Morfologie bacteriana

Dr. Carmen Costache

STRUCTURA
1.Structuri obligatorii: Nucleoid, Citoplasma, Membran citoplasmatic, Perete celular 2.Structuri facultative * neeseniale pentru multiplicare * confer proprieti de patogenitatea Capsul, Glicocalix; Pili comuni, pili de sex, Flageli (Cili), Spori

NUCLEOID

nu are
nucleoli, membrana nuclear.

Se evideniaz:
prin coloraii speciale:
coloraia Feulgen, acridin orange;

microscopia electronic (aspect fibrilar).

NUCLEOID

Un singur cromozom = o molecul dublu catenar de ADN circular

50-65 bucle supraspiralizate, pliat, rsucit, fibrilar, de arici sau ghem legat de membrana citoplasmatic prin mezozomi

Informaia genetic - haploid (gene pentru un caracter ntr-un singur exemplar). contact direct ntre ADN i ARN, important pentru transcrierea i traducerea inf.genetice

sediul de aciune al unor AB: Quinolone Nitrofurani, imidazoli Rifamicine

NUCLEOID

studii recente => Cz lineari

Borrellia burgdorferi, Streptomyces spp

Nr. copii de AND/cz la un moment dat

Depind de stadiul ciclului celular

Material genetic extracromozomial

autonom sau integrat n cz bacterian Plasmidele Bacteriofagii

Material genetic extracromozomial

Plasmidele
molecule de ADN circulare. se pot transmite de la o bacterie la alta = conjugarea bacterian Codifica nr variabil de gene
virulenta.

Feuelgen pozitiv

Material genetic extracromozomial

Bacteriofagii Structuri virale infecteaza bacteriile. 2 tipuri:
litici, capabili de replicare => liza bacteriei lizogeni (temperai)
se pot integra n cz. = profag => proprieti noi: ex. producerea unor toxine.

CITOPLASMA BACTERIILOR
necompartimentat, fr organite:

reticul endoplasmatic, aparat Golgi, mitocondrii,

2 zone distincte
Periferica, amorfa Interna (nucleoidul)

CITOPLASMA BACTERIILOR

1.Ribozomi: mii, 70 S

Chloramfenicol, Erithromicina (M) Clindamicin, Tetracicline Aminoglicozide

sediul sintezei proteice inta de aciune a unor antibiotice => inhiba selectiv sinteza proteica bacteriana dar nu si cea eukariota !

subunitile : 50 S (Large) i 30 S (Small)

50 S

30 S

CITOPLASMA BACTERIILOR

2.Granule/Incluzii:
mas lichid de substane nutritive, delimitate de membran Colorate specific de anumiti coloranti
Ex. Volutina = corpuscul metacromatic (albastru de metilen=> rosu)

CITOPLASMA BACTERIILOR

3. ARN n cantitate mare,

reprezentat de r ARN (9%), m ARN, t ARN.

4. Molecule: 3000 4000 molecule diferite;

ap, sruri minerale, ioni, acizi nucleici

5. Incluzii: material nutritiv de rezerv,

format n condiii nefavorabile de mediu

6. Plasmide

MEMBRANA CITOPLASMATICA
strat subire (10 -20 nm) sub peretele celular => greu de evideniat. Structura membranei citoplasmatice modelul mozaicului Singer:

mas fosfolipidic, plutesc insule de proteine,

dispuse spre interior, exterior sau n masa fosfolipidic.

model dinamic => reciclat permanent.

MEMBRANA CITOPLASMATICA
Prelungiri n citoplasm: 1. Mezozomi Rol:
diviziunea bacteriilor; replicare ADN-ului; formarea endosporilor

2. Oxizomi: prelungiri scurte Rol:

procesele bioenergetice la bacteriile capabile de respiraie:
aerobe, aerob anaerobe facultative, microaerofile.

FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE

1. Permeabilitate selectiv i transport de substane:

transport pasiv = difuzia simpl, substane cu GM mic transportul activ
contra gradient de concentraie, cu consum de energie

FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE

2. Funcie bioenergetic:
sediul transportului de electroni, a fosforilrii oxidative (Oxizomii).

3. Funcie biosintetic: precursori PC 4. Sediul enzimelor hidrolazice

hidrolizeaz polimeri organici: proteine, zaharuri, lipide n nutrieni, care pot ptrunde n bacterie.

FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE

5.inta de aciune pentru detergeni i antibiotice (bactericid.)

FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE

6. Replicarea ADN cromozomial, plasmidic:

prin mezozomii septali

7. Sediul motorului ciliar

FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE

8. Import de macromolecule
ex. fragment de ADN, de la bacterii donatoare = transformare

FUNCIILE MEMBRANEI CITOPLASMATICE

9. Sediul receptorilor chemotactici:

deplasarea spre substanele nutritive

PERETELE CELULAR BACTERIAN

prezent la majoritatea bacteriilor, cu excepia genului Mycoplasma. PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM POZITIVE gros (15- 50 nm), dar simplu structurat: straturi suprapuse de peptidoglican (40) i acizi teichoici ataai 1.Acizi teichoici sunt heteropolimeri repetitivi, Rol - aderarea bacteriilor de celulele epiteliale ale mucoaselor - antigene de suprafa - captarea unor nutrieni: ex. Mg. 2.Polizaharide de perete 3.Proteine de perete Lipidele sunt n cantitate mic (<1%);
excepie Mycobacterium,
ex. streptococ hemolitic.

(excepional-ex proteina A a Stafilococului aureus

PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE

subire (10 -15 nm) dar complex structurat 1. Peptidoglicanul : 2. Stratul lipoproteic Formeaz un schelet 3. Membrana extern
mas fosfolipidic fluid, n care noat proteine.
Proteinele majore (70%) i minore (30%)
Proteine majore: Porine, Nonporine NBP (nutrient binding protein), PBP (penicillin binding protein), FeBP (siderofor)

1- 2 straturi de peptidoglican, bidimensional

Proteine minore (Outer membrane proteins - OMP)

PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE

4. Lipopolizaharidul (LPZ) Lipidul A

este endotoxina bacteriilor Gram negative responsabil de fenomenele toxice:

febr, diaree, greuri, vrsturi, scderea tensiunii arteriale, oc endotoxic i deces.

Componenta polizaharidic intern (core, smbure polizaharidic):

structur comun la bacteriile Gram negative

Lanurile oligozaharidice laterale:

proemin la suprafaa bacteriei, ca spini i sunt n numr mare este antigenul O, responsabil de specificitate

PERETELE CELULAR LA BACTERII GRAM NEGATIVE

5. Spatiul periplasmic
ntre membrana extern i membrana citoplasmatic. Deine oligozaharide i protein-enzime:
distrugerea bacteriilor btrne/moarte -autoliza scindeaz substanele nutritive cu G.M. mare, (polimeri organici) n monomeri: nutrieni care pot ptrunde n bacterie.

FUNCIILE PERETELUI CELULAR

1. Menine forma 2. delimitarea bacteriilor n 2 grupe Gram. 3. responsabil de acido - alcoolorezisten, 4. creterea i diviziunea bacteriilor - primer pentru propria sintez 6. Intervine n nutriia bacterian 7. Intervine n metabolismul bacterian,

sit molecular transportor de ioni import i export de proteine

8. Este o barier selectiv i are rol protector.

FORMATIUNI FACULTATIVE

Confer bacteriilor proprieti importante n natur

aderena, rezisten la fagocitoz ( unele fiind factori de patogenitate.)

CAPSULA strat amorf de nveli 3 structuri : Capsula microscopic :poate nconjura 1-2 bacterii.

Microcapsul: antigenul K / antigen Vi la Salmonella.

se evideniaz doar n microscopie electronic poate nconjura doar parial peretele celular.

Ex. Pneumococi, Meningococi, Hemofili, Bacilul crbunos, Klebsiella, Clostridium perfringers.

Stratul mucos produs doar n condiii naturale =>patogene

Capsula se evideniaz
1. n frotiuri prin: coloraii negative,
nu coloreaz capsula, vizibil ca un halou alb n jurul bacteriilor:
coloraia Gram (prod. patologic), Burri (culturi pure)

coloraii pozitive: coloraia Muir 2. Prin reacii antigen - anticorp: reacia de precipitare i reacia de umflare a capsulei 3. Dup aspectul coloniilor pe medii de cultur: foarte mucoase

CAPSULA

Compoziie chimic

polizaharidic,
majoritatea bacteriilor capsulate (Pneumococ, Meningococ, Hemofili).

polipeptidic:
polimer al acidului D - Glutamic, la bacilul crbunos.

proteic
Yersinia pestis,

polimer de acid hialuronic la Streptococ - hemolitic. Rol 1. antigen bacterian. 2. factor de patogenitate bacterian:
se opune fagocitrii bacteriilor.

