Documente Academic
Documente Profesional
Documente Cultură
_______________________________________________________
235
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
Modificarea texturii
Modificarea texturii apare frecvent datorită distrugerii
macromoleculelor din substrat sau a producerii de metaboliţi microbieni.
Distrugerea polimerilor (celuloză, amidon, pectină, proteine, lipide, etc.)
corespunde reacţiilor de hidroliză şi conduce la modificări de structură sau
de textură a alimentului. Modificările de structură sunt foarte mari atunci
când încărcătura microbiană este importantă şi este constituită din germeni
mirobieni bogaţi în enzime exocelulare. Fenomenele de hidroliză sunt
uneori utilizate atunci când produc o amelioare a texturii (afânarea
brânzeturilor, fezandarea cărnii, etc.) sau aspectului (clarificarea cu ajutorul
pectinazelor fungice a sucurilor de fructe tulburi). Ele sunt în acelaşi timp
considerate nefavorabile, conducând la: prăbuşirea fructelor şi legumelor,
pierderea formei la carne şi la fructele în conserve sau la o afânare prea
mare a brânzeturilor.
O producere importantă de gaz de către microorganisme (CO2 cel
mai adesea şi H2) provoacă formarea de bule sau de fisuri şi gomflarea
produselor alimentare (de exemplu: gomflarea butirică a brânzeturilor).
Gazul produs poate altera şi ambalajele (gomflarea ambalajelor flexibile,
bombarea conservelor). Unele microorganisme produc polimeri (dextrani)
astfel încât, atunci când sunt prezente în lichide, le îngroaşă făcându-le
vâscoase sau cleioase. Un sirop dulce contaminat cu Leuconostoc poate fi
transformat într-un gel compact.
Aşadar, modificările de textură se repercutează asupra aspectului şi
asupra formei produsului.
Modificări ale valorii nutriţionale şi sanitare
Valoarea alimentară este modificată ca urmare a prezenţei şi
proliferării microorganismelor care consumă moleculele cu înaltă valoare
energetică: valoarea calorică a produselor fermentate este în general
inferioară celei a produsului iniţial. În acelaşi timp, anumite
micoroorganisme pot avea un rol favorabil: ele pot sintetiza molecule, cum
ar fi vitaminele şi factorii de creştere (aminoacizi, acizi graşi esenţiali,
etc.) sau pot duce la catabolizarea şi deci distrugerea unor produşi
toxici sau antinutriţionali precum şi a unor substanţe neasimilabile
(glucidele) care pot fermenta în intestin.
237
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
239
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
• umiditatea aerului;
• prezenţa sau absenţa oxigenului;
- factori care ţin de prelucrarea produsului
• tratamente termice;
• sărăcirea mediului în oxigen;
• iradierea;
• adăugarea unor substanţe cu rol
antimicrobian
- factori impliciţi
• relaţiile dintre microorganisme
241
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
243
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
aw = p/p0 = Nw/Nw + Ns
unde: p - presiunea vaporilor de apă din produs la temperatura T;
p0 - presiunea vaporilor de apă din atmosferă la aceeaşi
temperatură
Nw- numărul de moli de apă;
Ns - numărul de moli de substanţă
Presiunea osmotică
În general presiunea osmotică din interiorul celulelor microbiene
este ceva mai mare decât aceea a soluţiei reprezentată de un mediu de
cultură (aliment), datorită faptului că celula microbiană conţine în stare
247
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
solvită concentraţii mai mari de substanţe minerale şi organice pe care le
poate reţine datorită permeabilităţii selective a membranei ei citoplasmatice.
Ca urmare a faptului că apa din mediul extracelular tinde să intre în celulă
pentru egalizarea concentraţiei substanţelor solvite, celula microbiană se
află într-o permanentă stare de turgescenţă.
Dezvoltarea microorganismelor decurge bine atunci când ele se află
în soluţii izotone. Dacă echilibrul izotonic se dereglează brusc, acţiunile
brutale tind spre reechilibrarea osmotică şi determină lezarea mecanică a
peretelui celular, ceea ce în aceste condiţii expune celula la degradări
profunde cu efect letal.
Abaterile mari de la izotonie ale unui mediu generează la
microorganisme două tipuri de modificări:
- în medii hipertone (de exemplu în soluţii saline concentrate)
microorganismele suferă fenomenul de plasmoliză în cursul căruia, datorită
pierderii de apă volumul celulei se micşorează, citoplasma se retractă sub
forma unei mase sferice sau ovalare îndepărtată de peretele celular;
- în medii hipotone se produce fenomenul de plasmoptiză datorită
pătrunderii de apă dispre exterior, turgescenţa celulei creşte până când
presiunea intracelulară determină dezagregarea unor structuri parietale
însoţită de plesnirea peretelui celular.
