid

de

Figura 10.
Etapele formrii lipozomilor
n formarea i stabilizarea lipozomilor intervin o serie de factori precum:
-

proprietile structurale ale substanelor lipofile amfifilice;

proprietile superficiale i electrice ale componentelor;

proprietile dimensionale i optice;

- proprietile reologice.
La acestea se adaug i:
-

raportul molar fosfolipide/ap, temperatura, prezena ionilor de Ca2+ metoda de

preparare a lipozomilor.

Dintre factorii de mai sus, relevani sunt mrimea i distribuia dup mrime a lipozomilor i
sarcina superficial a acestora.
Dimensiunea i distribuia dup mrime a veziculelor lipozomale
Dimensiunile lipozomilor depind de metoda de preparare i de aparatura utilizat.
Sunt proprieti importante care influeneaz:
-

proprietile fizice ale lipozomilor;

capacitatea de ncapsulare a substanei active;

comportarea biologic.

Lipozomii trebuie s fie mai mici dect porii vasculari pentru a extravasa i a ajunge n
tumorile solide. Totodat, lipozomii cu dimensiuni mai mici (0,001-10pm) asigur o stabilitate
mai mare, iar veziculele mai mici de 100 nm necesit strategii suplimentare pentru a preveni
opsonizarea i pentru a prelungi semiviaa biologic (sau durata de circulaie n fluxul sangvin).
Sarcina superficial a lipozomilor
Proprietile electrice ale suprafeei membranare a lipozomilor pot influena stabilitatea fizic a
dispersiilor lipozomale pe durata stocrii ca i comportamentul lipozomilor n mediul biologic
i interacia lor cu celulele.
Agregarea lipozomilor, adic modificarea dimensiunilor originare, in vitro i in vivo reprezint
o problem major de stabilitate. De aceea, este preferabil ca sarcina superficial a lipozomilor
s fie mare pentru a mpiedica fenomenul de reunire a lipozomilor.
Introducerea unor molecule naturale (glicolipide, lectine, anticorpi) pe suprafaa lipozomilor le
confer stabilitate fa de autoagregare i interacii nespecifice. Un efect similar se obine i
prin grefarea pe suprafaa lipozomilor a unor polimeri hidrofili (PEG-uri), care protejeaz
lipozomii cu o barier steric ce inhib adsorbia componentelor sangvine.
n tabelul de mai jos sunt redate metodele de modelare a proprietilor fizico-chimice ale
lipozomilor i consecinele modificrilor rezultate asupra stabilitii i comportamentului
biologic al lipozomilor.

Tabel 6. Metode i rezultate ale modificrii proprietilor fizico-chimice ale lipidelor

Proprieti fizico-chimice Metoda aplicat
Rezultatul modificrii

Distribuia mrimii

sonicare, extrudere,

controlul timpului de

particulelor

microfluidizare

circulaie
creterea extravazrii

Permeabilitatea membranei

modificarea compoziiei

creterea stabilitii

lipidice (colesterol)

lipozomilor
sensibilitate indus de pH
sau temperatur

Tendina de agregare sau

modificarea compoziiei

-formarea structurii care

fuziune

lipidelor, adugarea de

poate transporta antigene,

cationic

ADN, vaccinuri

stabilizarea steric prin

-creterea timpului de

grefarea moleculelor

circulaie

hidrofile pe suprafaa

-modificarea

lipozomilor (dextrani

farmacocineticii i

lineari, derivai lipidici de

distribuirii tisulare a

polimeri hidrofili)

lipozomilor i substanelor

Hidrofobicitatea suprafeei

ncapsulate
Randament de ncrcare a

ncrcare activ sau de la

- ncapsularea lipozomilor

substanei active

distan

stabili cu substane
medicamentoase (n
rapoarte mari ntre
substan medicamentoas:
component lipidic)

Elasticitate, rigiditate

introducerea de detergeni

- creterea penetraiei

sau activatori marginali i

cutanate i retenia n piele,

lipide cutanate (ceramide)

(favorabil absorbiei

n preparate lipozomice

transdermice a substanelor
medicamentoase

Proprieti superficiale,

adiia unor liganzi specifici

lipozomale)
- potenial crescut pentru

stabilitatea lipozomilor i

pe suprafaa lipozomilor,

alte proprieti

asociat cu stabilizarea

intire eficace

steric

6.5.2. Incorporarea sau ncapsularea substanelor active n lipozomi

Substanele active pot fi incluse n lipozomi pe trei ci:
-

prin ncorporare n structura lipozomilor;

prin asociere cu lipozomii preformai;

prin formarea unui sistem compatibil cu acetia.

Toate aceste forme se pot obine prin procedee diferite i anume:

-

ncapsularea substanei hidrofile n compartimentul apos al lipozomilor;

interaciunea electrostatic cu lipidele ncrcate electric din compoziia stratului dublu

electric;

interacia hidrofob cu lipidele constituente ale bistratului;

legtura chimic cu lipidele bistratului;

combinarea acestor mecanisme.

Incapsularea substanelor active hidrofile

Este o faz critic a preparrii, care se evalueaz prin 2 parametri:
-

eficacitatea (randamentul) de ncapsulare, respectiv procentul de substan activ

ncapsulat n compartimentul apos, parametru ce depinde de cantitile relative de
lipide i ap din formularea lipozomilor;

volumul compartimentului apos, care depinde de dimensiunea i numrul de bistraturi

din vezicula lipozomal.

Randamentul de ncorporare a substanei active n lipozomi, esenial pentru eficacitatea clinic

a formulrilor lipozomale, depinde de o serie de factori:
-

concentraia de substan hidrosolubil.

Dac ncapsularea substanei este pasiv, adic nu interfereaz cu nici un alt proces, atunci
concentraia n compartimentul apos intern este identic cu cea din exterior. Cnd concentraia
de substan iniial este mare, cantitatea de substan activ ncapsulat va fi crescut. Se pot
aplica i tehnici de ncapsulare prin transportul activ al substanei active n lipozomi, de
exemplu prin crearea unui gradient de pH.
-

tipul i mrimea veziculelor.

Randamentul de ncapsulare a substanei hidrofile este mai mare n cazul lipozomilor mari
multilamelari, deci coninnd mai multe compartimente apoase.
-

sarcina electric a lipidelor.

Volumul compartimentului care separ bistraturile lipozomilor multilamelari este, n general,

mai mic de 0,01 pm.
Adugarea de lipide ncrcate cu sarcini electrice antreneaz respingerea electrostatic ntre
straturile duble electrice adiacente, rezultnd mrirea compartimentului apos chiar i pn la
50%.
-

tria ionic a mediului apos.

Dac veziculele lipozomale nu sunt ncrcate cu sarcini electrice (de exemplu cele formulate pe
baz de fosfatidilcolin), compartimentul apos nu este influenat de tria ionic a mediului.
n cazul n care bistratul este ncrcat electric (conine fosfatidilglicerol) compartimentul apos
este redus prin creterea triei ionice (respectiv prin neutralizarea sarcinilor electrice de ionii
prezeni n mediu).
-

natura fosfolipidelor.

Aceast parametru influeneaz rigiditatea i deci, permeabilitatea bistraturilor lipozomilor.

-

concentraia de cholesterol.

Colesterolul mrete rigiditatea i permeabilitatea stratului dublu lipidic.

Coninutul de colesterol din bistrat influeneaz nivelul de ncapsulare a substanei active pn
la o anumit valoare, peste care colesterolul nsui nu mai poate fi inclus n bistrat i tinde s
cristalizeze.
-

condiiile de fabricare/preparare a lipozomilor.

