Facultatea de Medicină

Numărarea hematiilor

Fiziologie, anul I MG.

Lucrare practică.

Pentru uz intern
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
ERITROCITELE. CARACTERISTICI MORFOFUNCŢIONALE

Structură

-celulă anucleată

-membrana
strat bilipidic,
proteine membranare
glicoforina - pe care se fixează substanţele polizaharidice
care formează antigenele de grup sanguin
spectrina - moleculă alungită şi flexibilă - menţinerea formei

-citoplasma - hemoglobina 33% din conţinutul hematiei

(concentraţie corpusculară medie)
- apa 57%
- lipide 7%, proteine, glucide, substanţe anorganice

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

ERITROCITELE. CARACTERISTICI MORFOFUNCŢIONALE
Forma

-disc biconcav - “pişcot”

-forma e menţinută de proprietăţile citoscheletului membranar
-deficitul spectrină - sferocitoza ereditară
-celule in seceră

-DEFORMABILITATEA - capacitatea hematiei de a-şi modifica forma

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Număr
-femei : 4,5-5 milioane/mmc sânge
-bărbaţi : 5-5,5 milioane/mmc sânge

Variaţii fiziologice: vârstă, sex, altitudine

Variaţii patologice:scăderea - anemie

creşterea - poliglobulie

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

 Numărare manuală a hematiilor.

Această metodă utilizează microscopul și o cameră specială de numărare

(hemocitometru), determinarea făcându‐se din sânge diluat.

Hemocitometrul este o lamă groasă de sticlă pe care, prin șanțuri, este

delimitată o cameră dreptunghiulară. Pe această cameră este gravată o rețea
de linii perpendiculare.
Dispozitivul este precis gravat astfel încât ariile suprafețelor delimitate
de linii și adâncimea camerei sunt cunoscute.

Pentru numărarea hematiilor se folosește camera de numărare Türk,

gravată cu două șanțuri adânci paralele și unul transversal, în formă
de “H”, care asigură suportul pentru fixarea lamelei de sticlă și separă cele
două zone gravate.
-suprafața camerei (a zonei gravate) este de 9mm2
-Adâncimea dintre lamelă și suprafața lamei este 1/10 mm.

-Rețeaua camerei de numărare este formată din linii perpendiculare aflate la o distanță
de 1/5 mm, respectiv 1/20 mm.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Liniile perpendiculare delimitează pătrate și dreptunghiuri pentru numărarea
celulelor sanguine:
– pătrate mici cu aria de 1/400 mm2 pentru numărarea globulelor roșii (hematii),
– pătrate mari cu aria de 1/25 mm2 pentru numărarea globulelor albe
(leucocite),
– dreptunghiuri cu aria de 1/100 mm2 pentru numărarea trombocitelor.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Pipetele de diluție (pipete Potain) sunt pipete capilare (foarte subțiri) care au o cameră
de amestecare (omogenizare). În camera de amestecare se găsește o perlă de culoare
roșie în cazul pipetei pentru hematii și albă în cazul pipetei pentru leucocite.

Pe porțiunea capilară a pipetei se află gradațiile pentru 0,5 și 1 μl, iar deasupra camerei
de amestecare se află o gradație pentru 101 μl pe pipeta pentru hematii și 11 μl pe pipeta
pentru leucocite. La extremitatea superioară a pipetei este atașat un tub
de cauciuc prevăzut cu o piesă bucală.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

MATERIALE NECESARE
– hemocitometru,
– pipetă de diluție pentru hematii,
– soluție de diluție (soluție Hayem; Na2SO4 5 g, NaCl 1 g, sublimat 0,5 g, apă
distilată ad 200 g)
– microscop optic,
– pentru recoltarea sângelui: tampoane de vată, alcool, ace sterile, mănuși de
unică folosință.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

 METODA DE LUCRU

-Curățați hemocitometrul și lamela de sticlă cu o bucată de vată îmbibată cu alcool și

lăsați să se usuce. Pregătiți hemocitometrul prin așezarea lamelei pe lamă.
-Când manipulați probele de sânge ale altor persoane, folosiți mănuși de unică folosință.
Aruncaţi acele folosite în recipientele special destinate acestui scop!
-Curățați vârful degetului cu vată îmbibată cu alcool. Lăsați degetul să se usuce. Folosind
un ac steril, de unică folosință, faceți rapid o singură puncție la vârful degetului curățat
(țineți‐l ferm între police și index), suficient de adâncă încât sângele să curgă liber din
rană. Ștergeți cu vată prima picătură de sânge.
-După ce s‐a format a doua picătură, se aspiră în pipetă. Nu aspirați până când nu s‐a
format o picătură suficient de mare deoarece aceste pipete au un lumen foarte îngust și
sângele coagulează extrem de repede în interior. Nu stoarceţi degetul!
-Așezați vârful pipetei în picătura de sânge. Aspirați, folosind piesa bucală, o coloană
continuă de sânge în pipetă până la gradația 0,5 a pipetei. Ștergeți excesul de sânge de
pe vârful pipetei. Introduceți vârful pipetei în soluția de diluție pentru hematii (soluția
Hayem); menținând pipeta în poziție verticală, aspirați soluție de diluție exact până la
gradația 101. Diluția ar trebui făcută foarte repede și exact pentru a evita coagularea
sângelui și pentru a asigura precizia. Astfel se obține o diluție de 200 de ori (volumul din
camera de amestecare este 101 μl‐1 μl=100 μl, conținând 0,5 μl sânge).
Acoperiți capetele pipetei cu policele și degetul mijlociu și agitați pipeta timp de 3
minute.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
La microscopul optic se folosește obiectivul 10x.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.
REZULTATE

-Raportați numărul de hematii ca celule/mm3. Întâi trebui calculat numărul mediu de

hematii într‐un pătrat mic: N (numărul total de hematii numărate)/80 (numărul de
pătrate ‐ NrP). Acesta trebuie raportat la volumul (V) corespunzător unui pătrat mic:
aria*înălțimea (A*Î) camerei. În final, rezultatele trebuie corectate cu diluția sângelui
(D).

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.

Este interzisă copierea și distribuirea neautorizată a acestui material.