Pentru a se dezvolta în condiţii optime, microorganismele au nevoie
ca în mediul lor de viaţă presiunea osmotică să fie mai mică decât cea
intracelulară. Excepţie fac microorganismele osmofile care se pot dezvolta
numai în medii cu presiune osmotică ridicată. Ele pot fi halofile atunci când
se dezvoltă normal în medii cu salinitate mare, sau zaharofile când se
dezvoltă în prezenţa unei concentraţii mari de zahăr (50-70%).
Spre deosebire de majoritatea microorganismelor care sunt stânjenite
de o concentraţie de sare mai mare de 2%, halofilele facultative
supravieţuiesc acestor condiţii de mediu în timp ce halofilele obligate nu se
dezvoltă decât în medii cu până 15% NaCl. Microorganismele halofile sunt
întâlnite în general în flora mărilor şi oceanelor şi în alimentele sărate
(măsline, peşte sărat).
Microorganismele osmofile au o deosebită importanţă economică:
ele pot avea uneori o acţiune utilă participând la procesele de maturare a
unor alimente ca brânzeturi, carne sărată, etc. Dar, pe de altă parte pot altera
alimentele conservate în soluţii concentrate de sare (saramuri) sau zahăr
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
249
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
253
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
255
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
257
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
când aceste toxine sunt prezente în alimente înainte de congelare, ele rămân
active şi după congelare.
Temperatura minimă la care microorganismele se mai pot multiplica
este de -15ºC, la -18ºC nu se mai multiplică nici o specie bacteriană în timp
ce levurile şi mucegaiurile pot rămâne viabile şi se pot multiplica chiar până
la -40ºC. De asemenea, la temperaturi scăzute pot să activeze şi unele
enzime cum ar fi lipazele şi enzimele proteolitice. Aşa se explică
modificările organoleptice ale produselor alimentare congelate.
Decongelarea produselor alimentare poate determina o scădere sau o
creştere a numărului de microorganisme, în funcţie de modul în care se face.
Atunci când decongelarea este rapidă, numărul de celule distruse în timpul
congelării rămâne constant sau chiar scade puţin datorită faptului că celulele
vătămate în timpul congelării nu au timp să îşi refacă structura (nu se
produce hidratarea celulelor şi nici aprovizionarea cu substanţe nutritive). O
decongelare lentă conduce la refacerea treptată a celulelor vătămate.
Atunci când decongelarea se face la temperaturi mari, apropiate de
temperatura optimă de multiplicare a microorganismelor, germenii rămaşi
viabili în timpul congelării îşi încep activitatea imediat aşa încât, dacă aceşti
germeni fac parte din microflora saprofită de putrefacţie, produsul
decongelat poate intra destul de repede în putrefacţie. Pentru a evita pe cât
posibil dezvoltarea microorganismelor decongelarea alimentelor este bine să
se facă la temperaturi mai mici de 10ºC iar atunci când ambalajul permite să
se recurgă la decongelarea rapidă sub jet de apă.
Trebuie ştiut faptul că, deşi microorganismele nu se înmulţesc sau se
înmulţesc foarte lent în alimentele congelate, acestea îşi modifică gustul,
culoarea, aroma şi chiar textura. Pe de altă parte congelarea unor alimente
foarte bogate în germeni microbieni nu oferă garanţia distrugerii complete a
acestora astfel că în timpul decongelării, formele viabile pot fi revitalizate
motiv pentru care un aliment decongelat nu trebuie recongelat.
Umiditatea atmosferică
Umiditatea relativă a aerului din spaţiul de depozitare influenţează
foarte mult dezvoltarea microorganismelor prezente în alimente şi în mod
deosebit a celor prezente în straturile superficiale. Atunci când produsele
sunt amblate în materiale impermeabile pentru apă, umiditatea atmosferică
nu influenţează microorgamismele prezente în produs. În acest caz
259
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
261
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
Tratamentele de eliminare
Eliminarea microorganismelor dintr-un aliment se poate obţine prin
procedeee mecanice. Spălarea este foarte mult utilizată (prezintă şi acţiune
antimicrobiană dacă se utilizează apă clorinată), în special pentru materia
primă vegetală care este supusă conservării. Atunci când se adaugă
substanţe coagulante, după floculare se impune centrifugarea sau filtrarea
pentru îndepărtarea microorganismelor. Metoda se practică la apă şi lapte.
Avantajul major al acestor procedee este că nu alterează calitatea
organoleptică şi nutriţională a produselor tratate, în special a celor fragile şi
măresc eficacitatea tratamentelor ulterioare.
