EMBRIOLOGIE

LP1 ANUL I
Asist.Univ. Dr. Tulin Raluca

Notiuni prezentate
L.p.I
I. Celule germinale primordiale, spermatogeneza, spermiogeneza - CURS
L.P.
1. Factori ce regleaza spermatogeneza: FSH, LH
2. Celule Leydig si celule Sertoli.
3. Bariera hemotesticulara.
4. Caracteristici morfologice ale spermatozoizilor anomalii.
5. Teste clinice spermatogenetice: test MAR, halosperm, test de
viabilitate, spermograma definitie, utilitate clinica.
II. Ovogenza, ovulatia. Corp galben; Insamantarea CURS
L.P.
1. Ciclul folicular
2. Ciclul uterin (endometrial )
3. Metode practice de determinare a ovulatiei principiul testelor
de ovulatie.
Preparate de microscopie optica:
1. Sectiune prin ovar;
2. Sectiune prin testicul;
3. Morula.Blastula.

1. Celule germinale
primordiale
Celule endodermale
(origine in peretele
sacului vitelin)
Formate in timpul S2
de unde migreaza
(S4-S6) in creasta
gonadala (S6)
Utilizate in
gametogenezaformeaza ovocitele
si spermatozoizii

Implicatii clinice
Celulele germinale sunt sechestrate de-a
lungul cii de migrare i pot forma neoplazii
la nivelul liniei mediane a corpului precum:
regiunea pineal 6%,
mediastin 7%,
retroperitoneu 4%,
regiunea sacrococcigian 42%,
ovar 24%,
testicul 9%,
i alte sedii 8%
AFP i HCG sunt utilizate pentru evaluarea clinic i
aprecierea activitii bolii

2. Spermatogeneza

Procesul de formare al spermatozoizilor

Incepe la pubertate
Dureaza toata viata
Un ciclu spermatogenetic dureaza 62 +/4 zile
Se desfasoara la nivelul tubilor seminiferi
testiculari (IN TESTICUL)
Se desfasoara prin mitoze si meioze
Se incheie cu spermiogeneza

Spermatogeneza

Celulele testiculare
Celulele SERTOLI (sustentaculare, sustinere)
In interiorul tubilor seminiferi
ABP (androgen binding protein) ce stimuleaza indirect
spermatogeneza mentinand o concentratie crescuta de
testosteron in vecinatatea spermatogoniilor
Inhibina inhiba FSH mentinand concentratia
spermatozoizilor

Celulele LEYDIG (interstitiale)

In afara tubilor seminiferi
Secreta testosteron (nivele crescute L3-L6 viu, primul an de
viata si postpubertate)

Celulele liniei seminale (spermatogonie-spermatozoid)

Reglarea hormonala a
spermatogenezei

SPERMATOGENEZA
FSH capacitatea de
reproducere
TESTOSTERON - LH caractere sexuale

Aplicatii clinice
Masurarea FSH + INHIBINA- pentru
functia de spermatogeneza (SERTOLI)
INHIBINA - barometru al
spermatogenezei (inhiba FSH si GnRH
hipotalamic)

3. Bariera hemotesticulara
Celulele Seroli impart tubii seminiferi in 2 compartimente
BAZAL intre membrana bazala si jonctiunile celulelor
Sertoli (contine spermatogonii, spermatocite primare)
LUMINAL superior de jonctiunile celulelor Sertoli
(bariera hemotesticulara)
n principal, aceasta bariera protejeaza celulele cu 23 de
cromozomi (care ar putea fi receptate ca non - self) de un
eventual atac cu anticorpi al organismului.

Tubi seminiferi testicul

adult

Spermiogeneza

Spermiogeneza
Ultimul proces al spermatogenezei
Are loc FARA diviziune
Spermatida (23 cr) devine
Spermatozoid (23 cr)
CAP (GENETIC)- ADN + acrozom (enzime
hidrolitice)
PIESA INTERMEDIARA (METABOLICA) mitocondria
COADA (MOTOR)

Spermograma
Reprezinta test de fertilitate masculina care verifica cantitatea si
calitatea spermei
Rezultatele

NORMOSPERMIE valori normale

polizoospermie = concentratia spermatozoizilor peste limitele normale
oligozoospermie = concentratia spermatozoizilor sub limitele normale
- hipospermie = volumul spermei < 1,5 mL
- hiperspermie = volumul spermei > 5 mL
- aspermie = absenta spermei
-azoospermie = absenta spermatozoizilor
- piospermie = prezenta leucocitelor in sperma
- hematospermie = prezenta hematiilor in sperma
- astenozoospermie = motilitate < 40%
- teratozoospermie = > 96% din spermatozoizi au forme anormale
- necrozoospermie = spermatozoizi neviabili
- oligoastenozoospermie = spermatozoizi mobili < 15 mil./mL si motilitate <
40%

