Sunteți pe pagina 1din 199

PREFATA

Lucrarea de fata pornete de la o bogata experiena a autorilor in


ultimii zece ani, in efectuarea a peste 200 de studii clinice de bioechivalenta
si studii de faza I, precum si studii de disponibilitate farmaceutica in vitro
cuplate cu acestea. In acest context ea se adreseaza investigatorilor clinici,
evaluatorilor din cadrul autoritatilor de reglementare si cercetatorilor in
domeniul dezvoltarii de noi forme farmaceutice sau de formulari generice
fiind axata pe problemele concrete, curente, ale domeniilor implicate.
Prezenta autorilor la practic majoritatea intalnirilor internationale
majore in ultimii ani in domeniul dizolvarii si bioechivalentei ca participanti,
ca autori si/sau organizatori in colaborare cu Societatea Americana de
Stiinte Farmaceutice si Federatia Internationala Farmaceutica (FIP), a
asigurat o cunoastere in profunzime a problemelor cu care se confrunta
comunitatea stiintifica internationala si perspectivelor domeniului.
Participarea coordonatorului lucrarii in comitetele directoare ale
actiunilor europene COST B 15 - Modelling in Drug Development si COST B
25 - Physiological Based Pharmaco/Toxico Kinetics and Dynamics, in ESAC
(European Center for Validation of Alternative Methods - Scientific Advisory
Committee), conducerea unor proiecte de cercetare la nivel national precum
si publicarea in reviste internationale de specialitate au contribuit si la
elaborarea unei viziuni personale asupra evolutiei in viitor a domeniului, care
se constituie in sugestii privind cercetari ulterioare, in cadrul unei "scoli" de
biofarmacie si farmacocinetica, cu multiple conexiuni in cercetarea
europeana si americana.
Cartea reprezinta o abordare cantitativa, practic toate formulele fiind
demonstrate, pentru aspectele matematice mult mai tehnice fiind corelata cu
cartea "Statistica Aplicata in Farmacie si Studii Clinice" aparuta in Editura
Universitara Carol Davila in anul 2007 si cu volumul de "Aplicatii Numerice
de Statistica in Farmacie si studii clinice" ce urmeaza sa apara in aceiasi
editura. In acest context ea se adreseaza studentilor de la farmacie,
masteranzilor in biostatistica si cursantilor de la ciclul de invatamant de
doctorat, in special cei ce pregatesc doctorate in farmacie sau in disciplinele
medicale preclinice.
In ceea ce priveste continutul cartii ea a urmarit sa fie complementara
cu cartile scrise de colegii Sorin Leucuta, Aurelia Nicoleta Cristea, Stefan
Moisescu si Lacramioara Popa, Dumitru Lupuleasa si Iuliana Popovici. De
exemplu, este prima carte care trateaza cantitativ aspectele de
farmacocinetica fiziologica. Ea este mai apropiata de specificul universal de
1

exemplu al masteratului de biostatistica unde cursantii sunt medici,


farmacisti, chimisti, biologi, matematicieni etc.
Ea va fi urmata de un al doilea volum care va include aplicatii concrete
ale principiilor fundamentale prezentate in acest volum, legate de practica
monitorizarii tratamentului medicamentos, de proiectarea studiilor clinice si
de proiectarea de noi medicamente, volum la care se lucreaza in colaborare
cu profesori romani si straini de la masteratul de biostatistica.
In final autorii considera ca o abordare fundamentala, matematizata,
este o carare ingusta, dar ea duce spre inaltimi si cel ce urmeaza acest drum
nu va bantui in intunecime.

BIOFARMACIE
INTRODUCERE
IN BIOFARMACIE SI FARMACOCINETICA

| BIOFARMACIA _____________________________________________
- studiaza masura si cinetica eliberarii principiului activ din forma
farmaceutica precum si absorbtia acestuia, in corelatie cu factorii de tehnica
farmaceutica, fizico-chimici si fiziologici la nivelul caii de administrare.
Prin extensie studiul in vitro privind eliberararea din forma farmaceutica
avand in vedere corelarea acestuia cu fenomenele in vivo, apartine tot de
domeniul biofarmaciei.
| FARMACOCINETICA_________________________________________
- se ocupa, dupa cum arata si numele (farmacon - medicament si
kinetos - miscare) cu studiul fenomenelor de transfer al medicamentelor in
organism si in principal cu studiul evolutiei concentratiei acestora in sange.
Fazele principale ale evolutiei medicamentului in organism sunt: absorbtia,
distributia, metabolismul si eliminarea. Se vorbeste despre lantul
"eliberare-absorbtie- metabolizare-eliminare" (LADME - liberation, absorption,
distribution, metabolism). Dupa cum se observa absorbtia apare ca obiect de
studiu atat in biofarmacie cat si in farmacocinetica. Cele doua domenii altfel
sunt atat de legate intre ele in ceea ce priveste scopul final al predictiei
evolutiei in timp a medicamentelor in organism incat se vorbeste in general
despre "biofarmacie si farmacocinetica" ca despre o singura stiinta.
| FARMACODINAMIA _________________________________________
- se ocupa in principal cu mecanismele de actiune ale medicamentelor.
Deoarece s-a observat ca de cele mai multe ori efectele depind de
concentratia medicamentelor si uneori la cresterea acesteia se observa chiar
2

o inversare a efectelor, o atentie deosebita se acorda in farmacodinamie


corelatiilor "doza-efect".
In ultimul timp studiile de acest tip au evoluat spre evaluarea corelatiilor
concentratie plasmatica - efect, vorbindu-se despre modelarea
"farmacocinetica - farmacodinamica" ( "PK/PD models" fiind termenul utilizat in
limba engleza).
Uneori se include, in mod natural si modelarea PK/PD in farmacocinetica
si,
intr-o
abordare
mai
completa,
eliberare-absorbtiemetabolizare-actiune-eliminare.
Ideea
includerii
actiunii
in
lantul
farmacocinetic nu este proasta, dupa cum se va arata mai departe intr-un
capitol special, dar nici explicata in mod cat de cat acceptabil.
| TOXICOCINETICA ___________________________________________
- ad literam se ocupa de cinetica toxicelor in organism dar, in masura in
care, in functie de doza, un medicament poate fi si toxic sau chiar foarte toxic,
toxicocinetica si farmacocinetica se suprapun. Atunci cand corelam efectele
toxice ale unui medicament cu concentratia sa in sange, putem spune in egala
masura ca facem toxocinetica si farmacocinetica. Metodele de lucru sunt
aceleasi, diferind doar scopul urmarit prin aplicarea acestor metode.
| TOXICOLOGIA CLINICA ______________________________________
- se ocupa cu probleme in principal cu problemele de tratament ale
intoxicatilor. Aici, pe langa metodele generale de reanimare si terapie
intensiva, valabile pentru grupe mari de toxice, se adauga si metode de
tratament "antidotic" specifice pentru fiecare tip de toxic. Mentionam la acest
capitol reactivatorii de colinesteraza, utilizati in intoxicatiile cu compusi
organofosforici, dat fiind folosirea pe scara larga a acestora in agricultura
pentru combaterea daunatorilor. Dat fiind capacitatea de adaptare a
daunatorilor si mijloacele de combatere a lor sunt in continua schimbare.
Trebuie mentionat ca, la fel ca la medicamente (in special la antibiotice), cu cat
compusii utilizati sunt mai activi, cu atat si toxicitatea lor pentru organismul
uman este mai mare. Legatura stransa intre toxicologia clinica si toxicocinetica
este legata de faptul ca tratamentu antidotic trebuie corelat cu concentratia
toxicului in sange sau la nivelul unor organe cu tropism crescut pentru toxic.
| FARMACOCINETICA CLINICA _________________________________
Domeniul este de importanta maxima pentru farmacist pentru aceea ca,
in ultimele doua decenii a aparut o noua specialitate farmaceutica - "farmacia
clinica". Farmacistul clinician este acela care individualizeaza tratamentul
medicamentos in functie de anumiti parametri generali ai pacientului (greutate,
varsta, sex), de unii parametri fiziologici sau fiziopatologici (in general gradul
de afectare al rinichiului si al ficatului) si, atunci cand se dispune si de
concentratia medicamentului la unul sau mai multe momente date, de
3

parametrii farmacocinetici individuali. Un caz special il prezinta medicamentele


care sunt metabolizate diferit in functie de particularitati genetice in tipul si
cantitatea de enzime ale pacientului.
In acelasi context, medicul poate individualiza tratamentul in functie de
stadiul bolii, stabilind limitele inferioara si superioara optime pentru
concentratiile plasmatice ale medicamentului in functie de balanta intre
eficienta si siguranta asociate medicamentului, bolnavului si bolii.
| APARITIA BIOFARMACIEI SI FARMACOCINETICII ________________
Problema principala cu care s-a confruntat lumea medicala si a dus la
aparitia farmacocineticii ca stiinta a fost problema sulfamidelor si a
antibioticelor.
La aparitia lor, sulfamidele au fost o revolutie in terapie. Eficienta lor
extraordinara in tratarea infectiilor a dat mari sperante medicinii. Treptat insa,
de-alungul a cativa ani s-a observat ca eficienta sulfamidelor a scazut
continuu. S-a contracarat acest fenomen, care de altfel nu a fost inteles de loc
la vremea respectiva, prin sinteza de noi compusi, mai activi dar si mai toxici.
In mai putin de un deceniu sulfamidele au disparut practic din terapie. Mai
tarziu, in vremea razboiului al II-lea mondial au fost descoperite antibioticele,
mai active decat sulfamidele, dar din pacate afectate de acelasi fenomen al
instalarii rezistentei germenilor patogeni la actiunea lor.
Explicatia mecanismului instalarii rezistentei s-a gasit mai tarziu, cand
s-a constatat ca exista o "concentratie minima inhibitoare" care trebuie
asigurata in sange pe o perioada suficienta pentru a impiedica adaptarea
microorganismelor si reluarea inmultirii lor.
A aparut deci pentru prima oara problema mentinerii concentratiei
sanguine a unui medicament peste un anumit prag, o perioada determinata.
Problema medicamentelor cu indice terapeutic scazut este
problema cea mai complicata .
Problema medicamentelor ce se repartizeaza foarte lent intr-un
compartiment profund
Problema medicamentelor metabolizate extensiv in ficat.
| SCOP SI METODE IN BIOFARMACIE SI FARMACOCINETICA
Din cele prezentate mai sus rezulta ca ca sopul biofarmaciei si
farmacocineticii este acela de individualiza tratamentul la un nivel dorit de
eficienta si siguranta, in functie de cunoasterea evolutiei concentratiei
medicamentului in sange. Desgur ca cele doua nivele nu sunt independente si,
similar oarecum cu "relatia de incertitudine" din mecanica cuantica, nu putem
sa crestem in acelasi timp si siguranta si eficienta peste o anumita limita a
produsului lor sau a altei functii de acestea.
In vederea realizarii obiectivului eficienta-siguranta fixat se cauta un
tratament care sa duca la realizarea de concentratii plasmatice intre anumite
4

limite. Desigur ca dependenta intre obiectivele generale de siguranta si


eficienta si concentratiile plasmatice nu este una singura. Concentratiile
plasmatice sunt un surogat, un inlocuitor al concentratiilor la locul actiunii
deoarece nu le cunoastem pe acestea si, mai mult, dupa cum se va arata mai
departe, nici locul efectiv al actiunii.
Mergand mai departe, in vederea realizarii "obiectivului derivat 1" si
anume pastrarea concentratiei intre anumite limite, ne este necesar un model
matematic care, pe baza cunoasterii evolutiei concentratiei in sange pe un
interval dat, sa permita predictia evolutiei in intervalul urmator. Acest lucru este
departe de a fi foarte simplu deoarece pe de o parte medicamentul nu se afla
numai in sange ci si in diferite tesuturi, organe, foarte adesea la nivelul
membranelor, si toate aceste "depozite suplimentare" sunt intr-un echilibru in
permanenta dinamica cu concentratiile din sange. Pe de alta parte, chiar daca
medicamentul ar ramane numai in sange, metodele matematice sunt mult prea
complexe si putine pentru a da raspunsul la problema propusa. Paradoxal, dar
metodele matematice sunt de fapt metode "empirice" de potrivire "post
mortem" a rezultatelor.
Apare insa clar un alt obiectiv, sa-i spunem "obiectiv derivat 2" si anume
cunoasterea concentratiilor in sange pe o anumita perioada data. Sa-i zicem
acestuia "determinarea experimentala a farmaco- cineticii".
Obiectivul este foarte dificil, intre altele si prin aceea ca trebuie, dupa
matematica, sa chemam inca o data un alt domeniu al stiintei in ajutor si
anume bioanalitica. Concentratiile in sange trebuiesc masurate. Aici trebuie
avut in vedere faptul ca medicamentul apare in sange in concentratii foarte
mici (in domeniul parti per bilion - parti per milion), de multe ori partial
transformat prin metabolism, legat de proteine sau liber, si, trebuieste separat
de componentele sangelui.
Mai inainte ca medicamentul sa fie cautat in sange el trebuie administrat
intr-o anumita doza si trebuiesc prelevate la diferite intervale probe de sange.
Aceasta se numeste un experiment clinic de farmacocinetica.
| ISTORIC ___________________________________________________
Se accepta ca farmacocinetica incepe cu doua articole ale lui Torsten
Theorell care a publicat in 1937 doua lucrari despre cinetica distributiei
substantelor administrate in corp. Termenul de farmacocinetica se pare ca a
fost introdus de F.H. Dost in 1953 iar cel de biofarmacie de catre J. Wagner
care a scris o carte fundamentala in 1971 - "Biopharmacy and relevant
pharmaco- kinetics".

Bazele matematice ale domeniului au fost puse de catre Aldo Rescigno


si Giorgio Segre1, a caror carte ramane a fi pe deplin inteleasa in intregime
probabil in secolul urmator. Traducerea ei in engleza "Drug and Tracer
Kinetics" este o carte fundamentala in ingineria chimica.
Intre cei care si-au adus contributii importante in farmacocinetica
mentionam pe Loo Riegelman, Gerhard Levy, Milo Gibaldi, Peter van
Pedersen, Peter Welling si Leslie Benett din Statele Unite. In ceea ce priveste
studiile de farmacocinetica legate de evaluarea bioechivalentei
medicamentelor o contributie importanta ii revine lui Vinod Shah.
La capitolul biofarmacie o contributie fundamentala a avut-o Takeru
Higuchi, singura lege teoretica in domeniu, "legea radacinii patrate" purtand
numele lui.
In Romania primele articole de biofarmacie si farmacocinetica au fost
scrise de prof. Nicolae Bonciocat, ilustru chimist, fizician si matematician in
1968, iar din interiorul lumii farmaceutice domeniul a fost introdus de prof.
Sorin Leucuta, incepand din anul 1971.

1. DIZOLVAREA.
CINETICI SI METRICI DE DIZOLVARE
1.1 Dizolvarea substantelor din cristale sau din tablete
Dat fiind ca in literatura farmaceutica s-au utilizat si se utilizeaza mai
multe "legi", aparent diferite, o prezentare mai riguroasa si demonstrarea lor
arata ca de fapt numarul lor este mult mai mic si ca de fapt aproape toate isi au
originea intr-o lege mult mai generala, si anume aceea ca transferul unei
proprietati oarecare intre doua zone vecine in spatiu este cu atat mai rapid si
mai intens cu cat diferenta intre cantitatile aflate in cele doua zone este mai
Considerm, pentru uurina calculelor (dar fr reducerea generalitii
problemei) cazul "unidimensional" al dizolvrii substanei active dintr-un cristal
sau dintr-o tableta. Fixm originea la suprafaa cristalului (tabletei). n acest
punct, concentraia substanei active va fi egal cu solubilitatea ei n lichidul de
dizolvare. Consideram ca exista un "strat limita" in cadrul careia concentratia
substantei active scade continuu iar dincolo de acest strat concentratia este
practic constanta.
c(h+x,t) =c(h,t)=ch
dupa cum se poate vedea in figura 1. Cand c(h)~0 in literatura
farmaceutica se zice ca avem conditii sink". Modelul este foarte general. In
hidrodinamica stratul limita este cel care ramane aderent
1

F Langenbucher: Linearization dissolution rate curves by the Weibull distribution, J Pharm


Pharmacol, 24, 979-981, 1972
6

mare. Daca vorbim de caldura, avem legea Fourier, daca vorbim de particule
de fluid in miscare, avem legea Navier-Stokes, daca ne referim la sarcini
electrice avem legea Kirchoff, daca avem molecule in solutie avem legea lui
Fick etc. In cele ce urmeaza vom folosi ca punct de plecare legea lui Fick. Vom
exploata confuzia ce se face frecvent intre dizolvare si cedarea din forme
farmaceutice, prezentand mai ales elementele comune aqle celor doua
fenomene.
1.2 Cinetici de dizolvare
la particula atunci cand restul lichidului este in miscare ca urmare a agitarii cu
un dispozitiv mecanic. In teoria stratului dublu electric avem similar stratul
dublu fix(stratul Helmholtz). In curgerea laminara prin vasele de sange avem
un strat de plasma la peretele vascular care ramane fix. Consideram acest
strat ca o membrana prin care are loc difuzia , pe cele doua fete ale
acesteia,avand concentratii constante: S (solubilitatea maxima a subst.active)
si c(h). In particular in cadrul teoriei lui Higuchi, h este grosimea unui strat din
tableta , din care substanta activa a fost spalata" in urma inaintarii fluxului de
solvent.
S

\k
Figura 1 - Cazul "unidimensional" al dizolvrii substanei active dintr-un cristal sau dintr-o tableta

