Universitatea Stefan cel Mare Suceava

Facultatea: Inginerie Alimentara

Specializarea: Controlul si expertiza produselor alimentare

CROMATOGRAFIA DE GAZE
 CROMATOGRAFIA

Cromatografia grupeaz o variat i important grup de metode care

permit cercettorului s separe compui foarte asemntori din amestecuri
complexe. n toate separrile cromatografice proba este dizolvat ntr-o faz
mobil: gaz, lichid sau fluid supercritic. Aceast faz este frecvent numit eluent,
iar dup ce trece de captul coloanei se numete eluat.
Metoda cromatografic a fost descoperit de botanistul rus Mihail Tsvet, n
1906 i a fost folosit nti pentru separarea unor substane colorate pe coloan
sau ca eluate colorate. Dac substanele sunt incolore, prezena lor pe coloan
sau n eluate se recunoate prin alte metode [63].
Metodele cromatografice sunt bazate pe adsorbia amestecului de
substane (solid-lichid; lichid-lichid; gaz-lichid) pe un material adsorbant, urmat
de desorbia succesiv (cu ajutorul unui dizolvant adecvat eluant) a
componentelor din amestec.
Coloana de adsorbant poate fi nlocuit, n unele variante cu o foaie de
hrtie poroas preparat n mod special (cromatografie pe hrtie) sau cu un strat
subire de adsorbant fixat pe o plac de sticl, cu ajutorul unui liant
(cromatografie n strat subire).
Separarea compusului de analizat de potenialele interferene este unul
din paii eseniali n analiza chimic. Cromatografia este una dintre cele mai
frecvent utilizate metode pentru a realiza aceste separri analitice. Aplicaiile
cromatografiei cresc exponenial cu timpul, n mare parte datorit faptului c ea
i gsete aplicaii n toate ramurile tiinei. Este rapid, simpl, cu costuri relativ
reduse i variabilitate mare relativ la alegerea metodei de separare.

O analiz cromatografic se rezum n general la urmtoarele concepte

fundamentale:
proba este dizolvat n faza mobil;
faza staionar este cel mai frecvent un lichid adsorbit la suprafaa unor
particule de solid utilizate pentru a mpacheta coloana;
faza mobil este trecut peste faza staionar nemiscibil; aceasta se
numete eluie;
solutul care are o mare afinitate fa de faza mobil se va mica prin
coloan foarte ncet;
componenii probei se vor separa n benzi discrete vizibile la detector, i
rezult cromatograma.

Tipuri de cromatografii:

Sunt 5 categorii de cromatografii: de adsorbie, de partiie, cu schimb de

ioni, prin excluziune molecular si de afinitate.
Metodele de cromatografie pot fi de asemenea clasificate n dou moduri:
cromatografia planar i cromatografia pe coloan.
Ele sunt bazate pe interaciunea fizic, ceea ce nseamn c faza staionar i
faza mobil sunt n contact. n cromatografia pe coloan, faza staionar este
introdus n interiorul unui tub ngust i faza mobil este introdus n tub cu
ajutorul presiunii sau a greutii proprii. n contrast, cromatografia plan folosete
o faz staionar care este depus pe o suprafa plan sau n hrtie. Faza
mobil se deplaseaz prin faza staionar datorit aciunii capilare sau a greutii
 Cromatografia de lichide, gaze i de fluide supercritice sunt 3 clase
generale bazate att pe tipurile de faze mobile i staionare ct i tipurile de
echilibre implicate n transferul solutului ntre faze. Fazele mobile sunt gaze,
lichide i fluide supercritice. Fazele staionare variaz i tipul de echilibru este
dependent de alegerea acestei faze.

Cromatografia de adsorbie utilizeaz o faz staionar solid i o faz

mobil care este un lichid sau un gaz. Solutul poate fi adsorbit la suprafaa
particulelor solide, unde echilibrul dintre starea adsorbit i soluie produce
separarea moleculelor solutului.
n cromatografia de partiie faza staionar este un film subire pe
suprafaa unui suport solid. Solutul stabilete un echilibru ntre lichidul staionar i
faza mobil (lichid sau gazoas).
n cromatografia de schimb ionic anionii sau cationii sunt legai covalent
de o faz staionar solid, frecvent o rin sau o faz solid tare i amorf. O
faz mobil lichid este utilizat. Ionii solutului de sarcin opus sunt atrai de
faza staionar datorit forelor electrostatice.
Cromatografia de excluziune molecular este mai comun denumit de gel
permeabil sau de filtrare cu gel. Aceast tehnic separ moleculele dup mrime
i moleculele mari trec cu o vitez mai mare dect moleculele mici. Nu exist
interaciuni atractive. n loc, faza mobil gazoas sau lichid este trecut printr-
un gel poros, care exclude moleculele mari, dar nu i pe cele mici. Moleculele
mari curg peste fr a intra n gel, i ele elueaz primele [65].
Cromatografia de afinitate este bazat pe interaciunea ntre un tip de
molecule de solut i un al doilea tip, acestea legate covalent de faza staionar.
Cnd un amestec este trecut prin coloan, doar un tip de molecule de solut
reacioneaz cu moleculele legate i formeaz legturi la rin. Moleculele de
solut dorite sunt dislocate apoi de moleculele legate variind pH-ul sau tria ionic
a solventului .

Dupa starea fizica a fazei mobile departajam doua tipuri de metode: gaz-
cromatografia si cromatografia pe lichide.

