Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
K S + cS 0
Valoarea vitezei critice de diluţie, Dcrit este determinată de valoarea vitezei
maxime de creştere, μmax , a valorii KS şi a variabilei cS0 , cu cât
aceasta are o valoare mai mare Dcrit se apropie de μmax. Într-o cultură
chemostat simplă, μmax nu se atinge, deoarece întotdeauna predomină
condiţiile de substrat limitativ.
3
Pc = D x1 −
T
τ3 – timpul necesar atingerii stării staţionare şi
include pregătirea fermentatorului, sterilizarea
şi fazele discontinue care preced operarea
continuă,
T - reprezintă timpul de menţinere a stării
staţionare.
K S + CS
Funcţie de concentraţia substratului limitativ se pot deosebi trei cazuri:
◼ concentraţia substratului limitativ, în mediu sau celulă, este foarte mare
comparativ cu constanta de asimilare a substratului, adică CS K S , ceea ce
are ca efect egalitatea dintre viteza specifică de creştere şi viteza maximă,
egalitate care se menţine până când are loc o scădere drastică a
concentraţiei substratului limitativ;
◼ concentraţia substratului limitativ are valori comparabile cu valoarea
constantei de asimilare a substratului, adică
C S K S = max
2
◼ concentraţia substratului limitativ este foarte mică, viteza procesului fiind
proporţională cu concentraţia substratului limitativ,
max
C S K S = CS
KS
4.2. Modul de furnizare a substratului limitativ
Intensitatea relativă a
formelor metabolismului
energetic în funcție de
oxigenul solvit în mediul
de cultură (CS –
concentrație de saturație a
oxigenului:
1. fermentație;
2. respirație
◼ La un conţinut de oxigen mai mic de 3% din concentraţia de
saturaţie au loc numai procese de fermentaţie, în timp ce la
concentraţii mai mari de 10% numai respiraţie.
◼ Comportarea diferitelor microorganisme faţă de oxigen depinde
de tipul metabolismului energetic şi oferă indicaţii cu privire la
enzimele pe care le posedă.
◼ Metabolismul aceluiaşi microorganism poate varia de la etapa de
acumulare de biomasă (creştere celulară) la cea de producere
de metabolit, atrăgând după sine modificarea naturii procesului
biochimic şi a necesarului de oxigen.
◼ Necesarul de oxigen al unei culturi microbiene depinde pe lângă
natura microorganismului şi de natura sursei de carbon şi
energie.
◼ Pe lângă microorganismele aerobe şi anaerobe există o
categorie de microorganisme facultativ aerobe (aerotolerante),
care au capacitatea de a-şi modifica metabolismul în funcţie de
conţinutul de oxigen al mediului de cultură.
◼ Consumul de oxigen poate fi exprimat cu ajutorul vitezei de consum de
oxigen RO2, care reprezintă cantitatea de oxigen consumată în unitatea de
timp şi pe unitatea de masă microbiană sau pe unitatea de volum de mediu de
cultură. RO2 depinde de:
- natura,
- vârsta şi morfologia microorganismelor,
- natura substratului şi
- condiţiile de fermentaţie.
◼ RO2 este minimă în etapa de lag, după care, creşte atingând valoarea maximă
în faza de creştere exponenţială rămânând la această valoare până la
atingerea fazei staţionare când redevine minimă.
Microorganism mmoli O2/l·h mmoli O2/g celule·h
Escherichia coli 5-8
Streptomyces griseus 15 3,0
Penicillium crysogenum 20-30 3,9
Aspergilllus niger 3,0
- pentru acid citric 28
- pentru α-amilază 56
Acetobacter sp. 90
Azobacter sp. 10-15
Saccharomyces cerevisiae 8,0
◼ Viteza de creştere a numeroase microorganisme este accelerată
semnificativ de intensificarea aerării, până la o anumită valoare după
care are loc o stagnare sau chiar o reducere, fenomen explicat prin
inhibiţia produsă de oxigenul din mediu (la concentraţii mari) asupra
unor procese metabolice.
CO 2
= max
K O 2 + CO 2
Pentru valori ale concentraţiei de oxigen mai mici de o anumită valoare
(definită concentraţie critică CO2critic)
max
= CO 2critic
K O2
Scăderea concentraţiei de oxigen dizolvat sub valoarea critică are ca
efect perturbarea metabolismului microbian. Valoarea
concentraţiei critice este specifică fiecărui microorganism şi este
funcţie de condiţiile de cultură.
