BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC

FEBRA AFTOASA - lichid vezicular ( intr-un criotub steril - izolarea virusului prin pasajul - testul blocking ELISA pt detectia atc
cu capac letat)
broiajului pe culturi celulare: daca fata de proteinele structurale ale
- epiteliul veziculelor nesparte sau efectul citopatic nu apare dupa 48 virusului

recent sparte ( se plaseaza intr-un
mediu de transport de 7,2-7,6
glicerol, tampon fosfat, antibiotice),
intr-un acon
virusului
de ore, rezultatul este negativ, dar - teste ELISA (indirect si blocking) pt
daca apare efect citopatic => se detectia atc fata de proteinele
face test ELISA pentru tipizarea nestructurale

- sange integral
- detectia atg viral prin ELISA
- ser sanguin
SANDWICH

- probe de organe: (muschi cardiac)

- detectia ARN-ului genomic viral
- probe de lichid si epiteliu utilizant diferiti primeri prin tehnica
orofaringian (pt identi carea RT-PCR

animalelor purtatoare-carrier, sau pt - pt depistarea purtatorilor carrier =>

certi carea absentei infectiei cu
virusul pt comertul international)
PROBANG TEST (se inoculeaza
raclatul de mucoasa faringiana pe
culturi celulare tiroidiene de vitel pt
ca sunt cele mai sensibile la
actionea virusului, si se asteapta
aparitia efectul citopatic)

BOALA VEZICULOASA A - lichid vezicular

- izolarea virusului pe culturi celulare - testul de virus-neutralizare

- epiteliu vezicular
derivate din celule de porc PK15
- ELISA indirecta

PORCULUI - probe de sange integral, recoltat in - identi carea atg viral prin
- reactia de xare a complementului
perioada febrila
*seroneutralizarea pe culturi
- probe de fecale de la animalele cu celulare

si fara simptome de boala

* ELISA directa

- probe de ser pt ex serologic * PCR

STOMATITA VEZICULOASA A - epiteliu vezicular conservat in solutii - izolarea virusului prin inocularea pe - reactia de virus neutralizare

de glicerol sau conservate

oua embrionate, soarece, culturi - ELISA

PORCULUI - - reactia de xare a complementului

lichid vezicular
celulate ( broblaste de pui de gaina,
- sange celule renale de purcel)

- detectia atg viral prin reactia de

xare a complementului, sau reactia
de neutralizare pe culturi celulare,
oua embrionate sau soricei sugari

1
fi
fi
fi
fl
fi
fi
fi
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
PESTA PORCINA AFRICANA - probe de sange pe anticoagulant - inocularea pe culturi celulare: culturi - ELISA pt detectia anticorpilor (test
sau sange coagulat de la porcii care primare de monocite de porc sau de de screening)

au prezentat febra sau alte semne celule din maduva osoasa

- immunoblotting - test con rmator

de boala
- identi carea virusului prin:
- testul imunoperoxidazei - test
- pt diagnostic serologic-detectia atc- *PCR
con rmator ( probele pozitive
probe de sange fara anticoagulant * t. de imuno uorescenta prezinta o coloratie rosie )

si sunt lasate sa coaguleze pt a indirecta

- testul de imuno uorescenta
exprima serul
* ELISA
indirecta - test de con rmare

- probe de organe: amigdalele, * reactia de hemadsorbtie

sternul, limfonodurile (renale, ! daca o proba este pozitiva la ELISA -
submaxilare si retrofaringiene), testul de screening, se a face un al
splina, rinichi, pulmoni, iar in cazul doilea test pt con rmare, e
carcaselor autolizate se preleva immunoblotting, e t.
sternul sau un os lung intreg
imunoperoxidazei, e
imuno uorescenta indirecta
=> probele sunt transportate in lada
izoterma sau in termos

