MEDICAMENTE BIOLOGICE CURS 11

Şef lucr. dr. Anca MOISEI

 Sângele şi produsele derivate din sânge

• Sânge – generalităţi

• Hemoterapia
–Traseul sângelui şi a produselor derivate de sânge
•Recoltarea, prepararea derivatelor, securizarea,
conservarea şi administrarea
–Sângele. Derivate de sânge şi substituenţi

• Hemostaza/Fibrinoliza
–Factori de coagulare
–Medicamente biologice anticoagulante. Heparinele
–Medicamente biologice fibrinolitice
 Hemostaza

• Activitatea plachetară, coagularea şi fibrinoliza sângelui = baza

hemostazei şi trombozei
–Boli hemoragice
–Boli trombotice arteriale şi venoase

• Reunesc terapia biologică ce acţionează

–În cascada coagulării
–La nivelul plachetelor sanguine
–În fibrinoliză
 Hemostaza

• Hemostaza reprezintă oprirea pierderii de sânge prin vase

sanguine traumatizate (fenomen esenţial)
–Traumatizarea vaselor de sânge
•produce vasoconstricţie însoţită de
•adeziunea şi activarea plachetelor (Hemostaza primara)
•formarea trombusului (cheagului) de fibrină (Hemostaza
secundara)
•dizolvarea cheagului (Fibrinoliza)
–Importanţa fiecărui proces este dependenta de tipul de vas de
sânge afectat (arterial, venos, capilar)
 Hemostaza
Hemostaza
primara

Coagulare

Fibrinoliza
 Hemostaza

• Vasoconstrictia
– Raspunsul imediat la leziunea unui vas de sange
– Spasmul vascular diminueaza diametrul vasului de
sange si incetineste sangerarea
 Hemostaza
• Hemostaza primară
–Implică:
• Plachetele – rol extrem de important
–receptori (= glicoproteine) pentru FvW, fibrinogen, sau alte proteine de
adeziune
–granule ce conţin factori de coagulare (FvW, fibrinogen, FV )
• Factorul von Willebrand (FvW )
–sintetizat de către celulele endoteliale şi megacariocite
–este o glicoproteină plasmatică multimerică heterogenă
–două funcţii majore:
» facilitează adeziunea plachetară
» transportor plasmatic pentru factorul VIII al coagulării, factorul
antihemofilic
–Constă în formarea unui dop plachetar
–Dacă afectarea endotelială este redusă, această măsură poate fi suficientă pentru
oprirea sângerării
–Manifestările bolilor hemostatice primare includ
• sângerările imediate după o intervenţie/traumă
• sângerările muco-cutanate
Hemostaza Hemostaza
primara

Coagulare

Fibrinoliza
 Hemostaza

• Hemostaza secundară = coagularea

–Implică
•Proteinele din cascada coagulării, având ca şi rezultat final
conversia fibrinogenului în fibrină solubilă, care prin
polimerizare formează cheagul de fibrină (stabilizat de
factorul XIIIa)
–Manifestările bolilor hemostatice secundare includ:
•sângerări tardive după o intervenţie/traumă
•hemartroze şi hematoame intramusculare
•hemoragii intracraniene, menoragii, etc.
 Hemostaza

• Cascada coagulării
–Activarea secvenţială a factorilor coagulării, urmată de
transformarea fibrinogenului în fibrină şi ulterior de
polimerizarea fibrinei şi transformarea în cheag de fibrină
–Marea majoritate a factorilor coagulării sunt serin-proteaze şi
circulă în plasmă sub formă de precursori inactivi (zimogen),
fiind convertite la forma activă prin acţiunea unor proteaze
–Activarea unui factor va duce automat la activarea
următorului din lanţul coagulării
 Hemostaza

• Factori ai coagularii
Numar si/sau nume Functie
I (fibrinogen) Substrat pentru trombina
II (protombina) Activeaza I, V, VIII, XIII, proteina C,
plachetele
III (factor tisular) Activeaza factorul VII
IV (calciu)
V (proaccelerina) Creste activitatea enzimatica a Xa (cofactor)
VI
VII(proconvertina) Activeaza IX, X
VIII (factor antihemofilic A) Creste activitatea enzimatica a IXa (cofactor)
 Hemostaza
• Factori ai coagularii
Numar si/sau nume
IX (factor Christmas ou
antihémophile B)
X (factor Stuart-Prower)
XI
XII (factor Hageman)
XIII (factor stabilizator al fibrinei)
Factor von Willebrand
Prekalikreina (factor Fletcher)
Functie
Activeaza X
Activeaza II
Activeaza XII, IX et prekalikreina
Activeaza prekalikreina si fibrinoliza
Legaturi covalente intre monomerii de
fibrina
Leaga VIII, favorizeaza adeziunea
plachetelor
Activeaza XII si prekalikreina
 Hemostaza

