Biocompatibilitate

curs 9

S.L. ANTONIAC Iulian

Calcifierea
Deteriorarea sau defectarea unor dispozitive medicale implantabile, n special a celor utilizate n

sistemul cardiovascular, este cauzat frecvent de formarea depozitelor nodulare de fosfat de calciu
sau ali componeni care conin calciu, proces cunoscut sub numele de calcifiere sau
mineralizare.

Cu toate c depunerea de sruri minerale de calciu apare ca un proces normal n oase i dini,

biomaterialele care intr n componena dispozitivelor medicale nu trebuie s se calcifice deoarece

depozitele minerale pot interfera cu buna funcionare a dispozitivului medical implantabil. De
aceea, calcifierea biomaterialelor este abnormal sau patologic.

Calcifierea patologic poate fi de asemenea distrofic sau metastatic.

Calcifierea distrofic este depunerea srurilor de calciu pe esuturi distruse sau bolnave, respectiv pe
biomateriale, la pacieni care au un metabolism normal n calciu.
Calcifierea metastatic este depunerea de sruri de calciu, n esuturi, ca rezultat al dereglrii
metabolismului mineral.
Calcifierile distrofic i metastatic pot fi sinergetice, n prezena unui metabolism mineral

anormal, calcifierea asociat cu biomaterialele sau cu esuturile anormale este mrit. Calcifierea
biomaterialelor poate afecta o varietate de proteze implantate n sistemul circulator, n interiorul
esuturilor conective, sau n alte pri ale corpului uman.

Calcifierea
Calcifierea a fost asociat att cu biomaterialele derivate sintetic ct i cu cele derivate biologic. Faza

mineral natural a multor calcificri de biomaterial este un fosfat cristalin de calciu, cunoscut ca
apatit, care este legat de hidroxiapatita de calciu, mineralul care furnizeaz rigiditatea structural a
oaselor i care are formula chimic Ca10(PO4)6(OH)2.

n general, determinanii biomineralizrii materialului de implant includ factori legai de metabolismul

corpului, i cei legai de structura i proprietile implantului. Mai mult, mineralizarea biomaterialului
este sporit n general la margini de deformaiile mecanice intense, cum ar fi punctele de ndoire ale
dispozitivelor circulatorii.

Calcifierea poate fi potenial n prezena infeciei implantului. Un plus de importan i se acord

faptului c, aceasta poate aprea la suprafaa implantului (calcifiere excentric), unde este asociat
adesea cu esuturi ataate sau celule, sau n componenii structurali (calcificare intrinsec).

n final, mecanismul fundamental al calcifierii patologice are multe similitudini cu mineralizarea

normal a osului. De fapt, unii investigatori au explorat calcifierea implantelor din biomateriale pentru
a crea noi esuturi dure.

Calcifierea
Modele experimentale de calcifiere:

Tipul

Calcifierea valvelor
bioprostetice ale inimii
Calcifierea poliuretanului

Sistemul

Durata

Implant subdermic la obolani 3 sptmni

nlocuirea valvelor ortotopice

5 luni

Implanturi de inimi artificiale

5 luni

Implanturi de valve polimerice 5 luni

Implant subdermic la obolani 2 luni
Calcifierea hidrogelului

Implant subdermic la obolani 3 sptmni

Calcifierea colagenului

Implant subdermic la obolani 3 sptmni

ncrustarea urinar

Incubare in vitro

Ore pn la zile

Implanturi in vivo

10 sptmni

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea
Depozitele calcificate sunt studiate folosind combinaii de tehnici
chimice i morfologice. Tehnicile morfologice ajut la conturarea
distribuiei depozitelor calcifiate microscopice i ultrastructurale, iar
tehnicile chimice servesc la identificarea i dozarea volumului
constituenilor minerali i a fazei minerale cristaline. Unele metode
morfologice permit determinarea cantitilor n anumite locuri.

Aceasta este de dou tipuri:

a. evaluare morfologic
b. evaluare chimic

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea morfologic
Distribuia morfologic a calcificrilor a fost analizat cu un numr

de tehnici bine dezvoltate, tehnici care i-au demonstrat eficiena i

care au cea mai mare cuprindere de la examinrile directe mari
(grosiere) sau raze X a protezelor expuse la tehnici sofisticate cum ar
fi spectroscopia electronic.