PESTA PORCINA CLASICA - probe de organe: tonsile, - izolarea virusului pe culturi celulare -r. de virus neutralizare

limfonoduri (retrofaringian, de porc PK15, culturile ind - ELISA

parotidian, mandibular, mezenteric), veri cate prin imuno uorescenta

- reactia de imuno uorescenta cu
splina, rinichi, maduva sternala, in - reactia de imuno uorescenta directa anticorpi neutralizati
cazul carcaselor autolizate, sternul pe criosectiuni de organe si pe
sau un os lung intreg
sectiuni de maduva sternala

- sange recoltat pe EDTA

- RT-PCR
- sange recoltat in tuburi seci sau cu
gel separator pt exprimarea serului
pt testele serologice 0

2
fi
fi
fi
fl
fl
fl
fl
fi
fi
fl
fi
fl
fi
fi
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
INFLUENTA AVIARA ( Gripa - de la pasarile cu semne clinice sau - izolarea virusului pe oua embrionate - reactia de inhibare a hemaglutinarii

de la cadavre se recolteaza:
(9-11 zile) prin inoculare - ELISA

aviara) - imunodifuzia in gel de agar

* pt ex. serologic: probe de sange intraalantoidiana a materialului
- minimum 20 probe
patologic

* pt ex. virusologic:
- identi carea virusului prin:

- pasari bolnave/cadavre 5
*r. de hemaglutinare

- tampoane traheale/ *r. de inhibare a neuraminidazei

orofaringiene si cloacale de la pasari * r. de inhibare a hemaglutinarii

vii - minim 20
* PCR

- fecale proaspete - minim 20

- set de organe: creier, pulmon si

trahee, intestin, pool din cat,
splina, cord, rinichi si pancreas

! se transporta in mediu cu antibiotice

(tampin fosfat salin steril pH 7,0-7,4 +
penicilina)

PSEUDOPESTA AVIARA - de la pasarile cu semne clinice sau - inocularea suspensiilor virale pe oua - testul de inhibare a hemaglutinarii

de la cadavre se recolteaza:
embrionate (9-11 zile)
- testul ELISA

( Boala de NewCastle) - de la embrionii morti in 20-72 de - reactia de seroneutralizare

* pt ex. serologic: probe de sange
- minimum 20 probe
zile, se recolteaza lichidul
* pt ex. virusologic:
alantoidian si se testeaza prin
- pasari bolnave/cadavre 5
reactia de hemaglutinare cu seruri
- tampoane traheale/ speci ce antipseudopestoase

orofaringiene si cloacale de la pasari

vii - minim 20
! patogenitatea tulpinilor virale poate
- fecale proaspete - minim 20
apreciata prin:

- set de organe: creier, pulmon si - determinarea timpului de mortalitate

trahee, intestin, pool din cat, a embrionilor
splina, cord, rinichi si pancreas

! se transporta in mediu cu antibiotice

(tampin fosfat salin steril pH 7,0-7,4 +
penicilina)

3
fi
fi
fi
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
RABIA (Turbarea) - probe POST MORTEM
- in cazul suspiciunii de boala
! pt veri carea titrului de atc vaccinari

- pt ex virusologic:
* examen prin IFD - testul de virus-neutralizare al
* SNC
(imuno uorescenta directa)
anticorpilor uorescenti

* tesut nervos ( creier, cornul lui * inocularea intracerebrala la - testul rapid de inhibitie a
Ammon, talamus, cortex cerebral
soareci( pe soareci albi de 3 sapt sau uorescentei

- pt ex. serologic - sange integral pt pe nou nascuti, se sacri ca soarecii - teste ELISA
veri carea titrului de atc vaccinali !!!
dupa 4 zile de la inoculare, se
recolteaza SNC si se efectueaza ex
- probe ANTE MORTEM doar in cazul histopatologic si IFD)/ inocularea pe
oamenilor - saliva, biopsie cutanata, culturi celulare ( N2a - neuroblastome
celule epiteliale ale corneei, LCR murineț) cand IFD este negativ

* ex. histopatologic - corpusculii

Babes Negri

* ex. imunohistochimic ( probe de

tesut nervos xate in formalina)

