– pentru ca lucrările de hibridare fortata să fie eficiente este
obligatoriu să se parcurgă câteva etape importante şi anume: •- alegerea genitorilor •- alegerea plantelor care participă la hibridare •- alegerea florilor și inflorescențelor •- toaletarea și izolarea florilor (inflorescențelor) castrarea florilor genitorului femel, polenizarea, controlul fecundării, repetarea polenizării dacă este cazul, recoltarea fructelor hibride. • SELECȚIA ÎN POPULAȚIILE HIBRIDE LA SPECIILE AUTOGAME – la această categorie de plante metoda de selecțe este selecția individuală repetată anual cu cele două variante ale sale: selectia genealogică și tardivă. • Selecția genealogică – constă in alegerea elitelor incepând cu generatia F2 cand are loc segregarea caracterelor și apoi urmărirea separată a descendențelor fiecărei elite. Dacă descendența unei elite este reprezentată de plante uniforme din punct de vedere morfologic înseamnă că există și homozigoție totală a genelor și în acest caz descendența respectivă va intra în câmpul de control și apoi va parcurge drumul prin toateverigile caracteristice selecției individuale simple adica: câmp de control, câmp de culturi comparative de orientare. Câmpuri de cultură orientate de concurs în stațiuni de ameliorare și din nou câmpuri comparative de concurs în rețeaua de omologare. • Dacă descendența unei elite prezintă exemplare neuniforme morfologic înseamnă că plantele sunt heterozigote pentru caracterele si insusirile pe care le urmărim și trebuie repetată alegerea elitelor. Se aleg în acest caz plantele viguroase, sănătoase, care manifestă valori ale elemnetelor de productivitate care corespund obiectivelor noastre. • Aceste elite vor fi urmărite în continuare separat și după aceeași logică, dacă vor da descendențe uniforme vor parcurge celelalte verigi ale procesului iar dacă descendențele nu sunt uniforme se va proceda la o nouă alegere a elitelor. Acest proces va dura până în F...F5 – F7 când este posibil să se ajungă la homozigotarea majorității caracterelor și însușirilor. • Selecția tardivă – presupune începerea alegerii elitelor mult mai târziu, după 5 – 7 generații, lăsând mai întâi plantele să se homozigoteze și apoi să se aleagă elite homozigote. CONSANGVINIZAREA • Reprezintă metoda de bază pentru crearea de noi surse de germoplasmă prin creşterea variabilităţii la speciile alogame. Metoda constă în autofecundarea forţată a speciilor monoice sau hermafrodite şi prin încrucişarea între indivizii înrudiţi proveniţi de la aceeaşi plantă la speciile dioice. • La speciile autogame, autofecundarea este un fenomen firesc şi nu afectează în nici un fel plantele respective, dimpotrivă la speciile alogame la care fenomenul de autogamie este de doar 3-4%, efectele autofecundării sunt foarte evidente. • În urma cosangvinizarilor repetate se obţin liniile cosangvinizate care prin încrucişarea între ele după o prealabilă verificare a însuşirilor acestora formează hibrizii la care se manifestă efectul heterozis. • Principala direcţie de utilizare a liniilor cosangvinizate o constituie obţinerea hibrizilor în vederea exploatării: efectul heterozis. În conformitate cu legea uniformităţii caracterelor în prima generaţie hibridă este posibil să întâlnim 5 situaţii şi anume: • -hibridul obţinut să se situeze prin caracterele şi însuşirile sale între cele 2 forme parentale (cea mai frecventă situaţie) • -să se apropie mai mult de genitorul matern • -să se apropie mai mult de genitorul patern • -să fie peste nivelul genitorului mai bun • -să fie sub nivelul genitorului mai slab. • Ultimele doua situaţii poartă numele de transgresiuni genetice şi se urmăreşte identificarea acestora în vederea extragerii elitelor care depăşesc genitorul cel mai bun. De la începutul secolului 20 s-au intensificat cercetările privind exploatarea efectului heterozis sub cele 2 aspecte ale sale: heterozisul somatic şi heterozisul generativ (reproductiv). • Aceste cercetări au condus la identificarea metodelor pentru găsirea celor mai bune combinaţii hibride în cadrul liniilor cosangvinizate. Simbolurile care se folosesc pentru diferite generaţii de