Metode fizice de stabilizare şi distrugere
Căldura
Efectul microbicid al căldurii este atribuit în primul rând denaturării
proteinelor celulare şi în special a enzimelor. La aceasta, în cazul
microorganismelor aerobe, se adaugă efectul asfixiei determinat de o
insuficienţă acută de oxigen. În plus, efectul letal al expunerii la căldură ar
putea fi datorat şi unei intoxicaţii celulare legată de faptul că ridicarea
temperaturii accelerează reacţiile metabolice, determinând acumularea de
produşi toxici într-un ritm superior aceluia în care ei pot fi eliminaţi.
Utilizarea căldurii este un procedeu foarte răspândit de distrugere a
microorganismelor. Metodele utilizate se referă la încălzire şi fierbere.
Rezistenţa microorganismelor la căldură depinde de numeroşi factori
intrinseci (specia, caracterul sporulat sau nesporulat, concentraţia, vârsta
celulelor) şi extrinseci - compoziţia mediului, condiţiile de cultură (pH, aw),
durata expunerii. Tratamentele termice sunt caracterizate prin doi
parametrii: temperatură şi timp.
Alegerea temperaturii şi a timpului de acţiune se face în funcţie de
natura şi nivelul microorganismelor care trebuiesc eliminate, de nivelul
florei tolerante la temperatură, de compoziţia alimentului şi de sensibilitatea
acestuia la acţiunea tratamentului aplicat (se va ţine cont în special de
acţiunea temperaturii asupra vitaminelor). Rezultate mai bune se obţin prin
creşterea temperaturii şi scăderea timpului de acţiune.
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
Sensibilitatea microorganismelor faţă de efectul letal al
temperaturilor ridicate este apreciată convenţional prin doi indicatori care
reflectă temperatura letală şi durata ei de acţiune:
- punctul termic mortal reprezintă temperatura la care sunt omorâte
în 10 minute toate celulele unei specii date;
- timpul termic mortal exprimă durata de expunere necesară pentru a
omorî toate celulele la o temperatură dată.
La stabilirea ambilor indici se are în vedere raportarea la o
concentraţie definită de germeni şi la un mediu cu pH cunoscut. În realitate,
sensibilitatea microorganismelor la temperaturi ridicate este apreciată cel
mai corect prin corelarea celor doi indici, deoarece cu cât temperatura este
mai ridicată, cu atât durata expunerii cu efect letal este mai mică şi invers.
Pasteurizarea
Pasteurizarea este un tratament care permite în principal distrugerea
formelor vegetative a microorganismelor patogene sau responsabile de
alterare dar nesporulate. Rezistenţă mare la pasteurizare prezintă şi formele
vegetative termorezistente care pot supravieţui la fel ca şi formele sporulate.
Este necesară aplicarea tratamentelor de stabilizare pentru conservarea
produselor pasteurizate (produsele pasteurizate se conservă prin frig).
Pasteurizarea se aplică la lapte, oţet, vin, bere, sucuri de fructe.
Temperaturile la care se fac pasteurizările sunt mai mici de 100ºC şi
evoluază invers cu timpul de pasteurizare. Pasteurizarea joasă se face timp
de 30 minute la 63ºC în timp ce pasteurizarea înaltă se face la 90ºC timp de
câteva secunde. Foarte mult se practică pasteurizarea UHT (ultra haute
temperature) care presupune utilizarea unei temperaturi de peste 100ºC,
câteva secunde sau fracţiuni de secundă. Creşterea temperaturii până la
140ºC presupune deja o sterilizare, nu o pasteurizare.
Încălzirea este un tratament practic utilizat în mod curent şi este
considerată o super pasteurizare. Aceasta nu distruge formele sporulate şi
s-a constatat adesea că germinarea sporilor după încălzire este stimulată în
condiţii de refrigerare.
263
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
Sterilizarea
Sterilizarea prin căldură este foarte mult utilizată în industria
conservelor. Parametrii tratamentelor termice sunt diferiţi, în funţie de
natura produsului. Foarte important este pH-ul produselor ştiut fiind faptul
că la o valoare mai mică de 4,5 nu se pot dezvolta germenii patogeni.