* ex. electronomicroscopic

! IFD + -> DIAGN +

IFD - -> inoculare pt con rmare

- in cazul carnasierelor domestice si

salbatice gasite moarte:

* examen prin IFD => se

elibereaza buletin de analiza

4
fl
fi
fl
fi
fl
fi
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
AUJESZKY (Pseudoturbarea) *de la suine
-izolarea virusului pe culturi celulare de - reactia de seroneutralizare

-lichid orofaringian, secretii nazale

porc PK15, sau celule embrionare de - ELISA conventionaa sau diferentiala

- creier, tonsile, pulmon, splina

pasare
- latex aglutinare
- sange
- identi carea atg virale sau a ADN-
ului viral prin:

*de la porcii la care se suspicioneaza *IFD

infectii latente:
* testul imunoperoxidazei

- ganglionul trigemen
* virus neutralizare

*PCR
*de la alte specii:

- portiunea din maduva spinarii

corespunzatoare regiunii cutanate in
care apare prurit

! probele de creier cu simptomatologie

nervoasa, se examineaza pt Aujeszky,
Rabie, EST si listerioza

5
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
TUBERCULOZA - de la animale sacri cate pt ! pe animalul viu
! pe animalul viu

precizarea diagnosticului:
- testul de evidentiere a sensibilitatii - dozarea γ interferonului

* limfonodurile capului de tip intarziat (TESTUL - pt reducerea timpului de stingere a

(retrofaringian, mandibular, parotidian)
COMPARATIV SIMULTAN)
unui focar, mai ales in exploatatii
* limfonoduri traheobronhice si - inocularea i.d. a 0.1 ml tuberculina care prezinta succesiv animale cu
mediastinale
PPD de tip bovin si a 0,1 ml rezultat pozitiv la tuberculinare
* limfonodurile hepatice, iliace, tuberculina PPD de tip aviar;
retromamare si poplitei
animalele reagente => sacri care

* portiuni de tesuturi si organe cu

leziuni macroscopice: pleura, pulmon, ! post-mortem

cat, splina, organe genitale, glanda - examen bacterioscopic - frotiuri prin

mamara
strivirea nodulilor sau prin stergerea
sectiunilor organelor lezionate -> se
! pt ex serologic pe animalul viu
coloreaza Ziehl-Neelsen

- dozarea γ interferonului
- examen bacteriologic- se utilizeaza
- se recolteaza probe de sange pe mediile:

anticoagulant * Lowenstein-Jensen

*Coletsos

=> mediile insamantate se incubeaza

la 37 de grade timp de 8-10 saptamani
=> colinii conopidiforme

- examenul histopatologic => in ltratii

limfocitare si de celule gigante de
tip Langhans, granulom tuberculos
cu zona centrala de necroza

- PCR

- proba biologica pt tipizarea tulpinilor

*cobai cu 0,1 ml cultura

semiuscata i.m -> moarte in 6 sapt

* iepurele cu 0,1 ml cultura uscata

i.m. - moarte dupa 4-6 sapt

6
fi
fi
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
PARATUBERCULOZA - materii fecale
*pe animalul viu
- reactia de xare a complementului

- raclat din mucoasa rectala

- testul alergic - stimularea - testul imunoenzimatic ELISA

- sange
reactivitatii organismului infectat - testul de imunodifuzie in gel de agar

- portiuni din intestin

utilizant paratuberculina - inocularea
- limfonoduri mezenterice
i.d. 0,1 ml atg -> citire dupa 72 ore
! reactia are valoare limitata in
- probe de ser pt ex serologic, sau depistarea infectiilor subclinice
lapte proaspat sau congelat *postmortem

- examen bacterioscopic - colorare

prin metoda Ziehl-Neelsen -> bacilii
se coloreaza in rosu, dispusi in
gramezi

- examen histopatologic - in ltrarea

mucoasei intestinale, a
limfonodurilor mezenterici cu celule
epiteloide si celule gigantice
Langhans + aglomerari de bacili