Gaz-cromatografia (GC)

Gaz-cromatografia (GC), denumita si cromatografie gaz-lichid (GLC), este o

tehnica de separare in care faza mobila este un gaz. Aceasta metoda utilizeaza
intotdeauna o coloana care poate fi impachetata sau capilara, umpluta cu faza
stationara, pentru a prelungi cat mai mult drumul parcurs de faza mobila.
Gaz-cromatografia se bazeaza pe un echilibru partitionat al analitului intre
o faza stationara solida (de obicei, un material pe baza de silicagel sau siliconi) si
faza mobila gazoasa (de obicei, heliu). Faza stationara este fixata in interiorul
unui tub de sticla de diametru foarte mic (coloana capilara) sau pe o matrice
solida in interiorul unui tub larg de metal (coloana impachetata). In general, este
utilizata in chimia analitica la scara larga.
Datorita temperaturilor inalte folosite, care denatureaza proteinele si
biopolimerii de masa, moleculara mare are o aplicativitate foarte ingusta in
biochimie. Ea este insa foarte utilizata in petrochimie, monitorizarea mediului si in
ariile chimice industriale.
De asemenea, este foarte utilizata in cercetarea chimica. Pentru
identificarea analitului la iesirea din coloana, gaz-cromatograful poate fi cuplat cu
un spectrometru de masa sau cu un spectrometru in infrarosu.
Cromatografia pe lichide

Cromatografia pe lichide (LC) este o tehnica de separare in care faza

mobila este un lichid. Transportul fazei mobile se poate face pe coloana sau in
strat subtire. Pe coloana, inaintarea eluentului se poate face gravitational sau
actionat cu presiune.
Astfel, in prezent, cromatografia pe lichide foloseste particule foarte mici pentru
umplutura coloanei, actionandu-se cu presiune pentru inaintarea fortata a
eluentului si se numeste cromatografie de lichide de inalta performanta (HPLC).
Mai pe larg, in HPLC, proba este fortata printr-o coloana cu particule sferice sau
de forma neregulata sau printr-un strat poros monolit (faza sta)ionara). Proba
este deplasata de un lichid (faza mobila) la inalta presiune.
In functie de polaritatea fazelor mobile si stationare, HPLC este divizata in
cromatografie de lichide in faza normala NPLC (faza stationara, ex. silicea,
este mai polara decat cea mobila, ex. toluenul) si opusul, cromatografie de
lichide in faza reversibila RPLC (faza stationara, ex. C18-octadecilsilan, si faza
mobila, ex. amestec apa-metanol). In mod ironic, NPLC are mai putine aplicatii
decat RPLC.

CROMATOGRAFIA DE GAZE

Generaliti

Prin cromatografie de gaze pot fi anlizate toate amestecurile de lichide

gaze sau solide care pot fi trecute sau exist n stare gazoas i care nu se
descompun la nclzire n alte specii chimice.
Modul cel mai uzual de analiz este acela n care amestecurile supuse
analizei snt n stare lichid din care snt aduse n stare gazoas prin evaporare .
 La cromatografia cu gaze proba este evaporat la intrarea n coloana
cromatografic fie direct la captul acestei fie ntr-un dispozitiv special plasat tot
la intrarea n coloan. Separarea de-a lungul coloanei (eluia) are loc cu
ajutorul unui gaz purttor care spre deosebire de cromatografia de lichide nu
interacioneaz cu faza mobil , singurul lui scop fiind acela de agent de
transport a speciilor chimice din amestec prin coloan.

nceputurile Cromatografiei de gaze snt legate de coloane cu umplutur

n care se transfera amestecul de substane gazoase dup ce n prealabil erau
evaporate spontan ntr un injector nclzit.
La ora actual este folosit n exclusivitate numai cromatografia de gaze
cu coloane fr umplutur la care se deosebesc dou tipuri:
- cromatografia de gaze pe faze staionare solide (cromatografie de
absorbie)
- cromatografia de gaze pe faze staionare lichide (cromatografie de
repartiie)
La cromatografia de gaze pe faze staionare solide retenia speciilor de
analizat din amestec este realizat pe baz de absorbie fizic pe peretele
interior al coloanelor cromatografice ce au diametre interioare de zecimi de
milimetrii i lungimi apreciabile de ordinul zecilor de metrii. Din cauza unor
absorbii ireversibile, care duc la rndul lor reproductibiliti slabe, aceast tehnic
este folosit rar i numai la substane cu puine molecule n structur.
Cromatografia de gaze pe faze staionare lichide se bazeaz pe repartiia
substanei de analizat ntre faza mobil gazoas i o faza lichid imobilizat pe
peretele interior al coloanei cromatografice. Acest tip de cromatografie de gaze
este folosit la ora actual aproape n exclusivitate.
Relaiile matematice care o descriu snt valabile cu mici modificri i la
cromatografia de lichide, aceste modificri snt dictate de faptul c gazele snt
compresibile i ca atare proprietile i comportarea reologic snt influenate de
presiune i de temperatur. Din acest motiv la cromatografia de gaze este
folosit n locul timpului de retenie tr volumul de retenie Vr care ine cont de
debitul mediu Q al fazei mobile exprimat n ml/min, debit ce depinde de
presiune i de temperatur : Vr= tr .Q (1)
Spre deosebire de cromatografia de lichide viteza fazei mobile are o
influen
mare asupra lirii de band ( vezi i cap. Cromatografia de lichide) influena2
difuziei longitudinale fiind important dtorit coeficientului de difuzie mai ridicat cu
3-4 ordine de mrime la gaze fa de cel al lichidelor.