Parametrii utilizaţi în mod frecvent în industria conservelor sunt:
- timpul de distrugere stabilit pentru o încărcătură dată şi pentru o
temperatură dată;
- temperatura de distrugere, pentru o încărcătură dată şi un timp de
tratare dat;
- parametrul D: timpul necesar pentru distrugerea a 90% din
populaţia iniţială la o temperatură dată, într-un mediu definit (timpul de
reducere zecimal sau t10). Valoarea D (în minute) pentru sporii câtorva
bacterii importante în industria alimentară la 120ºC sunt: 0,1-0,2 pentru
Clostridium botulinum A; 0,1 pentru Bacillus coagulans, 3-4 pentru
Clostridium thermosaccharolyticum şi 4-5 pentru Bacillus
stearothermophilus;
- parametrul Z: abaterea de temperatură (numărul de grade necesare)
pentru o variaţie a factorului D cu 10 (şi care permite de exemplu reducerea
cu 90% a duratei tratamentului pentru acelaşi nivel de eficacitate). Z se
exprimă în ºF pentru sterilizare şi în ºC pentru pasteurizare;
- parametrul F sau Vs : timpul necesar la 121ºC pentru distrugerea
sporilor sau formelor vegetative date (valoarea sterilizatoare). În general
nivelul de reducere N0/N găsit este 1012/1 pentru sporii de Clostridium
botulinum (în acest caz F=2,5 minute);
- parametrul Vp : timpul necesar la 70ºC pentru distrugerea formelor
vegetative date (valoarea de pasteurizare).
Eficienţa tratamentelor termice este diferită în funcţie de produs
(natura, vâscozitatea), de ambalaj (natura, forma, mărimea) şi de
temperatura iniţială a produsului.
Radiaţiile electromagnetice şi ionizante
Efectul biologic al radiaţiilor depinde de lungimea de undă şi de
doza de iradiere (cantitatea totală de energie incidentă). În funcţie de aceşti
doi factori, iradierea poate avea două efecte distincte asupra celulelor
microbiene:
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
- efect letal, reprezentând omorârea într-o dinamică logaritmică a
celulelor microbiene, în sensul că în fiecare interval succesiv de timp ele
mor într-un procent care rămâne constant;
- efectul mutagen, care constă în modificarea unor caractere
genotipice, survenind de obicei la o parte din celulele unei populaţii
microbiene şi manifestându-se prin apariţia la aceste celule a unor însuşiri
fenotipice noi, cum ar fi rezistenţa la un bacteriofag, capacitatea de sinteză a
unui metabolit esenţial sau, dimpotrivă, incapacitatea de a mai sintetiza un
anumit metabolit.
Radiaţiile sunt utilizate pentru distrugerea microorganismelor în
produsele alimentare. Radiaţiile UV cu lungimea de undă cuprinsă între 10
şi 400 nm sunt foarte penetrante fiind utilizate pentru reducerea încărcăturii
microbiene din atmosferă, de pe suprafeţe, din straturile lichide subţiri.
Puterea de penetrare a radiaţiilor UV este de numai câţiva mm. Radiaţiile γ
cu lungimea de undă 0,1-0,01 nm sunt de asemenea utilizate, au o bună
acţiune antimicrobiană şi permit pasteurizarea sau sterilizarea «la rece».
Radiaţiile X şi β sunt mai puţin utilizate în practica microbiologică.
Acţiunea antimicrobiană a radiaţiilor se manifestă în special la
nivelul acizilor nucleici care sunt hidrolizaţi. Germenii microbieni prezintă
rezistenţă diferită la acţiunea radiaţiilor: Salmonella şi Listeria sunt mai
puţin rezistente decât Pseudomonas, rezistenţă şi mai mare decât acesta
prezentând genul Staphylococcus.
Radiaţiile ionizante acţionează diferit asupra componenţilor unui
aliment: în apă determină formarea de peroxizi sau alţi radicali oxidanţi care
oxidează lipidele, vitaminele A, C, E şi B, acizii aminaţi; amidonul,
pectinele şi celuloza sunt depolimerizaţi; proteinele sunt hidrolizate formând
peptide. Acţiunea radiaţiilor se poate traduce prin modificări ale calităţilor
organoleptice dar în general nu alterează calitatea energetică şi nutriţională.
Enzimele endogene şi exogene şi toxinele microbiene sunt foarte sensibile.
În ciuda aparentei lor inocuităţi, utilizarea radiaţiilor ionizante este în
prezent bine reglementată: utilizarea lor este limitată în cazul produselor
deshidratate (vegetale) sau congelate, în cazul unor produse lactate (brânza
de tip Cammembert) sau în cazul cărnii (în special pentru carnea păsărilor
de curte).
265
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
Microundele, la fel ca toate radiaţiile electromagnetice determină o
agitare termică a moleculelor polare şi în particular a apei. Creşterea
temperaturii apei intracelulare atrage moartea microorganismelor, formele
vegetative sunt mai sensibile decât sporii. Acestea, ca de altfel şi
ultrasunetele sunt puţin utilizate şi numai în cazuri particulare.