Influeneaz tipul, mrimea i distribuia dup mrime a lipozomilor.

Incorporarea substanelor lipofile
i ncorporarea substanelor active lipofile n bistratul lipidic este influenat de o serie de
factori:
-

natura substanei lipofile.

Cu ct lipofilia unei substane este mai mare, cu att procentul de ncorporare este mai mare.
-

concentraia substanei lipofile.

ncorporarea crete cu creterea concentraiei substanei active lipofile pn la o limit i la un

anumit raport substan lipofil/lipidele din bistratul lipozomal.
- natura fosfolipidelor, concentraia de colesterol i condiiile de fabricare.

NOVARTIS

ConsumiT Hcaii li

n general, ncapsularea unei substane lipofile este favorizat dac bistraturile lipidice prezint
o oarecare fluiditate; adugarea de colesterol scade procentul de substan lipofilic
ncorporat.
- Temperature.
Este un parametru care influeneaz n mod diferit ncapsularea unei substane lipofile; pentru
unele substane active asocierea este maxim la temperatura de tranziie de faz a componentei
lipidice.
Tehnici de ncorporare a substanelor active n lipozomi
Pentru ncorporarea lipozomilor cu substane medicamentoase se folosesc strategii de ncrcare
pasiv sau activ.
ncrcarea pasiv se efectueaz n timpul formrii lipozomilor sau n condiiile n care
structura lipozomilor nu este consolidat n procesul de obinere. Produsul rezultat poate
conine proporii mari de substan medicamentoas nencorporat, a crei ndeprare din
suspensia lipozomal este laborioas. De asemenea, dup ndeprtarea complet a substanei
active rmas nencrcat, datorit dezechilibrului osmotic creat (gradientului de concentraie),
substana medicamentoas ncorporat se scurge din lipozomi n timpul pstrrii.
ncorporarea prin strategii active sau de la distan se refer la tehnici de ncrcare a substanei
active dup formarea veziculelor, fr afectarea integritii bistratului lipozomal. Acest
procedeu se bazeaz n principiu pe crearea unei diferene ntre mediul interior i cel exterior al
lipozomilor, prin intermediul creia se asigur un singur sens de pasaj (de la exterior la
interior) pentru moleculele de substan medicamentoas. Datorit acestei diferene, poate fi
obinut o ncrcare de aproape 100%, evitndu-se necesitatea ndeprtrii substanei
nencapsulate.
Metodele de ncrcare activ se bazeaz pe crearea unei gradient de pH, pe folosirea perechilor
de ioni sau a complexrii cu liganzi. ncrcarea activ reprezint un avantaj pentru substanele
medicamntoase labile care se pot ncrca chiar nainte de utilizarea preparatelor lipozomale.

Metoda deshidratrii lipozomilor prin liofilizare (criodesicare)

Este o metod simpl de obinere a lipozomilor cu volume apoase de ncapsulare mari, care se
desfoar n condiii blnde.
n aceast metod, o suspensie de vezicule unilamelare mici, mpreun cu materialul de
ncapsulat, este liofilizat prin mijloace convenionale. Se formeaz o structur asemntoare
unei spume afinate, avnd o arie a suprafeei mare. Hidratarea eficient a acestei spume se
poate realiza cu ajutorul unui volum mic de ap distilat ori soluie tampon, rezultnd vezicule
multilamelare cu o mare eficacitate de ncapsulare.
Pe lng avantajul unor condiii blnde de preparare, lipozomii obinui prin aceats metod pot
fi pstrai o perioad de timp relativ mai lung, rehidratarea fcndu-se chiar nainte de
utilizarea suspensiei lipozomale.

In acest procedeu modern de preparare, intervin compoziia lipidic, asocierea de ageni

crioprotectori, condiiile de congelare (viteza de congelare nu trebuie s fie prea rapid sau
prea lent).
Agenii crioprotectori au rolul de a preveni fuziunea, agregarea i pierderea componentelor
ncapsulate prin formarea unor structuri amorfe i/sau interacia cu grupele fosfolipidice.
Crioprotectorii (dizaharide precum maltoza, zaharoza, lactoza sau dextran i polividon)
menin integritatea fizic a lipozomilor n cursul liofilizrii, ca i n cursul rehidratrii
lipozomilor chiar nainte de utilizare.
Aplicarea liofilizrii ca modalitate de stabilizare a lipozomilor este convenabil n cazul
ncapsulrii substanelor medicamentoase liposolubile (amfotericina B, doxorubicina) care,
dizolvndu-se n dublul strat lipidic, rmn la acest nivel i dup rehidratarea lipozomilor
nainte de administrare, fr ca localizarea lor s fie influenat de rehidratare.
Reconstituirea lipozomilor liofilizai este mai dificil n cazul substanelor active hidrosolubile,

datorit partiiei acestora ntre faza apoas extern i compartimentul apos intern al veziculelor
lipozomale.
Este un procedeu de ncrcare in situ a substanei active care necesit anumite manipulri
tehnice, de aceea personalul farmaceutic i medical trebuie s fie bine informat i pregtit
pentru a evita ncrcarea necorespunztoare a lipozomilor.

6.5.3.

Asigurarea stabilitii fizice, chimice i microbiologice a lipozomilor

Asigurarea stabilitii fizico-chimice i microbiologice a lipozomilor, ca n cazul tuturor

formelor farmaceutice, reprezint un obiectiv esenial al formulrii, cu consecine directe n
asigurarea calitii acestora.
Structura vezicular i compoziia complex confer lipozomilor un potenial mare de
instabilitate.
n cazul lor, stabilitatea implic:
-

meninerea structurii i dimensiunii lipozomilor;

reinerea substanei active ncorporate n bistratul lipidic sau n faza apoas;

meninerea stabilitii fizico-chimice;

meninerea stabilitii n mediile biologice ntlnite;

mpiedicarea contaminrii microbiene.

Principalele tipuri de instabilitate ntlnite n cazul lipozomilor sunt rezumate n tabelul

urmtor:
Tabel 7. Tipuri de instabilitate a lipozomilor
Efecte produse
Tipuri de
instabilitate
Fizic

pierderea substanei medicamentoase

modificarea structurii i dimensiunii veziculelor
modificarea permeabilitii membranei
agregarea-fuziunea lipozomilor
influenarea compoziiei lipidice

Chimic

influenarea tehnologiei de fabricare

- oxidarea lipidelor nesaturate

hidroliza componentelor lipidice

degradarea substanei medicamentoase ncapsulate
Microbiologic

contaminarea microbian
influenarea tehnicilor de sterilizare
interaciunea cu conservanii

Stabilitatea fizic
Factorii care influeneaz stabilitatea fizic a lipozomilor i consecinele asupra acestora sunt
rezumate n tabelul urmtor.
Tabel 8
Factori

Efecte produse

Lumina
Acizi

- pot desface sau pot sparge veziculele

(dac membrana a fost n prealabil

Baze

deteriorat prin depozitare sau de substane

Ioni metalici

strine)

Electrolii concentrai

- deterioreaz veziculele lipozomale

Unele molecule organice (ncorporate n

- modificare permeabilitii

membrana lipozomal)