Fiecare tehnic are avantaje unice, combinnd cteva asemnri este

posibil s se ajung la o nelegere a compoziiei i structurii fiecrui

tip de calcificare. Urmtoarea examinare grosier atent, adesea sub
un microscop de putere mic, a fost folosit pentru evaluarea
distribuiei mineralului ntr-o bioprotez a valvei inimii i a
sistemelor ventriculare.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea morfologic
Microscopia luminoas a esuturilor calcifiate are o utilizare larg.
Identificarea mineralului este facilizat prin intermediul folosirii unor
colorani specifici de calciu i fosfor, cum ar fi alizarina roie, pentru
calciu, i von Kossa pentru fosfai. Aceti colorani sunt cei mai utilizati
pentru confirmarea i caracterizarea zonelor suspecte de calcifiere prin
tehnicile coloranilor n ordinea stabilit.
Tehnicile de microscopie optic, care presupun bombardarea cu fascicule

de electroni, cu o focalizare nalt au multe de oferit n caracterizarea

calcificrilor cardiovasculare. Analiza cu dispersie de raze X permite o
examinare semiconstitutiv a creterii depozitelor de calciu i fosfat, n
mod specific.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea morfologic
Analizele microscopice de transmisie electronic, a ultrastructurii
calcifierilor, de asemenea faciliteaz nelegerea poziionrilor iniiale ale
cristalelor calcice. Acestea au fost considerabil utilizate pentru
investigarea calcifierii bioprotezelor pentru valvele inimii. Proba
microelectronic sau, mai recent, spectroscopia electronic cu pierdere
de energie (EELS) sunt tehnici care cupleaz microscopia de transmisie
electronic cu analize elementare de nalt sensibilitate. Aceste tehnici
furnizeaz cele mai nsemnate nelesuri pentru localizarea locurilor
nucleaiilor ultrastructurale a depozitelor de fosfai de calciu.
n general cele mai sensibile i sofisticate tehnici morfologice necesit

pregtiri foarte atente, scumpe pentru evitarea artefacturilor.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea chimic
Este important dozarea calciului i fosforului n calcifierea biomaterialelor, pentru a

face comparaii relevante n funcie de severitatea depunerii i eficacitii msurilor

preventive. Tehnicile care au fost utilizate pentru analizarea, testarea volumului de
mineral la fel de bine ca i dezvoltarea fazei minerale n oase poate fi folositoare pentru
biomateriale. Analizele speciilor de mineral sunt cel mai bine preparate sub form de
pudr uniform att prin achierea lor n azot lichid sau n final meninerea prin
ngheare uscat.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea chimic
Calciul a fost dozat prin folosirea spectroscopiei atomice de absorpie a tesuturilor prin

hidrolizare acid. Reducerea dimensiunilor eantioanelor ntr-un cuptor cptuit este

un alt mijloc pentru pregtirea materialelor explantate de calciu i fosfat pentru analize.
Fosforul, din fosfat, este de obicei dozat folosind o tehnic complex cu detecie
spectrometric.aa cum s-a menionat mai sus, fosfaii de calciu cristalini, cum ar fi
hidroxiapatita, au devenit depozitele actuale de material. Tipul formei cristaline a
fosfatului de calciu poate fi determinat cu difracia de raze X.
Analizele pulberii, folosind o camer Debye-Scherer necesit alctuirea minim a

materialului i furnizeaz o difracie de raze X produs de rotirea specimenelor n

tuburi capilare printre fascicole de raze X. n plus, mostrele pot fi de asemenea analizate
pentru coninutul n carbon al fazei minerale, folosind spectroscopia cu infraroii.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea chimic
Au fost investigate 3 strategii cu prevenirea calcifierii implanturilor biomateriale:
terapia sistematic cu ageni de anticalcifiere;
terapia local cu dispozitive implantabile;
modificri ale biomaterialelor prin ndeprtarea componenilor calcifiabili, adiii cu agent

exogen.

Investigaiile n strategia anticalcifierii nu numai c au demonstrat eficacitatea terapiei, dar i

absena efectelor adverse. Efecte adverse ce pot include toxiciti la nivel local sau sistemic,
tendine ctre tromboze, inducerea de efecte imunologice sau degradare cu pierderi immediate i
progresive ale proprietilor mecanice sau de stabilitate.

Un dezavantaj al folosirii sistematice a agenilor de calcifiere pentru prevenirea calcifierii patologice

este efectul asupra osului, conducnd insuficienta formare a scheletului de fosfat de calciu.