S - solubilitatea substanei (concentraia substanei la suprafaa


cristalului),
c h- concentraia n "larg", h - grosimea
"stratului de difuziune". Daca notam cu:
J - fluxul substanei active de-a lungul stratului de difuziune, A - aria
supus dizolvrii, m - masa de substan dizolvat.
pe baza unor considerente de chimie-fizic, se ajunge la concluzia ca
fenomenul difuziei in membrana ,poate fi descris de legea I-a a lui Fick.
1d
m = j = _Ddc
(1)
A dt
dx
Aproximnd c dependena concentraiei de distan in
dc
interiorul membranei este liniar, gradientul de concentrai se
dx
7

poate nlocui cu

Ch

i se obine o prima ecuaie aproximativ:


h

m = _d (c^_)=k ( _ )
(2)
V!
A dt
h Vh
Ecuaia se poate rearanja i rescrie numai n termeni de concentraie
dac mprim n ambii membri ai ecuaiei cu volumul fluidului
(4) n care se face
dizolvarea.
1

dm

A S _ c)

dt
Legea in aceasta forma a fost dedusa experimental in urma cu peste
100 de ani si este cunoscuta in literatura farmaceutica sub numele de legea
Noyes-Whitney.
Daca impartim in ambii membrii ai egalitatii cu volumul de solvent in care
se face dizolvarea , prin impartirea cresterii cantitatii dm
dizolvate la volumul in care s-a facut dizolvarea V, se obtine
dt
dc
cresterea concentratiei in unitatea de timp
dt
d

dt = V (S _ ch)
(2')
dt V
Soluia acestei ecuaii difereniale cu variabile separabile este
kA
ln(S _ c h ) = ln S _t sau
c kA

) = _t
(2'')
SV
Dezvoltnd n serie logaritmul i pstrnd numai primul termen se
obine, pentru valori mici ale lui ch/S(c h /S << 1):
c h kA - = 1 sau
SV
( kAS \
c
h ={ / (3)

ln(l _

ch

ecuaie foarte des aplicat n practic, dar cu neglijarea verificrii


condiiei pentru care aceasta are sens ( c h /S << 1).
Deci, ca o caracterizare fenomenologica a ecuaiei (3), putem spune c
atunci cnd dizolvarea se face ct mai aproape de condiii "sink" i solubilitatea
substanei active este mare, concentraia n mediul de dizolvare ca funcie de
timp este o dreapt.
n practic s-au constatat dou tipuri de abateri de la aceste
legi. 12

(2'') se poate explicita n raport cu c:


k A

--1

c(t ) = S (1 _ e V )
i, dac nmulim cu volumul mediului de dizolvare - V i notm VS= m,
(masa totala care se poate dizolva) i cV=m (masa dizolvata la momentul t)
obinem:
k
A

m(t) = m, (1 _ e
V
)

(4')

t
V

Ecuaia (4) a fost de multe ori verificat n practic, dar n unele cazuri
curba de dizolvare ori are forma de S, ori datele iniiale au o cretere foarte
abrupt i deci modelul nu mai corespunde. Pentru astfel
de
situaii
s-a
propus
2
o funcie mai general - "funcia Weibull"

_ a t

_e)
care se verific empiric n aproape toate cazurile3. Observm
c ultima ecuaie se poate rescrie sub forma:
, m, _ m m ln -------- = ln(1
------------- ) = _at .
m m
, ,
Dupa cum se vede din figura 2, cnd P<1 avem de fapt o funcie de tip
radical, deci P crete mai repede dect t n intervalul [0,1], iar cnd P > 1,
curba este o funcie putere i creste mai repede decat cresterea liniara.
p

Figura 2 - Funcia Weibull

Observam ca daca dezvoltam in serie logaritmul si retinem doar


primul termen din dezvoltare (ln(1 _ x)x), se obtine expresia
m

(4) de m,
aproximativa = atP valabila pentru valori mici ale lui m fata
m
,
(deci etapa initiala a dizolvarii). O astfel de lege de dizolvare: m= m, k1tn
s-a dovedit a fi aplicabil pe domenii mai largi (chiar si atunci cand m
se apropie de valoarea sa de saturatie) . Un caz special il reprezinta legea
Higuchi, cnd n = -0,5, lege care va fi prezentata pe larg mai departe.
O abordare n care constanta K nu mai este constant i este
dependent de timp, numit abordare n condiii "neomogene" a fost
propus recent de Macheras2. El nlocuiete constanta k din legea Noyes
Whitney cu o funcie de timp: k = M-h (t*0)
justificnd schimbarea prin aceea c n timpul dizolvrii suprafaa
cristalelor scade volumul lor i raza lor de curbura creste, i scade si
grosimea stratului de difuzie ceea ce influenteaza constanta k. Facem
observatia ca acest h nu are nici o legatura cu grosimea stratului de
difuziune, alegerea notatiei fiind nu tocmai potrivita.
O astfel de cinetic numit de tip "fractal", pe care ca mnemotehnic
am putea considera c i trage numele de la aceea ca h nu este neaprat un
ntreg ci poate fi i un numr fracionar (n realitate denumirea vine din teoria
simetriei), a fost propus pentru a descrie dizolvarea n condiii de restricii
spaiale sau n lipsa agitrii3. Scriem (2') n forma:
=

k( m

,_m

t (

,_m

dt
i integrm f = f k 1 t ~ h dt + a.
J
m, _ m J
Facem observaia c integrala n raport cu t este improprie n t=0 i ea
este convergent numai pentru -h+1> 0, deci h<1. Calculnd efectiv
integrala, se obine:

P Macheras, A Dokoumetzidis: On the heterogenity of drug dissolution and drug release, J


Pharm Res, 17(2), 108-112, 2000
3
R Kopelman: Fractal reaction kinetics, Science 241, 1620-1626, 1988 14
11

t- h

+1

_ln(m _ m) = 7 + a _ h +1
i, deoarece la momentul t=0 avem m=0, rezult a = _lnmw i
k

deci
k1 1_h

m
- 1 h
= M =1_e _
(5)
m
deci o funcie Weibull.
Daca avem condiii "sink" ( c<<S i deci m<<mw) ecuaia (4), cu noul k:
= k 1 t~ h m x se va integra dnd rezultatul:
dt
1

1 h

= m = A_ t l-h
(6)
mx
1_h
ecuaie care altfel se poate obine i direct din (5) prin dezvoltarea
exponenialei n serie i reinerea a doar doi termeni.
Facem suplimentar observaia c integralele sunt improprii i sunt
convergente atunci cnd h<1 , iar cele doua rezultate obinute reprezint
cele dou legi empirice discutate mai sus.
Deci, rezumnd, cele dou tipuri de funcii ntlnite n practic n
descrierea empiric a procesului de dizolvare pot fi deduse prin nlocuirea
aa zisei "constante (k=D/h)" din ecuaia lui Fick cu o funcie de t. Observm
c nlocuirea unei constante cu semnificaie fenomenologice clare cu o
funcie postulat este o operaie "empiric". Dincolo ns de o unificare
teoretic a celor dou tipuri de curbe ntlnite n practica analizei curbelor de
dizolvare, metoda propus coreleaz cinetica "in vitro" cu cinetici "in vivo", n
special cea de absorbie, care poate fi abordat n aceleai condiii
"neomogene n ceea ce privete dizolvarea "in vivo", n special pentru
medicamentele foarte puin solubile.
1.1 Dizolvarea unui cristal sferic. Legea rdcinii cubice.
Plecnd din nou de la legea Noyes-Whitney
d"= k A ( S _ O
i notnd cu M masa cristalului rmas nedizolvat avem
dMM

- = _kA( S _ c)

i considernd cazul n care experimentul decurge n condiii n care S


- c poate fi considerat constant in timp, legea ia forma:

12

= -kA
d
Considernd particula sferic A = 4nR2, V = 4nR3/3 i deci
M
2/3
2/
dt A = aV = pM 3, unde M este masa cristalului, considerat ca
avnd densitate constant.
n acest fel inem cont de faptul ca prin dizolvarea cristalului masa i
implicit suprafaa lui se micoreaz.
dM

= -k 1 M 23 i integrnd n condiiile iniiale M(0)=M0

dt
kt = M 1 - M 13
Deci,daca vom reprezenta radacina cubica a masei nedizolvate in
functie de timp vom obtine o dreapta.
| 1.3 Dizolvarea din matrite inerte. Legea radicalului4'5 ______________
Cea mai utilizat lege teoretic pentru predicia eliberrii din forme
farmaceutice solide i semisolide este legea lui Higuchi, care stabilete o
dependen de tip liniar ntre cantitatea de principiu activ eliberat i rdcina
ptrat a timpului.
Modelul fizic unidimensional este reprezentat n figura 3. El se
bazeaz pe ipotezele:
(A) condiii perfect sink n mediul extern, (C 0)
dc
(B) o stare cvasistaionar ( =constant)
dx

-(h+dh) -h
Figura 3 - Modelul fizic unidimensional

T Higuchi: Rate of release of medicaments from ointment bases containing drugs in


suspension, J Pharm Sci , 50(10), 874-875, 1961
5
T.Higuchi: Mecanism of sustained action medication. Theoretical analysis of rate of
release of solid drugs in matrices, J Pharm Sci, 52(12),1145-9, 1963
13

Deducerea legii este prezentat n textele standard despre difuzia n


sistemele farmaceutice6 dup cum urmeaz.
Cantitatea dm cedat in larg pe unitatea de suprafa ca urmare a
depleiei (spalarii) dintr-o zon de grosime dh este egala cu cantitatea
spalata din care se scade cantitatea ramasa din zona spalata, unde
presupunem din nou spre simplificare o scadere liniara o concentratiei in
stratul de difuziune.
S
dm = Mdh --- dh
2
(1)
unde
M - cantitatea total de medicament n unitatea de volum iar
S - concentraia de saturaie a medicamentul n mediul de dizolvare
dh
S este suprafata triunghiului cu baza dh si inaltimea S si

/ o

h /h

pcdx =pl cdx


J o

= aria de sub curba c(x)) cu cantitatea ramasa in zona spalata, iar Mdh este
numeric egal cu cantitatea de substanta care se afla in stratul de grosime dh
inainte de spalare.
Facem observaia c ideea de zon "splat" include implicit ipoteza
c difuzia n interiorul tabletei se face cu viteza mult mai mica dect difuzia n
fluid, ipoteza destul de greu de acceptat. Dat fiind ns verificarea
experimental a legii n foarte multe cazuri i posibilitatea deducerii ei i n
alte condiii, meninem ipoteza i demonstraia mai mult ca mnemotehnic,
ceea ce este de fapt cazul pentru majoritatea teoriilor n tiinele medicale i
biologice.
Pe de alta parte , deoarece am presupus o scadere liniara a
concentratiei in zona spalata
dC S - 0 S
dx - h - 0 h
din legea I-a a lui Fick rezult pentru cantitatea ce traverseaza zona spalata

dm = ^-dt
Egalnd cele dou expresii pentru cantitatea cedat obinem:

G Flynn, S Yalkowski, TJ Roseman: Mass transport phenomena and models: theoretical


concepts, JPharm Sci, 63(4), 479-509, 1974
14

Mdh - S dh = ^^dt 2 h ;
DS
hdh = --------- dt
M - S /2
h 2 DS
Integrnd
= -------------t i putem scoate pe h:
a
K
2M - S/2*K
= I 2DSt
\M - S /2
Integrnd (1) cu condiiile iniiale m(0)=0, se obtine m(h) = (M-S /2)h(t)
i nlocuind pe h (t)
2 DSt
m = (M - S / 2)
M-S/2

J 2DSt ------------ = J D S (2M - S )t = k t 1


VM - S /2v

n condiii sink (2M>>S) expresia lui m se simplific la:


m = V 2MDSt .
| 1.4 Metrici. Similaritate si Disimilaritate. Msurtori _______________
In biofarmaceutica in ultimii ani au fost introduse o serie de metrici,
pentru compararea sau masurarea distantelor dintre seturi de puncte
experimentale obtinute pentru caracterizarea evolutiei diferitelor fenomene.
Cateodata metricii propusi sunt in concordanta cu definitia matematica
riguroasa, corespunzatoare unor cateva, binecunoscuti metrici derivati din
norme" de vectori, care sunt utili pentru a fi identificati, din moment ce
proprietatile lor au fost studiate pe larg.
Cateva alte marimi farmaceutice nu indeplinesc toate conditiile pentru
a putea fi adevarate", in principal conditia in care drumul dintre doua puncte
x si y este mai scurt sau egal cu decat drumul de la x la y prin intermediul
unui punct intermediar.

|| = x
= V Z O V -yF.

Norma sferica ||x


d (

x, y )

cu distanta asociata

Factorul f2 poate fi considerat ca o marime deviata din norma sferica:

15

100
f 50l

f = 5log-

Mti )
11 + --------------n
Din moment ce in multe cazuri nu toate punctele au aceiasi
importanta, este uzual sa le asociem diferite greutati".
De exemplu in statistica si probabilistica unui punct ii putem asocia
fracventa de aparitie sau probabilitatea, in care caz se obtine media" unei
variabile aleatoare asociata parametrului studiat.

In particular d(R, T) = E[(Yr - YT )2] = f - , + <-7r


poate fi folosita pentru definirea bioechivalentei individuale.
Norma rombica I U I = E | cu distanta asociata
(
d
y) = E|
y\
respectiv d(x,y) = J|x(t) -y(t)\ dt in cazul curbelor.
Factorul f1 este foarte apropiat de distanta asociata normei rombice:
X\

xn

f = -^-n ------------ x100 ja fel de bine ca si asteptarea care

^E^Ri
i =1

defineste cresterea bioechivalenta E(Xt -Xr |)


Daca ne uitam la bioechivalenta dintre un medicament testat T si unul
de referinta R, putem folosii distanta pe un spatiu al cubelor
de nivel la plasma d(R,T) = d(AUC T ,AUC R ) = jT|cT(t)-c R (t)| dt
Norma cubica ||X|c = maXxi|cu distanta asociata d(x,y) = maXx, -y\
care a fost propusa ca o marime sigura din moment ce aceasta distanta ne
asigura ca diferenta dintre 2 puncte ale curbelor nu sunt mai mari decat o
valoare acceptata. Pe cat timp in unele cazuri exeprimentale datele par sa
aiba o distributie de tip logaritm natural decat cel normal, evaluarile sunt
facute dupa logaritmare. Deoarece log x-log y=log x/y evaluarea acestor
rapoarte dintre perechile de date corespunzatoare, asemanatoare cu
marimea de tipul rho",
(RT^
1v
p = E max n
i

___

v T' R
i
i

16

pare a fi o idee naturala.


Distanta Mahalonobis este o marime care ia in consideratie variaatie
datei d (x, y ) = ((x - y)*M(x - y ))7 , unde M este o matrice a covariantei de data
niumita metric diagonal Mahalonobis.
Trebuiesc facute cateva discutii referitoare la independenta
caracteristicilor. In cazul unei cantitati de medicament eliberate la diferite
intervale de timp, este sigur ca valoarea medie este mai putin independenta,
fiind corelata dupa o lege cinetica de dizolvare. Din contra, variabilele sunt
mai libere fiind determinate de factori in functie de medicament si de
conditiile de dizolvare, dar de altfel, si de factorii locali conectati cu marimea
si structura tabletei la un moment tK , concentratia de substanta activa in
acelasi moment, precizia metodei analitice la concentratia respectiva etc.
I 1.5 Normalizarea datelor
probabilistice precum si doua proprietati definitorii ale marimilor echivalente:
reflexibilitatea si tranzitivitatea care necesita a fi examinate mai mult in
detaliu. Non-reflexibilitatea, non- bioechivalenta unui medicament de
referinta cu el insusi, intr-un experiment particular datorita unei mari
intravariabilitati, ne conduce la examinarea unui criteriu de crestere, cand noi

Masura Euclidiana d( x, y) = V E ( x - y ) 2 , ca o masura de


disimilaritate, include ipoteza unei izotropii a spatiului. Din punct de vedere
matematic componentii vectorilor x si y pot fi caracteristici fizice diferite care
pot fi cuantificati de diferite unitati de masuratori. Deci, pentru calcularea
distantei putem fi in situatia de a adauga unitati de timp, de concentratie, de
intersectie de linii etc. Din acest motiv, cateoadata este util a unii aceste date
precum si toate caracteristicile pentru a avea aceeasi medie si aceeasi
variatie. Acesta transformare poate fi considerata de exemplu ca o translatie
combinata cu o crestere de scala ' = --m-. Dupa acesta
x

transformare toate caracteristicile au media 0 si variatia 1. Aceasta


transformare evita o dominanta a caracteristicilor cu valori mari. De exemplu,
in compararea curbelor de dizolvare, transformarea va descreste dominarea
ultimelor puncte. Pe de alta parte daca suntem interesati mai mult in
extinderea ratei de dizolvare, transformarea va ascunde diferentele mari.
Pentru a putea fi siguri, decizia referitoare la normalizare sau non
normalizare depinde de importanta relativa a celor doi parametrii (rata si
extinderea) in biodisponibilitatea medicamentului si scopului terapeutic. Prin
asociatia marimilor, similaritatea si disimilaritatea, se pot definii relatiile
echivalente. Problema este ca marimile sunt definite pe mostre de dizolvare
sau curbe de plasma, fiind masuri
17

comparam un medicament de referinta cu unul generic. Non-tranzitivitatea


particulara, in cazul experimentelor diferite, pe diferite mostre, permite o
examinare mai amanuntita a rezultatealor, evaluarilor si concluziilor.
1.6 Prevederi generale ale USP 26 i EP 4
privind testarea parametrilor de dizolvare _______________________
Pentru formele orale solide sau alte forme care conin faze solide i
care pentru a-i exercita aciunea farmacologic trebuie s sufere un proces
de dizolvare, farmacopeile impun un test de dizolvare.
Condiiile generale n care se desfoar testul de dizolvare sunt
prezentate ntr-o monografie general denumit 2.9.3. Dissolution test for
solid dosage forms - EP sau <711> Dissolution - USP 26. Pentru forme cu
eliberare modificat, USP prevede i o monografie general <724> Drug
release.
n aceste monografii, sunt prezentate condiiile, aparatele, metodele
analitice, metodele de validare, etc. pentru testele de caracterizare a
dizolvrii sau eliberrii substanei active in vitro.
Aparatura utilizat este standardizat. n USP sunt standardizate 7
aparate de dizolvare, 6 dintre ele fiind prezente i n EP 4 i BP 2002. Toate
aparatele dispun de mijloace mecanice de agitare - dispozitive de rotire sau
pentru micri tip biel, vase de dizolvare calibrate, care s permit
observarea facil a fenomenului, bi termostatate care s ajute la
meninerea constant a temperaturii. Diferenele eseniale ntre aparate
constau n gradul de expunere al formei farmaceutice la mediul n care
trebuie s se realizeze eliberarea sau dizolvarea.
n continuare este dat o prezentare succint a aparatelor de dizolvare
conform USP:
Aparatul 1 - Cu coulee ______________________________________
Forma farmaceutic este aezat ntr-un coule ai crui perei sunt
constituii dintr-o sit cu dimensiunea ochiurilor standardizat. Couleul se
nvrte ntr-un vas de dizolvare cu o vitez bine determinat. Metoda se
preteaz testrii comprimatelor i capsulelor.
Aparatul 2 - Cu palete ________________________________________
Forma farmaceutic este aezat pe fundul vasului de dizolvare.
Agitatorul este constituit dintr-o palet cu dimensiuni standard. Pentru a
evita flotarea, unele forme pot fi prinse cu cteva fire de platine sau cu o
agraf. Dispozitivul de fixare nu trebuie s afecteze dizolvarea substanei
active.

