Investigarea tulburarilor metabolismului proteic

1.Proteinele totale - tehnica, valori normale, variatii patologice

2.Viteza de sedimentare a hematiilor – tehnica, valori normale, variatii patologice
3.Teste de labilitate coloidala a serului - tehnica, valori normale, variatii patologice
4.Electroforeza proteinelor plasmatice - tehnica, valori normale, variatii patologice
5.Imunelectroforeza - tehnica, valori normale, variatii patologice
6.Proteinele de faza acuta – tipuri de proteine de faza acuta, valori normale, variatii patologice
7.Diagnosticul enzimatic in infarctul de miocard – tipuri de enzme, valori normale, variatii patologice
8.Determinarea derivatilor azotati ai catabolismului proteinelor si nucleoproteinelor – metaboliti,
valori normale, variatii patologice

III.Investigarea tulburarilor metabolismului proteic

1.Proteinele totale - tehnica, valori normale, variatii patologice
dozarea se realizeaza in ser si urina
● in ser:
proteinemia= 6,5-8,5 g/100ml (g/dl)
2 grupe de proteine : albumine + globuline
albumina: 4,5 g/dl
globuline: 2,5-3 g/dl
raportul A/G : 1-1,5
↑ hiperproteinemii :
reale:
-boli însoțite de intensificarea sintezei => mielom multiplu (boala Kahler ) ,hemopatii maligne
false= pseudohiperproteinemia
-in hemoconcentratie prin deshidratare (diaree devera, varsaturi, diureza excesiva, sudoratie) si in
erori de determinare (evaporarea probei de ser din laborator, staza venoasa datorita ocluziei det de
colapsul vascular periferic)
↓hipoproteinemii
reale:
-carenta de aport, tulburari de absorbtie
-perturbari de sinteza : hepatopatii cronice, ciroza
-pierderi renale: sdr nefrotic
-pierderi intestinale: enteropatii cu pierderi de proteine => sprue tropical :boala endemica, caract prin
diaree cronica , anemie ,mucoasa intestinului subtire se inflameaza si se atrofiaza
-catabolism crescut: infectii severe, tumori maligne
false= pseudohipoproteinemie
hemodilutia din hipervolemie : perfuzii masiva, trim 3 de sarcina
● in urina
proteinuria se realizeaza cu bandetele pt urina

2.Viteza de sedimentare a hematiilor – tehnica, valori normale, variatii patologice

o scadere a raportului A/G ⇒ creste valoarea VSH pt ca nr de globuline ↑ VSH
+ prezenta in plasma a unor proteine care nu fac parte din spectrul proteic normal : proteina
C reactiva, factor reumatoid, proteina M, cresterea ig ⇒ det ↑ VSH
● VSH:
ramane accelerat chiar si dupa disparitia semenelor clinice
este accelerat in afectiuni degenerative, neoplazii, infarct miocardic
 factorii care influenteaza: eritrocitari (anemia - VSH accelerat, policitemia- scade VSH sub
valorile normale), plasmatici (albumina- protejeaza stabilitatea suspensiei eritrocitare,
globulinele si fibrinogenul- accelereaza VSH)
Tehnica:
-se clateste seringa sterila cu solutie de anticoagulant
-se aspira 0,4 ml citrat de sodiu 3,8%
-se recolteaza sange venos pana la 2 ml
-se omogenizeaza prin miscari de rasturnare
-continutul se varsa intr-o eprubeta
-cu pipeta Westergreen se aspira sange pana la div 0
-coloana de sange trebuie sa fie continua sa nu existe bule de aer
-se citeste dupa 1-2 ore ,rezultatul se exprima in mm plasma
VN:
dupa o ora ⇒ la femei: 2-13 mm, la barbati 1-10 mm
dupa 2 ore ⇒ la femei: 12-17 mm, la barbati 7-15mm, la copii 9-12 mm
Creșteri :
fiziologice ⇒ in perioada ciclului mentrual, in ultimele luni de sarcina
patologice ⇒ TBC, RAA, septicemii, infectii acute, infarct miocardic acut, in hemopatii
maligne (leucoze, mielom, boala Hodkin), neoplazii
Scaderi:
in hepatita A, stari alergice si afectiuni care evolueaza cu poliglobulie (bronhopneumonia
obstructiva cronica, cordul pulmonar cronic, maladii congenitale de cord)