Stabilitatea chimic
Asigurarea stabilitii chimice a lipozomilor vizeaz evitarea degradrii chimice att a
lipidelor, ct i a substanei active.
Degradarea chimic a componentelor lipidice
Compoziia n acizi grai nesaturai a fosfolipidelor din formulare predispune lipozomii la
degradare prin autooxidare sau hidroliz.
Lanurile acil-nesaturate din structura lipidelor sunt vulnerabile la degradare oxidativ
(peroxidare lipidic). Reaciile de oxidare se produc rapid i sunt accelerate de metale, lumin,
un pH crescut.
Degradarea poate fi produs i prin hidroliza legturilor esterice covalente care leag acizii

grai de glicerol din molecula fosfolipidelor. Aadar, preparatele lipozomale coninnd

fosfolipide sunt sensibile la degradarea hidrolitic att n domeniul acid (pH <5), ct i n cel
alcalin (pH >8).
De asemenea, procedeele de preparare (sonicarea) sau condiiile de depozitare (expunerea la
diferite valori de pH) pot afecta viteza de descompunere a lipidelor lipozomale.
Compuii de oxidare i hidroliz ai componentelor lipidice din lipozomi produc modificri
importante ale permeabilitii stratului dublu lipidic.
Degradarea chimic a substanei active
Procesul de degradare chimic a substanei active crete pe msura creterii concentraiei
componentelor lipofile, deoarece stabilizarea lor se efectueaz prin cuplare la structurile
membranare (bistratul lipidic).
Stabilitatea microbiologic
Datorit compoziiei complexe, dispersiile lipozomale reprezint medii prielnice pentru
dezvoltarea microorganismelor.
n cazul lipozomilor administrai extern (cutanat/pe piele i pe mucoase), stabilitatea
microbiologic este asigurat prin adugarea n formulare a conservanilor antimicrobieni
(alcool benzilic, acid sorbic, acid benzoic, sorbat de potasiu, nipaesteri). n selectarea agenilor
conservani se va ine seama de interaciile acestora cu bistratul lipozomal.
n cazul lipozomilor destinai administrrii parenterale sau oculare este obligatorie asigurarea
sterilitii, un demers dificil de realizat, innd seama de procedeele uzuale de sterilizare a
preparatelor farmaceutice. Sterilizarea se efectueaz cu radiaii gamma, deoarece sterilizarea
prin filtrare are inconvenientul c nu poate fi aplicat dect n cazul microveziculelor de mici
dimensiuni, iar alte procedee de sterilizare, ndeosebi cele termice influeneaz negativ
stabilitatea fizico-chimic a lipozomilor.
Pentru asigurarea stabilitii lipoziomilor se recurge la diverse procedee de stabilizare:
-

selectarea adecvat a componentelor stratului dublu lipidic, inclusive folosirea de

lipide saturate la formulare/preparare;

adugarea de colesterol n stratul dublu lipidic (pn la 25%) n momentul

preparrii lipozomilor (care rigidizeaz membrana lipozomal);

ncrcarea membranei lipozomale cu sarcini electrice (poate evita agregarea

lipozomilor prin respingere electrostatic);

adaosul de antioxidani n formulare;

adugarea de conservani antimicrobieni;

prepararea prin liofilizare;

ncrcarea lipozomilor chiar nainte de administrare, prin tehnici de ncrcare activ;

- evitarea nclzirii i lucrnd la pH = 6-7 n cursul fabricaiei (pentru diminuarea
proceselor de hidroliz);

- depozitare adecvat (de exemplu, la +40C, n recipiente sigilate, sub gaz inert).
Lipozomii trebuie s fie stabili n suspensie sau n stare deshidratat timp de 1,5-2 ani, la
temperatura ambiant.

6.5.4.

Realizarea caracterelor specifice, formelor farmaceutice, n funcie de calea de

administrare
Formularea lipozomilor urmrete obinerea unor preparate cu caracteristici organoleptice,
fizico-chimice sau farmacotehnice bine definite i corelate cu calea de administrare:
-

caracteristici organoleptice: aspect, miros, culoare;

pentru formulrile lipozomale parenterale: sterilitate i apirogenitate;

pentru formulrile dermatologice sau cosmetice: aspect elegant, consisten.

7. Prepararea lipozomilor

Aa cum s-a menionat anterior, formarea lipozomilor are loc spontan atunci cnd fosfolipidele
se disperseaz n ap. Totui, prepararea lipozomilor ncrcai cu substane active cu nivele
crescute de ncapsulare i o anumit mrime i structur (lamelaritate) este un proces dificil de
realizat.
n literatur sunt descrise numeroase metode de preparare a lipozomilor, a cror alegere
necesit o mare atenie deoarece metoda de preparare influeneaz proprietile lipozomilor
(tipul, mrimea i distribuia mrimiii ca i capacitatea de ncrcare i de reinere a substanei
medicamentoase).
Tehnicile propuse sunt conceptual distincte, nici una dintre ele nu ofer avantaje absolute i nu
poate fi utilizat ca o procedur universal. Unele dintre metode se pot aplica doar la scar de
laborator, altele se pot transpune la scar industrial.

Etapele preparrii lipozomilor includ:

-

etapa de hidratare a componentei lipidice;

ncorporarea substanei active;

etapa de uniformizare a dimensiunii lipozomilor;

etapa de ndeprtare a substanei active nencapsulate.

1. n etapa de hidratare a filmului lipidic se pot aplica:

Metode mecanice
-

agitaremanual sau mecanic (agitatoare tip Vortex) a dispersiei de fosfolipide;

microfluidizare;

omogenizare prin forfecare nalt.

Metode bazate pe nlocuirea solvenilor organici cu un mediu apos

-

ndeprtarea solvenilor organici nainte de hidratare;

evaporarea n faza invers;

injecia cu etanol sau eter n faz hidrofil.

Metode bazate pe ndeprtarea agentului tensioactiv
-

gel-cromatografie prin excludere;

dializ n timp;

diluie rapid.

Metode bazate pe modificarea dimensiunilor lipozomilor obinui anterior i fuziune

-

fuziunea spontan a lipozomilor unilamelari mici n faza de gel;

ngheare-dezgheare;

liofilizare (criodesicare).

Metode bazate pe ajustarea pH-ului

2. ncrcarea substanei active n lipozomi
Lipozomii care conin substane hidrosolubile se prepar direct cu soluia apoas sau soluia tampon apoas a acesteia.

NOVARTIS

Cnnsumer Health

Substanele lipofile se pot ncorpora fie adugndu-se n solventul organic n care se dizolv
compusul lipofil, fie prin complexare cu compusul lipidic din structura bistratului lipozomal.
Asocierea proteinelor n lipozomi are loc prin ncapsularea n faz hidrofil (de exemplu
interferon) sau prin legare la suprafaa lipozomului (de exemplu insulina) prin legturi
hidrofobe sau de natur electrostatic.

compus

liialrofll

compus
luorofob

Figura 11. Modalitatea de ncorporare a substanelor active n lipozomi

3. Etapa de uniformizare a dimensiunii lipozomilor
n aceasta faza se aplic:
-

extruderea la presiune ridicat sau sczut;

ultrasonicarea.

4. Etapa de ndeprtare a materialului nencapsulat

n aceast etap se apeleaz la:
-

dializ;

ultracentrifugare;

cromatografie de penetrare n gel;

rini schimbtoare de ioni.

n metoda de hidratare a filmului lipidic descris de Bangham, lipidele se dizolv n solveni

organici (cloroform sau amestecuri cu metanol) i solventul este apoi ndeprtat ntr-un
rotaevaporator la vid, formnd un film subire pe pereii balonului cu fund rotund. Peste acesta
se adaug faza apoas necesar pentru rehidratatrea filmului, prenclzit la o temperatur
superioar tranziiei de faz a lipidelor folosite la preparare. Filmul subire se detaeaz de pe
perei prin agitare, obinndu-se vezicule multilamelare, diferite ca mrime.