18

Aparatul 3 - Cu cilindru reciproc _______________________________


Vasul de dizolvare este de form cilindric, cu fundul plat. Forma
farmaceutic este aezat ntr-un cilindru care are la ambele capete cte o
sit cu anumite dimensiuni ale ochiurilor. Printr-o micare reciproc, cilindrul
este cufundat repetat n vasul de dizolvare i se realizeaz prelevrile la
timpii dorii.
Aparatul 4 - Cu solvent n flux continuu _________________________
Vasul de dizolvare este alctuit dintr-un corp de sticl tronconic, avnd
la vrf un orificiu prin care, dintr-un rezervor de solvent, cu ajutorul unei
pompe peristaltice este adus solventul de dizolvare. Agitarea este realizat
chiar de fluxul continuu de solvent. Forma farmaceutic ce urmeaz a fi
supus testului de dizolvare este aezat ntr-un suport special sau pe un
pat de bile de sticl aezat n partea inferioar a cuvei de dizolvare.
Aparatul 5 - Palete peste disc __________________________________
La anumite forme farmaceutice (ex. TTS), "volumele moarte" care
apar n jurul formei farmaceutice n timpul testului de dizolvare pot afecta
performanele de dizolvare in vitro. Din acest motiv, metoda cu palete a fost
adaptat n sensul plasrii unui disc realizat dintr-o sit pe fundul vasului. n
acest fel, forma farmaceutic nu ajunge pe fundul vasului, iar contactul cu
mediul de dizolvare este mai mare.
Aparatul 6 - Cu Cilindru _______________________________________
Utilizat mai ales pentru sisteme terapeutice transdermice , este
constituit dintr-un cilindru cu 4 locauri n care se prind sau se lipesc aceste
TTS. Cilindrul se mic similar aparatuluil - cu coulee.
Aparatul 7 - Cu Suport ________________________________________
Este similar aparatului 3, dar forma farmaceutic este aezat ntr-un
suport care variaz ca form i dimensiuni n funcie de caracteristicile
dorite. Formele farmaceutice se pot prinde de aceste suporturi cu adezivi
speciali, care exist deja pe pia. Acest aparat asigur posibilitatea
schimbrii rapide a mediului, prin schimbarea vaselor de dizolvare i un
contact foarte mare cu mediul de dizolvare.
Pentru anumite forme farmaceutice sunt prevzute n monografiile
specifice, condiiile impuse pentru testul de dizolvare.
Cele mai uzuale condiii de lucru sunt prezentate n continuare:
Aparate ____________________________________________________
Cele mai utilizate aparate sunt aparatul 1 (coulee) i aparatul 2
(palete) descrise n EP i n USP. Metodele sunt simple, robuste, foarte bine
standardizate i utilizate n toat lumea. Aceste metode de dizolvare sunt
19

destul de flexibile pentru a permite testarea parametrului de dizolvare pentru


o varietate mare de forme farmaceutice. Din acest motiv, aparatele 1 i 2
descrise n USP i EP vor fi utilizate n testele de dizolvare cu excepia
cazurilor n care se dovedesc a nu fi satisfctoare. n aceste cazuri pot fi
utilizate alte aparate de studiere a eliberrii substanei active (aparatele 3, 4,
5, 6, 7). Alegerea acestor metode se va face numai pe baza demonstrrii
superioritii metodei alese fa de metodele convenionale (aparatele 1 i
2). Metodele se preteaz att prelevrii de probe manual ct i automat.
Medii de dizolvare ___________________________________________
Testul de dizolvare trebuie s fie realizat n condiii ct mai similare
celor biologice. Acest lucru permite o interpretare a datelor de dizolvare prin
prisma performanelor in vitro ale produsului i stabilirea unor corelaii in vitro
- in vivo. Condiiile testului trebuie s in cont de proprietile fizico-chimice
ale substanei active i de eventualele condiii ale mediului intern, n care se
va realiza dizolvarea in vivo.
Volumul mediului de dizolvare este n general 500, 900 sau 1000 ml.
Condiiile "sink" sunt recomandate, dar nu sunt obligatorii. Trebuie utilizat un
mediu de dizolvare apos cu un pH ntre 1.2 i 6.8 cu tria ionic a
tampoanelor prezentate n USP.
Pentru realizarea fluidului intestinal reconstituit se va utiliza un mediu
cu pH 6.8 sau mai bazic, dar fr a depi valoarea de 8.0. Pentru realizarea
fluidului gastric reconstituit se va utiliza un mediu apos cu pH 1.2 fr adaos
de enzime. n anumite cazuri, adaosul de pepsin, respectiv pancreatin la
sucurile reconstituite poate fi justificat ( ex. capsule mbtrnite). Utilizarea
apei, ca mediu de dizolvare nu este recomandat, datorit variaiei mari a
parametrillor acesteia n timpul testului, variaie cauzat chiar de substana
activ ( variaz mult pH, tensiunea superficial, etc). Pentru substanele
medicamentoase greu solubile sau practic insolubile este recomandat
adugarea unui surfactant cum este LSS. Necesitatea adugrii
surfactantului, precum i cantitatea de surfactant adugat trebuie justificate
clar.
Utilizarea unor medii hidroalcoolice este nerecomandat.
Temperatura de lucru este de 37 0,5 oC ________________________
Pentru metodele uzuale se poate opta i pentru schimbarea
caracteristicilor mediului de dizolvare n timpul testului.
Anumite substane sunt sensibile la aerul dizolvat n mediul de
dizolvare. Din acest motiv este necesar deaerarea mediului. n cazul
capsulelor la care se opteaz pentru aparatul 2, pentru a evita flotarea se vor
prinde cu helix metalic conform recomandrilor USP.
20

Agitarea ___________________________________________________
Pentru a realiza un test ct mai discriminatoriu se va opta pentru
condiii blnde de agitare 50 - 100 rpm pentru metoda cu coulee i 50 - 75
rpm pentru metoda cu palete. Aparatele 3 i 4 se utilizeaz rareori pentru
forme cu eliberare imediat.
Stabilirea specificaiilor
privind testarea parametrului de dizolvare
pentru produsele cu eliberare imediat - nemodificat _____________
Absorbia unei substane active dintr-o form farmaceutic dup
administrarea p.o. depinde de eliberarea acesteia din forma farmaceutic,
de dizolvarea sau solubilizarea acesteia n condiii fiziologice i de
permeabilitatea prin membranele tractului GI. Din cauza naturii critice a
acestor 2 pai, dizolvarea in vitro poate fi relevant n a prevedea
performana in vivo. n baza acestor consideraii generale, testele de
dizolvare pentru formele farmaceutice solide cu eliberare imediat, aa cum
sunt comprimatele sau capsulele, sunt utilizate pentru:
1. a stabili un criteriu de calitate interserii
2. a ghida dezvoltarea de formule noi
3. a asigura calitatea produsului i performana acestuia dup
anumite modificri, cum ar fi modificrile n formulare, procesul de fabricai,
locul de fabricaie, transferul de tehnologie de la scar mic la scar
industrial (scale-up).
Cunotinele actuale despre solubilitate, permeabilitate, dizolvare i
farmacocinetica unui produs medicamentos trebuie luate n consideraie
pentru a defini specificaiile testului de dizolvare n vederea aprobrii
produsului pentru punerea pe pia. De asemenea, aceste cunotine trebuie
utilizate pentru a asigura echivalena continu a produsului, ct i pentru a
demonstra meninerea unei performane a produsului n cazul unor
modificri privind trecerea la scar industrial a unui proces i modificrile
post-aprobare.
Aplicaiile pentru entiti chimice noi trimise ctre autoritatea de
reglementare american (Food and Drug Administration) conin date de
biodisponibilitate i date privind dizolvarea in vitro, care, mpreun cu datele
privind dezvoltarea chimico - farmaceutic, procesul de fabricaie i
controalele impuse caracterizeaz calitatea i performana produsului
propus spre autorizare. Datele de dizolvare in vitro sunt obinute de obicei
prin testri realizate pe serii care au fost utilizate n studii clinice sau de
biodisponibilitate sau pe seriile utilizate la alte studii realizate pe parcursul
dezvoltrii produsului. Pentru produsele generice, specificaiile pentru testul
de dizolvare trebuie s se bazeze pe un profil de dizolvare.
21

O dat stabilite aceste caracteristici, specificaiile privind testul de


dizolvare ce asigur o reproductibilitate interserii a performanei ele sunt
publicate n USP (United States Pharmacopoeia), la monografia dedicat
formei farmaceutice n cauz. n general, referinele acestea compendiale
sunt teste de dizolvare cu un singur punct. Exist i teste care impun mai
multe puncte ( ex. diltiazem).
Modalitile de stabilire a specificaiilor
pentru testul de dizolvare n cazul produselor generice ____________
Modalitile de stabilire a acestor parametrii pot fi mprite n 3 mari
cazuri, n funcie de existena unei monografii pentru forma farmaceutic n
cauz i de natura testului de dizolvare impus pentru produsul de referin.
Cele 3 categorii sunt:
- Exist monografie pentru forma farmaceutic
n acest caz, controlul de rutin este cel impus de USP. De asemenea
este recomandt realizarea unui profil de dizolvare la intervale de 15 minute
att pentru produsul generic, ct i pentru referin n condiiile impuse de
USP (12 uniti). n anumite cazuri, pot fi necesare i alte date referitoare la
dizolvarea substanei active. Aceste cazuri pot aprea atunci cnd nu este
specificat un test de dizolvare pentru toate substanele active dintr-un
produs ce conine o combinaie de substane active sau dac se specific
utilizarea aparatului de testare de dezagregrii.
- Nu exist monografie pentru forma farmaceutic dar sunt fcute
publice date referitoare la testul de dizolvare pentru produsul de
referin ales
n acest caz, este recomandat realizarea unui profil de dizolvare la
interval de 15 minute, pe 12 uniti, pentru produsul testat i cel de referin,
n condiiile descrise. n anumite cazuri, justificate tiinific, pot fi cerute i
alte date referitoare la dizolvarea substanei active din forma farmaceutic
propus spre aprobare.
- Nu exist date referitoare la efectuarea testului de dizolvare
n acest caz, este recomandat realizarea mai multor profile de
dizolvare comparative ntre produsul testat i cel de referin n mai multe
condiii. Parametrii care pot varia sunt pH mediului de dizolvare (1 - 6,8),
adaosul de surfactant, utilizarea aparatului 1 sau 2 (coule sau palete).
Testele se vor efectua n condiiile impuse de USP, iar specificaiile se vor
stabili n urma evalurii rezultatelor studiului de bioechivalen.
Cazuri speciale
Teste de dizolvare cu 2 puncte ____________________________
Pentru substanele medicamentoase cu solubilitate mic (ex.
carbamazepina), testul de dizolvare su mai mult de 1 punct este recomandat
22

pentru a asigura performana in vivo. Alternativ, poate fi utilizat i un profil de


dizolvare n scopul controului calitii produsului finit.
Teste de dizolvare cu schimbarea mediului (succesive)
Pentru a reflecta mai precis condiiile fiziologice din tractul
gastrointestinal se pot realiza aceste teste de dizolvare care utilizeaz drept
medii de dizolvare suc gastric reconstituit cu/fr pepsin i suc intestinal
recinstituit cu/fr pancreatin. Cu ajutorul acestor teste se pot realiza
controale periodice care s demonstreze c sunt meninute performanele
seriilor utilizate la studiul de biodisponibilitate sau de bioechivalen.
Pentru anumite produse sub form de capsule gelatinoase moi i tari
pot fi necesare teste de dizolvare n diferite medii pentru a demonstra
calitatea produsului. La aceste produse poate aprea un fenomen de
mbtrnire a nveliului gelatinos, ceea ce se traduce printr-o scdere a
ratei de dizolvare chiar n mediile menionate mai sus, dar care nu conin
enzimele specifice tractului GI. n mediile cu enzime, nu au mai aprut astfel
de probleme.
Metodologia suprafeei de rspuns. Corelaii parametrii tehnologici
critici - performan in vitro - performan in vivo
Aceast metodologie se refer la determinarea relaiilor dintre
variabilele critice de fabricaie (Critical manufacturing variables - CMV) i
suprafaa de rspuns rezultat din datele profilelor de dizolvare i din datele
de biodisponibilitate.
Variabilele critice includ:
- Formularea
- Procesul de fabricaie
- Echipamente
- Materii prime - diferene de calitate, granulometrie, grad de
cristalinitate, umiditate, solveni reziduali, cale de sintez, etc.
- Modificarea procedurilor de operare

23

Pentru a deveni critici aceti parametrii trebuie s modifice


semnificativ dizolvarea in vitro a produsului. Cu alte cuvinte, prin aceast
metodologie se realizeaz o validare a procesului tehnologic n sensul
cunoaterii " celor mai rele cazuri - worst cases" i a stabilirii robusteii
procesului propus. Informaiile pot fi foarte utile i n sensul monitorizrii
calitii produselor fabricate pentru a asigura echivalena cu seriile utilizate
n studiul de bioechivalen.
Scopul este de a dezvolta specificaiile produsului la eliberare astfel
nct s se asigure faptul c seriile ce urmeaz a fi fabricate vor ndeplini
condiiile impuse de testele de dizolvare i vor fi eficiente terapeutic.
Exist mai multe tipuri de planuri experimentale pentru a studia
influena variabilelor critice de fabricaie asupra performanei produsului:
1. Fabricarea mai multor serii cu formule diferite pentru a studia
dizolvarea lor in vitro
2. Testarea produsului cu cea mai rapid dizolvare i a celui cu cea
mai lent dizolvare, mpreun cu standardul impus sau cu forma prezent pe
pia pe grupuri mici (12 voluntari)
3. Determinarea biodisponibilitii produselor i realizarea de corelaii
in vitro - in vivo.
Produsele cu caracteristici de dizolvare extreme trebuie testate n
sensul stabilirii bioechivalenei cu produsul realizat iniial. n acest mod se
stabilesc limitele de dizolvare pentru seriile care urmeaz a fi fabricate n
viitor. Aceast metod asigur un grad nalt de repetabilitate a calitii i
performan a produsului intre serii. n funcie de numrul produselor
evaluate se pot stabili sau nu corelaii in vitro - in vivo.
Corelaii in vivo - in vitro
___________ 3 __________________________________________________________________________________

Pentru substanele cu solubilitate ridicat (clasele 1 i 3) n forme


farmaceutice cu eliberare imediat, utiliznd excipienii uzuali i tehnologii
de fabricaie uzuale, nu poate fi realizat o corelaie in vitro - in vivo. Pentru
substanele din clasa 2 ( solubilitate mic - permeabilitate mare) se poate
realiza o corelaie in vivo - in vitro.
Valoarea procentului de substan dizolvat, ca test de rutin pentru a
prezice performana in vivo a unui produs medicamentos este semnificativ
mai mare dac se poate stabili o corelaie in vitro - in vivo. Testul in vitro
servete pentru a discrimina seriile acceptabile de cele care nu sunt
acceptabile. Seriile acceptabile sunt bioechivalente, n termeni de
performan in vivo, n timp ce seriile 28 care nu sunt acceptabile nu sunt
bioechivalente.Pentru a realiza o corelaie in vitro - in vivo, trebuie s existe
cel puin 3 serii care difer att n ceea ce privete performana in vivo, ct i
performana in vitro.Dac nu este descoperit nici o diferen n performana

in vivo i dac caracteristicile in vitro difer, este posibil s se modifice


condiiile testului de dizolvare pentru a obine aceeai performan a
dizolvrii cu cea a seriilor ce au avut rezultate favorabile in vivo. Foarte des,
testul de dizolvare in vitro poate fi mai sensibil i mai discriminatoriu dect
testul in vivo. Din punct de vedere al asigurrii calitii produsului este
preferabil un test de dizolvare mai discriminatoriu, pentru c n acest mod
testul poate indica modificri ale calitii produsului nainte ca performana
sa in vivo s fie afectat.
Verificarea i validarea specificaiilor ___________________________
Confirmarea printr-un studiu in vivo poate fi necesar pentru a valida
un sistem de dizolvare in vitro. n aceast situaie, acceai formulare trebuie
pstrat, dar trebuie variai parametrii critici de fabricaie care nu in de
formul. Vor trebui realizate 2 serii cu profile diferite in vitro prin metodologia
descris anterior. Aceste produse trebuie apoi testate in vivo. Dac cele 2
produse arat performane in vivo diferite atunci sistemul in vitro este validat.
Din contr, n cazul obinerii de rezultate similare in vivo, trebuie modificate
specificaiile pentru testul de dizolvare in vitro.
Compararea profilelor de dizolvare _____________________________
Pn recent, teste de dizolvare cu 1 punct erau utilizate pentru a
evalua modificrile post-aprobare aa cum ar fi:
- Scale-up
- Schimbri ale locului de fabricaie
- Schimbri n calitatea materiilor prime
- Schimbri n compoziia formei farmaceutice
- Schimbri de procese i de echipamente
Un produs schimbat poate fi i un produs realizat la un dozaj inferior
celui aprobat n prealabil. n prezena unor modificri minore, testul cu 1
punct poate fi suficient pentru a demonstra faptul c nu au fost afectate
calitatea i performana in vivo a produsului. Pentru alte schimbri majore, o
comparaie a profilelor de dizolvare, realizat n condiii absolut identice,
ntre produsul iniial i produsul schimbat este recomandat. Profilele de
dizolvare pot fi considerate similare din punct de vedere al:

25

- Similitudinii globale a profilelor


- Similitudinii n fiecare punct
Compararea profilelor de dizolvare se poate face utiliznd metode
dependente sai independente de model.
Metoda independent de model cu utilizarea unui factor de similaritate
Aceast metod simpl utilizeaz un factor de diferen - f1 i un factor
de similaritate - f2 (Moore, 1996).
Factorul de diferen exprim diferena procentual ntre 2 curbe la
fiecare punct i reprezint o expresie a erorii relative dintre cele 2 curbe:
n

f = x\00
\

i=\

unde:
n = numrul de puncte ale profilului
^ri = mediile rezultatelor la timpul ti pentru medicamentul de referin
^ti = mediile rezultatelor la timpul ti pentru medicamentul testat
Factorul de similaritate f2 este o transformare logaritmic a reciprocei
radicalului sumei erorilor ptratice i exprim similaritatea, n procente, ntre
2 curbe.
\/2

Yj M
(

Mti)2
\ + -----------------n
n

unde:
n = numrul de puncte ale profilului
400
^ri = mediilef 2 = 50logrezultatelor la timpul
ti pentru medicamentul de referin
^ti = mediile rezultatelor la timpul ti pentru medicamentul testat

26

Procedura de determinare a factorilor de diferen, respectiv de


similaritate este urmtoarea:
1. Determinarea profilui de dizolvare a celor 2 produse (iniial i
modificat) - condiii identice, 12 uniti
2. Utilizarea datelor medii de dizolvare i calcularea metricilor de
dizolvare conform formulelor prezentate mai sus.
3. Pentru a fi considerate similare condiiile sunt:
fi ^ 0 f2 ^
100
n general sunt acceptabile valori ale factorului de diferen cuprinse n
intervalul (0-15) i ale factorului de similaritate cuprinse n intervalul (50-100)
pentru a considera c profilele sunt echivalente.
Aceast metod independent de model este posibil a fi utilizat pentru
compararea profilelor de dizolvare atunci cnd sunt disponibile 3-4 sau mai
multe puncte. Alte recomandri de care trebuie s se in cont n realizarea
acestor comparaii ar fi:
1. Metodologia i condiiile de lucru trebuie s fie similare pentru
produsul testat i cel de referin. Punctele de prelevare trebuie s fie aceleai.
Produsul de referin utilizat trebuie s fie seria cea mai recent fabricat,
nainte de implementarea modificrii.
2. Numai un punct trebuie luat n considerare peste valoarea de 85%
pentru ambele produse.
3. Pentru a permite utilizarea datelor medii de dizolvare, coeficientul de
variaie al datelor la primele puncte (ex. 15 min.) trebuie s nu fie mai mare de
20%, iar pentru celelalte puncte trebuie s nu fie mai mare de 10%.
4. Valorile ^,ri pot proveni de la ultima serie sau de la ultimele 2 serii
consecutive realizate nainte de implementarea modificrii.
Procedura regiunii coeficientului de variaie
______ - model independent _____________________________
In cazurile n care variaia intraserie este mai mare de 15% CV, pentru
compararea profilelor de dizolvare este mai adecvat metoda independent
de model. Este recomandat urmtorul algoritm:
1. Determinarea limitelor de similaritate prin determinarea diferenelor
interserii fa de seriile aprobate. Acest lucru se face prin determinarea MSD
(Multivariate statistical distance).
2. Estimarea MSD ntre datele medii de dizolvare pentru produsul testat
i cel de referin ales
3. Estimarea unui interval de ncredere de 90% ntre seriile testate i
cele de referin

27

4. Compararea limitei superioare a intervalului de ncredere cu limita de


similaritate. Seria testat este considerat similar cu seria de referin dac
limita superioar a intervalului de ncredere este mai mic sau egal cu limita
de similaritate.
Metode dependente de model __________________________________
Mai multe modele matematice au fost descrise n literatur pentru a
descrie profilul de dizolvare a unei substane active dintr-o form farmaceutic.
Pentru a putea aplica unul din aceste modele pentru compararea profilelor de
dizolvare, este recomandat urmtorul algoritm:
1. Selectarea celui mai adecvat model pentru profilele de dizolvare din
seriile standard, seriile dinaintea modificrii i seriile modificate. Este
recomandat un model cu nu mai mult de 3 parametrii ( liniar, quadratic, logistic,
probit, Weibull).
2. Utiliznd datele din profilul generat de fiecare unitate e introduc
acestea in modelul cel mai adecvat.
3. Se fixeaz o regiune de similaritate pe baza variaiei parametrilor
modelulului ales pentru unitile testate (ex. capsule, comprimate) fa de
seriile standard.
4. Se calculeaz MSD
5. Estimarea intervalului de ncredere 90% pentru diferena adevrat
dintre cele 2 serii.
6. Compararea limitelor intervalului de ncredre cu regiunea de
similaritate. Dac intervalul este n interiorul limitelor regiunii de similaritate,
seria testat este considerat a avea un profil de dizolvare similar cu cea a
seriei alese drept referin.
Dizolvarea i Scale-up ________________________________________
Ghidul FDA (1995) cu privire la modificrile post-autorizare i procesele
de scale-up definesc clar nivelul schimbrilor posibile, testele recomandate n
acele cazuri precum i documentaia necesar a fi depus la autoritatea de
reglementare n domeniu. Aceste modificri pot s apar n:
1. Compoziie i calitatea materiilor prime utilizate
2. Locul de fabricaie
3. Mrimea seriei de fabricaie
4. Schimbri n procese i echipamente.
n funcie de gradul schimbrilor realizate i de clasificare BCS a
substanei sunt recomandate anumite teste in vitro i in vivo. Aceste teste pot
varia n funcie de indicele terapeutic al substanei precum i n funcie de
caracteristicile de hidrosolubilitate i permeabilitate ale substanei active.
Pentru schimbri n formulare, n afara celor citate n ghid, sunt recomandate

28

diferite teste de dizolvare n diferite medii de dizolvare. Pentru schimbarea


locului de fabricaie, procese de scale-up i modificri minore ale procesului
testarea parametrilor de dizolvare ai produsului este suficient pentru a
asigura pstrarea calitii produsului realizat n noile condiii.
Comparaia cu produsul realizat nainte de efectuarea modificrilor este
recomandat a fi realizat prin utilizarea factorului de similaritate.
1.7 Aplicatii
Consideram ca doua produse sub forma de tablete contin aceeasi
substanta activa, in aceeasi concentratie si ca am obtinut urmatoarele
rezultate in ceea ce priveste cedarea:
Timp

Cantitatea eliberata

(min.)

(%)
X

0
10
20
30
45
60

Ti

XRr

0
15
20
40
60
90

0
5
10
25
50
85

Tabelul 1

10

20

30

40

50

G0

Timp (min)

Figura 4

29

Sa se calculeze "distantele" f f2, 6, 6s, p, pw intre profilele de dizolvare


descrise in tabelul 1 si figura 4. Rezolvare: Calculam:
Ti
Ri Ti
( Ri - Ti )
XRi
X

-X

0
15
20
40
60
90

0
5
10
25
50
85

0
10
10
15
10
5

0
100
100
225
100
25

Tabelul
2
X
-X
Z Ri T

XRi
0 +10 +10 +15 +10 + 5
: 0.285
0 + 5 +10 + 25 + 50 + 85 175
f=

100

\
Deci f i

Factorul
f = 50 lgf 2 = 50 lg-

Z ((- X)
50

1 + -----------------n
100
100 +100 + 225 +100 + 25
1+

n
10
0
= 50 lg^= = 50 0.98 < 50
Vm

5
5
1000
= 50 lgFacem observatia ca in cazul factorului f2 este
5
stabilita
prin
recomandari ale autoritatilor de reglementare, o bariera
intre similaritate si non-similaritate intre curbe, si anume valoarea de 50. Un
factor mai mare de 50 justifica decizia de similaritate
Se admite ca profilele de dizolvare sunt similare si in cazul in care f2 <
50, cu conditia ca ambele produse sa elibereze peste 85% din substanta
activa in primele 15 minute.
1+

30

Distantele S, Ss sunt:
g_

'Z|

-X
X

Ri

t\

Z|

+
X

Ri

X
Ti

|
4

Z
Z
X

Ti

Xr,

R, - XTi

Ri + XTi

|XRi - XTi |

(XRl-

Ri

Ti

XTl)2
0
15
20
40
60
90

0
5
10
25
50
85

0
10
10
15
10
5

0
100
100
225
100
25

0
20
30
65
110
175

Tabelul 3

10 +10 +15 +10 + 5


5 0 1 1 nnr
g _ 2 ----------------------------------- _ 2 ------- _ 2' - _ - _ 0.25
20 + 30 + 65 +110 +175 400 8 4

100
+100 + 225 +100 + 25 550 550 _
c
g _ 4 --------------------------------------- _ 4 --------_ -------_ 5.50
' 20 + 30 + 65 +110 +175 400 100
Distantele p, pw (weighted, fiecare punct i fiind poderat cu
) sunt:
c

R i + XT,

ZK xj

31

Z^Ri^ XTi )max

^ XRI XTi ^

p_ Z
Timp

Si P w

max
V

T,

X Ri J

1
n

Ri XTi

X
Ti

X Ri J

X -r)

10

20

30

45

60

10
20
15
20
10
15

10
30
20
30
20
10

30
40
40
50
30
50

50
60
70
70
50
60

80
90
86
100
84
100

15

20

40

60

90

n
1
2
3
4
5
6
X

Ti

Tabelul 4

32

T i

yRi

0
15
20
40
60
90

0
5
10
25
50
85

maxf , 1 YY
VR i T i

R i

T i

0
20
30
65
110
175

2
40/25=1.6
60/50=1.2
90/85=1.06
Tabelul 5

p =- * (3 + 2 +1.6 +1.2 +1.06) = *8.86 = 1.76


w
P

= 1* f 20*3 + 30*2 + 65*1.6 +110*1.2 +175*1.6 1 =

=5f

20 + 30 + 65 +110 +175

1 . 60 + 60 +104 +132 + 280 636


= - * ----------------------------------- = ------ = 1.59
5
400
400
Pentru normele de tipul 3, p nu exista reglementari care sa
stabileasca limitele intre similaritate si non-imilaritate. Norma de
siguranta dc provenita din norma cubica dc(R,T) = max\Ri -Tt\va da in
acest caz:
dc(R,T) = 15
Deci curbele nu difera in nici un punct cu mai mult de 15%.
Timp
1
2
3
4
5
6

Y Rl

10

20

30

45

60

5
3
10
4
3
5
5

10
5
15
13
20
7
10

20
15
20
30
25
30
25

65
40
35
40
75
45
50

80
75
86
90
84
95
85

Tabelul 6

2. ABSORBIA MEDICAMENTELOR
i

2.1 Aspecte generale


Administrarea substanelor medicamentoase prin intermediul diferitelor
forme farmaceutice direct n fluxul sangvin este mai puin frecvent comparativ
cu calea extravascular. Complianei superioare a preparatelor destinate
33

administrrii pe cale oral i se opun frecvent probleme de biodisponibilitate.


Eliberarea substanei medicamentoase mpreun cu absorbia la nivelul
tractului gastro- intestinal constituie elemente ale unui ansamblu complex de
fenomene. Influena lor asupra apariiei, intensitii i duratei de manfestare a
efectului farmacodinamic urmrit n terapeutic este major. Existena unor
relaii complexe ntre nivelul substanei medicamentoase n biofaz i
rspunsul terapeutic impune necesitatea controlrii unor parametrii critici,
legai fie de caracteristicile fizico-chimice ale substanei medicamentoase sau
ale formei farmaceutice, fie de factori fizio-patologici.
Cedarea substanei medicamentoase din forma farmaceutic este
urmat de dizolvarea n fluidele biologice i traversarea membranei celulelor la
nivelul la care are loc procesul de absorbie. Complexitatea acestui proces
este indicat fie i numai de structura amfifil-poroas a membranei celulare:
strat bimolecular fosfolipidic, stabilizat de un strat monomolecular de proteine
interconectate prin extremitile lor polare, strbtut de pori fini de 4-8 A, care
conin ap. Manifestarea efectului farmacodinamic consecutiv administrrii
extravasculare este dependent astfel nu doar de capacitatea intrinsec a
substanei medicamentose de a determina cascade efectorii la nivelul
receptorilor sau altor structuri celulare, ct i de caracteristicile care i permit
atingerea locului de aciune n concentraii adecvate.
Cunoaterea factorilor care influeneaz absorbia substanelor
medicamentoase n vederea optimizrii formulrii implic studii detaliate
privind cinetica eliberrii din forma farmaceutic, realizarea unor modele in
vitro care s caracterizeze ct mai adecvat procesele de eliberare i absorbie
in vivo, optimizarea formulrii formelor farmaceutice, precum i elaborarea, pe
baza studiilor de biodisponibilitate, a unor standarde biofarmaceutice de
calitate a substanei medicamentoase i a formelor farmaceutice.
| 2.2 Biodisponibilitatea________________________________________
Obiectivul final al celor mai multe forme farmaceutice este de a se
constitui ntr-un mijloc de administrare, pe o anumit cale de administrare, n
vederea transferului substanei medicamentoase n circulaia sistemic i, de
aici, la locul specific de aciune. Biodisponibilitatea, parametru critic n
evaluarea calitii unui produs farmaceutic, este dat de viteza i mrimea
absorbiei substanei medicamentoase din produsul farmaceutic administrat,
n circulaia sistemic. Mrimea cantitii de substan absorbit i viteza
acestui proces determin prin urmare mrimea nivelurilor medicamentoase
plasmatice i evoluia lor n timp, precum i fracia ajuns la locul de aciune,
direct corelat cu eficacitatea terapeutic.
Exist dou tipuri de biodisponibilitate. Biodisponibilitatea absolut,
studiat pe parcursul cercetrii clinice ntruct este un indicator farmacocinetic
34

al substanei medicamentoase, este cea care se asigur dup administrarea


unei doze pe cale intravenoas. Sunt furnizate astfel date referitoare la
corelarea dozelor i a regimului de dozare cu nivele plasmatice i evoluia lor
n timp, viteza de eliminare, timpul de injumtire biologic, distribuia tisular,
cile de eliminare (excreie sau metabolizare) etc. Biodisponibilitatea relativ
este n fapt o biodisponibilitate comparativ, determinrile efectundu-se prin
compararea vitezei i mrimii procesului de absorbie a dou forme
farmaceutice.
| 2.3 Factori care influeneaz biodisponibilitatea __________________
Evalurile de biodisponibilitate relativ i gsesc argumentarea n riscul
modificrii sale i, n consecin a eficacitii terapeutice, prin formularea
diferit a formelor farmaceutice. Cercetarea biofarmaceutic a postulat astfel
factori cu influen major asupra biodisponibilitii unei substane
medicamentoase:
2.3.1 Factori dependeni de substana medicamentoas _________
2.3.1.1 Factori fizici: -solubilitatea; -mrimea particulelor;
-starea fizic (hidratat sau anhidr, cristalin sau amorf, polimorfism).
2.3.1.2 Factori chimici:
-structura chimic (sare, complex, ester);
-greutatea molecular (masa molecular);
-constanta de disociere (pKa) i gradul de disociere;
-liposolubilitatea formei nedisociate
(coeficientul de partiie ap/lipide - ap/octanol);
-stabilitatea.
2.3.2 Factori dependeni de forma farmaceutic ________________
2.3.2.1 Factori farmaceutici: -tipul
formei
farmaceutice;
-forma
geometric;
-modul de administrare (perfuzie sau n bolus, doz unic sau
doze repetate etc.) -natura, cantitatea i reactivitatea
adjuvanilor.
2.3.2.2 Variabile tehnologice: -particulariti ale procesului de preparare.
2.3.3 Factori fizio-patologici _______________________________
-particularitile cii de administrare; -particularitile segmentului n care
se desfoar procesul de absorbie (vascularizaie, debit circulator local, pH etc.);
-timpul de reziden la locul de absorbie; -starea fiziologic (obinuit,
particular - ciclu menstrual, stare de graviditate, vrste extrem, bioritmuri); -starea
patologic
35

(a cii de administrare, sistemic, anomalii genetice); -fenomenele


"shunting" (circulaia entero-hepatic, entero-gastric).

de recirculare -

2.3.4 Factori metabolici ____________________________________


-eliminarea presistemic; -efectul
primului pasaj etc.
Factorii amintii pot fi surse de variabilitate intra- i interindividual, fr
posibilitatea unei generalizri. Exist ns situaii n care se pot realiza evaluri
ale potenialelor probleme biofarmaceutice: solubilitatea redus n ap a
substanei medicamentoase, viteza de dizolvare redus, asocierea cu cantiti
mari de excipieni, proprieti farmacocinetice critice precum absorbia la
nivelul unui anumit segment al tractului gastro-intestinal, metabolizarea local
rapid, stabilitatea redus, farmacocinetica neliniar doz-dependent etc.
I 2.4 Mecanisme de absorbie
Absorbia medicamentelor poate avea loc prin diferite mecanisme, dintre
care cele mai importante sunt: difuzia pasiv, convecia, transportul activ,
transportul facilitat, transportul prin perechi de ioni i transportul prin
pinocitoz.