• Cascada coagulării
–2 căi separate şi independente de
activare a cascadei coagulării
•Intrinsecă
–Activarea F XII

–Activarea activării plachetare

•Extrinsecă = calea tisulară
–Iniţiată de leziuni
ale peretelui
vascular

–calea comună
 Hemostaza
• Inhibitorii naturali ai cascadei coagulării
–Verificarea şi controlul cascadei coagulării în scopul limitării
coagulării exclusiv în zona afectată.
–Inhibitori
• Factori homeostatici
–Fluxul sanguin normal
» diluează factorii de coagulare la un nivel inferior celui necesar
pentru propagarea cascadei
–Degradarea hepatică a factorilor coagulării activaţi, antrenaţi de la
locul de formare a cheagului.
• Antitrombina (AT)
–cel mai important inactivator fiziologic al factorilor coagulării
activaţi
» Se leagă ireversibil, inactivând trombina şi FXa (AT are o afinitate
scăzută pentru trombină).
» Heparina acţionează ca şi anticoagulant prin activarea AT (prin
legarea de heparină activitatea AT creşte de aproximativ 1000 de
ori)
Hemostaza
Hemostaza
primara

Coagulare

Fibrinoliza
 Hemostaza
• Fibrinoliza
–Este un fenomen extrem de important în procesul global al
hemostazei
–Sistemul fibrinolitic
• Elemente importante implicate în fibrinoliză
–Plasminogenul/plasmina
–Activatorul tisular al plasminogenului (t-PA).
–Inhibitorii de plasmină: α2-antiplasmina.
• Rezultatul lizei fibrinei este reprezentat de numeroşi produşi de
degradare ai fibrinei
–Au proprietatea de a inhiba coagularea prin
inserarea în cheagul de fibrină în locul
fibrinogenului
–Au şi activitate antiagregantă plachetară.
 Hemostaza
• Plasminogenul/Plasmina
–Plasmina
•Circulă în sânge sub formă de precursor inactiv,
plasminogenul.
•Enzima capabilă să digere fibrina şi să dizolve cheagul de
sânge.
•Are capacitatea de a degrada fibrinogenul şi alţi factori ai
coagulării sângerări severe

–Plasminogenul
•Este activat la plasmină în principal de către activatorul
tisular al plasminogenului.
•Poate fi activat de către activatori de tip urokinază (u-PA),
streptokinază şi diverse veninuri de reptile (şerpi).
 Tulburări ale sistemului hemostatic
• Tulburările de coagulare
–Boli hemoragice
–Boli trombotice arteriale şi venoase

• Beneficiază de terapii specifice, în funcţie

de etiologie
 Tulburări ale sistemului hemostatic

Tulburări ale sistemului hemostatic

• Bolile hemoragice

–Hemostaza normală necesită

•Concentraţii adecvate de factori de coagulare solubili
•Plachete sanguine corespunzătoare calitativ şi cantitativ
•Vase de sânge cu pereţi integri şi structură normală