Câmpul electric sau magnetic pulsator se utilizează pentru
dezinfectarea suprafeţei alimentelor.
Presiunea
Menţinerea alimentelor la presiune înaltă este în prezent un
tratament care se utilizează tot mai mult. Acţiunea presiunii asupra
activităţii microbiene este diferită: presiunea de 100-300 MPa reduce repede
numărul formelor vegetative la temperatura mediului ambiant, în timp ce
presiunea de 800 MPa denaturează numai sporii.
În prezent se utilizează CO2-ul pentru tratamentele de înaltă
presiune. Datorită unei toxicităţi proprii pentru anumite bacterii, acest gaz se
poate utiliza şi la presiuni moderate de 1-10 MPa. Astfel Listeria
monocytogenes este distrusă la temperatura mediului ambiant printr-un
tratament de 2 ore la 6 MPa.
Deshidratarea
Această tehnică de stabilizare este foarte veche şi se bazează pe
activitatea apei în produsele alimentare. Uscarea şi pulverizarea produselor
(cazul laptelui praf) se fac în condiţii de căldură. În cazul deshidratării
produselor alimentare intervin numeroşi factori. Astfel, în cazul uscării la
soare (fructe, carne, peşte) participă radiaţiile UV, fumul (carne, peşte)
combinând acţiunea căldurii cu acţiunea unor produşi de piroliză (formol,
acizi organici, acizi pirolici, alcooli, cetone, fenoli, cresol) care dau un plus
de savoare şi de culoare. Liofilizarea (sublimarea apei prin frig) este un
procedeu foarte utilizat care conservă proprietăţile alimentului.
Cea mai mare parte a procedeelor de uscare necesită controlul
temperaturii, al umidităţii, al turbulenţei aerului, al timpului. Produsele
uscate trebuie preparate cu grijă pentru limitarea încărcăturii microbiene
(spălarea, albirea, eventual periajul) deoarece uscarea nu face decât să
stabilizeze flora care există, produsele seci fiind şi ele supuse alterării.
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
Stabilizarea alimentelor prin distrugerea chimică a germenilor
microbieni
Agenţii chimici care se utilizează în industria alimentară pot fi
produse microbicide care acţionează prin distrugere şi produse
microbiostatice care acţionează asupra dezvoltării germenilor microbieni.
Aceste produse fie sunt utilizate în timpul fabricării (de regulă produsele
microbicide), fie sunt adăugate în produsul finit (în general produsele
microbiostatice) având rolul de stabilizare a produsului. Agenţii
antimicrobieni nu trebuie să fie toxici sau să aibă acţiune nefastă din punct
de vedere organoleptic sau nutritiv. Aceste produse sunt utilizate şi pentru
curăţarea utilajelor sau a localurilor (derivaţi ai clorului şi iodului,
săpunurile şi detergenţii, compuşii fenolici).
Alegerea unui agent dezinfectant sau a unui aditiv antimicrobian este
delicată. Acesta trebuie să îndeplinească următoarele condiţii: să aibă un
spectru larg de activitate adaptat la flora specifică a unui produs, absenţa
totală a toxicităţii (se va utiliza o concentraţie slabă care se elimină uşor prin
clătire sau care dacă rămâne în produs nu este periculoasă), absenţa puterii
corozive, posibilitate de utilizare uşoară, cost redus. În prezent, utilizarea
acestor agenţi antimicrobieni este reglementată prin lege, există liste cu
produsele autorizate care însă variază de la o ţară la alta.
Compuşii chimici antimicrobieni sunt foarte numeroşi, dar nu toţi
sunt utilizaţi. Activitatea lor antimicrobiană este variabilă: cei mai mulţi au
proprietăţi oxidante, alţii au putere tensioactivă în timp ce alţii au o acţiune
specifică.
Cei mai frecvent utilizaţi datorită proprietăţilor lor microbicide
(dezinfectante) sunt următorii agenţi:
- compuşii clorului (clorul gazos, hipocloritul de sodiu, cloraminele).
Acestea au un spectru bun de activitate, sunt uşor de utilizat şi au costuri
mici însă utilizarea lor în anumite circumstanţe este controversată;
- alţi halogeni cum ar fi iodul sau bromul. Aceştia sunt mai greu de
utilizat;
- acidul peracetic, foarte activ şi netoxic este din ce în ce mai mult
utilizat;
267
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
- peroxidul de hidrogen, 30-35%. Este adesea utilizat sub formă de
aerosoli pentru suprafeţe (0,02 ml/100 cm2) sau pentru sterilizarea
ambalajelor;
- ozonul, anhidrida sulfuroasă, detergenţii, etilenoxidul, etc.