Difuzie pasiva

Difuzie
Transport
prin canale apoase activ/facilitat

Piriocitoza

Mediu extracelular Mediu intracelular Membrana i Medicament

Figura 5 - Mecanisme de absorbie la interfee membranare

36

2.4.1 Difuzia pasiv


Difuzia pasiv sau difuzia simpl este un proces de transport frecvent
unidirecional, generat de un gradient de concentraie (n cazul substanelor
liposolubile, nedisociate, la nivelul complexului lipidic membranar) dependent
de gradul de ionizare (interrelaia pH - pKa) sau de un gradient electrochimic
sau de presiune hidrostatic - osmotic (n cazul substanelor hidrosolubile, la
nivelul porilor membranari). Este guvernat de prima lege a lui Fick, viteza de
difuziune sau de transport prin membran fiind direct proporional cu
diferena concentraiilor pe cele dou fee ale membranei; procesul se
desfoar pn la realizarea unui echilibru ntre cele dou compartimente
separate de membran. In situ, acest echilibru nu se poate realiza, deoarece
substana medicamentoas care a traversat membrana este trecut constant
n circulaia sistemic. Important de menionat este faptul c acest tip de
transport nu este dependent de metabolismul energetic al celulei8.
Cnd pe cele dou fee ale membranei exist o diferen de pH, cu ct
aceast diferen este mai mare, distribuia este inegal, substana
concentrndu-se pe faa unde pH-ul favorizeaz disocierea.
Moleculele substanelor neutre solubile n ap, cu dimensiuni inferioare
diametrului canaliculelor, pot traversa porii ca atare sau simultan cu
deplasarea concomitent a solventului (apa); procesul este cunoscut sub

Substana activ, existent n soluie apoas la locul de absorbie, poate


fi absorbit prin transport activ, cu ajutorul unor substane purttoare, crui
sau vectori de natur proteic, de exemplu enzime (ATP). Absorbia prin
transport activ are loc ntr-un singur sens, n general mpotriva unui gradient de
concentraie sau, n cazul ionilor, mpotriva potenialului electrochimic.
Este caracterizat de specificitate, fiecare substan sau grup de
substane beneficiind de purttori specifici, n cazul grupurilor putndu-se
manifesta fenomene de inhibiie competitiv de legare. Ionii cianur, florur,
acetatul de iod, substanele care influeneaz procesele metabolice celulare,
mpiedic transportul activ (inhibiie necompetitiv). Punctul de saturaie n
cadrul transportului activ este reprezentat de existena unui numr mai mare de
molecule de substrat relativ la numrul de purttori existeni pe faa extern a
membranei.
Sunt generate prin legare combinaii complexe care traverseaz
membrana prin utilizarea energiei produs de ctre ATP. Pe faa opus a
membranei, complexele sunt disociate cu rentorcerea purttorului i reluarea
procesului de transport. n general, cinetica acestui transport este de tip
michaelian, avnd o oarecare
8

Hidalgo I.J., Assessing the Absorption of New Pharmaceuticals, Current Topics in


Medicinal Chemistry, 1, 385-401(2001).

numele de difuziune prin convecie. n mod analog cu moleculele neutre se


comport i ionii a cror ncrcare este diferit de cea existent la suprafaa
porilor. innd cont de dimensiunea porilor cilindrici umplui cu ap, a cror
diametru nu depete 7 - 10 A, prin convecie nu vor difuza dect moleculele
a cror diametru se ncadreaz ntre aceste limite. Comportament de acest tip
prezint substanele cu structura sferic i mase moleculare pn la 400.

38

Liposolubilitate crescut
Compartiment
extracelular

Membrana

Liposolubilitate redusa
Compartiment 2
intracelular

Compartiment 1

Membrana

extracelular

Compartiment 2
intracelular

4Cm

A
C,

;ci

i
|c2

--- --- _

Figura 6 - Distribuia intra / extracelular funcie de


caracterul lipofil (modificat dup Mycek et al., 1997)

ACm

: c2

Mecanismul absorbiei prin convecie este astfel definit de diametrul


porilor 7 A, migrarea solventului, diferena presiunii hidrostatice, suprafaa
absorbant, grosimea membranei, numrul porilor, vscozitatea i sarcina
electric.
Electroliii de natur anorganic sau organic cu mase moleculare ntre
150 - 400, ca i ionii cu sarcini opuse nveliului porilor, sulfamidele ionizate,
sunt absorbite prin convecie.
2.4.2 Transportul activ

39

selectivitate imprimat de specificitatea vectorilor. Fenomenul de saturaie


face ca procentul de substrat absorbit s scad cu creterea dozei
administrate.
De exemplu, cu transportorii aminoacizilor sunt transportate substane
medicamentoase cu structur de aminoacizi, ca: acid glutamic, alfa
metil-DOPA, l-DOPA, 5 fluoro-uracil sau cefalosporine (cefazolina este o
cefalosporin care, datorit particularitilor structurale, nu poate fi substratul
transportorilor aminoacizilor; prin urmare este administrat doar parenteral).
Unul din mecanismele de transport activ al aminoacizilor (cu excepia prolinei)
l reprezint ciclul Y-glutamil, transportorul fiind gruparea glutamil. Moleculele
citoplasmatice donoare de grupri glutamil sunt Y-glutamilpeptide, printre care
glutationul. n transportul transmembranar propriu-zis al moleculei de
aminoacid sunt implicate dou enzime: Y-glutamil transferaza, enzima
membranar dependent de ionul de Na+ i Y- glutamil ciclotransferaza,
enzima citosolic. Resinteza glutationului la captul cascadei de reacii
necesit energie celular, consumnd trei molecule de ATP.
2.4.3 Transportul facilitat _____________________________________
Transportul substanelor aflate n stare de dispersie molecular la locul
de absorbie se poate realiza i prin transport facilitat, favorizat sau crescut.
Acest tip de transport se desfoar n sensul gradientului de concentraie,
fr consum energetic (asemnndu-se din acest punct de vedere cu difuzia
pasiv), dar necesit formarea unui complex cu un transportor (analogie cu
transportul activ), care difuzeaz pasiv. Transportul facilitat este rar intlnit, de
exemplu n cazul glucozei, al aminoacizilor, al colinei i al antagonitilor ei, al
cationilor de tetrametilamoniu, al vitaminei B12. n cazul absorbiei vitaminei B12
se formeaz un complex cu un factor intrinsec produs de mucoasa peretelui
gastric, complex transportat de ctre purttor. Cantitile de vitamin B12 astfel
absorbit sunt de ordinul 1,5 ^g. n cazul n care n intestin se gsesc cantiti
mari de vitamin B12 (> 3000 ^g), aproximativ 0,1% este absorbit prin
transport facilitat, iar restul prin difuzie pasiv.
2.4.4 Transportul prin perechi de ioni
Substanele puternic ionizate, ca srurile cuaternare de amoniu, acizi
sulfonici etc., pot fi absorbite printr-un mecanism bazat pe formarea perechilor
de ioni cu substane endogene, rezidente ale tractului gastro-intestinal, ca de
exemplu mucinele. Perechea de ioni formeaz n fapt un complex neutru, fr
sarcin electric global, cu proprieti lipofile predominante care poate
traversa astfel membrana. Formarea perechilor ionice n vederea absorbiei a
fost demonstrat i n cazul propranololului, compus cu caracter bazic care
40

formeaz compleci cu acidul oleic, sau chininei, care formeaz perechi ionice
cu hexilsalicilatul.
2.4.5 Pinocitoza
Singurul mecanism de absorbie al unei substane medicamentoase
care nu presupune pre-existena acesteia n stare de dispersie molecular l
constituie pinocitoza. Dei prezint importan redus din punct de vedere
cantitativ, exceptnd vitaminele liposolubile A, D, E i K, pinocitoza explic
parial absorbia substanelor nutritive, precum grsimi, uleiuri, glicerin,
aminoacizi, amidon, precum i a celulelor drojdiei de bere, a oulelor unor
parazii, a particulelor de materiale plastice, pr, precum i a fenitoinei i
insulinei la copiii mici.
Mecanismul este analog fagocitozei. Picturile sau particulele
substanelor grase sau solide sunt nglobate de celulele epiteliului i formeaz
o vacuol sau vezicul cu dimensiuni variabile, putnd atinge un diametru de
750 A, care traverseaz celulele.
2.4.6 Modele combinate de absorbie
__________________________________________________________________________________________________ 3 ________________________________________________________________________________

n funcie de mecanismul de transport la locul de absorbie, o substan


medicamentoas poate fi absorbit prin mai multe mecanisme de transport10.

41

Astfel, glicozidele cardiotonice sunt absorbite prin transport activ i prin


difuzie pasiv, vitamina B12 prin transport facilitat i difuzie pasiv, moleculele
mici prin difuzie pasiv i prin convecie. n funcie de originea mucoasei,
mecanismele de transport pot varia. Astfel, absorbia n cavitatea bucal are
loc prin difuzie pasiv i convecie, n stomac prin difuzie pasiv, convecie i,
probabil, prin transport activ; n intestinul subire prin toate mecanismele de
transport amintite mai sus, n intestinul gros i rect, prin difuzie pasiv,
convecie i pinocitoz, iar prin piele, prin difuzie pasiv i convecie.
2.5 Influena caracteristicilor structurale
asupra fenomenelor de absorbie ______________________________
2.5.1 Coeficientul de partiie ap/lipide
Coeficientul de partiie apa - 1-octanol este cea mai utilizat msur a
lipofiliei unui compus. Lipofilicitatea este un factor structural major ce
guverneaz att farmacocinetica ct i farmacodinamia medicamentelor9.
Coeficientul de partiie a unui compus chimic este o msur
termodinamic a balanei hidrofil-lipofile. n laborator, o cantitate mic dintr-un
compus este adus ntr-un sistem format din dou lichide nemiscibile, o faz
apoas (ap sau o soluie tampon) i o faz organic. Odat echilibrul
substanei stabilit ntre cele dou faze, coeficientul de partiie se poate calcula
din raportul substan n faz organic i substan n faz apoas i
logaritmare.
n-octanolul poate fi folosit cu succes deoarece mimeaz bine membrana
bilateral lipidic. Se poate aprecia c distribuia unui medicament n n-octanol
simuleaza bine abilitatea unui compus de a difuza pasiv prin membrane
biologice10.
Exist numeroase simboluri pentru coeficientul de partiie i fiecare
dintre ele dau o anumit msur a lipofiliei, Log P, Log Kow, Log D, ClogP,
MLogP.
Coeficientul de partiie determinat experimental, folosind un pH al fazei
apoase la care substana se gsete n stare neionizat, se noteaz cu logP
(partiie) sau log Kow11.

Hansch C., Leo A., Mekapati S.B., Kurup A., QSAR and ADME, Bioorganic &
Medicinal Chemistry, 12, 3391-3400 (2004).
10
Timmerman P.M.M.B.L., de Vries R. and Ingelse B.A., Tailoring Bioanalysis for PK Studies
Supporting Drug Discovery, Current Topics in Medicinal Chemistry, 1, 443-461 (2001).
11
*** - Cerep application note, Partition Coefficient (LogD), (2002). 46

Dac faza apoas este o soluie tampon cu un anumit pH, coeficientul de


partiie se noteaz cu logD (distribuie) sau logD pH 7.4 dac se folosete un
tampon avnd pH=7.4. Compusul studiat n acest caz poate fi parial ionizat.
ClogP, MlogP simbolizeaz coeficieni de partiie calculai prin diferii
algoritmi matematici, innd cont de structura moleculelor studiate.
Cele mai frecvent utilizate metode pentru determinarea coeficientului de
partiie sunt:
1. metoda direct: distribuia compusului ntre n-octanol i tampon;
2. metode indirecte: cromatografic, titrare electrometric;
3. algoritmi de calcul.
Predictori moleculari importani pentru o biodisponibilitate bun:
- flexibilitate molecular sczut, exprimat prin numrul total al
legturilor de rotaie, maxim 10 legturi;
- aria suprafeei polare sczut, <140A2;
- numrul total al donorilor i acceptorilor de protoni maxim 12.
Reducerea ariei suprafeei polare se coreleaz mai bine cu
creterea permeabilitii dect lipofilia, exprimat prin ClogP. Creterea
numrului de legturi de rotaie are un efect negativ asupra permeabilitii.
Obiective eseniale n cercetarea medicamentelor: identificarea i
nelegerea proprietilor moleculare care limiteaz biodisponibilitatea oral.
Primul
care
a
stabilit
anumite
reguli
structur-proprieti
fizice-biodisponibilitate a fost Lipinski.
Difuzia pasiv prin membrane, ce poate fi determinat folosind
membrane artificiale lipidice sau filme celulozice, nu este structural specific
dar este dependent de proprietile macroscopice considerate de Lipinski.
Caracterul lipofillic al unor specii amfifile, profilele de distribuie n
sisteme bifazice, absorbia pH-dependent reprezint factori determinani n
interpretarea interaciunilor medicamentelor cu biofaza10.
Conform teoriei pH-partiiei, viteza de absorbie a speciilor ionizabile
este proporional cu gradul de disociere. Variaia pH-ului
induce o modificare a vitezei de absorbie prin influena direct
11

asupra fraciei neutre in soluie11.


2.5.2 Regula lui Lipinski - Regula celor 512
Reprezint un instrument de prezicere i evaluare, din date structurale
moleculare, a posibilelor influene asupra permeabilitii i absorbiei. Valori
reduse pentru cei doi parametri biofarmaceutici sunt foarte probabile conform
unei reguli uor de reinut dac:
1.
exist mai mult de 5 donori de hidrogen;

12

Lipinski C.A. et all, Lipinski rule of five, Adv. Drug Deliv. Rev., 23, 3-25, (1997).

43

2.
masa molecular este peste 500;
3.
ClogP > 5;
4.
exist mai mult de 10 acceptori de hidrogen.
Lipsa unei aprecieri cantitative asupra biodisponibilitii orale, neglijarea
impactului posibilelor strii de cristalizare ale substanei active asupra
parametrilor biofarmaceutici de interes, a stabilitii chimice i a dificultilor de
realizare a unor forme farmaceutice reprezint limitri i insufieciene ale
acestei reguli. Rezultatele evalurilor sunt frecvent corelate cu influena unor
configuraii i conformaii moleculare date asupra flexibilittii moleculare, ariei
suprafeei polare sau complexrii moleculelor de ap la nivelul unor grupri
funcionale 15,16.
Caracterul lipofil este un factor structural major ce guverneaz att
farmacocinetica ct i farmacodinamia medicamentelor. Coeficientul de
partiie apa - 1-octanol este cea mai utilizat msur a lipofilicitii unui
compus chimic, o msur termodinamic a balanei hidrofil-lipofile13.
n tabelul 7 sunt prezentate formulele structurale, alturi de datele
structurale moleculare, respectiv numrul de grupri donoare / acceptoare de
protoni i masele moleculare pentru cinci compui (piroxicam, tenoxicam,
tolbutamid, hidroclorotiazid si pirido- stigmin), elemente utilizate n
aprecierea numrului lui Lipinski.

13

Marinez M., Amidon G., A Mechanistic Approach to Understanding the Factors


Affecting Drug Absorption: A Review of Fundamentals, J. Clin. Pharm., 42:620-643,
(2002).

44

Nr.
Lipinski

Masa
molecular

de
Nr. Donori
protoni

Formula
structural

Nr. Acceptori de
protoni

Compus

337

337

331

331

297

270

181

Tenoxicam
(forma
carbonilic)
Tenoxicam
(forma enolic)
Piroxicam
(forma
carbonilic)

Piroxicam
(forma enolic)

Hidroclorotiazid

Tolbutamid

Piridostigmin

45

Tabelul 7 - Stabilirea numrului lui Lipinski

46

Oxicamii reprezint substane foarte puin solubile n apa (22.8 mg/l


pentru piroxicam, respectiv 19.7 mg/l pentru tenoxicam), caracterizate prin
permeabiliti crescute, indicate de ClogP (0.94 mol/l i, respective 1.36 mol/l),
ceea ce le include n clasa II14, conform BCS. a valori de pH din domeniul
fiziologic de interes pentru absorbie, ambele substane se prezint sub form
anionic, fiind complet ionizate i avnd proprieti lipofile minime. Prezint un
caracter foarte slab acid, indus de prezena gruprii 4-hidroxi-enolice, ceea ce
explic solubilitatea n soluii alcaline19,20.
Calculul parametrilor moleculari a luat n considerare coexistena a dou
forme aflate ntr-un echilibru dinamic, forma carbonilic i forma enolic,
contribuiile lor relative fiind condiionate de configuraia molecular.
n cazul piroxicamului, forma enolic prezint solubilitate mai mare dect
forma carbonilic (80 mg/l fa de 22.8 mg/l). Forma carbonilic a
tenoxicamului prezint, aparent surprinztor, o solubilitate mult mai mare
dect forma enolic (20 mg/l fa de 1.5 mg/l).
Tolbutamida reprezint o substan practic insolubil n ap, dar
solubil n solveni organici, lipofil. Datorit permeabilitii mari, se
ncadreaz n clasa II a BCS. Comparativ cu grupul oxicamilor, solubilitatea n
ap este mai mare (160 mg/l fa de 20 mg/l), iar coeficientul de partiie este
practic dublu (2.1 comparativ cu 1.36 pentru piroxicam i 0.94 pentru
tenoxicam).
Valoarea pKa de 5.3, indic un slab caracter acid care determin
legarea puternic a formei anionice de proteinele plasmatice (>90%), probabil
prin interaciuni de natur electrostatic. Partea central a moleculei, hidrofil,
realizeaz legturi fizice, induse de compensarea unui deficit de sarcin, iar
fragmentele terminale hidrocarbonate apolare acioneaz prin mpiedicri
sterice.
Hidroclorotiazida este insolubil n ap i solubil n metanol. Este
ncadrat n clasa IV BCS, n principal datorit solubilitii reduse,
pH-depedente i permeabilitii reduse, ambele traduse n absorbie variabil
la nivel intestinal.
Dintre toi compuii studiai, n structura hidroclorotiazidei se gsete
numrul maxim de grupri donoare i acceptoare de protoni (3 + 8 = 11).
Dintre toi compuii studiai, ClogP prezint valoare negativ (0.23).
Prezint dou trepte de ionizare (pKai=7.9, pKa2=9.2), ambele
superioare valorii pH-ului plasmatic.
Piridostigmina este baz cuaternar de amoniu, liofob, avnd
solubilitatea apoas cea mai mare dintre compuii studiai (16g/l, comparativ
14

Yuksel N., Karatas A., Ozkan Y., Savaser A., Ozkan S.A., Baykara T., Enhanced
bioavailability of piroxicam using Gelucire 44/14 and labrasol: in vitro and in vivo
evaluation, Eur. J. Pharm. Biopharm.,56(3):453-9, (2003).
47

cu hidroclorotiazida, 1.66g/l, tolbutamida, 0.16 g/l, piroxicamul, 0.023 g/l,


tenoxicamul, 0.019 g/l). Structura molecular, puternic polar, nu prezint nici
o grupare donoare de protoni, ci numai 4 grupri acceptoare de protoni, ceea
ce se reflect n valoarea redus, dar pozitiv a coeficientului de partiie 1octanol/ap (0.73). Ete instabil n mediu bazic, la valori de pH mai mari de
8.5, fiind stabil n mediu puternic acid (pH=1) pe durate de scurte de timp (3
ore).
Compus

Formula
molecular

Solubilitatea apoas

LogW

CLogP

pKa

(Mol/L)
(W) Mol/L

g/L

0.000058

0.019726

-4.23

0.94

0.000004

0.001502

-5.35

1.29

0.000069

0.022840

-4.16

1.36

0.000242

0.080079

-3.62

1.68

C7H8O4N3ClS2

0.005586

1.663249

-2.25

-0.23

Tolbutamid

C12H18O3N2S

0.000590

0.159405

-3.23

2.10

5.3

Piridostigmin

C9H13O2N2Br

0.087059

15.77622

-1.06

0.73

Tenoxicam (forma
carbonilic)

C13H11O4N3S2

Tenoxicam (forma
enolic)
Piroxicam (forma
carbonilic)

C15H13O4N3S

Piroxicam (forma
enolic)
Hidroclorotiazi

pKa1=1.07;
pKa2=5.34.