Aparate folosite n gazcromatografie

Un gazcromatograf respect schema bloc din figura avnd particulariti

specifice pentru analiza unei faze gazoase schema lui de principiu arat ca n
figura de mai jos:

Schema de principiu a unui gazcromatograf. 1-butelie de gaz purttor, 2-reductor de presiune, 3 -

manometru de nalt presiune, 3- manometru de joas presiune, 5- regulator de presiune i debit,
6- sering de injecie pentru substane de analizat n stare iniial lichid, 7-dispozitiv de
evaporare rapid , 8-cuptor termostatat de nclzire, 9- coloan cromatografic tubular, 10-
detector, 11- amplificator electronic, 12- sistem electronic de achiziie prelucrare i afiare
date, 13 calculator, 14- imprimant.
Alimentarea cu gaz purttor

Gazul purttor trebuie s fie inert din punct de vedere chimic. Din acest
punct de vedere intr n discuie gazele inerte, hidrogenul, azotul i bioxidul de
carbon. Natura gazului utilizat depinde de tipul de detector folosit , iar acesta
depinde la rndul lui de mai muli factori dar n principal de clasa de substane
analizate.
Gazele purttoare de nalt puritate snt preluate de regul din butelii
speciale de nalt presiune prevzute cu reductoare de presiune ce asigur
presiuni de intrare cuprinse ntre 1,5 i 3 ata, dar pot fi produse i pe loc cu
generatoare speciale ( hidrogen, azot).
Pe traseul gazului purttor se gsete un debitmetru electronic precum i
o sit molecular pentru reinerea vaporilor de ap i a eventualelor impuriti
solide de dimensiuni mici.

Sistemul de injecie

Caracteristicile sistemului de injecie asigur n mare parte calitatea

analizelor cromatografice, fiind responsabile de lirea de band a peak-urilor.
Un sistem performant de injecie trebuie s asigure injecia n timp scurt a
unor cantiti extrem de mici de subsatan de analizat numai aa snt asigurate
peakuri 4 nguste la baz. Extragerea probei se face dintr-un minirecpient
cilindric de sticl aezat pe suportul mobil a autosamplerului prin intermediul unei
microseringi speciale acionat automat.
Acul seringii perforeaz un dop de cauciuc siliconic sau i absoarbe o
cantitate bine definit de prob, figura 2, dup care se ridic automat , se
deplaseaz i injecteaz proba printr-un semptum prevzut cu un dop de
cauciuc siliconic ntr-un dispozitiv de evaporare rapid situat la intrarea n
coloan. Este foarte important ca evaporarea s se produc practic instantaneu
astfel nct amestecul fazei purttoare cu substana de analizat s se produc
chiar la baza coloanei cromatografice.
Volumul unei probe analizate pentru coloane analitice normale variaz de
la civa l la cca 30 l, la coloane capilare volumul probei este mult mai mic de
ctiva nl fiind necesar folosirea unui sistem de splitare ( divizare), figura 3, a
volumului probei sistem care asigur preluarea pentru analiz numai a unui
volum extrem de mic restul fiind purjat n mediu. Aceste sisteme de splitare snt
n principiu divizri de debit cu tuburi de tip T, existente att pe traseul gazului
purttor ct i pe cel al
amestecului gazos, pe ale crori ramuri se creaz rezistene hidraulice bine
controlate astfel nct s poat fi purjat cea mai mare parte din substana de
analizat, pe coloan ajungnd numai o parte infim de amestec i gaz purttor
aa cum de altfel este necesar.
Manipularea a unor cantiti mici de prob, aa cum este cazul la
gazcromatografie, pe cale manual duce la erori importante motiv pentru care
pentru dozare i injecie snt recomandate dispozitive de tip autosampler.
Fazele de injecie ale amestecului lichid de analizat

dou procedee de splitatare a volumului probei la cromatograful de gaze

3- tub de evaporare cu dop de vata de sticl sau de cuar , 4 corpul
dispozitivului de injecie , 5- ventil cu 3 ci, 6- ventil cu ace cu debit
reglabil

Coloane cromatografice
 Termenul de coloan cromatografic este oarecum impropriu pentru
cromatografia de gaze, el provine inc din timpul n care se foloseau coloane cu
umplutur de lungimi rezonabile care ncpeau n gazcromatograf sau care erau
montate n poziie vertical lng aparat avnd o termostatare concentric.
Diametrul interior al coloanelor cu umplutur pentru gazcromatografie este
de 4,6 mm, 3,18 mm sau la aa numitele coloane micro <1mm. Acest tip de
coloane este astzi extrem de rar folosit din cauza faptului c au o capacitate de
separare redus i o rezoluie slab. Astzi snt folosite cu precdere

coloane capilare care se prezint sub forma unor tuburi metalice de cupru , oel
inoxidabil sau din sticl cele din urm fiind trase ntr-un film de poliamid sau de
aluminiu pentru a le mri rezistena mecanic la incovoiere.
Coloanele capilare snt goale, au diametre interioare submilimetrice i lungimi
de zeci de metrii putnd depi i o sut de metri. Coloanele capilare au
capacitate de separare i rezoluie mare n schimb din cauza cantitilor extrem
de mici de substan analizat au au o limit de detecie sczut i un timp de
analiz mai ridicat.
Din cauza volumului extrem de mic necesar ntr-o coloan capilar , de
ordinul l, ale amestecului gazos de analizat nainte de intrarea n coloana
cromatografic se folosete splitarea (divizarea) probei ,prin aceast operaie
numai o mic parte a acesteia, la limita dozrii volumice, este admis n colan
cealalt parte fiind purjat n atmosfer. Aceast cantitate emic de substan
analizat este motivul limitei de detecie mai sczute. Att coloanele cu umplutur
ct i cele capilare pot funciona n regim de cromatografie de absorbie (gaz-
solid) sau n regim de cromatografie de repartiie (gaz - lichid).
La folosirea coloanelor cu umplutur pentru cromatografia de absorbie
umplutura este format dintr-un absorbant foarte fin, iar la cromatografia
de repartiie umplutura este format dintr-un material poros a crui
suprafa este impregnat cu o faz lichid staionar.
Tipuri de coloane utilizate n gazcromatografie. a- coloane cu umplutur pentru
cromatografia de absorbie, 1-perete coloan, 2-umplutur poroas . b-coloane cu
umplutur pentru cromatografia de repartiie, 1-perete coloan, 2faz staionar lichid
depus pe umplutur, 3-umplutur. c-coloan capilar cu film lichid subire, 1-perete
coloan, 2-film lichid , d-coloan capilar cu strat subire impregnat cu lichid, 1-perete
coloan, 2- film lichid, 3-strat granular subire.