Simultan, poate fi ncorporat i substana activ dependent de proprietile fizico-chimice, fie

prin introducerea n film mpreun cu lipidele, fie n soluia apoas de rehidratare a filmului
lipidic, dac compusul este hidrofil.
Pentru omogenizarea dispersiei, respectiv pentru reducerea dimensiunii la scar nanometric a
lipozomilor multilamelari rezultai, dispersia se supune ultrasonicrii obinndu-se vezicule
unilamelare mici.
Figura 12. Fazele preparrii lipozomilor prin metoda hidratrii filmului lipidic

Lipide + s.

liposolubil

Soluie apoas a
hidro s o I u bile-

Solvent
organic

s.

Film lipidic

Hidratare / Agitare

Vezicule Unilamelare Mici

Alegerea metodei de preparare este important, deoarece de aceasta depind:

-

tipul de lipozomi formai;

mrimea acestora i distribuia mrimii lor;

randamentul ncrcrii cu substan activ.

8. Caracterele i controlul calitii lipozomilor

Controlul calitii lipozomilor presupune determinarea unor parametri caracteristici fizicochimici, microbiologici i biologici. Posibilitatea caracterizrii lipozomilor i a formulrilor cu
lipozomi a devenit mai evident o dat cu dezvoltarea unor metode analitice i echipamente de
control performante.
n tabelul urmtor sunt redate sintetic metodele folosite pentru controlul calitii formulrilor
lipozomale.
Tabel 9. Controlul calitii lipozomilor(caracteristici si metode)
Parametri de control
Procedeu analitic
Caracterizarea fizico-chimic
aspect
pH

poteniometrie

osmolaritatea

osmometru

indice de refracie

refractometru

concentraia n fosfolipide
compoziia n fosfolipide

coninut n fosfor lipidic/HPLC

CSS i HPLC

concentraia n colesterol

determinarea colesterol- oxidazei i HPLC

concentraia n sm (randamentul

metoda adecvat

ncorporrii)
Stabilitatea chimic
pH
hidroliza fosfolipidelor

potentiometrie
HPLC, CSS

autooxidarea colesterolului
degradarea antioxidantului
potenialul electric zeta
Stabilitatea fizic
mrimea
i distribuia
mrimii
Caracterizarea
biologic

HPLC, CSS
HPLC, CSS
zeta-sizer

lamelaritatea
sterilitatea

miroscopie
electronic
culturi aerobe
sau anaerobe

pirogenitatea

testul pe iepure ori testul LAL(Limulus)

toxicitatea animal

monitorizarea letalitii, histologiei i patologiei

Evaluarea eficienei terapeutice

difracia dinamic a luminii

teste in vitro utiliznd membrane artificiale

teste in vivo

Pentru lipozomii cu aplicaie cutanat se efectueaz teste suplimentare cum ar fi:

- determinarea capacitii de umectare a pielii, determinarea efectului
emolient
9. Dificulti privind dezvoltarea lipozomilor
Realizarea lipozomilor ntmpin o serie de dificulti generate de calitatea materiilor prime,
caracteristicile lipozomilor, tehnologiile de fabricaie, metodele de control, stabilitate etc.
Calitatea materiilor prime
Compoziia variabila a fosfolipidelor provenind din surse naturale diverse poate afecta
reproductibilitatea, de la o serie la alta, a calitii lor i implicit a lipozomilor. Utilizarea
produselor de sintez minimizeaz acest neajuns.
Proprietile fizico-chimice ale lipozomilor
Eficacitatea in vivo a lipozomilor este n mare msur dependent de proprietile structurale i
de suprafa.
La dezvoltarea unei formulri lipozomale este necesar s se ia n consideraie unele
caracteristici importante ale lipozomilor (mrimea i distribuia dup mrime, potenialul zeta i
randamentul de ncrcare a substanei medicamentoase) care determina comportamentul
lipozomilor in vitro ^i in vivo.
Se impune deci o caracterizare complet fizico-chimic a lipozomilor farmaceutici n stadiile
preliminare ale dezvoltrii farmaceutice, fapt ce reclam utilizarea unor metode analitice
complicate.
Randamentul ncrcrii cu substan medicamentoas
n mod obinuit, n lipozomi nu se nglobeaz toat cantitatea de substan medicamentoas
introdusa n formulare. Uzual, procentele incluse sunt mai reduse, iar cantitatea rmas
nencrcat trebuie s fie ndeprtat (dac este mai mare de 10%), aciune laborioas i
cronofag.
Dezvoltarea unor strategii de ncrcare activ sau de la distan crete eficacitatea
ncapsulrii.
Perioada de valabilitate
Dup cum s-a descris anterior, valabilitatea lipozomilor poate fi limitat de fenomenele de

instabilitate fizic i chimic.

Ambele tipuri de instabiliti modific disponibilitatea in vivo, iar procesul degradrii chimice
poate influena i sigurana lipozomilor.
Transpunerea preparrii la scar industrial a lipozomilor
Prepararea lipozomilor necesit existena unui echipament de fabricaie adecvat. n plus,
preparatele lipozomale parenterale reclama aplicarea unor tehnici de fabricatie capabile s
asigure sterilitatea i apirogenitatea preparatelor parenterale sau oftalmice.
10. Alte tipuri de sisteme veziculare
Pentru a evita unele limite ale lipozomilor (instabilitate chimic, costul i puritatea
fosfolipidelor, degradarea oxidativ a fosfolipidelor) s-au dezvoltat i alte tipuri de sisteme
veziculare, care s constituie alternative la sistemele lipozomale.
Denumirile acestor vezicule fac referire la natura componentelor ce formeaz nveliul
vesicular i sunt limitate doar de imaginaia productorilor.
Niozomii sunt vezicule obinute cu surfactani (ageni tensioactivi) bicatenari de sintez
neionogeni.
Sfingozomii sunt lipozomi care conin sfingolipide (sfingomielina, gangliozide) sau lipide a
cror compoziie este asemntoare pielii (ceramide, colesterol, acizi grai, sulfat de clesterol).
Imunozomii sunt sisteme veziculare la care sunt ataai anticorpi specifici sau fragmente de
anticorpi.
Hemozomii sunt vezicule asemntoare lipozomilor care conin hemoglobine.
Catezomii sunt lipozomi cationici care conin sruri ale acizilor grai cu amine cuaternare.
Virozomii conin vaccinuri.
Imunoenzimozomii sunt vezicule coloidale ce conin enzime (utili n maladii autoimune).
Ufazomii sunt sisteme veziculare ce conin acizi grai nesaturai cu caten lung.
Etozomii sunt vezicule lipidice cu un coninut ridicat (pn la 45%) de etanol. Etanolul
fluidizeaz att lipidele etozomale, ct i din straturile lipidice ale celulelor stratului cornos.
Aciunea de dezorganizare a stratului lipidic cornos permite penetraia veziculelor n piele.
Sunt capabili s ncapsuleze i s elibereze n piele molecule lipofile, precum testosteron,
minoxidil, ca i substane medicamentoase cationice, precum propranololul sau chiar plasmide
i insulin.
Rovizomii sunt transportori veziculari multifuncionali care au un coninut mare de acizi grai

eseniali (de exemplu, acid linoleic) utilizai pentru transferul a numeroase ingrediente active
cosmetice.
Dragozomii sunt sisteme veziculare obinute din lecitin hidrogenat i colesterol, cu aplicaii
n cosmetologie.
Transferozomii sunt un tip special de lipozomi n care sunt ncorporai aa numii activatori
marginali (molecule, precum colat de sodiu).
Sunt vezicule ultradeformabile cu o capacitate de deformare mai mare de pn la 105 n
comparaie cu lipozomii. Datorit elasticitii i capacitii de deformare, ei se pot strecura prin
porii stratului cornos (care sunt cu 1/10 mai mici dect diametrul lor). Astfel, ei pot penetra prin
pielea intact acionnd pe baza existenei gradientului de hidratare cutanat (diferenei de
hidratare din stratul cornos i esuturile viabile ale epidermului mai hidratate n comparaie cu
stratul cornos deshidratat).
11. Mecanisme de aciune in vitro a lipozomilor
Natura fosfolipidic a lipozomilor le confer o mare asemnare cu membranele biologice, n
care cele mai importante componente sunt fosfolipidele (considerate elemente ale vieii).
n principal, pe aceast similitudine se bazeaz mecanismul de aciune a lipozomilor, respectiv
interaciile dintre acetia i celulele vii.
n absena oricarei specificiti, interaciile dintre lipozomi i celulele vii, investigate in vitro,
pot fi descrise de urmtoarele procese:

Adsorbia la suprafaa celulelor - facilitat de ncrctura electric a veziculelor lipozomale.