3.Teste de labilitate coloidala a serului - tehnica, valori normale, variatii patologice

disproteinemia este insosita de un dezechilibru coloidal al serului, care poate fi pus in evidenta prin
reactii de floculare nespecifice
cu sarurile metalelor grele, evidentiala disproteinemia
Reactia Gros
Reactia Timol
Reactia sulfat de zinc
Reactia cu sulfat de cadmiu
nu sunt specifice unei maladii si nici afectarii unui organ
se poate aprecia mecanismul patogenic al bolii

4.Electroforeza proteinelor plasmatice - tehnica, valori normale, variatii patologice

utilizat pt fractionarea si separare proteinelor serice sau a altor lichide biologice
valorile difera in functie de mediul de separare si modul de apreciere
5 fractiuni proteice
3 fractiuni GLICOproteice
4 fractiuni LIPOPROTEICE
electroforeza + alte explorări ⇒ aprecierea corecta a disproteinemiilor
fractiunile PROTEICE după migrarea in camp electric:
● SERUMALBUMINELE/ SERINELE
VN= 4-5 g/dl sau aprox 60% din proteinemie
sinteza la niv hepatocitului
lezarea parenchimului hepatic ⇒ ↓ albuminei
hipoalbuminemii:
 -scaderea ratei de sinteza (anabolism)
-catabolism crescut : hepatite acute, cronice, leucemii acute, dz, neoplazii
-pierderi pe cale renala : sdr nefrotic, tumori renale, amiloidoza, nefroza lipoida
-pierderi intestinale: enterite acute si cronice, fistule instestinale
-intoxicatii cronice, arsuri, supuratii, hemoragii mari
hiperalbunemii: rare
leucemii limfatice cronice
faza initiala a inainitiei ⇒ datorita mobilizarii din rezerve
● SERUMGLOBULINELE
VN= 2,3-3 g/dl sau 40% din totalul proteinelor serice
cresteri patologice a unei fractiuni a proteinelor plasmatice ⇒ scaderea celorlalte fractiuni
⇒ mecanism de reglare inversa
alfa1 ⇒ 0,3 g/dl , 6%
alfa 2⇒ 0,5 g/dl 9%
beta ⇒ 1g/dl 12%
gamma ⇒ 1,2 g/dl 15-28%
cresteriile globulinelor globale si intereseaza anumite fractiuni
hiperglobulinemie
de tip reactiv det de boli infectioase acute sau cronice
de tip compensator det de hepatopatii cronice atunci cand sinteza albuminelor este deficitara

alfa-1 si alfa-2 globulinele

scad cresc

icter hemolitic afectiuni inflamatorii

acute (RAA)

etilism cronic poliartrita reumatoida

neoplazii

sdr nefrotic

glomerulonefrita acuta

TBC pulmonar

amiloidoza

cresterea betaglobulinelor (↑ o data cu alfa sau

gamma)

mononucleaza infectioasa

difterie

hepatita acuta
 hepatite toxice

sdr nefrotic

hiperliepemii esentiale

macroglobulinemia Waldestorm (rar)

gamaglobulinele (↑ datorita hiperproteinemiei)

infectii bacteriene sau virale cronice

boli parazitare

boli cu hiperimunizare

periartrita nodoasa

colagenoze

anemie hemolitica

boli hepatobiliare

hipoglobulinemie (diminuarea sintezei)

deficit de factori alimentari sau dupa iradiere

radioterapie

boli congenitale sau dobandite prin inf recidivante

arsuri grave

nefroza lipoida

Disproteinemii prin modificarea fibrinogenului:

Hipofibrinogenemii si afibrinogenemii congeniale sau

dobandite

alcoolism

neoplasm gastric

post gastrectomie

ciroza atrofica

Hiperfibrinogenemii
 afcetiuni cardio-renale cu edeme

afectiuni coronariene

dupa roentgen terapie

hepatite acute

afectiuni reumatismale inf microbiene

5.Imunelectroforeza - tehnica, valori normale, variatii patologice

evidentiaza variatiile fracțiunilor proteice imune = imunoglobuline
Ig G = 12-14%
Ig A = 2-4%
Ig M = 1g%
Ig D = 0,03g%
Ig E = 0,003g%
● Ig G:
origine limfoplasmocitara
suportul pp al ac din org
cantitati sup celorlalte fractiuni
● Ig A:
org limgoplasmocitara
secretate prin sucurile digestive sau lacrimi
● Ig M:
predomina in lichidele intravasculare
contine ac neinfectiosi
Hipergamaglobulinemiile :
➢ hepatite cronice active
➢ ciroze hepatice
➢ boli cronice autoimune (LES, sclerodermia, Sdr Sjogren)
Hipogamaglobulinemiile:
➢ poate fi redus la o singura clasa de ig sau presupune o productie scazuta la toate clasele de ig
asociate infectiilor
Paraproteinemii (gamapatii monoclonale)
=prezenta in ser sau urina de ig monoclonale denumite paraproteine sau componenta M (monoclonal)
sunt produse de o singura clona de cel limfoide si au o mobilitate electroforetica limitata ⇒ apar
in electroforeza sub forma unor bande inguste “in pisc”
proteinele monoclonale sunt ig normale ca structura dar care in conditii patologice pot fi produce in
exces

6.Proteinele de faza acuta – tipuri de proteine de faza acuta, valori normale, variatii patologice
=proteine a caror conc plasmatica se modifica in reactii inflamatorii
APP +:
- Glicoproteina acida (Orosomucoid)
- Protease inhibitor (α1 Antitripsina)
- α 1 Antichimiotripsina (α1 Achy)
- Ceruloplasmina (Cp)
- Haptoglobina (Hp) n < 0,006 g/l
- Proteina C-Reactiva (CRP)
- Fibrinogenul (Fib)
- Proteina Amiloida (SAA)
- Unele fractii ale complementului
⇒ formeaza impreuna cu liganzi complexe proteina-ligand ⇒ inactivarea proteazelor si
neutralizarea molec toxice (anioni superoxid, dimeri de hemoglobina) ⇒ sunt indepartate din
circulatie de sistemul macrofagic
cel mai frecvent se dozeaza CRP, fribrinogenul, haptoglobulina
➢ CRP: <0,5 md/dl
rol de opsonina si ag citolitic, odata legata de membrana agentului patogen activeaza sist
complement pe calea clasica
induce proliferarea unei clone de cel T-supresoare care blocheaza sinteza de ac ⇒
contribuie la porcesul de clearance al proteinelor si al unor subst toxice in organism
(precum produsi de degradare tisulara sau fragmente bacteriene)
marker de monitorizare a inflamatiei

Valori usor crescute ale CRP

obezitate

alcoolism

DZ

HTA

Stari patologice

RAA

poliartrita reumatoida

boala Crohn

Sdr Reiter

vasculite sistemice sau cutanate

rectocolita ulcerohemoragica
conc serica a CRP este un criteriu obiectiv al activitatii bolii
➢ Fibrinogenul
➢ Haptoglobulina : 0,3-1,8 g/l
alfa2-globulina creste de 2-3 ori
este o alfa2 globulina care a ajuns in focarul inflamator leaga hemoglobina blocand astfel
utilizarea fierului necesar pt multiplicarea microorg + neutralizeaza molec toxice
in anemii hemolitice ⇒ complexul haptoglobina+hemoglobina este preluat de sistemul
reticulo-endotelial splenic ⇒ fierul este reutilizat
 creste in inflamatii , coronaritele silentioase
scade in anemii hemolitice
➢ Ceruloplasmina: 25-43 md/dl
metaloproteina
migreaza electroforetic cu alfa2 globulinele
rol: in transportul cuprului
deficit ⇒ boala Wilson ⇒ caract prin depuneri de cupru in ficat, creier, cornee, rinichi
diagnosticul clinic: se pune pe triada ⇒ ciroza, semne de suferinta ale nucleilor bazali si
inelul Kayser-Fleischer
paraclinic: scaderea cupremiei sub 70 microg/dl si scaderea accentuata a ceruloplasminei sub
15mg/dl
ceruloplasmina poate fi scazuta in sindromul nefrotic
in focarul inflamator⇒ creste ceruloplasmina ⇒ are rol de a neutraliza radicalii liberi de
oxigen
➢ Alfa 1-antitripsina: 190-350 md/dl
glicoproteina sintetizata de ficat
rol: inhibarea enzimelor proteolitice: tripsina, chimiotripsina, elastaza, kalicreina, colagenoza,
plasmina, trombina
dezechilibrul raportului proteaza/antiproteaza in sensul deficitului de alfa1-antitripsina
det aparitia emfizemului pulmonar si realizarea BPOC (bronhopneumopatiei obstructive
cronice) ⇒ desi alfa1-antitripsina este prezenta in toate tesuturile org, in principal rolul
sau fiziologic pare sa se manifeste in plaman unde protejeaza tesutul alveolar sanatos dar
fragil ⇒ impotriva leziunilor proteolitice cauzate de enzime (cum ar fi elastaza
neutrofilica)
scaderea niv circ ⇒ marile traumatisme, septicemii, coagulare intravasculara diseminata
(CID), insuf respiratorie
cresterea niv seric ⇒ infectii cronice si acute respiratorii, infarct miocardic acut, hepatita
virala acuta, hepatita cronica