GLICOCALIXUL
strat de suprafa sintetizat de bacterii n mediul lor natural. structurat, fibre polizaharidice lungi (dextran sau levan) se poate evidenia doar n microscopie electronic Rol 1.adezina polizaharidic 2.factor de colonizare

Ex. Mutanul ( Streptococus mutans) - ader de smalul dentar cu formarea cariei dentare. Bacteriile produc metabolii acizi, care atac smalul dentar.

PILII COMUNI (FIMBRII)

Pleac din membrana citoplasmic, strbat PC

formaiuni filamentoase, tubulare scurte numr mare (aproximativ 100 - 200 pili). natur proteic (pilein ). determinism cromozomial
mai rar determinism plasmidic.

ntlnii la bacteriile Gram negative

PILII
Rol 1. adezinele proteice ale bacteriilor:

aderarea nespecific pe suprafee inerte, aderarea specific pe mucoase, epitelii, endotelii, hematii, fagocite.

2. factor de patogenitate
Gonococii, E. coli- (ETEC),

3. antigene
posibilitatea modificarea structurii antigenice

PILII DE SEX
formaiuni tubulare lungi numr mic (1-4 ) prezeni la bacteriile G negative au determinism extracromozomial (plasmidic) Rol: conjugarea bacterian

FLAGELI (CILI)

formaiuni tubulare lungi

organite de locomoie ale bacteriilor Structur proteic = flagelin Ultrasctructura la ME: Evidentierea cililor :
corpuscul bazal cilindru proteic (filament axial). n preparate microscopice:

aprox. 20 m lungime/20 nm lime.

pe medii de cultur, prin nsmnarea bacteriilor prin nepare:

bacteriile imobile se dezvolt doar pe traiectul de nepare, cele mobile se dezvolt n tot mediul.

coloraii speciale indirect n preparate native (mobilitatea bacterian) .

Rol: 1. mobilitate, spre locurile unde exist atractani:

chimiotaxie (deplasarea spre substane chimice); fototaxie (deplasare spre locurile cu lumin); etc

2.antigen bacterian - antigenul H,

Weil - Felix a evideniat la Proteus, nsmnat ntr-un punct dintr-un mediu, se dezvolt pe tot mediul sub forma unor vluri concentrice (hauch).

SPORII
forme de rezisten - condiii nefavorabile de temperatur, nutriie, pH, oxigen, form primitiv de difereniere celular la bacterii. Sporularea:

Germinare

iniial endospori ulteior - spori liberi = exospori

Evidenierea sporilor

Revenire la forma vegetativ cnd ntlnesc condiii favorabile coloraii negative: Gram (formaiuni ovalare, necolorate, n interiorul bacteriilor). coloraii pozitive: verde malachit i safranin Protoplastul sporal Peretele sporal Cortexul nveliurile sporale si exosporium

Ultrastructura sporilor (ME) din interior spre exterior:

Rol: 1. identificarea bacteriilor. 2.alegerea metodelor de sterilizare i dezinfecie capabile s distrug sporii

SPORI

IMPORTANA CUNOTINELOR DE MORFOLOGIE BACTERIAN

I. Pentru unele boli infecioase, examenul microscopic = singura posibilitate diagnostic.

Ex. Sifilis - Treponema pallidum,
nu exist posibilitatea de a izola, cultiva => evidenierea i identificarea n preparat nativ sau n frotiuri prin coloraii speciale (impregnarea argentic) = forma spiralat.

IMPORTANA CUNOTINELOR DE MORFOLOGIE BACTERIAN

II. Pentru alte boli infectioase, exist posibilitatea cultivrii i izolrii agentului etiologic, dar examenul microscopic ofer informaii preioase.
gonoree - Neisseria gonnorhoeae (gonococ)
imaginea microscopic: PMN, diplococi intra i extracelulari.

tuberculoz, bacilul Koch se dezvolt lent,

frotiu din produs patologic: evidenierea de bacili acido alcoolorezisteni prin coloraia Ziehl - Neelsen,

IMPORTANA CUNOTINELOR DE MORFOLOGIE BACTERIAN

III. Pentru alte boli infecioase- informaii orientative. Frotiu din puroi, colorat Gram: coci Gram pozitivi dispui n grmezi - infecie stafilococic coci Gram pozitivi, dispui n lanuri - infecie streptococic diplobacili Gram pozitivi, capsulai - etiologie crbunoas bacili G pozitivi deformai - tetanos ( Clostridium tetani) bacili G negativi capsulai - Klebsiella Frotiu din sput: diplococi Gram pozitivi capsulai - pneumonie pneumococic bacili Gram negativi capsulai Klebsiella pn. Frotiu din LCR: diplococi G negativi - etiologie meningococic. diplococi G pozitivi capsulai - etiologie pneumococic