Adsorbia se poate produce prin fore hidrofobe nespecifice sau electrostatice sau prin
interaciuni specifice cu componentele suprafeei celulare.
Transferul lipidic- mediat de proteinele de suprafa (exist o analogie ntre lipide, lipozomi i
membrane lipidice). Colesterolul trece foarte uor ntre membranele lipozomal i celular,
fr distrugerea lipozomului
Transferul lipidic poate determina modificarea permeabilitii lipozomilor nsoit de eliberarea
unei pri din faza apoas a veziculelor. n anumite condiii, substanele active ncapsulate
traverseaz apoi membrana celular.
Endocitoza, un fenomen influenat de sarcina electric a particulelor, permite digestia
lipozomilor de lizozomi n interiorul celulei i facilitarea cedrii ingredientului active.
Endocitoza reprezint mecanismul predominant de ptrundere a lipozomilor n celule; n acest
caz exist riscul degradrii principiului activ n lizozomii intracelulari.
Fuziunea cu plasma membranei celulare este un proces care rezult prin inserarea
constituenilor membranei lipozomale n membrana celular, nsoit de eliberarea simultan a
coninutului lipozomal n citoplasma celular.

Figura 13. Reprezentarea schematic a interaciilor lipozomilor cu celulele

Adesea este greu de stabilit mecanismul de interaciune dintre lipozomi i celule, existnd
posibilitatea ca simultan s intervin mai multe mecanisme.
Afinitatea lipozomilor pentru diverse esuturi poate fi modificat prin utilizare n formulare a
diferite fosfolipide, cu configuraii diverse ale lanului de acid gras.
De asemenea, modificarea sarcinii (ncrcturii) veziculelor lipozomale poate influena n mare
msur distribuia lor n organism.
Veziculele ncrcate negativ, de exemplu, intr n celule prin fuziune, n timp ce veziculele
neutre sunt ncorporate prin endocitoz, substana medicamentoas fiind expus sistemul
hidrolitic liozomal al celulelor.
Veziculele pozitive sau neutre sunt ndeprtate mai lent dect acelea ncrcate negativ.

12. Ci de administrare a lipozomilor

In vivo, obstacolele ntmpinate la transportul i eliberarea la int a substanelor
medicamentoase ncorporate n lipozomi sunt substaniale i dificil de depit.
n acest sens, se pot cita ca fiind bariere de depit:
-

clearance-ul nespecific i rapid al lipozomilor prin intermediul celulelor SRE;

dificultatea traversrii endoteliului capilar i a membranei bazale;

capacitatea endocitar foarte mic a numeroase tipuri de celule, inclusiv a celulelor tumorale.
Aceste bariere limiteaz n mare msur aplicarea cu succes a lipozomilor.
Efectul lipozomilor ca sisteme farmaceutice de eliberare a agenilor terapeutici este intrinsec
legat de capacitatea de a controla cu exactitate concentraia de substan activ eliberat care
atinge locul de aciune ntr-o perioad de timp dat.
Atingerea locului int din organism presupune ca lipozomii s rmn intaci ca transportori ai
substanei active (s-i menin integritatea structural) i s conin cantitatea iniial de
substan activ ncorporat ce urmeaz a fi eliberat la inta vizat.
Succesul unui tratament cu lipozomi nu depinde doar de caracteristicile de formulare, ci i de
calea de administrare.
Iniial, lipozomii au fost dezvoltai pentru administrare pe cale parenteral, ca vectori
medicamentoi n terapia cancerului. Ulterior, s-a studiat i posibilitatea administrrii lor i pe
alte ci (oral, transmucozal sau cutanat).
Mediile biologice variate ntlnite dup administrare (snge, fluide digestive, lichidele:
interstiial, peritoneal, sinovial) influeneaz evoluia in vivo a acestora.
Calea intravenoas
Lipozomii convenionali administrai intravenos sunt pui n faa unor bariere precum endoteliul
vascular i bariera hemato-encefalic.
Ca atare, aa cum s-a mai subliniat, extravazarea lipozomilor, ndeosebi a celor multilamelari i
a celor unilamelari mari, apare doar n organe, precum ficat, splin i mduva spinrii (datorit
fenestrelor i jonciunilor lejere dintre celule endoteliale), i n anumite stri patologice
(prezena tumorilor, inflamaie, infecie).
Lipozomii unilamleari mici pot avea o distribuie mai mare n esuturi, dar i ei pot fi
sechestrai de ficat i splin.
n afar de asta, lipozomii prencrcai cu sarcin electric superficial i cu dimensiuni mai
mici de 100 nm prezint un clearance sangvin lent n comparaie cu ali lipozomi cu

dimensiune mai mare i/sau transportori ncrcai pozitv sau negativ.

Schimbul lipidic dintre transportorii lipozomali i lipoproteinele plasmatice contribuie la
ruperea membranei i ulterior la pierderea substanei active. De aceea, lipozomii convenionali
se folosesc n principal n tratarea SRE sau pentru a masca efectele adverse ale substanelor
medicamentoase antitumorale.
n cazul lipozomilor de lung-circulaie, profilul biodistribuiei se schimb semnificativ
deoarece suprafaa veziculelor este acoperit cu polimeri, uzual cu PEG-uri. Studii
experimentale au evideniat o circulaie sangvin mai lung, o preluare mai mic de ficat i o
acumulare mai mare n tumori.
Acoperirea cu PEG a lipozomilor i face potrivii pentru administrarea intravenoas. Moleculele
de PEG furnizeaz o repulsie electrostatic i steric ntre lipozomii i neutralizeaz sarcina
electric, previnind opsonizarea lor.
De asemenea, opsonizarea lipozomului este redus din cauza inabilitii opsoninelor de a se
lega de suprafee hidrofile. Mai mult, grosimea stratului de PEG, care depinde de masa
molecular a PEG i de procentul ncorporat n compoziia lipozomilor, influeneaz interacia
lipozomilor cu macrofage.
De altfel, acest tip de lipozomi au fost concepui pentru a fi administrai pe cale parenteral i
de a mri timpul de remanen i circulaia sistemic.
n design-ul unor lipozomi eficieni pe cale parenteral trebuie luate n consideraie parametrii
importani, precum mrimea, compoziia, sarcina electric a lipozomilor, densitatea substanei
active n membrana lipozomal i metoda de preparare, parametrii care influeneaz soarta i
biodistribuia lor dup administrare.
Calea intramuscular
n acest caz, transferul de molecule are loc de la locul de administrare n snge prin difuzie
pasiv, injecia respectiv realiznd un depozit local de substan activ i implicit o eliberare
prelungit a sa.
Calea subcutanat
Lipozomii administrai subcutanat au scopul de a inti sistemul limfatic n scop imagistic,
precum i n distribuirea unor ageni terapeutici sau n vaccinare.
Lipozomii injectai subcutanat care nu intr n fluxul sangvin, fie intr n capilarele limfatice,
fie staioneaz la locul de injectare.