APP - :
- Albumina (Alb)
- Prealbumina (Prealb)
- Retinol Binding Proteine (RBP)
- Transferina (Tf)
- Apoliproteina A1
- Corticosteroid binding globuline
➢ Transferina (siderofilina): 200-400mg/dl
glicoproteina
rol: transportul fierului ⇒ de la intestin la nivel hepatic/splenic/muscular/maduva
hematoformatoare
ionul este implicat in seinteza hemoglobinei/mioglobinei/ enzime din lantul respirator
in atransferina congenitala (transferina serica 0-40 mg/dl) ⇒ apare din copilarie o anemie
hipocroma, microcitara
hipotransferinemia: sdr nefrotic, talasemia, anemia falciforma
 hipertransferinemia: hepatita virala acuta

7.Diagnosticul enzimatic in infarctul de miocard – tipuri de enzme, valori normale, variatii

patologice
enzimele plasmatice:
● enzime secretate activ in plasma de anumite organe: ficatul secreta zimogeni (precursori
inactivi implicati in coagularea plasmatica)
● enzime eliberate in timpul turn-overului celular normal: se gasesc in mod normal intracel
cresterea activitatii enzimelor plasmatice poate indica modif tisulare
➢ Creatinfosfokinaza (CK)
se gaseste in cantitati mari la niv: m scheletici, miocard, creier
cant moderate: intestin si plaman
CK impreuna cu izoenzima sa MB sunt cel mai folositit markeri serici de necroza miocardica
creste in: infarct miocardic acut, tomboembolism pulmonar, accidente vasculare cerebrale
➢ Lacticodehidrogenaza (LDH): 40-160 U/L
marker de necroza miocardic
are surse comune cu CK: muschii scheletici, plamanii, rinichii
5 izoenzime
LDH3+LDH5 ⇒ cresc in afectiuni hepatice
LDH1+LDH2 ⇒ cresc in infarctul de miocard
mai poate fi eliberata in caz de neoplasme
➢ Transaminaza glutam-oxalica (TGO): 0-37 u/l
este un marker enzimatic clasic folosit pt diagnosticul pozitiv al infarctului de miocard acut
creste in multe afectiuni concomitente cu infarctul: boli cu citoliza hepatica, afectiuni
pulmonare, afectiuni musculare, accident cerebral vascular
constelatii enzimatice serice care au o valoare crescuta atunci cand sunt corelate cu simptome clinice:
infarct miocardic: CK-MB, LDH1/2 , TGO ⇒ crescute
embolie pulmonara: LDH, TGO, TGP ⇒ crescute
hepatita epidemica: TGP, LDH3/5, TGO, OCT (ornitril carbamil transferaza) ⇒ crescute