Produsele microbiostatice sau microbicide adăugate în alimente sunt
cunoscute sub denumirea de conservanţi alimentari. Aceştia trebuie să
acţioneze asupra levurilor şi mucegaiurilor, asupra germenilor patogeni şi a
celor care provoacă alterări, să fie stabili şi inofensivi (netoxici) şi să nu
modifice valoarea nutriţională a alimentelor. Efectul conservanţilor
alimentari poate fi specific (acizii caprilic, dehidroacetic, sorbic şi
propionic, acidul benzoic şi benzoaţii, nitriţii, anhidrida sulfuroasă, etanolul,
antibioticele) alţii determină modificarea unor proprietăţi ale alimentului
cum ar fi pH-ul (acidul acetic, citric, formic, tartric, lactic) sau activitatea
apei (clorura de sodiu, zaharoza). Adiţionarea de sare (sărarea şi
saramurarea) sau de zahăr (fructele confiate) modifică gustul alimentelor şi
determină scăderea valorii activităţii apei până la valori la care germenii
periculoşi nu mai pot supravieţui sau nu se mai pot multiplica. Tratarea
alimentelor cu fum sau alţi acizi organici conduce la modificări
organoleptice ale alimentelor.
Cele mai multe metode de conservare nu modifică organoleptic
alimentele. Au fost semnalate substanţe care formează un ecran între produs
şi mediul ambiant; ambalajele în general, parafina, gazele inerte (N2, CO2).
Silicaţii alcalini sunt utilizaţi pentru conservarea ouălor, a fructelor şi
legumelor. Difenilul şi ortofenilfenolul sunt utilizate pentru conservarea
fructelor şi legumelor.
Agenţii minerali foarte mult utilizaţi sunt NaCl şi nitratul de sodiu
sau de potasiu. Acţiunea antimicrobiană a acestor substanţe este dependentă
de factorii de mediu şi în mod deosebit de pH. Cea mai mare eficienţă a
substanţelor antimicrobiene se înregistrează la pH=5-7.
Substanţele de conservare utilizate în industria alimentară nu pot
avea efect antimicrobian atunci când sunt utilizate în mod singular. De aceea
efectul lor se adaugă la efectul exercitat de tratamentele termice care
rămân cel mai mult utilizate pentru distrugerea sau inhibarea germenilor
microbieni. Atunci când celulele sunt vătămate ca urmare a acţiunii unui alt
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
factor de stres (temperatura supramaximă sau subminimă), substanţele
antimicrobiene pot determina moartea celulelor respective.
3.2.3. Factori impliciţi
La nivelul diferitelor biotopuri se stabilesc raporturi între speciile
microbiene componente ale microbiocenozelor, care pot fi de trei feluri:
indiferente, de tip beneficial sau cooperant şi de tip antagonic.
Interrelaţii microbiene de tip beneficial (cooperant)
Relaţiile de tip beneficial sau cooperant presupun ca cel puţin una,
dacă nu ambele specii, să aibă un beneficiu. În funcţie de gradul de
reciprocitate al beneficiului, de gradul de dependenţă care se crează între
speciile partenere şi de efectele acţiunii cooperante a microorganismelor
asupra substratului relaţiile beneficiale pot fi de mai multe feluri:
a) Comensalismul sau metabioza este un tip de relaţie în care numai
una din specii beneficiază de pe urma celeilalte fără ca specia care profită de
pe urma beneficiului să ofere ceva celei de pe urma căreia beneficiază.