6.3

pKa1=7.0;
pKa2=9.2.

Tabelul 8 - Caracteristici fizico - chimice calculate din date structurale

Exist ns muli factori i mecanisme care limiteaz absorbia oral15:


- energia necesar transportorilor enzimatici din intestin sau hepotocite
(glicoproteina P);
- primul pasaj hepatic sau intestinal, incluznd oxidare cu citocromul
P450, glicozilare, glucuronidare.
Spre deosebire de permeabilitatea membranar, mecanismele
clearence-ului enzimatic, att metabolice ct i transportul mediat, depind de
factorii individuali.
2.5.3 Permeabilitatea
Viteza de transfer printr-o interfa lipide / ap este dependent de
LogP, pKa ale substanei medicamentoase, pH-ul fazei apoase, suprafaa
interfazei, volumul relativ al fazelor n contact, natura fazei organice i tipul de
agitare. La unele grupri lipofile, LogP scade n ordinea:
naftil>fenil>propil>etil>metil>H.
15

Marinez M., Amidon G., A Mechanistic Approach to Understanding the Factors Affecting Drug
Absorption: A Review of Fundamentals, Journal of Clinical Pharmacology, 42:620-643, (2002).
48

Datorit caracterului preponderent lipidic al membranelor celulare i


faptului c mecanismul predominant de absorbie este reprezentat de difuzia
pasiv prin membranele gastro-intestinale, permeabilitatea unei substane
medicamentoase este direct dependent de LogP, adic de echilibrul dintre
interaciunile atomice i moleculare la care particip substana
medicamentoas dispersat molecular n faza apoas i lipidic a membranei.
Dac forele de atracie intermoleculare ntre faza lipidic i substana
dizolvat sunt mai mari dect dintre faza apoas i substan (valoarea LogP
mare), este de ateptat ca permeabilitatea prin membran va fi mai mare i
invers. Datorit liposolubilitii mai mari n cazul formelor neionizate,
permeabilitatea va avea valori mai mari.
A fost studiat absorbia a cca 100 de compui diferii cu ajutorul
membranei biliare (Wright i Diamond, 1969), evalurile de permeabilitate
avnd la baz diferenele de potenial pe cele dou fee ale membranei la
nivelul creia se desfura procesul de absorbie. Permeabilitatea marcat a
fost astfel corelat cu inducerea unei presiuni osmotice i a unui flux osmotic
reduse, traduse ntr-o diferen mic de potenial i invers. Raportul dintre
diferena de potenial a unui compus oarecare i cea a unui compus de
referin definete coeficientul de reflecie o i constituie un indicator al
permeabilitii compusului testat fa de un compus de referin. Cu ct
compusul este mai puin permeabil, valoarea lui o tinde spre unitate, iar cu ct
permeabilitatea lui crete, valoarea coeficientului de reflecie o se va apropia
de zero.
Folosind aceast metod, Wright i Diamond au corelat valorile LogP cu
mrimea absorbiei la un numr mare de compui. Dou clase fac ns
excepie de la regula conform creia absorbia crete direct proporional cu
liposolubilitatea i anume moleculele polare mici i compuii ramificai a cror
absorbie decurge mai ncet dect se deduce utiliznd LogP.
n cazul moleculelor polare, mici i relativ insolubile, procesul de
absorbie presupune traversarea porilor membranari, regiuni polare localizate,
cptuite cu grupuri funcionale hidrofile (absorbie prin convecie). Abordarea
acestui mecanism este dependent de mrimea moleculei, de absena
impedimentelor sterice.
Posibila explicaie pentru absorbia redus a compuilor ramificai o
poate constitui structura membranei care este alctuit din molecule lipidice
cu orientare strict (configuraia paralel a catenelor hidrocarbonate ale
acizilor grai). Astfel, compuii ramificai vor trebui s rup structura local a
membranei, rezistenele stricte manifestate fiind mult mai pronunate dect n
cazul compuilor lineari.
n ceea ce privete evoluia permeabilitii n seriile omoloage i
influena substituenilor, se remarc permeabilitatea crescut a primilor
termeni (corespunztor unui transport prin convecie steric posibil), scderea,
49

apoi creterea permeabilitii corespunztor creterii lungimii catenei, care


determin creterea solubilitii n faza lipidic reprezentat de membran,
dar i scderea numrului i triei legturilor de hidrogen cu apa. Moleculele
nepolare hidrocarbonate sunt nconjurate astfel de o regiune local n care
moleculele apei sunt mai ordonate dect n restul fazei apoase, aceast
structur determinnd creterea LogP i a permeabilitii membranei.
Creterea lanului hidrocarbonat determin intensificarea forelor de
respingere a compusului din faza apoas, avnd ca substrat o cretere a
entropiei16.
n prezent, determinrile de permeabilitate se realizeaz cu ajutorul
dispozitivelor de intubare i perfuzare local la nivel jejunal (Amidon i
Lennernas). Sunt utilizate pentru perfuzare:
-soluii de concentraii reduse, pentru a facilita calculul permeabilitii;
-soluii izotonice, pentru a anula fluxul transmembranar de ap; -soluii
cu pH=6,5, valoarea medie a pH-ului la nivel jejunal; -markeri:
-PEG 400 (marker non-absorbabil);
-Fenilalanina (permeabilitatea nalt - BCS, transport activ specific
aminoacizilor);
-Propranolol (permeabilitate nalt - BCS, difuzie pasiv);
-PEG 400 (Permeabilitate joas - BCS, difuzie pasiv).

(adaptat dup Lennernas et al, 2003)

Metoda Perfuziei Regionale Jejunale Umane asigur o bun corelare a


valorilor permeabilit ii efective cu datele privind viteza i mrimea procesului
de absorbie oferite de studiile de biodisponibilitate. Acurateea acestor
corelri este mai mare n cazul transportului de tip difuzional, mai puin n
cazul transportului mediat activ. Interesant a fost, n cadrul procesului de

16

Veber D.F., Johnson S.R., Cheng H.Y., Smith B.R., Ward K., Kopple K., Molecular Properties
That Influence the Oral Bioavailability of Drug Candidates, J. Med. Chem., 45, 2615-2623,
(2002).
50

validare a acestui sistem de determinare in vivo, postularea a trei compui de


referin necesari pentru corelarea datelor de permeabilitatea difuziv efectiv
n cadrul studiilor multicentrice: agenii beta-blocani atenolol, metoprolol i
propranolol.
2.5.4 Sistemul de clasificare biofarmaceutic - BCS
Sistemul de clasificare biofarmaceutic (Biopharmaceutical Clasification
System - BCS, Amidon G. et al.) realizeaz cuplarea aspectelor critice de
solubilitate i permeabilitate a substanelor medicamentoase i stabilete
posibile corelaii in vitro - in vivo.
Exist patru clase biofarmaceutice:
Corelaia in vitro - in vivo

Clasa

Solubilitatea

Permeabilitatea

Mare

nalt

Posibil, dac viteza de dizolvare este mai


mic dect viteza de golire a stomacului;
altfel corelaie limitat sau absent.

II

Mic

nalt

III

Mare

Joas

Posibil, dac viteza de dizolvare in vitro


este similar celei in vivo; excepie cazul
dozelor foarte mari.
Permeabilitatea este factor limtant al vitezei
procesului de absorbie; corelaie limitat
sau absent cu viteza de dizolvare.

IV

Mic

Joas

Corelaie limitat sau absent.

Tabelul 9 - Sistemul de clasificare biofarmaceutic

Reprezentanii generici ai acestor clase sunt:


Clasa I - metoprolol, antipirin, l-DOPA;
Clasa II - naproxen, carbamazepin, cimetidin, ranitidin;
Clasa III - atenolol, terbutalin, enalaprilat;
Clasa IV - furosemid, hidroclorotiazid.
Exist cazuri de frontier ntre aceste clase, n special n ceea ce
privete cazul compuilor cu o solubilitate pH-dependent (ex. piroxicam,
pKa=6.7, ketoconazol pKai=2.9, pKa2=6.5). Extinderea sistemului de
clasificare biofarmaceutic este reprezentat de detalierea noiunii de
solubilitate.

51

Solubilitatea

pH=1-8

Volumul de soluie

Mare

Toate valorile pH

< 250 ml

Intermediar

Oricare valoare de pH

< 250 ml

Mic

Nici o valoare de pH

> 250 ml

Tabelul 10 - Detalierea criteriului Solubilitate n cadrul Sistemului de


Clasificare Biofarmaceutic.

52

Clasa intermediar este reprezentat de compuii cu valori ale pKa n


intervalul de variaie a pH-ului fiziologic.
n ceea ce privete permeabilitate n sensul prevzut de BCS,
coeficientul de permeabilitate efectiv asociat include variabile precum
procesele de transport la nivelul membranei de absorbie (permeaie apoas,
difuzional sau convectiv), permeaia celulelor mucoasei (incluznd
fenomene de translocaie membranar, transportul transcelular pasiv sau
activ, difuzia sau convecia pasiv paracelular), transportul la nivelul
citosolului, membranei basolaterale, fluidului interstitial i peretelui vascular.
Rezistena major ntmpinat n cadrul acestui ansamblu este localizat la
nivelul membranei apicale (marginea n perie a intestinului subire).
Metabolismul citosolic poate influena determinrile de permeabilitate prin
alterarea n compartimentul acceptor - spaiul intracelular - a condiiilor sink.
Un alt factor de alterare a datelor legate de permeabilitatea efectiv este
prezent unui transport activ de eflux, chiar n cazul unui transport difuzional
semnificativ ca vitez i mrime. De menionat c n cazul Metodei Perfuziei
Regionale Jejunale Umane datele furnizate sunt caracteristici ale unui sistem
aflat n stare de echilibru, astfel nct posibilele fenomene de adsorbie la
interfeele membranare s nu falsifice parametrii de absorbie, iar fluxul
secreiei biliare este deviat n regiunea jejunal perfuzat.
| 2.6 Sisteme micelare i rolul lor n procesul de absorbie __________
2.6.1 Sistemele micelare _____________________________________
Creterea concentraiei moleculelor amfifile n soluie apoas determin
n punctul su critic deviaii importante de la idealitate, mult mai semnificative
dect cea exercitat de ctre electroliii puternici. Debutul acestor deviaii este
sesizat frecvent prin monitorizarea unor proprieti fizice cum ar fi tensiunea
interfacial, conductivitatea i turbiditatea/dispersia luminii polarizate ca funcii
de concentraia amfifilului i este atribuit autoasocierii moleculelor n
micele17.
Conceptul de micelizare, acceptat astzi ca asociere a unor molecule
peste o valoare critic a concentraiei pentru formarea unor agregate
macromoleculare, a fost propus iniial de McBain n i9i3. Ceea ce deosebete
soluiile micelare de alte sisteme coloidale, cum ar fi coloizii de asociaie, este
echilibrul dinamic cu forma liber, disocierea i regenerarea continu pe
fondul unei valori minime a energiei libere. La concentraii reduse, moleculele
amfifile asigur scderea energiei libere a sistemului prin acumularea la
nivelul unei interfee, gruprile hidrofobe orientndu-se spre exteriorul

17

Florence A.T., Attwood D., Physicochemical principles of pharmacy, 334 - 342, (1993). 56

mediului apos. Creterea concentraiei determin ineficiena acestui proces,


energia liber fiind redus prin asociere n monostraturi micelare, gruprile
hidrofobe meninndu-se n afara scutului apos.
Exist dou moduri distincte de abordare a discontinuitilor
caracteristice concentraiei micelare critice. Primul ia n discuie o concentraie
de saturaie a moleculelor neasociate, micelele fiind considerate astfel o faz
distinct, care separ de restul sistemului. Al doilea privete sistemul micelar
ca pe un ansamblu dinamic, care se supune legii aciunii maselor.
Structurile micelare sunt de tip ionic sau non-ionic, funcie de tipul
moleculelor amfifile care le genereaz. Primele sunt de tip sferic sau aproape
sferic la concentraii apropiate de CMC, dispunnd de sarcina superficial i
numr redus de agregare.
Micelele non-ionice se remarc prin dimensiunea lor mai mare, datorat
n primul rnd unui bilan energetic nefavorabil la admiterea unei noi molecule
n stratul monomolecular. Drept urmare, forma este n general neregulat
(micelele generate de cetomacrogol 1000 - C16H33(OCH2CH2)21OH au forma
presupus-elipsoidal, cu un raport axial sub 2:1). Stratul hidratant extern este
integrat cinetic micelelor.
2.6.2 Concentratia micelar critic
_________________________3______________________________________________________________________

Tensioactivii se gsesc n trei faze aflate n echilibru dinamic:


-monomeri liberi;
-micele;
-strat monomolecular localizat la o interfa.
Dac starea de monomeri liberi este n general nesemnificativ
cantitativ, structurile micelare reprezint stri de tranziie ntre formele
monomere i oligomere. Acest punct de tranziie este caracteristic fiecrui tip
de tensioactiv i este denumit concentraie micelar critic (CMC).

54

Depirea valorii specifice a CMC determin delinearizarea i


discontinuitatea izotermei tensiunii interfaciale Y, conductivitii specifice K i
turbiditii T.
Tensiunea superficial descrete cu creterea concentraiei
surfactantului, indicnd prezena unei cantiti care depete necesarul
pentru formarea unui strat monomolecular. Sub valoarea corespunztoare
CMC, nu se nregistreaz variaii ale tensiunii superficiale, fracia monomeric
liber rmnnd constant. Atingerea valorii critice semnific stabilirea unui
echilibru ntre cele trei stri coexistente ale tensioactivului; depirea acestei
valori se traduce doar n creteri ale numrului de micele, semnificativ n
planul altei proprieti caracteristice - creterea turbiditii (light scattering).
Dac tensioactivul este purttor al unei sarcini electrice, conductivitatea
soluiei va nregistra creteri proporionale cu creterea fraciei libere.
Discontiuitatea menionat mai sus, manifestat la atingerea CMC, este
la rndul ei dependent de caracteristicile dimensionale i structurale ale
micelelor generate. Este important de menionat faptul c micelele prezint
dimensiuni i numere de agregare (numrul de monomeri antrenai n cadrul
micelei) specifice, fr variaii la creterea concentraiei tensioactivului
(exceptnd creterile dramatice peste valoarea CMC), caracteristice fiecrui
tip de tensioactiv.
Valoarea limit a concentraiei tensioactivului la care debuteaz
formarea micelelor este funcie de structura monomerului i compoziia
mediului n care se desfoar procesul. Valoarea CMC descrete cu
creterea lungimii lanului hidrocarbonat apolar-lipofil; n general se
nregistreaz scderi cu un factor de 0.3 pentru creteri ale lanului
hidrocarbonat cu 2 atomi de carbon. Dimensiunile micelelor generate variaz
direct proporional cu tria ionic a soluiei. Conductana aparent a soluiilor
de tensioactivi ionici la concentraii superioare CMC este mai mic dect cea
corespunztoare speciei monomoleculare, fenomen datorat n special
prezenei contraionilor implicai n interacii mult mai puternice cu sistemele
structurate multisarcin reprezentate de micele, ecrannd aceast sarcin.
Micelele beneficiaz astfel de 20% din sarcina electric a speciei monomerice,
influennd astfel procesele de formare ale structurilor supramoleculare i
interaciile ntre gruprile terminale purttoare de sarcin sau ntre acestea i
contraioni.
2.6.3 Determinri calitative asupra sistemelor micelare____________
Caracterizarea sistemelor micelare cuprinde, pe lng determinrile de
tensiune superficial, conductivitate i turbiditate, analiza dimensional,
corelat cu natura tensioactivului i numrul de molecule de monomer
implicate n generarea micelelor. Aceasta se realizeaz prin determinri de
55

dispersie a luminii polarizate (van Holde), care permite evaluarea masei


moleculare a particulelor din soluie fr a oferi ns informaii structurale.
Lumina fiind o radiaie electromagnetic, componenta electric a undei
produce o oscilaie a distribuiei electronice n cadrul moleculei. Oscilaiile
electronice induc dipoli care absorb energia undei incidente, dispersnd-o
ulterior n direcii diferite de cea a radiaiei incidente1. Dipol- momentul indus
este dependent de polarizabilitatea molecular a i intensitatea cmpului
electric, E: / = a - E
n general, prezint interes modificarea intensitii pe direcia
fasciculului incident I/i. Scderea intensitii este proporional cu gradul de
dispersie, la rndul ei dependent de numrul i mrimea particulelor (n cazul
dat micelelor) aflate n soluie. Un indicator adecvat al polarizabilitii pentru
radiaiile din domeniul vizibil este ptratul indicelui de refracie: n 2 - n02 = 4 -n- N
-a unde:
n - este indicele de refracie al soluiei n0 - este
indicele de refracie a solventului N - numrul
particulelor cu polarizabilitatea a

56

Dispersia luminii polarizate n cazul unei soluii coninnd particule cu


masa molecular M n concentraia C depinde de produsul CM, astfel nct
determinrile furnizeaz, n plus fa de cele turbidimetrice, masa molecular
a micelelor.
Distribuia dimensional a micelelor este relativ omogen pentru un
anumit surfactant, ca i numrul de agregare. Modelul acceptat n prezent
pentru structura micelelor ionice generate de surfactani sintetici n soluii
apoase este aceea a unor sisteme sferice sau elipsoidale cu suprafaa neted,
incluznd 40 - 150 de monomeri.
Fosfolipidele sunt surfactani cu o valoare CMC extrem de redus,
datorat n principal lungimii lanului hidrocarbonat de acid gras. Cuplarea
acestui lan cu grupri funcionale ionizabile reduse ca volum determin
structuri micelare elongate de tip elipsoidal. n fapt, structura ideal a
agregatelor fosfolipidice peste valoarea CMC este de tip bidimensional extins bistraturile fosfolipidice. CMC n cazul fosfolipidelor a fost determinat
utiliznd tehnici de filtrare, urmrindu-se variaia concentraiei acestora n
filtrat.
La valori ale concentraiei sub CMC, concentraia fosfolipidelor n
materialul suspus filtrrii i cea din materialul filtrat sunt egale, n timp ce peste
aceast valoare, cantitatea de fosfolipide din filtrat este redus prin
intermediul reinerii sterice a agregatelor micelare la nivelul materialului poros.
CMC pentru DPPC (dipalmitoilfosfatidil- colina) a fost determinat n apa
purificat ca fiind 0,5 nM, crescnd la adugarea de metanol pn la valoarea
de 10 mM, care indic de fapt solubilitatea fosfolipidelor n respectivul solvent
organic. Fosfolipidele implicate n procesul fiziologic de absorbie prezint
ns n mediul intestinal cu compoziie carateristic post-adminstrrii de
alimente o valoare CMC de 0,01 pn la 10 nm, ceea ce corespunde cantitii
fiziologic-existente n intestin i face posibil generarea i, astfel, implicarea
sistemelor micelare n procesul de absorbie al substanelor liposolubile.
2.6.4 Tensioactivi endogeni ___________________________________
Acizii biliari i srurile acestor sunt tensioactivi ionici, derivai structurali
ai colesterolului, jucnd un rol important n cadrul procesului de absorbie,
transport i excreie a unei game variate de compui endogeni i exogeni.
Prezint structur perhidrociclo- pentanofenantrenic comun tuturor
perhidrosteroizilor. Particularitile constau ntr-un nucleu sterolic saturat, cu
19 atomi de carbon, 60 un atom de hidrogen orientat n poziie beta la atomul
de carbon 5, o caten lateral saturat dispunnd de o grupare terminal
carboxilic i o grupare hidroxil orientat n poziia alfa la atomul de carbon 3.
Gruprile hidroxil, caracteristice nucleului sterolic al acizilor biliari, sunt dipuse
n cazul mamiferelor n poziiile 3, 6, 7 i 12.