La folosirea coloanelor capilare se deosebesc coloane cu film i capilare

cu strat. La coloanele capilare cu film faza staionar ader sub forma
unui film subire de peretele interior neted al coloanei capilare iar la coloanele
capilare cu strat, figura, faza stationar este aplicat sub forma unui strat
subire de diatome impregnat cu faza lichid staionar.
n cadrul cromatografiei de gaze snt valabile tot relaiile stabilite la
ceromatografia de lichide cu condiia ca influena temperaturii i a presiunii s
fie redus la maxim. n acest scop procesul de sparare n coloan trebuie s fie
izoterm iar trecerea amestecului n faz gazoas ct mai rapid posibil.
Pentru alegerea corect a unei coloane pentru gazcromatografie este
nevoie s se in cont de urmtoarele:
- proprietile negative ale unei coloane ( cost, timp de analiz, absorbie
rezidual) snt proporionale cu lungimea crescnd deci cu creterea acesteia
- singura proprietate pozitiv a coloanei i anume capacitatea ei de
separare crete abia cu ptratul lungimii coloanei, acesta fiind i motivul
folosirii unor coloane de lungime medie de 20 -30 m n locul unor lungimi ce pot
depi 100 m. Afar de aceasta la coloane scurte scade timpul de analiz i
absorbia rezidual deoarece ea este proporional cu lungimea drumului parcurs
de faza mobil n mediul absorbant
- Atunci cnd se solicit o separare avansat se vor folosi coloane de lungime
mare cu recomandarea ca drept gaz purttor s se foloseasc hidrogenul
deoarece se reduc sensibil timpii de analiz. Trebuie avut n vedere c aici crete
timpul de analiz
- Reducerea timpului analiz prin mrirea presiunii iniiale a gayului purttor duce
la reducerea capacitii de separare a coloanei capilare

Cuptoare de termostatare

Temperatura coloanei este un parametru esenial pentru gazcromatografie

deoarece ea provoac practic gradientul de presiune ce transport gazul prin
coloan. Creterea temperaturii duce la creterea exponenial a presiunii
amestecului gazos care la rndul ei duce la creterea vitezei de migrare reducnd
sensibil timpul de retenie. n general se consider c o cretere a temperaturii
cu cca 300C duce la reducerea la jumtate a timpului de retenie.
n realitate nu intereseaz viteza absolut de migrare ci viteza relativ de
migrare vr ca fiind raportul dintre viteza medie vma liniar a substanei analizate
raportat la viteza medie vmg a gazului purttor:mg ma v v v r = (2) valoarea
vitezei relative de migrare se situeaz ntre 0 i 1, ceea ce nseamn c la
valoarea zero nu are loc nici o migrare, temperatura fiind prea mic, iar la
valoarea 1 nu are loc nici o separare deoarece amestecul de de analizat
traverseaz coloana cu aceei vitez cu gazul purttor nefiind reinui difereniat
n timp diferiii componeni. Care valoare intermediar ntre zero i 1 este optim
depinde n mare parte de dificultatea separrii. Temperatura optim a coloanei
depinde de temperatura de fierbere i de gradul de separare. Pentru amestecuri
a cror temperatur de evaporare se situeaz ntr-un domeniu destul de apropiat
se poate spune cu o apreciere relativ bun c o temperatur egal sau ceva mai
mare dect temperatura medie de evaporare a probei duce la un timp de eluie
apreciat de cca 4-30 minute ceea ce reprezint valori acceptabile. Dac se
folosete acest raionament se apeleaz la regimul de lucru izoterm (temperatura
coloanei constant).
In cadrul lucrului n regim izoterm valoarea temperaturii trebuie meninut
constant n limitele 0,1 0C motiv pentru care coloana se gsete ntr-un cuptor
termostatat . n cazul unor probe cu un interval mare de fierbere este de dorit s
fie folosit un program de temperatur n cadrul cruia temperatura este crescut
fie n mod continuu fie n trepte .
La injecie proba se gsete la temperatura cea mai sczut optim
pentru componentele volatile dar necorespunztoare pentru componentele cu
temperatur de vaporizare mare. n timpul analizei temperatura este crescut
progresiv pn cnd se obine n final temperatura corespunztoare
componentelor volatile. n cadrul programelor de temperatur nu trebuie depit
ns temperatura care duce la valorii mai mari de 1 a vitezei relative de migrare
vr.