Relaţiile comesale, la rândul lor, pot fi de mai multe tipuri, printre care cele
mai importante sunt:
- punerea la dispoziţia microorganismului care profită a unei
substanţe nutritive necesare activităţii ei vitale, substanţă care este un
metabolit produs de celălalt microorganism. Astfel, levurile nu pot
metaboliza sau metabolizează foarte greu poliglucidele (amidon, celuloză)
în timp ce mucegaiurile, datorită unui echipament enzimatic mai bogat pot
scinda aceste substanţe cu moleculă mare punând la dispoziţia levurilor
carbohidraţi uşor asimilabili. Un alt exemplu este cel întâlnit între
streptococii lactici şi lactobacili;
- producerea unui factor de creştere esenţial pentru celălalt
microorganism; aşa este cazul sintezei factorului V (NAD) necesar unor
specii din genul Haemophilus şi care este sintetizat de specii de Bacillus şi
de specii de stafilococ cu pigment alb;
- degradarea sau neutralizarea unei substanţe cu efect nociv
pentru partener. Astfel Escherichia coli şi alte specii produc enzima
penicilinaza (care degradează penicilina), creând în acest fel condiţii de
multiplicare bacteriilor penicilinosensibile; în mod analog unele tulpini de
Pseudomonas produc o substanţă capabilă să împiedice efectul antibacterian
al streptomicinei. Unele microorganisme pot să degradeze anumite substanţe
269
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
care se adaugă în alimente în scopul conservării acestora. Astfel, unele
tulpini de Pseudomonas aeruginosa pot să descompună substanţele prezente
în fum creând astfel condiţii favorabile de multiplicare pentru bacteriile
inhibate anterior de fum şi care pot produce alterarea produselor conservate
în acest mod. Alte microorganisme pot să degradeze substanţele
antimicrobiene elaborate în mediu tot de microorganisme. Un exemplu îl
constituie genurile Bacillus şi Lactobacillus care degradează nisina, un
polipeptid produs de Streptococcus lactis;
- modificarea pH-ului alimentului. La obţinerea pâinii, în
aluat are loc mai întâi o fermentaţie lactică produsă de bacterii. Prin
acumularea acidului lactic are loc scăderea pH-ului astfel încât acesta devine
propice dezvoltării levurilor care metabolizează zaharurile. Modificarea pH-
ului poate avea şi efecte nedorite în sensul că o creştere a valorii pH poate
determina o stimulare a bacteriilor de putrefacţie;
- consumarea oxigenului. Microorganismele aerobe consumă
oxigenul pus la dispoziţie şi în cazul în care aportul de oxigen încetează, se
crează condiţii de anaerobioză propice microorganismelor anaerobe;
- modificarea activităţii apei. Unele microorganisme se pot
dezvolta chiar şi în condiţii de umiditate scăzută (produsele deshidratate)
datorită caracterului lor xerotolerant. Prin activitatea lor asupra unui substrat
pot determina o creştere a valorii activităţii apei astfel încât
microorganismele care nu sunt foarte pretenţioase la acest parametru să îşi
poată desfăşura activitatea;
- denaturarea structurii produsului. Unele alimente dispun de
aşa-numite structuri de protecţie care nu permit microorganismelor de
alterare să pătrundă în produs. Degradarea acestor structuri de către
microorganismele care posedă enzimele tipice permite pătrunderea
microorganismelor reţinute anterior. De exemplu, coaja fructelor nu este
accesibilă decât mucegaiurilor care după ce se instalează şi degradează o
parte din fruct permit levurilor aflate pe suprafaţa cojii să producă
fermentarea sucului din fruct. Tot astfel, membrana de protecţie de la ou
împiedică pătrunderea microorganismelor care au străbătut porii cojii.
Degradarea acesteia de către microorganismele care produc liza cheratinei
(unele tulpini de Pseudomonas, Aeromonas) lasă cale liberă de pătrundere a
microorganismelor în interiorul oului;
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
b) Simbioza este o relaţie în care beneficiul este bilateral, cu caracter
specific şi permanent în care se crează o dependenţă complementară între
parteneri. Un exemplu de simbioză este cea creată în iaurt între unele tulpini
de lactobacili şi streptococi. Astfel, Lactobacillus bulgaricus şi
Streptococcus thermophilus se stimulează reciproc având împreună o
activitate metabolică mai intensă decât fiecare specie în parte. În prezenţa
lactobacilului, streptococul produce mai mult acid şi se înmulţeşte mai
repede decât atunci când este în cultură pură. Simbioza este nedorită atunci
când un microorganism util se află în relaţie cu un microorganism dăunător
produsului.
c) Sinergismul este o relaţie facultativă în care două microorganisme,
care se multiplică la nivelul aceluiaşi biotop, produc un efect (degradare,
sinteză) pe care nici una din ele nu este capabilă să-l producă singură. Astfel
arginina este descompusă până la stadiul de putresceină numai prin acţiunea
sinergică a unei asociaţii formate din Escherichia coli şi Streptococcus
faecalis.
Interrelaţii microbiene de tip antagonist
Relaţiile de tip antagonist presupun un efect nefavorabil sau nociv al
unuia din parteneri pentru celălalt. În funcţie de mecanismul acestuia
relaţiile antagonice pot fi la rândul lor de mai multe feluri:
a) Parazitismul este un tip de relaţie în care un microorganism se
multiplică pe seama celuilalt, în cadrul relaţiei parazit-gazdă, în care gazda
reprezintă de fapt biotopul pentru parazit. Cea mai cunoscută relaţie de tip
parazit este bacteriofagia care este fenomenul de parazitism al virusurilor
bacteriene numite şi bacteriofagi. Efectul multiplicării fagilor de către celula
bacteriană este liza celulei gazdă.