Rezultat spermograma
Valori rezultate in urma analizei

Valori normale

Volum: ml
Culoare: opalescent
pH:
Lichefiere: completa
Timp de lichefiere: 15min
Vascozitate: normala
Concentratia: mil/ml
Nr. total de spz in proba: mil
Motilitatea a+b: %
Motilitatea a+b+c: %

1,5ml
Opalescent
7,2-8,0
Completa: picaturi distincte
20 min
Normala
15 x 106 /ml sau
39 x 106 in proba
32%
40%

Morfologie
Valori rezultate in urma analizei
Forme normale: %
Forme anormale: %

Valori normale
> 4% forme normale
(dupa criteriile WHO 2010)

Leucocite: 1%

1% leucocite

Halosperm este un test diagnostic bazat pe

tehnica dispersiei cromatinei nucleului spermatozoizilor.
Fragmentarea ADN-ului spermatozoizilor (SDF)

factorii care pot influenta fragmentarea ADN-ului spermatozoizilor mentionam:

unele medicamente, toxice, febra, fumatul, drogurile, boli infectioase,
varicocelul, varsta, abstinenta lunga.

Principiul metodei consta in denaturarea blanda a ADN-ului cu

formarea unui halo in jurul capului spermatozoidului cand ADN-ul
este intact, si lipsa acestui halo cand ADN-ul este fragmentat.
Indicatiile testului Halosperm
Barbatii infertili cu varicocel au un procent mare de
spermatozoizi cu ADN-ul nuclear fragmentat. Testul Halosperm
indica gradul acestei afectari;
In infectii (in mod particular cu Chlamidia trachomatis si
Mycoplasma), testul Halosperm permite verificarea eficientei
tratamentului antibiotic si alegerea probelor celor mai potrivite
pentru reproducere umana asistata;
Interpretare valori de referinta.
SDF<30% in limite normale;
SDF>30% fragmentare mare a ADN-ului

Test MAR
(Mixed Antiglobulin Reaction)
Testul Mar direct se efectueaza pentru detectarea anticorpilor prezenti pe spermatozoizi.
Suspensia cu spermatozoizii este amestecata cu o suspensie cu particule de latex acoperite cu
anticorpi monoclonali anti IgA uman sau cu anticorpi monoclonali anti IgG uman.
Anticorpii antispermatici. vPrezenta anticorpilor antispermatici ce reactioneaza cu
antigenele de pe spermatozoizi este considerata tipica si specifica pentru infertilitatea de
cauza imunologica. Acesti anticorpi se gasesc la aproximativ 8% din barbatii infertili.
Limitele metodei. Testul Mar direct poate fi realizat doar la probele cu spermatozoizi mobili.
Probele cu concentratie foarte mica sau mobilitate foarte mica pot da rezultate fals negative.
Interpretare valori de referinta.
Cand sunt prezenti anticorpii antispermatici, spermatozoizii mobili vor lega particulele de latex
formand aglutinari, intr-o proportie (procent) corelata direct cu severitatea reactiei
imunologice.
Valori de referinta:
< 10% - negativ;
10 39% - intermediar (suspiciune de infertilitate de cauza imunologica);
> 40% - pozitiv (probabilitate foarte mare de infertilitate de cauza imunologica).

Utilitatea clinica
Alegerea metodei de reproducere
asistata corespunzatoare
Azoospermia --- donator
OligoAstenoTeratozoospermia --- FIV clasic
sau ICSI
Normospermia ---Inseminare (IUI)
MAR pozitiv (peste 40%)---ICSI
Halosperm pozitiv (SDF peste 30%)---ICSI
sau FIV

Ovogeneza
Incepe in viata intauterina
Se opreste puntin inainte de nastere
Se reia la pubertate
LA NASTERE SUNT PREZENTE IN OVARE TOATE
OVOCITELE (1.000.000). Din acestea 400.000
raman pana la pubertate si doar 400 vor ajunge in
stadiul de ovocit secundar (eliberate prin ovulatie).
Ovulele se formeaza numai in urma fecundarii.
NUMARUL DE OVULE ESTE EGAL CU NUMARUL DE
SARCINI

Ciclul ovarian
Cuprinde
Ciclul folicular (F. Foliculara)
Ovulatia
Formarea si evolutia corpului galben (F.Luteala)

Dureaza in medie 28 zile

Incepe la pubertate
Se termina la menopauza (50-52 ani) =
epuizarea rezervei ovariene
ATENTIE ----- C. Ovarian nu este acelasi lucru cu
C. Menstrual

Ciclul ovarian Vs Ciclul uterin

Implicatii clinice Ciclul

folicular
Determinarea rezervei ovariene (important in fertilitate)
AMH (anti-Mullerian hormone)

