Imunologie curs nr.

Imunologie curs 9 Rspunsul imun celular(RIC)

Definiie : este unul din mecanismele imune efectorii de prim importan, implicat n 3 condiii majore de patologie: 1. eliminarea celulelor infectate cu microorganisme, cu habitat intracelular: virui, mycobacterii, Lysteria, Brucella 2. aprarea antitumoral 3. respingerea grefelor de esut sau organe RIC recunoate i distruge dou categorii importante de celule int: - celule singenice devenite antigen (sunt celulele self devenite antigen pentru c sunt infectate cu microorganisme sau pentru c s-au metaplaziat) - celule allogenice = celule strine i care ne parvin ca urmare a transplantului de esut sau organ RIC are 3 celule efectorii ce realizeaz funciile sale 1. Limfocitele (Ly) 2. Celulele natural killer (NK) 3. Celulele killer (K) Toate celulele prezint 2 particulariti: a) recunosc celulele int (sin/allogenice) prin mecanisme diferite b) distrug celulele int prin mecanisme comune citotoxicitate extracelular a) Ly Tc recunosc imunologic specific celulele int dup Ag prezent pe membrana acestora: 1. recunoaterea este MHC I dependent (recunosc Ag membranar numai dac sunt prezentate n complex cu MHC I, recunoatere posibil prin TCR) 2. e o recunoatere clonotipic specific: fiecare varietate de Ag poate s fie recunoscut strict doar de o singur clon de Ly Tc 3. Ly Tc reprezint o populaie celular clonotipic diversificat : ntr-un organism normal exist multe clone care pot s recunoasc o diversitate foarte mare de Ag b) NK = Ly mari granuloase (LGL), recunoaterea e imunologic specific: NK recunosc celulele int fr ca NK s aib contact direct cu Ag de pe membrana celulei int. 1. recunoaterea fcut de NK este MHC I independent: nu recunosc niciodat Ag prezentat n complex cu MHC I, pentru c celulele NK nu au TCR. 2. Dar celulele NK recunosc prin receptorul lor de suprafa NKR, un ligand NKL de pe toate celulele somatice ale organismului numai cnd celulele somatice devin celule Ag c) celulele K : nu iau contact direct cu Ag celulelor int; recunosc complexele imunologice prezentate accidental la suprafaa membranei celulei int: Complexul Imunologic = Ag + Ig G. Recunoaterea complexului imun se realizeaz prin receptorul Fc R3 sau CD16. Ly Tc, NK i K elibereaz u mediator cu rol distructiv (perforina) care altereaz profund structura membranei celulare, distrugnd celulele int prin liza osmotic (citotoxicitate extracelular). 1

Imunologie curs nr. 9 Cele mai importante celule sunt Ly Tc pentru c reprezint o populaie celular foarte diversificat clonotipic astfel nct ele pot recunoate orice Ag expus pe molecula MHC I. Limfocitele T citotoxice (Ly Tc) Fenotipic prezint pe suprafaa membranei lor cele 3 categorii de receptori: 1. receptorii de recunoatere Ag (recunoatere asociat) : TCR, CD3 i CD8. prin aceti receptori se realizeaz o recunoatere imunologic dublu asociativ intrareceptorial(TCR) i extrareceptorial(TCR, CD8) declaneaz stimuli activatori ce vor duce la activarea Ly Tc. Aceast activare e doar o activare parial, se definitiveaz doar dac Ly Tc sunt stimulate prin IL2. 2. receptorii cu rol n activarea Ly Tc sunt CD25, CD28 i CD45. 3. receptorii de adeziune intercelular: sunt foarte importani pentru c Ly Tc trebuie s aib contact intim cu celula int pentru a le distruge: CD2 care angajeaz legturi cu LFA3, formeaz un cuplu de adeziune de linia I; LFA1 care are legturi cu ICAM pe suprafaa celulei int formeaz un cuplu de adeziune de linia a II a . VLA sunt antigenele foarte trzii (Very-late Ag). receptorii din clasa VLA permit migrarea Ly Tc n esuturile imunologice, sunt receptori pentru proteinele matricei extracelulare. Sunt 6 tipuri de VLA. De exemplu: VLA, VLA% sunt receptori pentru fibronectin, VLA6 este receptor n special pentru laminin Clasificarea Ly Tc I - 90-92% sunt celule CD8+ (clasa majoritar) celule cu rol efector, distrugtor II - restul sunt celule CD4+ (asemntoare cu Ly Th ), au capacitate citotoxic redus, rolul lor fiind de imunomodulare, adic n maturaia Ly Thp n Ly Th1 celulele care amplific RIC. Dinamica i etapele RIC Trstura fundamental a RIC este declanarea intraganglionar a sa i RIC se desfoar intratisular, fapt ce presupune acumularea la locul contactului antigenic (n focarul antigenic) a Ly T Ag specifice. Cum reuesc Ly Tc, care sunt celule intens recirculate s recunoasc i s se acumuleze n focarul imunologic cnd pur i simplu aceste celule patruleaz n tot organismul ?