- ex. bacteriologic:

*se dezvolta la 37-39 de grade pe

medii ce contin micobactina in decurs
de 4-8 sapt pe Mediu Herold cu
galbenus de ou si micobactina, sau pe
mediu Dubos

- PCR

7
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
BLUETONGUE - de la animale in viata: sange pe -inocularea pe oua embrionate, - ELISA competitiva

EDTA
intravascular la embrioni in varsta de - imunodifuzia pe gel de agar

- de la cadavre proaspete: splina, 10-12 zile

- reactia de seroneutralizare

cat, maduva osoasa din oase - pe culturi celulare BHK-21

- reactia de xare a complementului
lungi, sange cardiac, limfonoduri
- inocularea pe oi, soareci sugari

- de la avortoni si nou-nascuti
infectati transplacentar: ser recoltat -identi carea ag viral:

in faza precolostrala, si probele de * imuno uorescenta

mai sus
* ELISA

- ser sanguin * virus-neutralizare

* RT-PCR

! metoda de con rmare este RT-PCR

SCHMALLENBERG - pt detectia ag patogen in faza de - izolare prin cultivare pe culturi - ELISA

infectie acuta ante-mortem:

celulare: celule de insecte (KC), celule - seroneutralizare

* ser sanguin
de hamster (BHK) si celule renale de - Imuno uorescenta indirecta
* sange pe anticoagulant
maimuta (VERO)
- pt detectia atg din cadavre:

* creier, maduva spinarii, splina,

lichid toraco-abdominal ,lichide
placentare si amniotice

* de la nou nascuti: sange si ser

precolostral

8
fi
fl
fi
fi
fl
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
ANEMIA INFECTIOASA -probe de sange in tuburi seci -> -examen hematologic: -testul Coggins

pentru con rmare, test Coggins hemoleucograma, det. VSH, det. - testul imunoenzimatic ELISA

ECVINA - Western Blot

(imunodifuzie in gel de agar) sau Elisa

hemoglobinemiei si siderocitemiei,
-probe de sange pe anticoagulant
efectuarea medulogramei si leuco- - r. de imuno uorescenta indirecta

-probe de tesut: cat concentratului

- r. de xare a complementului

-examen virusologic: izolarea virusului

prin inocularea sangelui suspect pe
culturi de leucocite de cal, sau culturi
de epiteliu dermic ecvin =>
identi carea virusului prin
imunodifuzie, imuno uorescenta, PCR

-examen histopatologic: prin biopsie

hepatica sau dupa moartea animalului
-> in ltratii histiocitare si limfocitare,
acumulare de hemosiderina,
proliferarea tesutului reticulo-endotelial

9
fi
fi
fi
fi
fl
fi
fl
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
LEUCOZA BOVINA - sange pt ex serologic
- ex. histopatologic
- testul de imunodifuzie in gel de agar

- probe din tumori, miocard, pulmon, * in ltratii masive cu elemente - testul imunoenzimatic ELISA
cat, rinichi, splina, limfonoduri limfoide si reticulohistiocitare

- ex. hematologic:

- det. nr de leucocite intre

4000-9000/mm2 sunt neinfectate

- efectuarea formulei leucocitare,

daca se obs ca limfocitele depasesc
74% se condisera ca animalele sunt
infectate cu BVL

- det. nr absolut de limfocite

- efectuarea ex. citologic

-ex virusologic:

- izolarea virusului prin inocularea

materialului patologic pe culturi
celulare primare renale, pulmonare si
splenice de vitel

- detectia atg viral prin:

- testul sincitiilor

- PCR

ESB - probe de creier, recoltate imediat teste rapide:

dupa sacri care pt reusita detectarii - Western blot

PrP speci ce ESB, pastrata la - testul rapid imunocromatogra c

temperaturi de refrigerare
- testul imunoenzimatic ELISA

! se recolteaza cu ajutorul unei spatule

din foramen magnum, si se obtine teste de con rmare:

truchi cerebral sau numai un segment, - western blot ( detectia de PrPsc in

se introduce proba intr-un recipient de tesut nervos)

plastic si se eticheteaza
- histopatologica -> vacuolizari
neuronale

- tesut limfoid - imunohistochimica ( kit Pullman)