Peptide non-hormonale ca si indicatori de malignitate = MARKERI TUMORALI

=subst sintetizate de o tumora si eliminate in sange sau urina
● Antigenul carcino-embrionar:
glicoproteina cu greutate molec mare
valori crescute in neoplasm : colorectal, pancreatic, gastric, pulmonar, mamar, cervical,
ovarian
in boli benigne si la fumatori valorile CEA nu depasesc 10ng/ml in 80% din cazuri
sub 10 ⇒ nu are specificitate din cauza interferentei cu bolile non-maligne
intervalul 10-20 ng/ml ⇒ exista riscul unui proces malign
peste 20ng/ml ⇒ prob mare de proces malign
nu poate localiza cu exactitate tumora
● Alfa-fetoproteina (AFP): <7ng/ml (<3,5 U/ml ) la adult
glicoproteina de origine oncofetala sintetizata in cursul vietii uterine in sacul vitelin si mai
tarziu in ficat
in ficatul fatului sinteza maxima are loc in saptamanile 14-20, de aici ajung in serul mamei si
atinge conc max in sapt 35-38
 se det in sange sau lichis amniotic al pacientelor insarcinate pt screeningul anomaliilor de
dezvoltare intrauterina a fatului
creste: defecte de inchidere a tubului neural si omfalocel
scade: in sdr down
creste: carcinom hepatic, ciroza biliara, tumori hepatice, hepatoame primare, teratoame
● Antigenul gastro-intestinal CA 19-9: 0-37 U/ml
prezent in cel epiteliale si mucoase: stomac, intestin, pancreas, ficat
interval de granita/borderline: 37-100 U/ml ⇒ boli maligne si si benigne
val> 63 U/ml ⇒ natura maligna (95%)
marker pt verificarea eficacitatii tratamentului
crescut: neoplasm colo-rectal, pancreas
specificitate mai mare decat CEA
● Antigenul gastro-intestinal CA 72-4: 0-8 ng/ml
creste : carcinom colo-rectal/gastric/ovarian/endometrial/mamar, adenocarcinom pulmoar +
afectari non maligne (pancreatita)
folosit pt monitorizarea carcinomului gastric postop indica devreme recidiva
● Antigenul tumorilor mamare CA15-3: 0-22 U/ml
sensibilitatea crescuta pt carcinomul mamar aflat in diferite stadii
folosit si postop pt dectarea recidivei
sub 40U/ml ⇒ discutabil
>40 U/ml ⇒ probabil neo 80%
● Antigenul ovarian CA 125: 0-35 U/ml
poate fi gasit in epiteliul : conjuctiva, cornee, ureche medie, trahee, bronsii, ovar, pancreas,
vezica biliara, stomac, rinichi, colon
in cant crescuta lichid amniotic + lapte si serul femeilor insarcinate
cel mai bun marker tumoral pt detectarea carcinoamelor ovariene serioase si nediferențiate
folosit in monitorizarea evolutiei si terapia bolii
in cazul tumorilor mucinoase (rep aprox 10% din carcinoamele ovariene) sensibilitatea mai
mica
interval de granita/ borderlina: 35-36 U/ml
valori constante peste 100 U/ml + 2 testari succesive arata o creștere a 50% a conc
markerului ⇒ prob ca boala sa fie progresiva 90%
● Antigenul specific prostatic: 0-2,5 ng/ml
bordeline: 4-10 ng/ml
sintetizat de cel epiteliale prostatice
sub 4 ng/ml ⇒ probab scazuta
peste 10 ng/ml ⇒ probab crecsuta
activitatea preteolitica a PSA in sange este inhibata prin formarea unor complexe ireversibile
cu inhibitori de proteaza (alfa1-antichimiotripsina, alfa2-macroglobulina, alte proteine de faza
acuta)
aprox 30% din PSA circulant exista in forma libera ⇒ inactiv
rol: pt monitorizarea evolutiei bolii sau a eficientei terapeutice la pacientii cu carcinom de
prostat ⇒ scaderea PSA ⇒ succes terapeutic

8.Determinarea derivatilor azotati ai catabolismului proteinelor si nucleoproteinelor –

metaboliti, valori normale, variatii patologice
● Ureea: 15-45 mg/100ml
variaza in funcie de varsta, alimentatie, diureza
produs final al catabolismului proteic
sintetizat in ficat
eliminat in cea mai mare parte in urina
creste: regim hipoproteic, catabolism proteic exagerat (leucemii, stari febrile), faza
oligoanurica a insuficientei renale acute
scade: situatii cu bilant proteic crescut (covalescenta, prima jumatate a scarcinii), deficite
grave de productie (hepatopatii grave), tulburari de eliminare renala
● Creatinina si creatinina
vn ser: 0,6-2,3 mg/100ml
vn urina: 1-1,5/24 ore
creatina utilizata ca substrat energetic de catre muschi
creatinina produsul final al metab creatinei
creatina prin fierberea in sol acida ⇒ creatinina
se dozeaza concomitent dupa transformare
creste: dupa efort fizic, hipercorticism, acromegalie
scade: scaderea productiei (imobilizarea prelungita), scaderea nr de nefroni functionali (IRC),
hipertiroidism
● Ac uric: vn ser 2-7 mg/100ml
principalul metabolit al bazelor purinice
se elimina prin urina 0,35-0,8 g/24h
variaza in functie de varsta si regim alimentar
creste: productie endogena marita (guta, leucemii), reabs tubulara scazuta (trat cu corticoizi)
scade: faza oligoanurica a insuf renale acute, faza decompensata a IR cronice