Detectoare pentru gazcromatografie

Caracteristicile detectoarelor

La ieirea din coloana gascromatografice exist condiii optime de

msurare pentru multe tipuri de detectoare deoarece aici ies pe rnd substane
gazoase pure cu o diluie ideal realizat cu un gaz inert. Pentru identificri
calitative este indicat folosirea de spectrometre la ieirea gazcromatografelor.
Cele mai utilizate combinaii snt: gazcromatograf- spectrometru de mas ( GC-
MS) sau gazcromatograf- spectrometru n infrarou cu transformat Fourier (GC-
FTIR).
 Pentru analiza cantitativ a probelor ( probe a cror compoziie calitativ
este deja cunoscut) s-au impus cteva detectoare utilizate la ora actual la
scar mare acestea se clasific dup principiul lor fizic n:
- Detectoare sensibile la variaie de concentraie
- Detectoare sensibile la variaie de debit masic
La detectoarele sensibile la variaie de concentraie semnalul electric al
detectorului este proporional cu concentraia momentan a substanei (i) din
volumul din imediata vecintate a detectorului. La un detector sensibil la variaie
de debit masic semnalul electric al detectorului este proporional cu debitul
masic (Mi), adic cu masa de substan ce trece n unitatea de timp prin dreptul
detectorului.
Detectoare sensibile la variaia de concentraie snt influenate de
debitul de gaz purttor motiv pentru care debitul de gaz purttor trebuie reglat
automat n vederea meninerii constante a valorii lui. Influena debitului de gaz
purttor nu se manifest la detectoarele sensibile la variaie de debit masic.
Sensibilitatea S a detectorului reprezint nivelul de conversie a mrimii fizice
neelectrice ntr-o mrime electric proporional. La detectoarele sensibile la
variaie de concentraie sensibilitatea detectorului este dat de raportul dintre
semnalul electric Ei i concentraia substanei i din gazul purttor, iar la
detectoare sensibile la variaie de debit masic sensibilitatea este dat de raportul
dintre semnalul electric Ei i debitul masic Mi - mas n unitate de timp).
Prin nregistrarea semnalului electric al detectorului (potentialul electric E-
mV sau curentul electric I-mA) n funcie de timp se obine cromatograma. Un
detector nu d numai un semnal electric util ci conine i componente duntoare
sau parazite precum: abateri, zgomot de fond , drift (plaj de variaie) care pot
duce la erori importante de msurare. Abaterile periodice i au originea n
reglrile periodice automate ale temperaturii i debitului gazului pe cnd oscilaii
neperiodice trebuie puse mai ales pe seama coloanelor de separare inclzite
incomplet sau murdare. Zgomotul de fond are frecven ridicat este specific
fiecrui detector i electronicii sale aferente i se manifest mai ales atunci cnd
amplificarea electronic a semnalului este mare.
 Componentele parazite din semnalul electric se determin n felul urmtor:
din semnalul nregistrat al detectorului n funcie de timp se alege ntimpltor un
interval de 15 minute si se traseaz pe ambele pri ale liniei de baz a
semnalului dou linii paralele n aa fel nct aceste linii s ating tangenial intr-
un interval de cca 10 minute peak-urile (virfurile) a cele mai mari.
Drift-ul este definit ca fiind nclinaia celor dou linii paralele fa de
abscis. Abaterile snt definite ca distana ntre cele dou linii. Pentru stabilirea
mrimii zgomotului de fond se alege intervalul de un minut care prezin cel mai
mare zgomot. Nivelul zgomotului de fond se determin prin mrimea distanei
ntre cele dou linii paralele ce unesc vrfurile semnalului de zgomot.

Componente duntoare ale semnalului electric al detectoarelor

Limita de detectare Ld reprezint o msur a concentraiei mg/l sau a

debitului masic g/s celor mai mici a substanelor analizate nc detectabile de
un senzor cromatografic: Pentru descrierea capacitii unui senzor folosit n
cromatografie se folosete exclusiv limita de detectabilitate i nu sensibilitatea
lui. Limita de detectabilitate se determin din raportul dintre nivelul tuturor
semnalelor parazite p raportat la sensibilitate S:
Ld =p/S (3)
 Numai atunci cnd diferena E ntre valoarea mrimii msurate i valoarea
medie a unei analize oarbe este de trei ori mai mare dect abaterea standard
(s) ( vezi i cap ) a tuturor semnalelor parazite p se poate susine cu o
siguran de 99% c c un punct de msurare oarecare P de pe cromatogram
reprezint un punct a semnalului util i nu a componentelor parazite ale
semnalului. La acest raionament se iau n calcul numai abaterile pozitive ale
Peak-urilor de la valoarea medie ( jumtatea semnalului de eroare).

caracteristicile semnalului detectorului

Acest concept teoretic , dealtfel perfect valabil, este modificat n practica

cromatografic n sensul c se iau n considerare att abaterile pozitive ct i cele
negative , msurtorea fcndu-se vrf vrf. Din aceste msurtori ar rezulta
prin mprire un factor f , (f = 1,5 (n loc de 3) pentru distana punctului de
msurare P de la valoarea median a semnalului de abatere . de regul pentru
calculul limitei de detectabilitate Ld se fololosete un factor f =1,2 2:
Ld = (1,5...2) semnal de abatere /Si (4)
Ld = (5...10) semnal de abatere /Si (5)
n conformitate cu alte standarde snt folosite i alte valori pentru factorul f, de ex
IUPAC recomand f = 3.
 Limita de determinare real Ldet reclam valori mai mari pentru (f) dect
n cadrul limitei de detectare, astfel valoarea acestuia trebuie s fie cuprins
ntre 5-10 corespunztor cu sigurana statistic cerut pentru rezultatul
msurtorilor.
Constanta de timp () a unui detector cromatografic, inclusiv a electronicii
aferente, reprezint timpul care trece din momentul iniierii msurtorii pn n
momentul n care este indicat 63,2% a ntregului semnal. Dup (5) se obin
99,3 % a ntregului semnal

Influena consatantei de timpt asupra timpul de rspuns t

Selectivitatea unui detector Si,j descrie sensibilitile diferite pentru

dou materiale diferite i i j. Selectivitatea Si,j este indicat ca fiind raportul
sensibilitii detectorului pentru cele dou substane:
Sij= Si/Sj (6)
Dac sensibilitatea pentru substana j se apropie de valoarea unu detectorul
este specific pentru substana i, (Si = )
Domeniul liniar al unui detector, figura 8, reprezint domeniul unde
sensibilitatea Si este constant . n partea de jos domeniul liniar este limitat prin
limita de detectabilitate Ld. n partea de sus prin o abatere tolerat de 5% de la
dreapta ideal de liniaritate.
Pentru exemplificare grafic a domeniului liniar se
reprezint n coordonate dublu logaritmice suprafaa peak-ului Ai sau a
semnalului detectorului Ei n funcie de cantitatea mi a probei, concentraia Ci
respective fa de debitul masic Qmii, figura a., [BK 99] Intr-un alt tip de
reprezentare folosit se reprezint sensibilitatea Si n funcie de cantitatea de
prob folosit mi, n funcie de concentraia Ci sau n funcie de debitul masic
Qmii, figura b.Valoric domeniul liniar se exprim prin raportul dintre limita
superioar a domeniului liniar i limita de detectabilitate, este obligatorie i
indicarea naturii substanei analizate i.
Domeniul dinamic al detectorului este plasat n continuarea domeniului liniar i
reprezint domeniul n care o modificare a concentraiei sau a debitului masic
mai provoac o modificare sensibil i posibil de calibrat a semnalului
detectorului, figura a,b.