Termenul de acizi biliari primari se refer la cei sintetizai de hepatocitul


uman de novo: acidul colic (acid 3a, 7a, 12a-trihidroxi-5p- colanic) (AC) i
chenodezoxicolic (acid 3a, 7a-dihidroxi-5p-colanic) (ACDC). Procesele de
dehidroxilare a acestora mediate de bacteriile florei intestinale genereaz acizi
biliari
secundari,
mai
hidrofobi:
acid
deoxicolic
(acid
3a,
12a-dihidroxi-5p-colanic) (ADC) i litocolic (acid 3a-hidroxi-5p-colanic) (ALC).
Cei patru acizi constituie aproximativ 99% din totalul acizilor biliari prezeni n
intestinul subire. Produii metabolismului hepatic sunt denumii frecvent acizi
biliari teriari.
Ceto-acizi biliari sunt generai prin oxidarea de ctre flora intestinal a
unei grupri hidroxil, n special n poziia 7, fiind ns rapid redui de ctre
enzimele hepatice la a i p-hidroxi-acizi biliari corespunztori. De exemplu,
ceto-acidul biliar corespunztor ACDC este acidul 7-ceto litocolic i unul dintre
produii si de reducere este acidul ursodezoxicolic (acid 3a,
7p-dihidroxi-5p-colanic) (AUDC).
Fiziologic, peste 99% din acizii biliari prezeni n secreia biliar sunt
conjugai. Substituentul organic, de tipul glicinei, taurinei sau sulfatului, este
ataat fie catenei laterale hidrocarbonate, prin intermediul gruprii carboxilice,
fie la nivelul uneia din gruprile hidroxil-sterolice, genernd legturi labile de
tip ester, eter sau amidic. Aceti substitueni influeneaz, prin efecte inductive
sau electromere, precum i prin caracterului acido-bazic al compusului care l
genereaz, ionizarea conjugatului.
Acizii biliari liberi, neconjugai, au un pKa de aproximativ 5.
Glicin-conjugaii au un pKa mediu de 3.9, iar taurin-conjugaii, mai mic de 1.
Conjugarea se traduce astfel n reducerea valorii pKa, mrind astfel fracia
ionizat la un pH dat. Forma ionizat fiind mai solubil n ap dect forma
neionizat, se poate lua n considerare i o cretere a solubilitii. Acizii biliari
precipit din soluii apoase cu pH n domeniul 6.5 - 7 (domeniul de pH al
jejunului i ileonului). Glicin- conjugarea reduce acest domeniu la valori de pH
sub 5, iar taurin- conjugarea menine n soluie acizii biliari chiar n domenii
puternic acide (pH<1). O influen redus se manifest ns asupra
caracterului hidrofob al fraciei ionizate, corelat cu proprietile tensioactive
manifestate fiziologic asupra fosfolipidelor i a

58

colesterolului, dar i caracterul iritant manifestat asupra mucoaselor


biologice att in vitro, ct i in vivo.
Secreia biliar se comport astfel ca un amestec complex de
tensioactivi cu implicaii majore n procesele de absorbie caracteristice
intestinului i n alte funcii biologice, toate derivate din proprietile amfifile.
Acizii biliari prezint i un alt avantaj, legat de aceast dat de reglarea
propriului metabolism i a propriei sinteze prin intermediul
colesterol-7-hidroxilazei, retro-controlul permind astfel reducerea
variaiilor de biodisponibilitate n cadrul regimurilor multidoz ale
medicamentelor lipofile. Implicarea demonstrat n transportul intestinal al
unor ioni (Ca2+, Fe2+) cupleaz prezena acizilor biliari la mecanismele de
transport facilitat (cotransport).
2.6.5 Rolul tensioactivilor n absorbie
______________________________________________________________________________________________________ 3 _____________________________________________________________________________

Acizii biliari i srurilor lor reprezint un factor important n generarea


micelelor i, prin intermediul acestora, n solubilizarea intraluminal i
excreia unor numeroi compui organici, precum bilirubin, colesterol,
metabolii endogeni, derivai amfifili ai hormonilor steroizi i diverse
xenobiotice. Secreia acizilor biliari este n general cuplat cu secreia
fosfatidilcolinei (lecitinei) i colesterolului, compui care s-au dovedit ageni
stabilizatori majori ai structurilor micelare. Astfel, prezena lecitinei reduce
CMC pentru acizii biliari la mai puin 1mM, ceea ce face posibil
manifestarea solubilizrii micelare chiar a jeun (generarea de micele mixte).
Rolul tensioactivilor n procesul de absorbie, i n particular al
structurilor de tip acid biliar, a fost evideniat de ncercrile de introducere a
lor n formularea unor produse coninnd principii active caracterizate de
hidro/lipofilie limitat18.
n ciuda valorilor terapeutice incontestabile i utilizriii medicale
ndelungate a acizilor biliari ca substane medicamentoase i/sau adjuvani
pe baza proprietilor i funciilor biologice menionate, utilizarea n cadrul
formelor farmaceutice este limitat la cele solide (tablete, capsule,
suspensii), datorit solubilitii reduse n mediile apoase cu pH cuprins ntre
1-8, dar i gustului amrui, persistent, care reduce compliana. De remarcat
faptul c ACDC, AUDC i ALC sunt practic insolubili n ap19.
Interpretarea rolului tensioactivilor endogeni presupune pre- existena
micelelor generate intraluminal n prezena acizilor/srurilor biliare.
Solubilizarea micelar favorizeaz n mod cert absorbia, ns parametrii care
caracterizeaz cele dou procese nu pot fi direct corelai. n fapt, generarea
18
19

Quintus: Phenomenes de transport, Hermann, , 14-25, 55-74, 217, (1990).


Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19 th ed., 206, 260, (1995).
59

unor micele cu stabilitate marcat ar defavoriza procesul de absorbie prin


capturarea i eliminarea pe cale digestiv a substanelor medicamentoase,
fapt neconfirmat experimental. Pe de alt parte, structurile micelare au
dimensiuni mult prea mari pentru a fi absorbite ca ansamblu prin difuzie
pasiv. Teoretic, dimensiunile ar fi cel puin mai mari dect dublu lungimii
catenei tensioactivului, iar prezena acestui ansamblu, dispunnd de sarcin
electric superficial considerabil raportat la curenii transmembranari ar
genera, prin difuzie pasiv, dezorganizri membranare locale i cascade de
reacii secundare care ar pune sub semnul ntrebrii integritatea morfologic i
funcional celular.

Figura 9 - Rolul tensioactivilor n absorbie

Studiile pre-clinice au evideniat efectul iritant al tensioactivilor sintetici la


nivelul membranelor biologice. De asemenea, n cazul obstruciilor biliare
cronice i al cancerelor biliare, procese care influeneaz calitativ, dar mai ales
cantitativ secreia biliar, prezena unor leziuni de tip ulceros la nivel duodenal
este nsoit de ineficiena terapiei anti-Helicobacter pilori clasice. Agentul
bacterian a fost localizat la nivelul membranei apicale a enterocitelor, protejat
de glicocalixul intestinal format din mucoproteine. Substanele tensioactive
sunt frecvent utilizate ca referine n cadrul determinrilor de activitate
mucolitic. Absena acizilor/srurilor biliare menine vscozitatea
mucoproteinelor i reduce difuzia antibioticului spre spaiul n care este
localizat agentul bacterian, reducnd eficacitatea terapeutic.
Intraluminal, la nivelul mucoproteinelor suprapuse membranei apicale
exist un gradient de pH (dat de diferenele de pH existente ntre spaiul
intraluminal, slab acid - 6.4) i membrana celular (pH neutru). Acest gradient
de pH, tradus ntr-un gradient electrochimic, induce modificri structurale n
cadrul micelelor. Asimetria astfel indus permite interacia tensioactivilor ionici
din stratul monomolecular cu apa de hidratare a mucoproteinelor determinnd
treptat transformarea lor n structuri laxe care permit avansarea micelelor spre
suprafaa apical a membranei. n paralel, micelele sunt termodinamic stabile,
60

dei are loc o cretere a energiei libere, migrarea tensioactivului n masa


mucoproteic determinnd creteri ale tensiunii superficiale, dar i creteri ale
entropiei (migrarea micelar mediat de gradientul electrochimic).
Etapa final a ntregului proces este reprezentat de difuzia pasiv a
substanei medicamentoase solubilizat n centrul sistemului micelar,
ncadrat de membrana apical la nivelul creia se realizeaz absorbie i de
agentul tensioactiv dispus n strat monomolecular.
Nu este exclus nici formarea intraluminal a unor alte sruri biliare prin
implicarea srurilor cu glicin sau taurin n reacii de transesterificare la care
particip chiar substane medicamentoase cu structur de alcool, acid sau
chiar amine (ex. Enanaprilatul, care prezint circulaie enterohepatic).
Structurile generate beneficiaz de transportul activ, specific i cantitativ
semnificativ (pn la 10g n 24 de ore) hIBAT (human Intestinal Bile Acid
Transport), Na+ dependent, hidrolizarea enzimatic regenernd rapid n
spaiul intracelular entitile iniiale.
Teoria prevede aadar posibilitatea unor interaciuni ntre structuri
compatibile din punct de vedere al polaritii i lipo/hidrosolubilitii,
interaciuni premergtoare unui proces de absorbie prin difuzie pasiv.
Elementele componente ale unui sistem privit n prezent ca unitar acioneaz
individual, interdependent i consecutiv asupra interfeei membranare.
2.7 Caracteristici ale cilor de administrare
2.7.1 Absorbtia oral

In absorbtia orala includem absorbtia medicamentelor administrate pe


cale orala. Aceasta absorbtie se poate face in gura, in stomac si in intestin.
2.7.1.1 Absorbtia la nivelul mucoasei bucofaringiene
Absorbtia la nivelul mucoasei bucofaringiene este limitata in primul rand
prin aceea ca medicamentele stau un timp foarte redus in aceasta zona, cu
exceptia celor destinate tratamentului local, in care caz insa nu ne intereseaza
ceea ce se absoarbe decat cel mult din punct de vedere toxicologic. Exista
insa medicamente destinate unei actiuni immediate, si care se tin sub limba.
La aceasta categorie mentionam nitroglicerina, destinata tratarii crizelor de
anghina pectorala. De remarcat ca timpul sau de injumatatire este de ordinul
minutelor urmare a hidrolizei in plasma si unei distributii rapide. Oricum se stie
ca se absoarbe puternic pe eprubetele de plastic pe care se face recoltarea).
Biodisponibilitatea este mai mare dupa absorbtia sublinguala decat
dupa absorbtia orala datorita evitarii primului pasaj hepatic care duce la o
biodisponibilitate sub 1% desi, pe de alta parte, actiunea se pare ca se
datoreaza in primul rand celor doi metaboliti (dinitratul si respectiv
mononitratul de glicerina). Trebuie totusi mentionat ca apartitia metabolitilor in
61

plasma intr-un interval de cateva minute si concentratia lor foarte mare fata de
capacitatea de metabolizare in ficat dovedeste ca metabolismul se face si in
alte organe decat in ficat20. Administrarea se poate face sub forma de spray
sau tablete sublinguale, diferenta de farmacocinetica intra cele doua forme
fiind nesmnificativa21.
2.7.1.2 Absorbtia gastrica _____________________________________
Dat fiind ca medicamentele stau un timp mai mare in stomac, aici are loc
in principal dezagregarea comprimatelor si cedarea substantei active. Atat
cedarea cat si absorbtia sunt legate in primul rand de influenta pH-ului acid din
stomac. Acesta favorizeaza cedarea subtantelor insolubile care se transforma
in mediu acid in saruri mai solubile. In ceea ce priveste absorbtia propriu zisa,
sarurile se absorb mai putin decat substantele liposolubile din cauza barierei
lipidice constituite din membranele celulare.
Aici se pot face ipoteze privind deplasarea echilbrului reactiei de
disociere a sarurilor:
BH ^ B" + H+
Trecerea formei nedisociate BH in membrana duce la deplasarea
echilibrului in reactie spre stanga si deci la formarea unei noi cantitati de
compus nedisociat care va intra in membrana si asa mai departe. O parte din
compusul BH trece apoi in interiorul celulelor unde disociaza in ioni.
Stomac Membran
-

BH H BH B
BH
BH H+ BH
BH &B-+ H+

.....

Snqe H+ BB
BH
BH H+ BH

BH ^BH B-+ H+

Figura 10 - Disocierea si permeabilitatea prin membrane


biologice

Procesul decurge teoretic pana la momentul in care raportul


concentratiilor atinge valoarea coeficientului de partitie intre fazele in contact.
Suplimentar trebuie sa ne mai gandim si la o serie de reactii catalizate
de ionul H+ care pot duce la inactivarea sau din contra, la activarea
medicamentului.
Gradul de modificare si de absorbtie depinde mult si de interactiunea cu
alimentele, care se pot tampona o parte din aciditatea continutului gastric sau
altele, la cresterea secretiei gastrice.
20

MG Bogaert: Clinical Pharmacokinetics of Glyceryl Trinitrate Following the Use of Systemic


and Topical Preparations, Clin Pharmacokinet 12, 1-11, 1987
21
KM Jensen, S Mikkelsen: Studies on the Bioavailability of Glycerol Trinitrate after Sublingual
Administration of Soray and Tablet, Arzneim - Forsch/Drug Res, 47(I), nr. 6, 716-8, 1997
62

2.7.1.3 Absorbtia in intestinul subtire ___________________________


Intestinul subtire este segmentul tractului gastrointestinal in care se face
absorbtia majoritatii medicamentelor in principal din urmatoarele motive:
- suprafata sa este foarte mare (egala aproximativ cu cea a unui teren de
tenis - circa 400 m2),
- timpul de stationare al medicamentelor este de mai multe ore,
- pH-ul este neutru spre alcalin, permitand o absorbtie mai buna pentru
substantele active lipofile sau pentru cele care pot trece in conditiile date
intr-o forma "baza",
- o parte din enzimele existente aici cu rol de a creste absorbtia
alimentelor pot avea acelasi efect si asupra absorbtiei unor
medicamente,
- vascularizatia foarte bogata, legata de acelasi scop al preluarii
alimentelor, permite o rapida preluare a substantelor active
medicamentoase,
- suplimentar, in acest segment substantele active sunt deja eliberate din
forma farmaceutica.
Un aspect esential de retinut in ceea ce priveste absorbtia din intestinul
subtire este acela ca medicamentele absorbite sunt purtate de sange in ficat,
unde au loc majoritatea proceselor de metabolizare, trecand numai dupa
aceasta in circulatia generala. Faptul ca in multe cazuri metabolizarea duce la
inactivarea medicamentelor, fenomen numit "efectul primului pasaj", trebuie
retinut ca un dezavantaj al administrarii orale si un motiv pentru a cauta cai
alternative de administrare.
Un element foarte important care trebuie avut in vedere in legatura cu
unele substante active foarte putin solubile sau unele substante hidrofile este
prezenta in intestin a acizilor biliari, substante tensioactive ce se asociaza in
micele ce includ si substante medicamentoase, ducand astfel la un "transport
facilitat".
2.7.1.4 Absorbtia in intestinul gros _____________________________
Absorbtia in intestinul gros este mai redusa dat fiind ca cea mai mare
parte din substantele active s-au absorbit inainte de a ajunge la acest nivel.
Pentru unele substante ce au fost insa acumulate in bila ca metaboliti, in
particular glucoronoconjugati si apoi excretate in intestin, se poate produce o
hidroliza cu eliberarea substantei active care se reabsoarbe. Fenomenul este
semnificativ de exemplu in cazul piroxicamului, tenoxicamului si ranitidinei
cand, in curba concentratiei plasmatice apare un al doilea maxim, corelat in
general cu absorbtia alimentelor. In particular timpul foarte mare de
injumatatire pentru tenoxicam si piroxicam este datorat acestui fenomen,
numit "circulatie enterohepatica" si duce la avantajul foarte mare ca aceste
medicamente pot fi administrate o singura data pe zi sau chiar mai rar.
63