Veziculele neutre mai mici de 100 nm traverseaz prin interstiiu i apoi spre limfatice cu mult
mai uor dect veziculele mari.
Transportorii medicamentoi rmai la locul de injectare vor ceda moleculele active
ncorporate.
Calea intraperitoneal
Administrarea intraperitoneal are avantajul de a asigura o expunere direct a tumorii, infeciei
sau inflamaiei la agentul terapeutic inclus n lipozomi.
Aceast metod de eliberare a substanei medicamentoase crete efectul dozei n cavitatea
peritoneal.
Pentru substanele antitumorale, acest mod de administrare este preferat celui intravenos
datorit acumulrii mai mari a substanei medicamentoase i a minimizrii toxicitii.
Calea oral
Prin administrarea pe cale oral a lipozomilor se urmrete evitarea degradrii substanei active
i facilitarea absorbiei substanelor active coninute.
Eficacitatea lipozomilor administrai oral impune meninerea integritii structurale n cursul
trecerii prin tractul gastrointestinal i necesitatea absorbiei intestinale cu un randament
suficient.
Pentru meninerea structurii, lipozomii trebuie s reziste la valorile de pH variate din tractul
digestiv i la aciunea srurilor biliare i a lipazei pancreatice (aciune fosfolipazic).
Administrarea oral a lipozomilor ce conin fosfolipide saturate are efecte benefice asupra
mucoasei gastrice, inhibnd aciditatea sau aciunea duntoare a unor substane asupra
mucoasei gastrice.
Calea dermic (cutanat)
Administrarea dermic a veziculelor bazate pe fosfolipide apare pentru prima dat n literatur
la nceputul anilor 80.
Dup aplicarea pe piele, lipozomii joac un dublu rol i anume acela de a reine/proteja
compusul activ de-a lungul stratului cornos i de a aciona ca un promotor pentru penetraie.
Viteza de transport a substanei medicamentoase coninute n formulrile lipozomale prin piele
poate fi influenat de compoziia, mrimea i sarcina de suprafa a lipozomilor.
n cazul lipozomilor destinai aplicrii cutanate este necesar un design atent pentru a defini

compoziia optim, dependent de obiectivul specific, respectiv:

-

eliberarea dermic, cnd se dorete retenia crescut a substanei medicamentoase n

piele sau

eliberarea transdermic, cnd se impune penetrarea mai profund a transportorului

lipozomal n piele.

Lipozomii cu sarcin pozitiv pot interaciona cu pielea ncrcat negativ.

Deoarece mrimea porilor cutanai este de aproximativ 0,3 nm, mrimea lipozomilor pentru
eliberare transdermic este un parametru crucial pentru performana global a formulrii.
n general, se consider c principalele ci de penetraie transdermic a compuilor activi sunt
cile intercelular sau pe la nivelul anexelor cutanate (calea transfolicular).
Tratamentul local al bolilor de piele prin intermediul lipozomilor vizeaz tratamentul acneii, a
arsurilor solare i a plgilor sau pentru combaterea mbtrnirii.
Lipozomii pentru uz dermatologic sunt potrivii pentru ncrcarea cu antiinflamatoare,
antimicotice, antibiotice, retinoide.
Recent, pentru eliberarea transdermic a substanelor medicamentoase, atenia a fost centrat pe
dezvoltarea unor vezicule transformabile sau elastice, precum transferozomii i etozomii,
menionai anterior.
n pofida unor rezultate promitoare raportate n unele cercetri, mecanismul eliberrii
transdermice rmne nc un subiect controversat, n special n legtur cu profunzimea
penetraiei n piele a lipozomilor intaci.
Calea ocular (oftalmic)
Corneea

reprezint o barier eficace fa de absorbia substanelor medicamentoase

hidro/lipofile la nivelul segmentului posterior al ochiului.

Lipozomii au caracteristici promitoare pentru eliberarea ocular a substanelor
medicamentoase deoarece pot fi administrai sub form de picturi sau geluri oftalmice, care
vor localiza i menine activitatea farmacologic a acestora la locul de aciune.
Niozomii prezint o biodisponibilitate ocular crescut pentru substane medicamentoase
hidrofile, deoarece agenii tensioactivi din formulare acioneaz ca promotori de absorbie i
ndeprtreaz stratul mucos de pe suprafaa ocular.
O versiune modificat a niozomilor, denumii discozomi, variaz n mrime i form.
Dimensiunea mai mare a acestora (12-60 ^.m) previne drenajul n sistemul de drenaj
nasolacrimal. Mai mult, forma lor asemntoare unor discuri furnizeaz o fixare mai bun la

nivel ocular.
Studii pe niozomi i discozomi cu timolol maleat au demonstrat o biodisponibilitate mai mare a
timololului.
Calea vaginal
Administrai vaginal, lipozomii au avantajul c pot controla i susine eliberarea substanei
medicamentoase la locul de aciune. Substanele investigate sunt contraceptive, antimicrobiene,
antibiotice, antifungice, antivirale. Au fost dezvoltate formulri lipozomale n geluri de
carbopol care s mreasc timpul de retenie n vagin.
Alte ci investigate pentru administrarea lipozomilor sunt calea nazal (pentru eliberarea
vaccinurilor) i cea pulmonar (pentru eliberarea peptidelor i proteinelor).
13. Produse farmaceutice lipozomale
Fa de numrul mare de cercetri raportate de literatura de specialitate, se constat c numrul
produselor lipozomale care au obinut autorizaia de punere pe pia este restrns, fapt
explicabil avnd n vedere consideraiile de mai sus.

NOVARTIS

CnnsunuT Health

Totui, agenii terapeutici investigai sunt mult mai numeroi, ca i numrul produselor aflate n
diverse stadii ale studiilor clinice.
Cteva exemple dintre cele mai folosite preparate medicamentoase care conin lipozomi sunt
redate n continuare.
Tabel 10. Preparate parenterale
Substan
Produs
medicamentoas

Tipul particulelor
Lipozomi (de

AmBisome

Amfotericina B

circulaie
ndelungat)
Complex lipidic

Abelcet
Amphocil

Amfotericina B

Complex lipidic

Indicaii

Productor

Infecii fungice

NeXstar

grave

Pharmaceuticals

Infecii fungice

The Liposome

grave

Company
Sequus

Infecii fungice
grave

Amfotericina B
Llipozomi de

Doxil

Doxorubicina

circulaie lung

Sarcom Kaposi

(PEGY-lai)
Lipozomi de
DaunoXome

Daunorubicina

circulaie

Sarcom Kaposi

lung(PEGY-lai)

Tabel 11. Preparate cutanate

Substan
Produs
medicamentoas
Pevaryl Lipogel
Heparin
Pur
Heparin Pur

Tipul particulelor

Indicaii

Emgel

Sequus
Pharmaceuticals
NeXstar
Pharmaceuticals

Productor

Eczeme/micoze
Econazol baz

Lipozomi (gel)

cutanate

Cilag Corp.
Ratiopharm

Heparin

Lipozomi (gel)

Anticoagulant

Corp.
Ratiopharm

Heparin

Lipozomi (gel)

Anticoagulant

Forte
HepaPlus 30

Pharmaceuticals

Corp.
Ratiopharm

Heparin

Emulgel

Anticoagulant

Corp.Corp.