Domeniul liniar (a) i domeniul dinamic (b) al unui detector folosit n cromatografie
Detectorul de ionizare cu flacr ( FID)

Detectorul de ionizare cu flacr este un detector folosit pentru

substane organice ( hidrai de carbon) ce are aplicaia de baz la cromatografele
de gaze deoarece mbin o sensibilitate ridicat cu robusteea.
Un detector de ionizare cu flacr este de cca 1000 ori mai sensibil dect
un detector de conductivitate termic. Alte domenii de aplicare ale acestui
detector snt la supravegherea apelor privind prezena de hidrocarburi volatile
precum i la supravegherea polurii atmosferei i a aerului din spaii interioare cu
hidrocarburi gazoase. Principiul detectorului se bazeaz pe msurarea
conductivitii electrice unei flcri de hidrogen plasat ntre doi electrozi.
Substanele de analizat snt transportate n flacr cu un gaz purttor
unde snt ionizate termic datorit aportului de cldur din flacr. n felul acesta
n cmpul electric dintre cei doi electrozi apare un curent ionic msurabil care
este nregistrat n funcie de timp de ctre nregistrator sub form unor vrfuri
(Peak-uri) cu aplicaii n analiza chimic calitativ. Intensitatea semnalului electric
al detectorului (nlimea maxim al Peak-ului) este liniar i proporional cu
coninutul de hidrocarbur ntr-un domeniu foarte larg de concentraie , cu
aplicaii n analiz cantitativ.
Din acest motiv concentraia unei hidrocarburi poate fi determinat direct
din semnal fr a se folosi curbe de etalonare.
Unele substane organice ( de ex. acidul formic, acetaldehida) au
detectabilitate slab . Alte substane precum: gazele nobile, H2 , N2, NO2 , CO,
CO2 , H2O , CS2 , NH3 , 02 , CCl4 sau alte legturi de halogen , halogenuri de
siliciu
Schema de principiu a detectorului gazcromatografic de tip FID. 1-areztor, 2-flacr de
hidrogen, 3,4- electrozi colectori de electroni, 5 amplificator electronic, 6- sistem
electronic de prelucrare i afiare

Sistemul cromatospectrometric prezentat in figura 10 permite

determinarea concomitent a compoziiei calitative i cantitative moleculare
precum i a celei calitative i cantitative atomice din amestecuri complexe de
gaze.
n acest scop este folosit un gazcromatograf echipat cu detector FID
dispozitivat cu o structur spectrometric modular format dintr-o sond,
compus la rndul ei dintr-o lentil colimatoare, o fibr optic, un spectrometru
miniatural compact echipat cu reea de difracie fix , detector Diode- Aray, soft
pentru prelucrare informaii spectrale de emisie atomic precum i un sistem de
procesare, afiare i tiprire spectre.
Sonda se monteaz perpendicular pe direcia de ardere a flcrii de
hidrogen i valorific emisia spectral a atomilor elementelor chimice excitate n
flacra de hidrogen la cca 3.000 0C. Informaia spectral ajunge prin lentila
colimatoare i fibra optic pe reeaua de difracie a unui spectrometru miniatural,
iar dup difracie, pe un detector Diode-Array care mpreun cu microprocesorul
spectrometrului furnizeaz spectrograma de emisie atomic a speciilor chimice
elementare (elemente chimice) prezente in amestecul de gaze analizat.
Sistem combinat cromatospectrometric. 1-gazcromatograf, 2- detector de ionizare, 3-
sistem de adaptare pentru sonda optic, 4-flacr de hidrogen, 5-lentil colimatoare din
sticl de cuar, 6- fibr optic de transmisie, 7-spectrometru cu reea de difracie i
detector Diode- Array, 8- sistem de procesare afiare i tiprire spectre

Detectorul pentru compui de azot i fosfor (NPD)