Pentru a evita acest lucru, cercetarirle recente pentru prevenirea calcifierii bioprotezelor de la
valvele inimii s-au bazat fie pe modificarea biomaterialelor, fie pe introducerea unui sistem adiacent
cu proteza.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea chimic
Pre-tratamentul cu produse de curat a protezelor valvei inimii previne calcifierea att

la implanturile subcutanate ct i la cele circulare. Mecanismul de aciune al acestui tip

de micorare nu a fost stabilit, dar el poate s cauzeze dezmembrarea, disocierea i
sfrmarea celulelor derivate, acestea contribuind la dezvoltarea leziunilor calcifiate.
Pre-tratamentele s-au artat a fi numai parial eficace n circulaie, poate datorit
reabsorpiei fotolipidelor de ctre snge , ntrziind astfel debutul calcifierii.
Folosirea medicamentelor cu specific anticalcifiant este o alt cale important n

prevenirea calcifierii biomaterialelor. Bifosfaii sunt componeni sintetici care inhib

formarea hidroxiapatitei in vivo i in vitro. Totui, eficacitatea terapiei cu bifosfai are
efecte ntotdeauna asupra oaselor. Aceasta are loc datorit mecanismelor similare de
calcifiere a bioprotezelor esutului i osului.
Efectele adverse cauzate de bifosfai sunt evitate complet prin folosirea altor polimeri

controlai pe post de co-implanturi sau prin legarea covalent a acestor ageni, cum ar fi
aminobifosfaii.

Evaluarea i prevenirea calcifierii biomaterialelor

Evaluarea chimic
Procesul controlat de producere a etanhidroxidifosfat-ului (EHDP) folosind un sistem

polimeric, a fost eficace n aezarea subcutanat pentru prevenirea calcifierii

bioprotezei valvei inimii cu administrri locale de medicamente, dar nu i s-a
demonstrat nc eficacitatea n circulaie. Producerea controlat a EHDP poate fi
susinut pentru extrapolarea duratei la mai mult de 30 ani, prin folosirea unei soluii
nesaturate de sare de calciu a EHDP n matrice. Legtura covalent dintre difosfai i
poliuretan poate preveni n aceeai msur calcifierea implantului.

Alt cale potenial folositoare n prevenirea calcifierii implic folosirea ionilor

metalici specifici care sunt inhibitori. Pretratamentul protezelor inimii cu Al3+ a

demonstrat prevenirea mineralizrii implanturilor fr a genera efecte secundare.
Aceast cale a fost sugerat prin observarea pacienilor cu boli ale rinichilor, oase
insuficient calcefiate.

Mecanismul de acionare al calcefierii inhibitorilor cu Al3+ a artat o inhibare a

creterii cristalelor de hidroxiapatit. Ali cationi metalici care au artat c inhib

cristalizarea hidroxiapatitei, cum ar fi Fe3+, Ga3+ i Cd2+, pot fi folositori n aceeai
msur.

Exemple de calcifiere a unor dispozitive medicale

a) Calcificarea valvelor inimii
Calcifierea valvelor inimii este cel mai important exemplu al disfuncionalitii unui dispozitiv

medical datorit calcifierii biomaterialului.

Aproape toate valvele de inim bioprotetice recuperate n urma operaiilor prezentau fie

cateva picturi, fie erau rigidizate, datorit calcifierii intrinseci. S-a observat faptul c procesul
de calcifiere este mai pronunat n regiunile de ndoire ale vrfurilor, n punctele de tensiuni
maxime de funcionare ale valvelor. Calcifierea poate conduce la defectarea protezelor, ca
rezultat al disfunciunii valvei sau a deteriorrii peretelui aortic datorit depozitelor de
mineral. Se presupune c procesul de calcifiere a valvelor este condiionat de tipul de
procedur de sterilizare utilizat.
Degenerarea calcifierii valvelor bioprostetice

ale inimii, pretratate cu glutaraldehid este cel

mai important exemplu al disfuncionalitii
chimicea unui dispozitiv medical conducnd
la calcifierea biomaterialului.