Imunologie curs nr. 9

Ly Tx nu poate trece dect prin dreptul Agx, adernd la endoteliul vascular plat (EVP). Rspuns: Ly Tc se acumuleaz n focarul Ag pentru c, fiind deja sensibilizate ca urmare a primului lor contact cu Ag, ele sunt Ly cu memorie. Memoria imunologic nseamn: - recunoaterea n general a focarelor imunologice - aceste Ly recunosc n final, din mai multe focare, focarul specific care conine AG pentru care Ly Tc au fost create. Ly Tx ptrunde n focarul cronic (Agy), caut Agx i negsindu-l, prsete foarte rapid focarul Y. Ly Tx ptrunde n focarul acut n care se afl Agx. l caut, l gsete, l recunoate i staioneaz foarte mult timp. n acest timp Ly Tc coopereaz cu diverse celule (macrofage), se activeaz, sufer o proliferare i apoi distruge Agx pentru care a fost creat. Ly T se mpart n 2 categorii mai importante: 1. Ly T naive (Ly Tc i Ly Th) nu au mai ntlnit niciodat n existena lor Ag pentru care au fost programate genetic (preformate). 2. Ly T cu memorie (Ly Tc i Ly Th) sunt celule care au avut contacte repetate cu Ag pentru care ele sunt preformate. Caracteristici: - au caracteristici diferite (cele T naive sunt diferite fenotipic de cele T cu memorie) - parcurg un circuite(traficuri) diferite n organism - au distribuie diferit fenotipic (au HOMINGURI diferite) Traficul i homingul Ly T naive (LTN) n esuturi exist o circulaie sanguin i o circulaie limfatic. Ly T naive circul prin vasul sanguin i iau calea arteriolelor aferente, ptrund foarte adnc n parenchimul ganglionar, ajung n reeaua capilar paracortical a ganglionului. Aici Ly T naive sunt oprite de endoteliul vascular local (HEV=endoteliu vascular nalt): celule cuboide ce protruzioneaz mult n lumenul capilar, ngustndu-l. Ly T naive ader la HEV trec din va n paracortical unde staioneaz foarte mult timp (cteva

Imunologie curs nr. 9 luni de zile) cu rolul de a crete ansele Ly T naive de a veni n contact cu Ag specifice ajunse n paracortical cu ajutorul APC-urilor. Dup o lung staionare, nevenind n contact cu Ag, prsesc paracortexul, iau calea vaselor limfatice eferente pn n circulaia sanguin (versantul venular) apoi se reia ciclul. Ly T naive au un trafic n exclusivitate circulator, i un homing predominat intraganglionar. Traficul i homingul Ly T cu memorie(LTM) Ly T cu memorie pot trece direct n focarul Ag, dac acesta exist. LTM circul prin vasele sanguine, iar cnd vin n contact cu endoteliul vascular plat din dreptul focarului Ag, ader de acesta i trec direct n focar, unde stau foarte mult: - recunosc Ag, se activeaz, coopereaz cu diversa celule i se i divid - n final LTM distrug total/parial Ag recunoscut - dup distrugerea Ag, LTM prsesc focarul, iau calea vaselor limfatice aferente, ajung n ganglionul local/regional, l tranziteaz rapid prin paracortex i l prsesc pa calea vaselor limfatice eferente, revenind n circulaia sistemic ca LTM Deci LTM au un trafic i homing predominant intratisular. LTM i LTN au traficuri i hominguri diferite pentru c au caractere fenotipice distincte care le permit s adere la diferite tipuri de endotelii vasculare. LTM ader la EVP, iar LTN ader la HEV, pentru c au receptori de adeziune de suprafa diferii. LTM au pe suprafaa lor receptorii: LFA1 ce se leag de molecula ICAM de pe EVP; VLA4 ce se leag de contraligandul VCAM (molecula de adeziune ale celulei vasculare prezente pe EVP din dreptul focarului AG); CD4 ce se leag de un contraligand numit adresin. Receptorii ICAM, VCAM i adresina nu sunt prezeni n mod continuu pe suprafaa celulei vasculare. Prezena lor e indus de citokinele eliberate n focarule Ag ca urmare a declanrii unui proces inflamator acut. Citokinele (IL1, TNF i IFN ) cresc expresia de ICAM, VCAM i adresin zonal (doar n dreptul focarului Ag) o modificare fenotipic zonal a EVP-ului ce atrage atenia LTM. LTN exprim pe suprafaa lor un receptor numit LAM-1/2 (molecula de adeziune limfocitar) prin care ader la un contraligand de pe HEV. Schema de principiu a desfurrii RIC I Etapa de inducie a RIC - are loc n cea mai mare parte intraganglionar - const n prezentarea Ag declanator ctre LTN - const n maturarea LTN ce devin LTM II Etapa de desfurare propriu-zis 4