cosangvinizare sunt: C0 sămânţa cu care se porneşte operaţia de cosangvinizare; C1 prima generaţie, C2 a doua, etc, până la C9, C10 cunoscut fiind ca după 9-10 generaţii de autofecundare se ajunge la homozigotarea totală pentru toate caracterele. • Efectele cosangvinizării – în urma autopolenizării forţate la speciile alogame se manifestă în fenotip unele efecte: reducerea vitalităţii, scăderea variabilităţii sau creşterea uniformităţii, desfacerea populaţiilor în biotipurile constituente. • Reducerea vitalităţii se manifestă chiar din prima generaţie de cosangvinizare şi afectează principalele caractere şi însuşiri ale plantei. Fenomenul este cunoscut sub numele de presiune de cosangvinizare şi se manifestă prin reducerea taliei plantelor, reducerea fertilităţii, reducerea productivităţii. • Acest efect depinde de la o specie la alta şi se manifestă timp de câteva generaţii până când se ajunge la un minimum de cosangvinizare. Depresiunea este cu atât mai puternică cu cât procentul de autogamie la specia respectivă este mai mic. • În funcţie de specie, la speciile multianuale efectul este mai redus, la speciile anuale, bienale efectul este mai puternic (la cucurbitaceae efectele sunt aproape nesemnificative pe când la varză sunt deosebit de puternice). • Încercând să explice acest efect, cercetătorii l-au pus pe seama homozigotării genelor recesive cu implicaţii majore asupra productivităţii. Reducerea vitalităţii este însoţită şi de alte efecte cum ar fi unele de deficienţe clorofiliene, apariţie de plante albinotice, apariţia de sectoare internervurale lipsite de clorofilă, anomalii florale, sterilitate, sensibilitate la diferite boli. • Scăderea variabilităţii sau creşterea uniformităţii – aceasta se manifestă prin uniformizarea materialului după câteva generaţii de consangvinizare uniformă determinată de gradul ridicat de homozigotare, astfel cu fiecare generaţie de autopolenizare, gradul de homozigotare creşte cu 50% faţă de anul anterior şi astfel se ajunge ca plantele să fie perfect uniforme şi aici fenomenul se manifestă diferit de la o specie la alta astfel: la ceapă uniformitate perfectă se întâlneşte după 3 generaţii, la sfecla pentru masă abia la a 8-a generaţie. • Desfacerea populaţiei în biotipurile constituente – cosangvinizarea duce la apariţia prin segregări şi recombinări a unor noi biotipuri stabile care pot fi identificate, izolate, înmulţite şi folosite pentru folosirea hibrizilor. Numărul maxim de linii homozigote care pot fi izolate dintr-o plantă alogamă este determinat de numărul genelor prezente în stare heterozigotă, astfel dacă planta iniţială este heterozigotă pentru 15 gene, prin cosangvinizare vor rezulta 215 linii homozigote diferite, adică 32768 linii. • Procesul de homozigotare se manifestă atât pentru genele dominante cât şi pentru cele recesive. De regulă homozigotarea genelor recesive duce la exteriorizarea evidentă a unor efecte dăunătoare pentru plantă făcând în aşa fel încât selecţia naturală să elimine aceste plante încă din primele generaţii de cosangvinizare. Astfel exemplarele care prezintă malformaţii, debilitate, nanism, sterilitate, fie sunt eliminate natural fie prin purificare biologică, prin selecţia în masă negativă le elimină amelioratorul. • Există şi cazuri rare când prin homozigotarea unor gene recesive se obţin unele exemplare rezistente la boli sau la factorii nefavorabili de mediu. Cele mai importante exemplare sunt cele homozigote dominante. • Obţinerea liniilor cosangvinizate – important este alegera germoplasmei care va fi cosangvinizată, aplicarea unor măsuri de îmbunătăţire a acesteia, măsurile fiind diferitele metode de selecţie recurentă care urmăresc doua grupe de efecte şi anume pe de o parte eficientizarea selecţiei pe de altă parte obţinerea de genotipuri superioare prin diverse combinaţii de gene din cadrul materialului avut la dispoziţie. • Selecţia recurentă se utilizează în 4 variante: • -selecţia recurentă pentru fenotip • -selecţia recurentă pentru capacitatea combinativa generală • -selecţia recurentă pentru capacitatea combinativa specifică • -selecţia recurentă reciprocă