–Anomaliile anatomice şi structurale ereditare sau dobândite,

sunt exprimate prin sângerări anormale
 Tulburări ale sistemului hemostatic
• Bolile hemoragice ereditare
–Anomalii ale factorilor de coagulare solubili
• Anomalii ale fibrinogenului
–Manifestări: sângerări grave (se constată
incoagulabilitatea sângelui)
–Afibinogenemia/Disfibinogenemia – rare
–Terapie: adm. crioprecipitat
• Deficit de protrombină - rar
–Manifestări: sângerări medii spre severe, variază în funţie de
concentraţiile de protrombină
–Terapie: adm. concentrate de complex protrombinic
• Deficit de factor V
–Manifestări: uşoare – moderate
–Terapie: adm. plasmă proaspătă congelată
• Deficit de factor VII
–Manifestări: moderate - severe
–Terapie: adm. factor VIIa recombinant
 Tulburări ale sistemului hemostatic
Hemofilia – maladie regală
• Arborele genealogic al reginei Victoria
 Tulburări ale sistemului hemostatic
• Bolile hemoragice ereditare
–Anomalii ale factorilor de coagulare solubili
•Hemofilia A - Deficit de factor VIII
– Manifestări: variabile în funţie de
concentraţiile de factor VIII
» Sângerări la nivelul articulaţiilor
(hemartroză), a ţesuturilor moi şi a
muşchilor
» Hematurie, echimoze
» Hemoragii intracraniene
– Terapie: adm. concentrat factor VIII
•Hemofilia B - Deficit de factor IX
–Manifestări: variabile în funţie de
concentraţiile de factor IX
–Terapie: adm. concentrat factor IX
 Tulburări ale sistemului hemostatic
• Bolile hemoragice ereditare
–Anomalii ale factorilor de coagulare solubili
• Deficit de factor X
–Manifestări: variabile în funţie de concentraţiile de factor X, pot da
forme asemănătoare hemofiliilor
–Terapie: adm. plasmă proaspătă congelată, sau concentrate de complex
protrombinic
• Deficit de factor XI
–Manifestări: variabile, mi puţin severe, dar nu depind de concentraţiile
de factor IX (depinde de abilitatea de formare a trombinei)
–Terapie: adm. factor VIIa recombinant
• Deficit de factor XII
–Manifestări: nu prezintă manifestări
–Terapie: nu este necesară
• Deficit de factor XIII
–Manifestări: grave (sângerările pot avea loc în orice ţesut)
–Terapie: adm. crioprecipitat (săptămânal)
 Tulburări ale sistemului hemostatic
• Bolile hemoragice ereditare
–Anomalii ale factorilor de coagulare solubili
• Deficite multiple ale factorilor de coagulare
–Deficit de factor V şi VIII
» Manifestări: variabile în funţie de concentraţii
» Terapie: adm. plasmă proaspătă congelată + concentrat de factor
VIII
–Deficit de factori ai căror sinteză necesită prezenţa vitaminei K (II,
VII, IX, X, proteina C şi proteina S)
» Manifestări: variabile
» Terapie: adm. doze mari de vitamina K
• Maladia von Wildebrand
–Cea mai frecventă boală hemoragică ereditară
–Manifestări: variabile, rapide (simptomatologie asemănătore
deficitelor plachetare)
–Terapie: adm. concentrat factor VIII îmbogăţit în FvW
 Tulburări ale sistemului hemostatic
• Bolile hemoragice ereditare
–Anomalii ale plachetelor
• Mai rare decât anomaliile factorilor de coagulare: trombocitopeniile
ereditare, alte afecţiuni non-trombocitopenice
• Manifestări: sângerări muco-cutanate
–Anomalii ale pereţilor vasculari
• Nu fac parte din categoria bolilor hemoragice, chiar dacă se pot
manifesta şi prin hemoragii

• Bolile hemoragice dobândite

–Anomaliile hemostatice din bolile ficatului
•Trombocitopenie (infecţii)
•Disfuncţie plachetară
•Anomalii de coagulare
•Coagulare intravasculară diseminată
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice

•Factori ai coagulării
–Obţinere
•2 metode:
–Fracţionarea industrială a sângelui proventi de la donatori sănătoşi
–Obţinerea via tehnologia recombinantă pe culturi de celule