Imunologie curs nr. 9 are loc strict n esuturi cooperarea LTM cu diverse celule

I Etapa de inducie Este declanat prin ptrunderea n esuturile organismului a Ag declanator. Ag este recunoscut imunologic specific i captat de APC = monocitele-macrofagele rezidente (prezente n mod continuu n esuturi); sunt recunoscute mai ales dac Ag sunt opsonizate prin complement i Ig. Unele monocite ncep s se activeze progresiv pn devin capabile s elaboreze i s elibereze local diverse IL i citokine: IL1, TNF, IFN , deci induc modificarea fenotipic zonal a EVP din dreptul focarului Ag=expresia crescut a celor 3 tipuri de receptori (ICAM, VCAM, adresina). Alte monocite prsesc focarul Ag, trec n ganglionii loco-regionali aducnd n ganglion Ag captat. Ag e transportat n ganglion i monocitele se stabilesc n paracortex unde stau un timp ndelungat. Aici monocitele prezint Ag ctre Ly T ce tranziteaz n mod curent paracorticala (LTN). LTN trec prin dreptul EVP, nu recunosc modificarea fenotipic local, ajung n ganglionii loco-regionali, apoi n arteriolele aferent, n paracorticala ganglionilor unde staioneaz: vin n contact cu APC. Exist receptori prin care LTN se activeaz, se matureaz n LTM. Prsesc paracorticala, ajung n limfaticele eferente, apoi n circulaia sistemic unde se ncheie etape de inducie. II Etapa desfurrii RIC concentrarea LTM n focarul imunologic LTM ajuns n dreptul EVP din faa focarului Ag, recunosc modificarea fenotipic local i ader la EVP, unde prin diapedez trec n esutul antigenic i devin LTM AG specifice ce vin n contact cu monocitele rezidente, se desfoar o cooperare celular i are loc desfurarea propriu-zis a RIC are la baz o cooperare celular la care particip 4 tipuri de celule: APC (monocitele din focar), Ly Tc CD8+ care ptrund n organ, Ly Tc CD4+ , Ly Th1 a) recunoaterea celulelor int de ctre Ly Tc CD8+ cu memorie : - celulele int singenice/allogenice, sunt celule Ag . Ag sunt prezentate n complex cu MHC I; multe Ag sunt recunoscute de Ly Tc CD8+ rezultnd o activare doar parial a Ly Tc CD8+, celulele ncepnd s se divid i s prolifereze local. Macrofagele prezente intratisular sunt activate i preiau Ag celulelor int, le endociteaz, le prelucreaz i le exprim pe membrana lor n complex cu MHC II. Aceste complexe Ag- MHC II sunt prezentate ctre Ly Tcm CD4+ i Ly Thp unde are loc o cooperare celular i maturaia complet a Ly Thp n Ly Th1 ce amplific RIC prin Il elaborate i eliberate local: IL2- stimuleaz n special Ly Tc CD8+ cu memorie activarea complet a celulelor CD8+ duce la eliberarea unor cantiti crescute de mediatori citotoxici: perforina ce altereaz profund structura celulei int, perfornd membrana. Ly Th1 elaboreaz i cantiti crescute de IFN ce stimuleaz mai ales macrofagele din focarul Ag. IFN stimuleaz expresia pe membrana macrofagelor a moleculelor MHC II, deci crete foarte mult capacitatea de APC a macrofagelor(monocite), cooperarea se intensific ; IFN stimuleaz i funciile efectorii ale macrofagelor: -