Liza fagică se exprimă în culturi pe medii solide prin formarea unor
zone circulare de liză numite „plaje”. Specificitatea de gazdă a bacteriilor a
permis valorificarea fenomenului de bacteriofagie în scopul identificării
unor genuri şi specii bacteriene prin test fagic (Salmonella, Brucella
abortus, Bacillus anthracis). Prezenţa bacteriofagilor este foarte dăunătoare
în culturile starter de bacterii care se utilizează în industria laptelui.
b) Competiţia este un alt tip de relaţie care se manifestă atât în cadrul
aceleaşi specii bacteriene cât şi între specii diferite. Competiţia se datorează
mai ales diferenţelor de viteză de multiplicare între specii. În afară de
271
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
diferenţele privind timpul de multiplicare alţi factori care intervin în
determinismul competiţiei sunt: compoziţia mediului care poate favoriza o
specie în dezavantajul celeilalte, modificarea compoziţiei mediului de către
microorganisme, activitatea aparatului ciliar (speciile mobile ocupă mai
rapid biotopul decât cele imobile).
Speciile de microorganisme cu viteză de multiplicare mare consumă
rapid substanţele nutritive astfel că mediul devine sărac pentru speciile care
se multilpică mai greu sau care atunci când nu găsesc toate substanţele
nutritive în mediu, sunt inhibate de alte specii mai puţin pretenţioase. Un
exemplu în acest sens îl constituie genul Staphylococcus, care fiind foarte
pretenţios în ceea ce priveşte substanţele nutritive din mediu, este concurat
în dezvoltare de alte specii de bacterii din aceeaşi familie şi anume
Micrococacceae, sau de bacterii de putrefacţie din genul Pseudomonas.
Mecanismele competiţiei sunt în mare măsură asemănătoare cu cele
ale comensalismului. Astfel, consumarea oxigenului din substrat de către un
anumit microorganism poate stimula microorganismele facultativ anaerobe
sau pe cele strict anaerobe dar inhibă dezvoltarea altor specii aerobe sau care
au pretenţii mai mari faţă de prezenţa oxigenului din substrat.
Tot astfel, schimbarea valorii pH a substratului poate determina
inhibarea unor microorganisme. Creşterea acidităţii produselor lactate
stimulează dezvoltarea speciei Escherichia coli care este rezistentă la
aciditate şi inhibă specia Shigella enterocolitica, foarte sensibilă la
aciditatea pronunţată.
Tot ca un fenomen de competiţie poate fi şi cel creat de om prin
adăugarea în produsele alimentare de anumite substanţe care favorizează
dezvoltarea anumitor germeni microbieni. Astfel, în produsele conservate
prin sare sau zahăr vor supravieţui numai microorganismele osmofile.
c) Antagonismul propriu-zis sau prin antibioză se realizează pe baza
efectului nociv al unor secreţii produse de microorganisme din diferite grupe
faţă de alte microorganisme.
Exemple de substanţe cu acţiune antimicrobiană:
- nisina produsă de Streptococcus lactis este foarte activă asupra
speciilor G (+). Această substanţă se utilizează la obţinerea brânzeturilor
pentru a preveni fermentaţia butirică;
Microbiologia alimentelor
_______________________________________________________
- subtilina produsă de Bacillus subtilis previne dezvoltarea genului
Clostridium în conserve;
- pimaricina (sau natamycina) este produsă de Streptococcus
notalensis;
- tilosina este produsă de Streptomyces fradiae şi este activă asupra
bacililor acido-rezistenţi.
Un alt exemplu de antagonism este cel determinat de prezenţa
factorului killer la unele specii de levuri. Astfel levurile de tip killer
rezistent (tulpini de Saccharomyces) aflate în acelaşi mediu cu tulpini de tip
killer sensibil (specia Rhodotorula) vor pune rapid stăpânire pe mediu ca
urmare a faptului că toxina killer distruge tulpinile sensibile.
Mossel, citat de Bârzoi şi colab. dă următoarele exemple principale
de antagonism între unele bacterii patogene şi saprofite de alterare din
alimente (tabelul 38):
273
Factorii care influenţează activitatea metabolică
a microorganismelor prezente în alimente
_______________________________________________________
Relaţiile dintre microorganisme ca şi factorii extrinseci, intrinseci şi
cei care ţin de prelucrarea produsului alimentar determină o anumită
succesiune a microorganismelor în produs, în funcţie cerinţele
microorganismelor şi de optimul factorilor de mediu. Ansamblul factorilor
de mediu va determina arhitectura microbiană a unui produs alimentar care
nu este stabilă un anumit timp ci în permanentă schimbare în funcţie de
modificările ce apar la factorii de mediu.