Alte preparate lipozomale aflate n uz clinic conin:

Amfotericin B, vaccinuri pentru hepatita A, hepatita B, difterie, tetanos vaccin oral E. coli sau
Shigella flexneri, amikacin vincristin nistatin, kanamicin i tretionin.

14. Lipozomii - vectori cosmetici

Cercetrile privind utilizarea lipozomilor n domeniul cosmetic sunt mai recente dect cele
iniiate pentru aplicaiile farmaceutice.
Primul produs lipozomal cosmetic, Capture, a fost obinut de DIOR n 1987.
Totui, n prezent pe piaa produselor cosmetice lipozomii sunt larg comercializai, nregistrnd
adevrate succese comerciale, spre deosebire de lipozomii medicamentoi care au o aplicare
clinic mult mai restrns.
Se pot desprinde dou motive eseniale care justific puterea de atracie a acestor preparate n
cosmetologie:
pielea ndeplinete funcii fiziologice foarte importante pentru organism i, depunnd
de-a lungul timpului o munc extraordinar, merit o atenie special, mai ales atunci cnd
vreuna dintre aceste funcii este perturbat;
similaritatea unor componente ale epidermului cu cele ale lipozomilor, fac din acetia
principalii transportori (vectori) ai compuilor dermatologici, respectiv ai ingredientelor
cosmetice.
Preparatele lipozomale au deschis calea unor noi formulri i chiar a unor categorii de produse
care ofer consumatorului ansa unei ngrijiri eficace i intense.
Lipozomii utilizai n cosmetic prezint o serie de avantaje:
-

au o bun compatibilitate cu lipidele cutanate;

formeaz o barier natural la suprafaa pielii, favoriznd hidratarea acesteia;

asigur o eliberare prelungit a ingredientului activ;

prezint afinitate pentru cheratin, favoriznd fixarea ingredientului cosmetic n stratul

cornos i o absorbie prelungit;

Multe din produsele comerciale reprezint variante ale lipozomilor, niozomi, rovizomi,
dragozomi etc., a cror denumire au legtur cu compoziia lor sau sunt rodul imaginaiei
productorilor.
Produsele cosmetice coninnd lipozomi sunt formulate:
-

pentru aplicare n timpul zilei, cu aciune protectoare;

pentru aplicare n timpul nopii, cu aciune de regenerare;

pentru pielea uscat i sensibil;

ca produse anti-age, antirid, ecrane solare, bronzare, autobronzare etc.

n tabelul urmtor sunt prezentate unele ingredientele active cosmetice ncorporate n lipozomi,
aciunile i formele de prezentare a produselor lipozomale cosmetice.
Tabel 12
Ingredient cosmetic
Vitamine (A, B3, C, E, F)
Ulei de Avocado
Ulei de Jojoba
Aloe

Aciune

Forme cosmetice

Revitalizant

Creme
protectoare

Emolient, nutritiv

- antirid

alfa hidroxi -acizi

Pirolidon-carboxilat de sodiu

restructurante
- antiage

Hidratant

NMF (Factor natural de umectare)

Hialuronat de sodiu

Geluri

Filtre UV

Protecie solar

Ginkgo Biloba

Antioxidant

Factor uman de cretere

Antiaging

Loiuni
Contur de ochi

Hidrolizat de colagen
Elastin
Precursori de glicozaminoglicani

Refacerea arhitecturi:
dermice

Sprayuri

Ceramide
Cofein

Baze de machiaj

Stimularea lipolizei i
microcirculaiei

Produse pentru baie

ampoane

De asemenea, exist lipozomi n care sunt ncorporate i alte ingrediente:

-

depigmentani;

compui nutritivi;

alte substane pro-barier (acizi grai linoleic i gamalinoleic);

extracte vegetale;

cheratin;

peptide capilare;

triclosan (antiacneic);

salicilat de sodiu (antiacneic);

aminoacizi;

coenzima Q (regenerarea i netezirea pielii);

lactat de sodiu (hidratant);

dihidroxiaceton (autobronzant) etc.

Bibliografie
1. Baillie A.J., Florence A.T., Muirhead L.H., J. Pharm. Pharmacol., 37, 863, (1985).
2. Bangham A.D., Standish M.M., Watkins J.C./1965, Diffusion of univalent ions across
the lamellae of swallen phospholipids, J.Mol.Biol., 13, 238-252.
3. Betageri Guru V., Shirish B. Kulkarni, Preparation of Liposomes in Preparation &
Chemical Applications, vol. I, ed. Reza Arshady, Citus Books, 489-521, (1999).
4. Billah M.M., Finean J.B., Coleman R., Biochim. Biophys. Acta, 433, 54, (1976);
5. Boddy A., Aarons L., Adv. Drug Deliv. Rev., 3, 155, (1989).
6. Burkhanov S.A. et al., Int. J. Pharm., 46, 31, (1988).
7. Cafiso D.P., Petty F.R., Biochim. Biophys. Acta, 649, 129-132, (1981).
8. Caque J.P. and Bernoud T., Les cristaux liquides dans les cosmetiques, Parf. Cosmet.
Aromes, (1990).
9. Cerezo Galan, Liposomas, in Tratado de Farmacia Galenica, ed. Faulii Trillo, Luzan 5,
S. A. De Ediciones, Madrid, 173-186, (1993).
10. Chakravarty P.K. & colab., J. Med. Chem., 26, 638, (1983).
11. Chew C.H. and Gan L.M., Monohexylether of ethylene glycol and diethylene glycol as
microemulsions cosurfactants, J. Dispersion Sci. Tchnol., 1990.
12. Cioca G. and Calvo L., Liquid crystals and cosmetics applications, Cosmet. Toiletries

(1990).
13. Davis S.S., J. Pharm. Pharmacool., 44 (suppl. 1), 186, (1992).
14. Deamer D., Bangham A.D., Biochim. Biophys. Acta, 443, 629-634, (1976).
15. Dlattre J., Couvreur P., Puisieux F. et al., Les liposomes: Aspects technologiques,
biologiques et pharmacotechniques, Lavoisier Tec et Doc, Paris 1993.
16. Dressman J.B., Bas P., Ritschel W.A., J. Pharm. Sci., 82, 857, (1983).
17. DSilva J.B., Notary R.E., J. Pharm. Sci., 71, 1394-1398, (1982).
18. De Luca M., Grossiord J.L., Medard J.M., A stable W/O/W multiple emulsion, Cosmet.
Toiletries, 1990.
19. Ghiescu L., Fixman A., Simionescu M., Simionescu N., J. Cell. Biol., 102, 1304,
(1986).
20. Gonzales-Rothi, R.J. SchreiperH, Pulmonary delivery of liposomes, J. Controlled
Release, 1993,5, 149-161.
21. Grossiord J.L., Seiller M. and Puisieux F., Apport des analyses rheologiques dans
letude des emulsions multiples H/L/H, Rheologica Acta, 1993.
22. Gruner S.M., Novel Multilayered Lipid Vesicles, Biochem., 24, 2833-2842, (1985).
23. Haran G., Cohen R., Bar L., Barenholz Y., Transmembrane ammonium sulphate
gradients in liposomes produce efficient and stable entrapment of amphipathis weak
bases, Biochim. Biophys. Acta, 1993, 1151, 201-215.
24. Hellstrom K.E. & colab., Antibodies for Drug Delivery, in Controlled Drug Delivery:
Fundamental and Applications, ed. J. R. Robinson and V. H. Lee, Marcel Dekker, N.
Y., 623, (1987).
25. Harrington K.J., Syrigos K.N., Vile R.G., Liposomally targeted cytotoxic drugs for the
treatment of cancer, J. Pharm. Pharmacol., 2002, 54, 1573-1600.
26. Hrju V., Lupuliasa D., Dumitrescu A.M., Dermocosmetologie, ed. Polirom, 30-35,
(1998).
27. Hrju Victoria, Lupuliasa D., Hrju M., Sisteme cu eliberare la int a substanelor
medicamentoase n Tehnologie Farmaceutic, (Iuliana Popovici, D. Lupuliasa), Editura
Polirom, vol. 3, 2009, 682-686.
28. Hofland H.E., Bouwstra J.A., Spies F., Interactions between nonioniques surfactant
vesicles and human stratum corneum in vitro, J. Liposome, 1995.
29. Hope M.J., Bally M.B., Biochim. Biophys. Acta, 816, 294, (1985).
30. Hopkins C.R., Site-specific Drug Delivery Cell Biology Medical and Pharmaceutical