Imunologie curs nr. 9 1. crete mult expresia pe membrana macrofagelor a receptorilor de adeziune celular LFA1 ce se leag de ICAM (de pe suprafaa celulelor int) macrofagele ader strns de suprafaa celulelor int. 2. stimuleaz foarte mult capacitatea fagocitar a lor 3. stimuleaz foarte mult capacitatea citotoxic a lor: crete foarte mult citotoxicitatea O2 dependent, elibereaz muli radicali liberi de O. Este stimulat i citotoxicitatea O2 independent : eliberarea de enzime hidrolaze, proteaze - ce contribuie la dezintegrarea celulei int. Efectorii RIC: Citotoxici: Ly TcmCD8+ Auxiliari: macrofagele(monocitele) Celulele NK Reprezint circa 15% din totalul limfocitelor periferice, sunt limfocite non B non T, cu aspect morfologic de LGL (au diametre mari i prezint n citoplasm multe granulaii citotoxice). Pe suprafaa lor se afl aceleai categorii de limfocite: 1. receptori de adeziune celular CD2 i LFA1 2. receptori cu rol activator al celulelor NK: CD25(pentru IL2), receptor pentru IFN 3. receptorii de recunoatere antigenic: a) NK-R ce recunoate contraligandul NK-L distribuit uniform pe suprafaa tuturor celulelor somatice din organism. n organismul normal, aceast recunoatere are loc pentru c pe suprafaa celulelor somatice normale NL-K este mascat de moleculele MHC I. Poate fi recunoscut doar n condiii patologice: demascarea NK-L ca urmare a scderii sintezei i a scderii expresiei MHC I pe celulele somatice, n situaiile cnd celulele sunt canceroase i cnd celulele somatice sunt colonizate viral (virui) elibernd o protein ce sechestreaz MHC I intra RER(reticul endoplasmatic rugos). Prin demascare, NK-L este recunoscut de NK-R i celulele NK sunt implicate n aprarea antiviral i antitumoral (aprare nespecific). Celulele K Sunt tot LGL, dispun pe suprafaa lor din abunden de receptori CD16(Fc R3) prin care recunosc complexele imune membranare de pe celulele int. Toate cele trei tipuri de celule (Ly Tc, NK, K) distrug celulele int prin acelai mecanism comun: citotoxicitatea extracelular. Ele distrug celulele int fr a le fagocita, ci doar prin eliberarea de mediatori care determin: leziuni membranare grave, leziuni grave ale nucleului celulei int, produse ca urmare a eliberrii perforinei. Perforina este un factor citotoxic ce seamn foarte bine cu componenta C9 a complementului. Se prezint ca lan peptidic unic, iar n lichidul interstiial sub form de plcue. - se organizeaz spontan n lichidul interstiial n structuri tubuliforme ce se inser n membrana celulelor int producnd liza osmotic a celulelor int: fagocitarea fragmentelor - este eliberat spontan de Ly Tc, NK, K cu o singur condiie dup activarea lor complet: - activarea se face n urma recunoaterii Ag 6

Imunologie curs nr. 9 activarea se face prin IL2 dei perforina este eliberat prin fanta dintre cele 2 celule, se inser numai n membrana celulei int pe care o altereaz. Acest lucru se datoreaz faptului c celulele citotoxice elibereaz i proteoglicani(PG) o dat cu perforina, PG sub form de filament protector pentru membrana proprie. Leziunile nucleare rezult din fragmentarea ADN(acid dezoxiribonucleic- pt. cei ce nu suport prescurtrile) celulelor int, ca urmare a activrii unor endonucleaze a celulelor intmoartea celulelor int prin apoptoza, indus prin inductorii de endonucleaze: - TNF produs de Ly Tc i macrofage - TNF produs de Ly Th1 (mari productoare la hectar de TNF ) -

The End(c mi s-a acrit i mie) P.S. : citii monocite-macrofage i viceversa, persoana de la care am luat cursul(mea culpa) folosete aceeai prescurtare!!!!!!!!