O dat cu nceperea pubertii, AMH este produs de celulele stratului granulos ale
foliculilor de cretere din ovar i nu de ctre foliculii primordiali, nici de ctre foliculii
antrali n faza final de cretere (aflai sub reglarea direct a FSH).
Datorit exprimrii specifice la nivelul celulelor stratului granulos din foliculii de cretere
neselecionai (foliculii primari i secundari potenial fertili), AMH constituie un marker
ideal pentru estimarea rezervei ovariene
O dat cu naintarea n vrst nivelul AMH scade continuu
Util ca marker al raspunsului de stimulare ovariana in cadrul ART
La sexul masculin valorile AMH pot diferenia criptorhidismul (celule Sertoli)
de anorhie iar la copiii mici ce prezint ambiguitate genital determinarea
markerului este util pentru evaluarea prezenei i funciei testiculare.
Constanta pe parcursul ciclului ovarian

INHIBINA B
(produsa de celulele granuloase) masurata in faza foliculara indica numarul de ovocite ce se
pot obtine dupa stimulare in cadrul ART
variaza cu fazele cicluli ovarian

 Ciclul ovarian
F.Foliculara
Ovulatia
F.Luteala

Temperatura bazala
Gonadotropi (LH,
FSH)
HH. Sexuali (E2,
Progesteron)
Ciclul uterin

Menstruala
Proliferativa
Secretorie
+/-Premenstruala

Determinarea ovulatiei
Considerand un C.O de 28 zile ovulatia are loc
teoretic in ziua 14 (la 24-36 h dupa peack-ul de
LH = trigger al ovulatiei)
Semne clinice
Cresterea temperaturii bazale
Modificarea mucusului cervical (devine elastic si
alunecos pentru a asigura un "vehicul" sigur pentru
"transportul" spermei) asemanator albusului de ou

Daca C.O este mai lung/scurt se calculeaza

considerand constanta faza luteala (14 zile) =
Metoda calendarului
Ex- C.O 35 zile ovulatia are loc in 35-14 = ziua 21

Implicatii clinice - Ovulatie

Planificarea sarcinei perioada fertila
= 1,2 zile inainte si dupa ovulatie
Contraceptie (Metoda calendarului)
Tehnici de ART (inseminare
intrauterina IUI- pe ciclu natural,
fara stimulare ovariana in prealabil)

Teste de ovulatie
Principiul = masurarea LH in urina
LH-ul atinge un peack
Test pozitiv
dac linia de test (LH) este de intensitate egal sau mai
mare dect linia de control, aceasta indic vrful LH, iar
ovulaia va surveni n cursul urmtoarelor 24 - 48 ore
MediTest, Oview, Minut, Ferlidona

Metode contraceptive

1.

HORMONALE
1. Anticonceptionale (E2+P sau numai P) INHIBA OVULATIA, mucusul cervical devine impermeabil, inhiba
proliferarea mucoasei uterine si astfel implantarea oului
2. Plasture hormonal (5/5cm) se aplica 3s/luna cu pauza 1s (E2+P)
3. Inel vaginal se aplica 3s/luna (de catre femeie) (E2+P)
4. Injectia trimestriala (P in doza mare) im, fesa, actiune pe mucus cervical si ovulatie
5. Implant (P in doza mare) se fixeaza de catre medic, sc, brat dureaza 3 ani
6. Sterilet hormonal (Mirena) sefixeaza intrauterin, de catre medic, dureaza 5 ani

2.

NEHORMONALE
1. Sterilet
2. Spermicide
3. Prezervativ
4. Diafragma

3.

NATURALE
1. Temperaturii bazale creste cu 0,3-0,5 grade dupa ovulatie si se mentine ct pana la menstruatie
2. Metoda simptomatica- modificarea glerei cervicale

4.

DEFINITIVE
1. Ligatura trompelor/ductelor deferente

5.

URGENTA
1. Pilula cu P in doza mare (Postinor)
2. Pilula cu E+P in doxe mari
3. Steriletul introdus in Max 5 zile

Contraceptia de urgenta
Nume

Nume comercial

Doz recomandat

Levonorgestrel

Postinor 2
Microgynon

0,75 mg (1 tablet), se repet doza la 12-16 ore

Estro-progestativ

4 tablete, se repet doza la 12 ore

Plasture hormonal/Inel vaginal

Ortho-Evra

Implant hormonal -3L

Sterilet

ART
INSEMINAREA ARTIFICIALA (introducerea spermei
prelucrate in laborator direct in cavitatea uterina) tehnica
simpla, ieftina, poate fi efectuata lunar
Pe ciclu natural
Cu stimulare ovariana

Fertilizarea in vitro (FIV) fecundarea are loc in afara

organismului
Cu stimulare ovariana + punctie ovariana
Se pune in contact cu sperma prelucrata in laborator
Embrionul obtinut (morula sau blastocist) se implanteaza in
cavitatea uterina

ICSI (injectarea intracitoplasmatica a spermatozoizilor)

Prin micromanipulare
Cand spermatozoizii sunt f putini sau extrasi prin biopsie
testiculara

Istoric ART
1790 prima nastere dupa inseminare cu
sperma sotului in U.K
1890 prima nastere dupa inseminare cu
sperma de la donator
1978 Louise Brown primul copil
conceput in eprubeta
1984- prima nastere din embrioni congelati
1992 prima nastere dupa ICSI
1996 primul copil FIV in Romania