• Obţinerea din plasma donatorilor sănătoşi

–Etapa 1
•Obţinerea unui concentrat de puritate intermediară
•Securizarea virala
–Etapa 2
•Purificarea prin tehnici de imunoafinitate (monoclonală) pe
coloană obţinerea unor factori de înaltă puritate (factor
purificat monoclonal)
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice
• Concentrat de F VIII / F vW - Primul aprobat FDA
–Obţinere, în funcţie de produs
• Precipitări multiple
• Cromatografie de excluziune moleculară
• Cromatografie de afinitate (ligand - heparina)
–Inactivarea
• Pasteurizare, 60oC/10h
• Chimică (TNBP/polisorbat 80), 80oC/72h
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC, se evită îngheţarea
–Produse farmaceutice
• Humate-P (Aventis - Behring)
• Koate DVI (Bayer)
• Alphanate (Alpha)
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice
• Concentrat de F VIII purificat prin tehnici de imunoafinitate
–Obţinere, în funcţie de produs
• Cromatografie de afinitate (AMC)
• Cromatografie de afinitate (AMC) + cromatografie de excluziune
moleculară
–Inactivarea
• Pasteurizare, 60oC/10h
• Chimică (TNBP/Triton X-100)
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC (max. 6 luni), se evită îngheţarea
–Produse farmaceutice
• Monoclate-P (Aventis - Behring)
• Hemofil M (Baxter)
• Monarc M (American Red Cross)
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice
• Concentrat de F VIII obţinut prin tehnica rADN
–Obţinere, în funcţie de produs
• Tehnica rADN + cromatografie de afinitate
(AMC) + cromatografie de excluziune moleculară
–Inactivarea
• Atenuare virală în timpul purificării
• Chimică (Triton X-100)
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC (max. 3 luni)
–Produse farmaceutice
• Recombinate (Baxter)
• Refacto (Wyeth)
• Kogenate FS (Bayer)
• Helixate FS (Aventis - Behring)
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice
• Concentrat complex protrombinic (F IX)
–Obţinere, în funcţie de produs
• Cromatografie de schimb ionic
• Adsorbţie pe Ca3(PO4)2 + fracţionare PEG
• Adsorbţie pe celuloză (DEAE)
–Inactivarea
• Pasteurizare, 60oC/10h, 80oC/1h
• Chimică (TNBP/polisorbat 80)
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC (max. 3 luni)
–Produse farmaceutice
• Proplex (Baxter)
• Bebulin VH (Baxter)
• Profilnine (Alpha)
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice

• Concentrat de F IX
–Obţinere, în funcţie de produs
• Cromatografie de schimb ionic + cromatografie de imunoafinitate
–Inactivarea
• Chimică (TNBP/polisorbat 80) + nanofiltrare
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC (max. 3 luni)
–Produse farmaceutice
• Mononine (Aventis - Behring)
• Alpha-Nine (Alpha)
Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice

• Concentrat de F IX obţinut prin tehnica rADN

–Obţinere, în funcţie de produs
• tehnica rADN
–Inactivarea
• Nanofiltrare
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC (max. 3 luni)
–Produse farmaceutice
• Benefix (Wyeth)
 Medicamente biologice utilizate în bolile hemoragice

• Concentrat de F VIIa obţinut prin tehnica

rADN
–Obţinere, în funcţie de produs
• tehnica rADN
–Inactivarea
• Nanofiltrare
–Condiţionare
• Pulbere liofilizată pentru administrare
parenterală
• Unităţi internaţionale
–Conservare
• La 2-8oC; max. 25oC (max. 3 luni)
–Produse farmaceutice
• NovoSeven (NovoNordisk)
 Tulburări ale sistemului hemostatic

• Tulburările de coagulare
–Boli hemoragice
–Boli trombotice arteriale şi venoase

• Beneficiază de terapii specifice, în funcţie de

etiologie
 Tromboza

• Tromboza reprezintă apariţia patologică a unei stări

hemostatice, în absenţa unei sângerări (hemoragii).
–3 factori predispozanţi ai trombozei (triada Virchow)
•afectarea peretelui vascular,
•afectarea fluxului sanguin
•coagulabilitatea anormală a sângelui.
–Trombusurile venoase si arteriale au structuri diferite
 Tromboza

• Trombusul arterial = trombus alb

–constituit în principal din leucocite şi plachete prinse
într-o reţea de fibrină.
–asociat aterosclerozei şi întrerupe curgerea sângelui,
antrenând ischemia, sau moartea (infarctul) ţesuturilor
 Tromboza
• Trombusul alb
 Tromboza
• Trombusul venos = trombus roşu
–constituit dintr-un cap mic, de culoare albă şi
dintr-o coadă mare, roşie, gelatinoasă
–sunt mobile, circulând lent, cu sângele prin vase,
de unde riscul crescut de apariţie a emboliilor .
 Tromboza

• Trombusul venos
 BIBLIOGRAFIE

• World Health Organization Blood Transfusion Safety GENEVA

- The Clinical Use of Blood
• Fiona Regan, Clare Taylor - Blood transfusion medicine, BMJ
vol. 325, 20 iulie 2002
• Medicaments derives du sang – M. Puntous, dec. 2004
• Teodor Vaida, Victor Cristea – Elemente de imunologie, ed.
“Vasile Goldiş”, Arad, 1996
• “Microbiology and immunology on-line”, http://www.med.sc.
edu:85
• "Essentials of Immunology" Reese AC, Dolan WK. Published
by Gold Standard Multimedia Inc. http://www.gsm.com