Detectorul pentru azot i fosfor este un detector modificat de tip FID care
conine o surs alcalin de silicat sub forma unei perle din sticl sau ceramic
dopat cu elemente alcaline, precum K,Rb,Cs, ce elibereaz uor electroni.
Perla alcalin este fixat pe o srm de platin ntre flacra de hidrogen i
electrozii colectori de electroni ai detectorului, figura fiind nclzit att pe cale
electric prin srma de platin pus sub tensiune ct i prin flacra de hidrogen,
n jurul ei formndu-se un nor termic plasmatic care prin norul de electroni emii
are totdeauna sarcina negativ fa de sarcina pozitiv a electrozilor colectori .
Detectorul NPD poate fi folosit n dou moduri:
- ca detector de fosfor (P)
- ca detector de azot (NP)
n cazul utilizrii lui ca detector de fosfor , flacra de hidrogen arde ca la
detectorul FID deasupra arztorului cu deosebirea c arztorul este legat la
pmnt, figura, deoarece electronii rezultai din arderea unor componente ce
conin atomi de carbon , electroni ce constituie semnalul electric la un detector
FID , snt respini n acest caz de potenialul negativ al perlei scurgndu-se la
mas, n schimb electronii ce iau natere pe suprafaa perlei alcaline , al cror
numr este proporional cu concentraia de fosfor, ajung nestingherii la electrozii
colectori formnd semnalul electric al detectorului.
n ce privete mecanismul propriuzis de reacie trebuie artat c la
nceput se formeaz n flacr oxizi de fosfor cu un numr impar de electroni ,
prin fixarea a electronului impar se formeaz n prima faz anionii diferiilor acizi
fosforici care n flacr snt oxidai n flacr cu radicali OH la acizi neutrii de
fosfor , a) b) ocazie cu care electronul fixat este eliberat i se constituie n
semnalul electric al detectorului.
La folosirea detectorului pentru compui de azot mecanismul este asemntor ca
la fosfor deoarece i i azotul are un numr impar de electroni care duce la
formarea de oxizi numai c acetia se descompun prea repede i nu
reacioneaz cu perla alcalin . Dac n schimb se scade regimul termic de
nclzire al perlei se formeaz radicali cian care dau reacie alcalin specific .
Pentru a reduce regimul termic se micoreaz debitul de hidrogen la
un nivel de cca 1-3 l/min i cel de aer la cca 100 l/min, condiii n care flacra
de hidrogen se stinge iar aportul slab de hidrogen existent , ca urmare a
reducerii debitului acestuia, duce la aprinderea lui n jurul perlei sub forma unui
nor plasmatic slab . Radicalii cian formai prin piroliz termic fixeaz un
electron iar anionii CN- formai reacioneaz cu hidrogenul respectiv cu
radicali OHo cu formare de compui neutrii de tip CO2, H2O, N2 cu eliberarea
unui electron ce se constituie , aa cum s-a mai artat, n semnalul detectorului .
Detectorul azot - fosfor este un detector selectiv putnd fi folosit n
principiu pentru toate elementele care au un numr impar de electroni , inclusiv
pentru compui volatili de bor i arsen , utilizarea lui de baz este totui cea
pentru compui fosfor i azot n regimul de lucru N-P, figura11 b. n regimul de
lucru numai pentru fosfor (regimul P) detectorul este selectiv pentru compui de
fosfor dar are sensibilitatea mai redus ca n regimul de lucru N-P. Un mod de
lucru numai pentru azot (regim de lucru de tip N) nu este posibil fiind indicate
alturi de compui de azot totdeauna i compui de fosfor , bineneles dac
acetia snt prezeni n amestecul de subsatane analizate

Schema de principiu a detectorului pentru: a- fosfor (P), b- azot i fosfor (N-P). 1-

arztor, 2- flacr de hidrogen, 3,4 electrozi colectori de electroni, 5-perl alcalin, 6-
plasm, 7- amplificator electronic, 8-sistem electronic de prelucrare i afiare

Detectorul de conductivitate termic

Detectorul de conductivitate termic este unul din cele mai vechi

detectoare folosite n cromatografie. El se bazeaz pe msurarea continu a
conductivitii termice a amestecului de gaze compus dintr-un gaz purttor i
amestecul gazos de analizat. Conductivitatea termic este o mrime fizic
specific naturii i concentraiei substanelor. Amestecuri de gaze de compoziii i
concentraii diferite ce scald cei patru rezistori nclzii ai punii Wheatstone
modific proporional cu natura i cu concentraiilor substanelor rezistena
acestor rezistori ducnd la apariia unei tensiuni de dezechilibru a punii.

Schema de principiu a unui analizor de gaze bazat pe principiul punii

Wheatstone. 1- amplificator electronic, 2- sistem electronic de achiziie , prelucrare i
afiare, R1,R2, R3, R4 - rezistori din platin nclzii electric

Detectorul de conductivitate termic este format dintr-un bloc metalic

compact bine termostatat n care se gsesc patru celule de gaz identice
prevzute cu filamente de platin sau de wolfram , sub form de srm, legate
electric ntr-o punte de tip Wheatstone. n detector se realizeaz o msurare
comparativ de compensaie. n acest scop prin dou celule, situate pe dou
laturi opuse ale braelor punii, trece gazul purttor pur, iar prin celelalte dou
brae ale punii trece gazul purttor n amestec cu gazele pentru analizat.
Toate filamentele snt parcurse de un curent electric care provoac
nclzirea acestora prin efect Joule-Lenz. Temperatura srmelor i prin aceasta i
rezistena lor electric depinde de conductivitatea termic a gazelor ce trec prin
celule.
 Modificri ale compoziiei gazelor provoac prin conductivitile lor
termice specifice modificri corespunztoare de temperatur i prin aceast
modificri ale rezistenei electrice a filamentelor de srm. Diferenele de
temperatur a filamentelor n celulele de msurare i n celulele de referin duc
la un dezechilibru electric msurabil al punii Wheatstone. Timpul la care se
produce acest dezechilibru este proporional cu natura substanei care
traverseaz la acel moment dou brae opuse ale punii , iar valoarea
dezechilibrului este proporional cu concentraia acelei substane din amestecul
de gaze.
Detectorul de conductivitate termic este un detector universal, utilizabil la
aproape toate substanele, singurele ngrdiri snt la substane puternic corozive
care distrug filamentele, dar are o sensibilitate destul de sczut.