Aspects, ed. Tomlinson E. i Davis S.S., John Wiley & Sons, Chichester, 27, (1986).
31. Hsu M.J., Juliano R.L., Biochim Biophys. Acta, 720, 411, (1982).
32. Hussain A., Truelove J.E., J. Pharm. Sci., 65, 1510, (1976).
33. Illum L., Farraj F., Davis S.S., Int. J. Pharm., 46, 261 (1988).
34. Ishida O., Maruyama K., Sasaki K., Iwatsuru M., Size-dependent extravasation and
interstitial localization of polyethylenglycolliposomes in solid tumor bearing mice, Int.
J. Pharm., 1999, 190, 49-56.
35. Johnson M.M., Biochim. Biophys. Acta, 307, 27-41, (1973).
36. Kenneth A. Walters, Drug Delivery: Topical and Transdermal Routes, Encyclopedia
of Pharmaceutical Technology, Informa Healthcare USA, 2007, 1318-1319.
37. Kirby C., Clarke J. and Gregoriadis G. (1980), Cholesterol content of small
unilamellar liposomes controls phospholipid loss to high density lipoproteins in the
presence of serum, FEBS, Lett, 111, 324-328.
38. Kim C.K., Lee M.K., Int. J. Pharm., 108, 21, (1994).
39. Kulkarni S.B., Betageri G.V., Singh M., J. Microencap., 12, 229-246, (1995).
40. Kumar V., Banker G.S., Target - Oriented Drug Delivery Systems, in Modern
Pharmaceutics, third ed., ed. Banker S. G. i Rhodes T. C., Marcel Dekker Inc., 611679, (oct. 1995).
41. Lasic D.D., Liposomes: From Physics to Applications, Elsevier, Amsterdam, 63-107,
(1993).
42. Lassic D.D., The Mechanism of Vesicle Formation, Biochem. J., 29, 335-348, (1988).
43. Leucua S., Medicamente vectorizate, Ed. Medical, 163-165, (1993).
44. Machida K.J., Hu R., Int. J. Pharm., 61, 109, (1990).
45. Magenheim B. and Benita S., Nanoparticles characterisation. A Comprehensive
physicochemical approach, STP Pharma., (1991).
46. Martn F.J., Morano J.K., Liposome Extrusion Method, U.S. Patents, 4737 323, 1988.
47. Marsh D., Handbook of Lipid Bilayers, CRC Press, Boca Raton, FL, 1990.
48. Mayer L.D., Hope M., Cullis P.R., Biochem. Biophys. Acta, 817, 193-196, (1985).
49. Meric E., Tehnologia produselor cosmetice, ed. Corson Iai, 274-278, (2000).
50. Mezei M., Nugent F.J., Method of Encapsulating Biologically Active Materials in
Multilamellar Lipid Vesicles, U. S. Patent, 4 485 054, CA 101, 12 227 w., 1984.
51. Muller R.H., Hildebrand G.E., Pharmazeutiche Technologie: Moderne Arzneiformen,
Wissenschaftliche Verlagsgesellschaft mbH Stuttgart (1998).

52. Muranishi S.S. et al., Delivery Systems for Peptide Drugs, ed. S. S. Davis, L. Illum, E.
Tomlinson, Plenum Press, N. Y., 177, (1986).
53. New R.R.C., Liposomes, A Practical Approach, IRL press, Oxford and New York, 33103, (1989).
54. Notari R.E., Optimization of Drug Delivery, ed. H. Bundgaard, A. B. Hansen, H.
Koford, Munksgaarg Copenhagan, 117, (1982).
55. Oku N., MacDonald R.C., Biochem, 22, 855-863, (1983).
56. Oussoren C., Storm G., Liposomes to target the lymphates by subcutaneous
administratio, Adv. Drug Delivery rev. 2001, 50, 143-156.
57. Popovici Adriana, Antofie I., Lipozomii ca vectori medicamentoi, Cluj-Napoca
2004, 123-128.
58. Popovici Iuliana, D. Lupuliasa, Tehnologia farmaceutic, volumul 2, ed. Polirom,
2008, 311-386.
59. Prybilski C., de Luca M., Grossiord J.L., et al., W/O/W multiple emulsions
manufacturing and formulation considerations, Cosmet. Toiletries, 1990.
60. Seiller M., Orecchioni A.M., and Vautions C., Vesicular Systems in cosmetologye, in
Cosmetic Dermatologye (R. Baran and H. I. Maibach), London, Martin Dunitz, 1994.
61. Seymour L. W., Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst., 19, 135 (1992).
62. Sone S., Matsura S., J. Immunol., 132, 2105, (1984).
63. Sophia G. Antimisiaris, Paraskevi Kallinteri, Dimitrios G. Fatouros, Liposomes and
Drug Delivery, in Pharmaceutical Manufacturing Handbook: Production and
Processes, edited by Shayne Cox Cad, John Willey&Sons, Inc., 2008, 443-506
64. Stella V. I. & colab., J. Med. Chem., 23, 1275, (1980).
65. Storm G., Crommelia D.J.A: Liposomes: Quo vadis?, Pharma Science & Tehnology
Today, 1998,vol.1,nr.1, 19-31.
66. Suzuki T., Nakamura M., Sumida H. and Shigeta I., Liquid crystal make-up
remover:condition of formation and its cleansing mechanisms, J. Soc. Cosmet. Chem.
1992.
67. Talsma H., Crommelin D.J., Liposomes As Drug Delivery Systems, Pharmaceutical
Technology International, 24-36, (Nov. 1992).
68. Talsma H., Crommelin D.J., Liposomes As Drug Delivery Systems, Pharmaceutical
Technology International, 34-38, (Dec. 1992).
69. Talsma H., Crommelin D.J., Liposomes As Drug Delivery Systems, Pharmaceutical

Technology International, 48-59, (Jan. 1993).

70. Taylor K.M., Taylor G., Stevens J., Int. J. Pharm., 58, 57-61, (1998).
71. Tomlinson E., Int. J. Pharm. Technol., 4, 49, (1983).
72. Vasant V. Ranade, Manfred A. Hollinger, Site-specific Drug delivery using
Liposomes as carriers, Drug delivery Systems, CRC Press, Boca Roton, Florida 1995,
3-25.
73. Vauthier C., Holzcherer, S. Benabbou, G. Spenlehauer, et al., Methodology for the
preparation of ultradispersed polyner systems, STP Pharma Sci., 1991.
74. Wu P.C., Liao Y.H. C.C., Chang J.S., Hiang, Y.B., The characterization and
biodistribution of cefocitin-loaded liposomes, Int. J. Pharm., 2004, 271, 31-39.