◼ Exemplu:
Brevibacterium flavum
➢ La o concentrație foarte mică de CO2 produce acid lactic + acid
piruvic;
doi.org/10.1016/S1369-703X(01)00132-2
Microorganism T,0C CO2 critic, mmol/l
Escherichia coli 15.5 0.0031
37.0 0.008
37.8 0.0083
Azobacter sp 30 0.035
Saccharomyces sp 20 0.0037
30 0.0040
34.8 0.0046
Penicillium crysogenum 24 0.022
Dacă oxigenul dizolvat se află în concentraţia mai mare decât concentraţia critică,
viteza de consum nu depinde de concentraţia oxigenului dizolvat, dacă însă
concentraţia este mai mică decât cea critică, scăderea vitezei de consum va fi
semnificativă.
Necesarul de oxigen
aerobe anaerobe
Clasificarea fermentatoarelor - se poate face în funcţie de mai multe criterii:
I. Modul de amestecare:
- bioreactoare cu amestecare mecanică, echipate cu amestecătoare
(agitatoare) de diferite tipuri constructive,
Bioreactorul clasic cu amestecare mecanică este contstruit dintr-un recipient
cilindric, numit virolă, din oțel inoxidabil sau sticlă (capacitate maximă 30 l)
prevăzut c =u un capac elipsoidal și manta de răcire.
Pentru realizarea unui transfer termic rapid mai ales în etapa în care mediul de
fermentație își modifică vâscozitatea, unele bioreactoare sunt prevazute cu
serpentine interioare montate fie în jurul agitatorului, fie vertical pe pereții
bioreactorului.
Spumarea este rezultatul eliminării dioxidului de carbon ca produs al
transformărilor biochimice, fenomen care este mai pronunțat pentru
sistemele cu agitare puternică
Dezavantajele spumării:
- Reduce volumul util al bioreactorului;
- Mărește riscul contaminării mediului datorită revărsării sale prin
racordul de evacuare a aerului (revărsarea spumei în exterior
antrenează și o parte din mediu și/sau produși utili);
- În cazul proceselor aerobe bulele de aer sunt reținute în spumă
ceea ce determină reducerea gradientului de concentrație al
oxigenului și împiedică transportul acestuia în mediul de fermentație;
- Calitatea mediului este afectată din cauza adăugării agenților
antispumanți ceea ce conduce la purificări suplimentare a masei
celulare și a produsului.
Pentru evitarea spumării bioreactoarele pot fi prevăzute cu spărgătoare de
spumă montate la partea superioară a axului agitatorului. Pentru spumări
abundente se adaugă antispumanți: alcooli superiori, ulei siliconic, uleiuri
vegetale (soia, floarea-soarelui), grăsimi animale, etc.
5.2. Bioreactoare cu amestecare hidraulică
- se bazează pe circulaţia sau recircularea mediului cu ajutorul pompelor. Din
acest punct de vedere, sunt bioreactoare cu circulaţie internă sau externă, cu
duze (jet) exterioare şi interioare (înecate), cu pulverizare, cu strat fluidizat sau cu
contact multiplu.
a. cu jet exterior;
b. cu jet interior;
c. cu contact multiplu;
d. cu strat fix;
e. cu strat fluidizat
Bioreactoarele cu jet interior sau exterior realizează recircularea lichidului cu
viteze ridicate prin intermediul unei duze amplasate deasupra sau în interiorul
lichidului.
D. Cașcaval C. Oniscu, A.-M. Galaction, Inginerie Biochimică și Biotehnologie, Vol 2., Cap. 4, p122, Ed. InterGlobal, Iași 2002.
Bioreactoarele pneumatice tip coloană
- sunt bioreactoare fără dispozitive interioare care să favorizeze dispersia
gazului inert în mediu (cazul a) sau cu dispozitive interioare de tipul sitelor sau
plăcilor perforate (cazul b) sau cu umplutură (cazul c). În cazul bioreactoarelor
tip bazin (cazul d), bulele de gaz nu interacționează între ele.
❖ Aplicații: obținerea drojdiei de panificație, a berii, epurarea apelor.