Exemple de calcifiere a unor dispozitive medicale

b) Calcifierea vezicii urinare polimerice
Depunerea de cristale calcifiate pe suprafeele flexibile ale vezicilor limiteaz longevitatea

funcional ale pompelor de snge compuse din poliuretan i utilizate ca sistem de asisten
ventricular sau inimi artificiale.
Rigiditatea cauzat de depozitele de minerale poate duce la deteriorarea pompelor sau valvelor,

prin pierderea fiabilitaii sau iniierii picturilor, sau amndou. Calcifierea pompelor de snge, n
funcie de tipul de poliuretan utilizat, predomin n general de-a lungul zonelor de flexiune a
diafragmelor, la jonciunea diafragmelor, zona de flexiune a aprtorului sau diafragmei cilindrice
Calcifierea componentelor pompei de snge poate fi intrinsec sau extrinsec. Depozitele de calciu

sunt frecvent asociate cu defecte microscopice de suprafa, poate din fabricaie, ca rezultat al
tensiunilor mediului sau ca efecte mecanice, conducnd la fisurare.
S-a emis ipoteza c aceste defecte de suprafa pot servi ca locuri preferate pentru depozitele de

calcifiere la suprafeele polimerului. Dac celulele de snge degradate i componentele lor

subcelulare scap n aceste caviti microscopice devin calcifiate, procedeul numindu-se calcifiere
extrinsec.

Exemple de calcifiere a unor dispozitive medicale

c) Calcifierea n dispozitivele contraceptive intrauterine (IUD)

Calcifierea dispozitivelor contraceptive intrauterine a fost considerat principala cauz a

disfucionalitilor ce conduc n cele din urm la desprinderea dispozitivului sau la pierderea
contraceptivitii.

Acumularea de calciu pe dispozitivele de acest tip din cupru poate preveni formarea de ioni de

cupru, schimbnd astfel eficacitatea mecanismelor (dispozitivelor), din moment ce cuprul este un
element important pentru prevenirea concepiei. n mod analog, depozitele de calciu care se
interpun cu eliminarea unui agent activ pot fi de asemenea o problem pentru eliminarea de
hormoni a sistemelor IUD.
Studierea implanturilor extrase de IUD, folosind microscopia optic de transmisie asociat cu

analize microscopice de raze X, au artat c, n realitate, toate dispozitivele examinate variaz

privind depunerea de calciu. Dispozitivele IUD care funcioneaz pentru perioade mari de timp au
cantiti mai mari de depuneri, cu toate c acumularea de pe dispozitivele care elibereaz hormoni
de contracepie este mai mic

Exemple de calcifiere a unor dispozitive medicale

d) Calcifierea pe lentilele de contact
Depozitele de fosfat de calciu conduc la opacizarea lentilelor de contact, care sunt

confecionate din HEMA (poli-2-hidroxietimetilacrilat).

Calciul coninut de lacrimi este considerat ca fiind sursa depozitelor gsite pe lentilele

de contact confecionate din HEMA. Depozitele de calciu se mresc progresiv n timp,

iar ndeprtarea lentilelor devine imposibil fr distrugerea lor.

Nici un material destinat fabricrii lentilelor de contact, care este disponibil pn

acum, nu poate nltura aceast problem, cu toate c lentilele fabricate din metacrilat
poliglicerilmetilic se comport mult mai bine dect cele confecionate din HEMA.

n mod similar, condiiile sistemice i optice de mbuntire pot de asemenea ajuta n

identificarea la pacient a riscului de degradare a lentilelor i mbuntirea materialelor

de confecionare a lentilelor, cu intenia de a obine biomateriale mai rezistente la
procesul de calcifiere.

Exemple de calcifiere a unor dispozitive medicale

e) Acoperirea cu crust a endoprotezelor urinare
Dezvoltarea utilizrii endoprotezelor polimerice pentru a alina obstruciile urinare au

supus ateniei frecventele formri de cruste minerale pe suprafaa acestor dispozitive.

Aceste probleme au fost observate att la implatele pentru femei ct i la cele pentru
brbai, precum i n cazul uretrelor artificiale. Crustele pot duce la obstrucionarea
dispozitivelor urinare conducnd astfel la eecul lor.

Depunerea de cristale calcificate pe suprafeele flexibile ale implantelor ureterale limiteaz

longevitatea funcional a acestora. Calcifierea, n funcie de tipul de poliuretan utilizat,

predomin n general de-a lungul zonelor de flexiune, indicnd faptul c i factorii
mecanici influeneaz acest proces. Exist i ipoteza c defectele de suprafa pot servi ca
locuri preferate pentru depozitele de calcifiere la suprafaa polimerului.

Crustele minerale conin att hidroxiapatite ct i fosfai minerali cu coninut de amoniu i

magneziu.