SCRAPIA - testul de genotipare

- testul de discriminare pt tipizare de

suse EST la rumegatoare

10
fi
fi
fi
fi
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
PESTA RUMEGATOARELOR - de la animale in viata - tampoane - izolarea virusului pe culturi celulare - virusneutralizare

oculare, nazale, bucale, rectale, renale sau pulmonare de miel - ELISA de competitie
MICI
sange pe anticoagulant
(VERO)

- pt ex. serologic - sange fara - identi carea:

anticoagulant
* imunodifuzie in gel de agar

- de la animaloe moarte sau * electroforeza

eutanasiate: limfonoduri * ELISA de captura

( mezenterice si bronhiale), splina, *PCR

mucoasa intestinala, pulmon

PESTA ECVINA - sange integral, necoagulat, - izolarea virusului pe culturi celulare - ELISA

transportat la 4 grade celsius la BHK-21, VERO, sau celule de - reactia de xare a complementului

laborator
insecte KC, oua embrionate sau - immunoblotting

- probe de splina, plamani, ggl intracerebral la soarecii nou-nascuti

- reactia de virus neutralizare
limfatici de la animale recent moarte
- detectia virusului: RT-PCR, ELISA

- probe de ser ( pastrate la -20 - tipizarea virusului: virus neutralizare,

grade) PCR

FEBRA VAII RIFT - izolarea virusului prin inocularea - ELISA

materialelor patologice la soarece - virusneutralizare

sau hamster, miel la 1-2 zile, culturi
celulare de pasare sau precum
VERO sau BHK-21, pe celule renale
sau testiculare de vitel sau miel

- identi carea virusului:

* Imuno uorescenta pe
criosectiuni sau pe amprente din cat,
splina si encefal

* reactia de xare a
complementului

* reactia de imunodifuzie in gel de

agar utilizand broiaje tisulare

* testul ELISA directa

DERMATOZA NODULARA - noduli si cruste de la nivel cutanat, - PCR - virus neutralizare

saliva, secretii nazale, sange -> PCR - Western blot

BOVINA - ELISA

11
fi
fi
fi
fl
fi
fi
 BOALA PROBE RECOLTATE EXAMEN VIRUSOLOGIC EXAMEN SEROLOGIC
PERIPNEUMONIA - animale vii: tampoane nazale, probe - izolarea si cultivarea pe medii: agar - reactia de xare a complementului

lavaj bronho-alveolar, lichid pleural cu infuzie cord, bulion, la 37 grade - ELISA de competitie

CONTAGIOASA BOVINA - Immunoblotting

obtinut prin punctie, sange/ser creste in 2-10 zile -> aspect de ou
sanguin
prajit ( medii de cultura lichide sau
- cadavre: leziuni pulmonare, ggl solide)

limfatici, lichid pleural si lichid - teste biochimice

sinovial de la animale cu artrita - imuno uorescenta

- PCR

VARIOLA OVINA SI CAPRINA - biopsie cutanata efectuata in - izolarea virusului prin inocularea pe - atc pot detectati la o sapt dupa
decursul primei saptamani de la culturi celulare testiculare de miel aparitia leziunilor cutanate

aparitia leziunilor cutanate

sau tap, celule renale de origine - reactia de imuno uorescenta
- probe de ser sangvin
caprina
indirecta

- leziuni pulmonare si limfonoduri - identi care ag etiologic:

- reactia de imunodifuzie pe gel de
mediastinale de la cadavre
* imuno uorescenta
agar

- * ELISA directa - ELISA

! metodele serologice nu permit

diferentierea de dermatoza nodulara
contagioasa

12
fi
fl
fi
fi
fl
fl