Detectorul cu capcan de electroni (ECD)

Detectorul cu capcan de electroni (ECD engl. Electron Capture

Detector), este un detector specific pentru gazcromatografie folosit n analiza
substanelor sulfuroase, substanelor cu azot i a substanelor halogenate ( ex.
PCB, Lindan, etc). Aplicaiile de baz snt n analiza urmelor i n chimia
mediului.
Detectorul este format dintr-o camer de ionizare ce conine un catod
i un anod i un flux continuu de gaz. Pentru ionizare snt folosite radiaii ()
emise de o surs radioactiv sub forma unei folii foarte subiri al izotopului Ni63,
sursa de radiaii constituie totodat i catodul.Descompunerea radiaiei () duce
la emisia de electroni primari care se ciocnesc cu moleculele (N2) ale gazului
purttor i ca urmare iau natere ioni N2 ncrcai pozitiv i electroni secundari
liberi. Prin aplicarea unei tensiuni ntre cei doi electrozi apare un cmp electric
prin care electronii secundari liberi se deplaseaz spre anod unde produc un
curent electric de civa nanoamperi numit curent de ionizare de baz. Dac n
amestecul de gaze este un gaz cu afinitate mare fa de electroni atunci aceast
substan colecteaz o mare parte din electronii liberi ceea ce duce la
micorarea curentului de ionizare de baz. Aceast micorare afecteaz
proporional curentul de baz i reprezint semnalul util al detectorului.
Detectorul cu capcan de electroni reacioneaz la substane cu afinitate
de electroni cum snt de exemplu substane halogenate precum i anumite
pesticide. Sistemul clasic cu msurarea curentului de ionizare de baz, descris
mai sus, are dezavantajul unui domeniu liniar redus, motiv pentru care n aparate
moderne se folosete alt sistem de lucru. Astfel se aplic un impuls de tensiune
cu frecven variabil . n momentul n care exist semnalul de tensiune (0,5 pn
la 1s), electronii care nu au reacionat cu substanele amestecului de gaze din
gazul purttor snt colectai de anod.
Timpii de pulsare a semnalului electric se aleg aa de scuri pentru ca ionii
grei, rezultai ca urmare a absorbiei de electroni, s nu poat ajunge la anod.
Frecvena semnalelor electrice aplicate nu este constant ci modificat
continuu n sensul asigurrii unei intensiti de curent constante. Dac n
detector intr prin amestecul de gaze un numr mare de molecule electrofile
pentru compensarea scderii sub limit a curentului (ca urmare a scderii
numrului de electroni) se mrete frecvena curentului. La acest mod de lucru
semnalul util al detectorului nu-l mai reprezint micorarea curentului de ionizare
de baz ci modificarea frecvenei tensiunii aplicate n scopul meninerii constante
a intensitii curentului frecvena semnalului fiind proporional cu concentraia
moleculelor captoare de electroni. Prin timpul de pauz ntre semnale se asigur
n limite largi un numr de electroni liberi constant , ceea ce nsemn c i la
concentraii mari ale substanei de analizat snt suficieni electroni la dispoziie
pentru ionizare.
Numrul de electoni se adapteaz concentraiei substanei de analizat
prin acesta extinzndu-se sensibil i domeniul liniar.
Schema de principiu a detectorului gazcromatografic de tip ECD. 1 Camera
de ionizare, 2- folie de izotop Ni63, 3- amplificator electronic, 4- sistem
electronic de prelucrare i afiare

Detectorul de emisie atomica

Detectorul de emisie atomic (AED - Atomic Emission Detector)

reprezint o realizare relativ recent fiind legat n principal de evoluia
detectorului de tip Diode- Array. Eluatul ce prsete colana cromatografic
este introdus ntr-o plasm termic de heliu generat ntr-un cuptor cu
microunde.
Energia nalt a plasmei atomizeaz toate elementele din prob
provocnd emisie atomic specific a acestora . Prin decompunerea radiaiei
rezultate cu o reea de difracie rezult spectrul atomic al probei care este preluat
de un detector Diode Array. Marele avantaj al acestui tip de detector este
analiza multipl fiind posibil detectarea mai multor elemente n acelai timp.
Profitnd de prezena unei plasme de nalt energie deja existent la
spectrometrele clasice cu plasm cuplat inductiv (ICP-MS), vezi i cap. , la ora
actual se realizeaz combinaii deosebit de performante ntre cromatografe
HPLC i spectrometrele cu plasm cuplate inductiv (HPLC-ICP-MS) i
gazcromatografe i spectrometre cu plasm cuplate inductiv (GC -ICP-MS).
Aceste combinaii snt avantajoase ca pre de cost deoarece un cromatograf
clasic beneficiaz de o plasm termic deosebit de performant generat de un
alt aparat , respectic un spectroscop cu plasm cuplat inductiv (ICP) prezent
poate chiar n acelai laborator.

Schema de principiu a detectorului de emisie atomic. 1-camer cu plasm termic

dat de microunde, 2- plasm termic, 3-oglind plan de reflexie, 4- retea de difracie, 5-
detector Diode-Array, 6-amplificator electronic, 7- sistem electronic de achiziie , prelucrare
i afiare

Detectorul cu fotoionizare

Folosirea detectorului cu fotoionizare, figura 15, n cromatografia de gaze

se datoreaz att selectivitii ct i sensibilitii sale ridicate la detectarea
hidrocarburilor aromatice sau a speciilor organice cu heteroatomi . Acest tip de
detector utilizez ionizarea cu radiaii ultraviolete a compuilor ce prsesc
coloana cromatografic dup urmtorul model:
R + h R+ + e- (7)
Doi electrozi colecteaz electronii rezultai ca urmare a ionizrii, electroni
ce formeaz de fapt semnalul electric al detectorului. Nivelul acestui semnal este
proporional cu gradul de ionizare , iar acesta la rndul lui este proporional cu
concentraia specieiei anlizate ce se gsete n acel moment n camera de
ionizare.

Schema de principiu a detectorului cu fotoionizare. 1-camer de ionizare cu radiaii

ultraviolete, 2,3- electrozi, 4- lamp de ultraviolete, 5- amplificator electronic, 6- sistem
electronic de prelucrare i afiare
 Bibliografie:

- www.usv.ro
-