2.7.1.5 Absorbtia rectala


Absorbtia rectala este semnificativa pentru medicamentel administrate
la acest nivel in special ca supozitoare. Avantajul administrarii rectale din
punct de vedere al absorbtiei este evitarea efectelor destructive asupra
medicamentelor ale aciditatii gastrice si ale enzimelor in timpul primului pasaj
hepatic. Absorbtia decurge principial la fel ca in intestinul subtire dar o
diferenta semnificativa apare din aceea ca substanta activa se afla dizolvata in
masa supozitoarelor si absorbtia cuprinde ca faza o "partitie" intre aceasta si
membrane. Aceasta este o deosebire fata de absorbtia in celelate segmente
se face dintr-o faza esentialmente "apoasa". Ideia ca exista o partitie prelabila
de la masa topita a supozitorului catre o faza apoasa ce "captuseste" mucoasa
rectala, idee pe care se bazeaza modelul experimental pentru studiul cedarii
din supozitoare este probabil gresita, deoarece datele obtinute sunt mult prea
mici (10-15% in cateva ore) fata de biodisponibilitatea mare a substantelor
active din supozitoare. Un proces care favorizeaza foarte mult transferul
substantei active este acela al "etalarii bazei supozitorului" pe mucoasa
rectala.
Ca o caracterizare generala, se pare ca biodisponibilitatea dupa
administrare rectala este mai buna decat dupa administrarea orala. Indiferent
insa de aceasta, absorbtia incepe practic imediat si efectul se instaleaza mai
rapid.
La acest nivel trebuie tinut cont si de actiunea florei intestinale asupra
substantele active medicamentoase.
Ca o caracterizare generala a absorbtiei in traiectul gastrointestinal,
aceasta depinde factori fiziologici si fiziopatologici, prin intermediul timpului cat
dureaza tranzitul prin diferite segmente si prin intermediul pH-ului in acestea.
2.7.2 Absorbia parenteral___________________________________
Sub denumirea de absorbtie parenterala se include toate celelate locuri
de administrare in afara de traiectul gastrointestinal si acestea includ calea
vasculara, calea percutana, calea intra musculara calea intravaginala, calea
intraoculara, calea intranazala etc.
In timp ce calea intracasculara si cea intramusculara sunt destinate
medicamentelor cu actiune generala (in tot organismul), celelalte cai sunt
destinate in principal medicamentelor cu actiune locala desi sistemele
terapeutice transdermice sunt o forma moderna de administrare cu avantaje
majore terapeutice si in ceea ce priveste complianta.
2.7.3 Absorbia intramuscular

Data fiind vascularizatia foarte bogata si mediul local esentialmente


apos, este o absorbtie rapida si totala cu exceptia cazului cand se urmareste o
64

absorbtie intarziata si se administreaza substanta activa ca injectie uleioasa


sau ca sare metalica disociabila lent. Pentru o prelungire moderata a
absorbtiei sau pentru o mai intensa actiune locala, se poate asocia substantei
active un vasoconstrictor local cum ar fi adrenalina.
2.7.4 Absorbia vaginal _____________________________________
Se aseamana in linii mari cu cea rectala, dar tratamentele urmaresc in
special actiunea locala, obiectiv greu de realizat pe termen mai lung datorita
tocmai absorbtiei bune la acest nivel.
2.7.5 Absorbia percutan ____________________________________
Dincolo de administrarea medicamentelor cu actiune locala, calea
percutana este o cale foarte avantajoasa de administrare pentru medicamente
cu actiune generala care necesita tratamente cu caracter quasipermanent, in
special tratamentul hormonal si cel antihipertensiv.
In ceea ce priveste absobtia prin piele exista doua cai alternative:
transferul prin piele si absorbtia la nivelul glandelor anexe (in special cele
sudoripare). A existat in timp o lunga disputa privind care din cele doua cai
este primordiala. In prezent este acceptat ca drumul anexelor este unul
secundar, el preluand numai cateva procente din transportul medicamentelor.
Pielea la randul ei este formata din mai multe straturi, dar cel care este
determinant pentru viteza transferului (deci cel prin care transferul este cel mai
lent) este stratul cornos. Distrugerea numai in
parte a stratului cornos duce la o crestere de circa 100 de ori a
28
22

toxicelor organofosforice prin piele .


Imaginea curent acceptata pentru stratul cornos este aceea a unui zid:
caramizile sunt celulele keratinizate (scleroproteine formate din multi
aminoacizi) iar mortarul dintre ele este format dintr-un strat fluid sau care se
poate fluidiza, de molecule lipidice. Aici din nou se pune problema raportului
fluxurilor pe cele doua cai. Aparent calea lipidelor ar fi mai lesne de urmat dar,
dupa cum se va arata mai departe, numeroase experimente ale lui H.
Maibach 23 au pus in evidenta fluxuri semnificative pentru numeroase
medicamente prin straturi de keratina, de tipul celei din celulele stratului
cornos.

22

M. Ionescu, C. Mircioiu, V. Voicu: Inhibition of the percutaneous absorption of o, o-dimethyl -o - dichlorvinylphosphate by


adsorptive powders, "Perspectives in Percutaneous Penetration", (K. Brain, V. James, K. Walters edts) STS Publishing, Cardiff, vol.
5B, pp.258-260, 1998
23

RJ Feldman, HI Maibach, J Invest Dermatol, 52,89,1969

65

Multe medicamente se acumuleaza in stratul cornos. De exemplu


progesterona atinge in stratul cornos concentratii de 20 n g / g , in timp ce in
sange, concentratiile nu depasesc 2 ng/ml 24 . In absorbtia percutana a
medicamentelor trebuie deci sa distingem doua faze: partitia intre forma
farmaceutica si stratul cornos in prima faza si distributia ulterioara din stratul
cornos. In ceea ce priveste distributia din stratul cornos, aceasta se face in
doua directii: in sange si de aici in tot organismul, si in apa ce ce se elimina
prin piele.

24

C. Mircioiu, A. Perju, E. Grau,G. Calin, A. Neagu , D. Enachescu, D.S. Miron: Pharmacokinetics of progesterone in
postmenopausal women: II. Pharmacokinetics following percutaneous administration, Europ. J. Drug Metab. Pharmacokin.,
23(3), 397-402, 1998

66

Dincolo de fluxul propriuzis de apa prin stratul


cornos, o parte din apa
33
hidrateaza proteinele si duc la o marire considerabila a grosimii acestuia - de
la 15 ^ in stare nehidratata la 45 ^ la hidratarea completa. Stratul cornos
complet hidratat contine 20 % proteine, 5 % lipide si 75 % apa25. O parte din
substantele active

25

IH Blank, RJ Scheuplein, in Progress in Biological Sciences in Relation to Dermatology, A Rook, R Champion eds, Univ. Press
Cambridge, England 1964

67

difuzeaza pasiv prin aceasta apa imobilizata 26 . In conditii de ocluzare


permeabilitatea creste de circa 4-5 ori iar cea a corticosteroizilor de peste 100
de ori27.
2.7.6 Modele teoretice privind absorbtia.
Modele experimentale in-vitro pentru studiul absorbtiei ___________
Deoarece absorbtia este o succesiune de transferuri interfaciale si
difuzii prin faze continue este de asteptat ca factorii care influenteaza aceste
procese, in principal solubilitatea si coeficientul de partitie apa/lipide, sa fie si
factorii care determina transferurile prin membrane.
Modelele ar putea fi grupate in functie de cum considera dependenta
concentratiei de spatiu si timp, in trei categorii si
35

anume28:
- modele de quasiechilibru, care considera concentratii finale, independente
de timp si spatiu, cum ar fi modelul partitiei in functie de pH sau modelul
partitiei intre faze nemiscibile ,
- modele de stare stationara, unde se considera o dependenta numai de
spatiu a concentratiei, cum ar fi metoda balantei de masa,
- metode dinamice: metoda compartimentala, mixing tank model,
dispersion model, transit model.
Dependenta transferului prin membrana se poate intelege usor din
diagrama de mai jos:

26

R Scheuplein, I Blank,: Permeability of the skin, Physiol Rev, 51,702, 1971


27
C Vickers, Arch. Dermatol. 88, 20,1963
28
P. Macheras: Characterization of the plasmaprofile: Wht are the choices?, APV Workshop on Bioequivalence, Frankfurt, 9 March, 1999

68

Ap

Afi

Lipide
100 1000 900
Ac=100

100 10 1
Pua=0,1

Ac =9

Figura 11 - Transferuri interfaciale si difuzii prin faze continue

1
0

1
0

69

Deci, deoarece viteza de transfer este proportionala cu gradientul de


concentratie, se observa ca viteza de transfer este cu atat mai mare cu cat
coeficientul de partitie apa/lipide este mai mare. Desigur ca rezultatul trebuie
privit cu oarecari rezerve. Se vede ca sa presupus ca echilibrul la cele doua
interfete se stabileste instantaneu. Pe de alta parte, daca coeficientul de
partitie este 0.1, este greu de presupus ca se va realiza o concentratie de
100 unitati in faza apoasa.

3. TRANSFERUL INTERFACIAL I DISTRIBUIA


MEDICAMENTELOR
| 3.1 Cmpul de fore al interfeelor ______________________________
Este determinat de asimetria distribuiei moleculelor n aceast "faz
interfacial". De o parte i de alta avem vscoziti diferite, interaciuni
diferite cu moleculele fazei continue, distribuii de sarcini electrice diferite
care determin apariia de straturi duble electrice pe ambele pri,
interaciuni diferite ntre moleculele celor dou faze cu apariia unei tensiuni
interfaciale, a unui potential de interfata etc. Apariia moleculelor de
substan activ duce la perturbarea structurilor interfeei. O mare parte din
mecanismele de aciune ale medicamentelor se pot explica prin aceste
interaciuni ntre moleculele de substana activ i structurile interfeei, care
sunt interaciuni fr reacii chimice i au fost numite "interaciuni finite" dup
modelul interaciunii ntre o molecula i pereii capilari n teoria ascensiunii
capilare.29
n ceea ce privete efectul interfeei asupra moleculei farmacodinamic
active, aceasta sufer n primul rnd o orientare n funcie de interaciunile
cu cmpul electric al interfeei i de interaciunile de tip van der Waals
(interaciuni hidrofobe, interaciuni polare etc.). n final aceast orientare
duce n general la o fixare a moleculelor active la interfa i o ntrziere a
transferului lor.
Aceste acumulri la interfa i perturbri ale structurilor electrice ale
acesteia pot fi constatate n cazul plachetelor prin efectele asupra agregrii
plachetare. Aproape toate medicamentele curente au fost testate n ceea ce
privete efectul lor asupra agregrii plachetare. S-a constatat, n linii mari, c
cele care au o sarcin rezidual negativ cresc potenialul electroforetic al
plachetelor i reduc agregarea, iar cele cu sarcin rezidual pozitiv scad

29

Voicu V, Mircioiu C - Mecanisme farmacologice la interfete membranare. Interactiuni finite


medicamente - interfete biologice, Ed. Academiei Romane, Bucuresti, 1994
70

potenialul Z i cresc agregabilitatea. Se poate face o paralel ntre aceste


efecte i efectul acelorai medicamente asupra vitezei de sedimentare a
hematiilor30, dat fiind paralela ntre agregarea plachetar i cea eritrocitar:
ambele sunt controlate de interaciunea ntre straturile dublu electrice
asociate membranei.
n funcie de natura lor i datorit i faptului c membrana ca bistrat
lipidic este asimetric (stratul interior este mai bogat n fosfatidil-serin i
cele dou jumti acioneaz ca un cuplu, rspunznd diferit la perturbri),
unele molecule vor realiza concentraii mai mari pe faa extern a
membranei (i ntre acestea se afla toate moleculele fa de care membrana
este impermeabil) iar altele pe cea intern. i acestea din urm ns, dat
fiind c traversarea nu se face instantaneu, ntr-o prim etap vor fi mai
multe pe faa extern.
Diferena de concentraie pe cele doua fee va avea ca urmare o
deformare a membranei, interfa la care avem concentraii mai mari
suferind o "expandare" ca urmare a slbirii coeziunii intermoleculare.
Macroscopic se constata c acizii grai, alchil- sulfonaii, acidul etacrinic,
saponinele, fenilbutazona, indometacinul, furosemidul, barbituraii,
tiosemi-carbazonele, dipiridamolul etc. fac s apar protuberane pe
suprafaa hematiilor, iar fenotiazinele, anestezice locale (cincocaina,
tetracaina, procaina), antihistaminice (feniramin, clorfeniramin etc.),
propranololul, verapamilul, rezerpina etc. duc la apariia unor invaginri.
Regula este ca substanele cationice prefer partea
citoplasmatic ducnd la formarea de nvaginri, iar cele anionice i
neutre, partea extern ducnd la formarea de protuberane (crenatori)31.
Aceste grupe sunt veritabili antagoniti, adugarea unei substane din
grupa advers ducnd, n funcie de concentraie, la restaurarea formei
hematiei sau la inversarea efectului. La toate substanele menionate c
produc nvaginri, efectul este bifazic, n prima faz ele fiind crenatoare 32.
Explicaia este aceea c ele se adsorb nti pe faa extern a membranei i
numai dup aceea migreaz spre faa intern.

30

V. A. Voicu, C. Mircioiu, M. Jiquidi, R. Gref, M. Olteanu: Studies concerning some effects of drugs,
colloid vectors for drugs and decorporators on some physicochemical parameters of blood, in T. Sohns, V.
Voicu (edts): NBC Risks. Current Capabilities and Future Perspectives for Protection, Kluwer Academic,
Amsterdam, 1999, p. 311-330.
31
Sheetz MP, Singer SJ. Biological membranes as bilayer couples. A molecular mechanism of
drug-erythrocyte interactions. Proc Natl Acad Sci U S A. 1974 Nov; 71(11):4457-61.
32
Deuticke B. Transformation and restoration of biconcave shape of human erythrocytes induced by
amphiphilic agents and changes of ionic environment. Biochim Biophys Acta. 1968 Dec 10; 163(4):494-500.
71

| 3.2. Limitele termodinamice ale transferului ______________________


3.2.1 Coeficientul de partiie __________________________________
Transferul prin interfee este limitat de regula c la echilibru activitile
moleculei active n cele dou faze trebuie s fie egale. Aceasta duce la
concluzia, altfel verificata i experimental, c indiferent de cantitatea total
de substan activ, la echilibru concentraiile n cele dou faze se vor gsi
ntr-un raport constant, numit coeficientul de partiie al substanei respective
ntre fazele n contact.
Coeficientul de partiie este un parametru foarte important n practic n
corelrile cantitative ntre structura chimic i activitatea biologic (QSAR Quantitative Structure-Activity Relationships) ntre care cea mai cunoscuta
este relaia Hansch33.
Dac vom considera o serie de compui de structura R-X, putem
asocia fiecrui substituent X, un numr o X definit prin relaia Hammet:
Gx
X

= ln

k
k

unde kH este constanta de viteza a reaciei standard n care este


implicat produsul de baza R-H iar kX este constanta de viteza a reaciei dup
nlocuirea lui H cu X.
Descoperirea fundamental a lui Hammet este aceea c dac
schimbam reacia standard noii parametri sigma sunt proporionali cu
cei din reacia anterioar o x = pu X ceea ce ne permite, atunci
>

cnd cunoatem vitezele pentru una din reacii, s prezicem constantele de


vitez pentru toi compuii n a doua reacie, dac tim constanta de
proporionalitate.
Toate ncercrile de a aplica acelai model la prezicerea activitii
biologice au dat gre pn n momentul n care Hansch a adugat i un
"parametru de lipofilicitate":
X
n Y
=
ln
X
P
P

unde reprezint coeficientul de partiie ap/octanol.


Aceasta a condus n final la un model cu o valoare predictiv foarte
mare pentru rspunsul biologic (RB) n forma:
33

Hansch C, Muir R, Fujita T, Maloney P, Greyger F, Streich M. The Correlation of Biological


Activity of Plant Growth Regulators and Chloromycetin Derivatives with Hammett Constants and
Partition Coefficients. J. Am. Chem. Soc., 1968, 85 (18), 2817-24
72

ln B R = a n 2 + b a
Explicaia importanei coeficientului de partiie n determinarea
rspunsului biologic deriv din faptul c moleculele farmacodinamic active
ajung la locul aciunii lor dup un ir lung de transferuri interfaciale unde,
dup cum am spus coeficientul de partiie este cel care caracterizeaz
"rezultatul final" al procesului de transfer.
| 3.3 Transferul prin difuzie in faze continue _______________________
Fenomenele de absorbie, distribuie i eliminarea medicamentelor au
ca numitor comun dou fenomene: difuzia n fazele continue i transferul la
interfee.
Difuzia este un fenomen continuu i poate fi descris cu destul de bun
aproximaie de o ecuaie matematic foarte simpl:
dc = D d c
2

dt~ dx2

dar a crei soluie depinde n mod esenial de condiiile iniiale i pe


frontiera.
Astfel, pentru un comprimat care cedeaz substana activ ntr- un
volum foarte mare de fluid se obine pentru concentraia de substan activ
la distana x fa de suprafaa comprimatului la un moment de timp t, soluia
x
c(t,x) = c0(1 - erf )
unde erf(y) se numete funcia erorilor i este egal cu aria de
2 2
sub curb e ntre 0 i punctul de abscisa y.
Vn
Distribuia ntr-o membran de grosime l, ce separ un rezervor cu o
concentraie mare, constanta - c1 ntr-un mediu n care concentraia este
meninut iari constant - c0 (n literatura farmaceutic luat de obicei
zero, corespunznd condiiilor sink")

73

mediul de cedare
c(O.t = Co
)
membrana
t=0 c(x,0) c0
rezorvor

r.< -

constant

Figura 12 - Distributia printr-o membrana biologica

n aceste condiii se obine pentru distribuia concentraiei


medicamentului n membrana soluia:
n n t
n
, x 2 ^ (1)
c(x t)
sl
, = c + i o y ---------------------n . en1 n) x
f
-------- > - sin
l
n n
l schimbarea condiiilor
Se
observ
c
iniiale i pe frontiera duce la o schimbarea radicala a soluiilor ecuaiei
difuziei. Din acest motiv, prezentarea unei soluii a ecuaiei difuziei fr
precizarea condiiilor n care a fost dedus aceasta se poate considera ca
lipsit de sens i de folos practic.
Menionm c soluiile ecuaiei difuziei s-au dovedit de folos n analiza
cedrii "in vitro" din forme farmaceutice. Dat fiind complexitatea foarte mare
n cazul analizei fenomenelor "in vivo", aceste soluii nu se mai pot aplica i
verifica.
2

(c

c )(

| 3.4 Transferul prin difuzie la interfa ___________________________


Transferul peste o interfa, pe lng componenta difuzional, care
determin numrul de molecule de substan activ i de viteza cu care ele
se aproprie de interfa, mai cuprinde o component de cinetica a
transferului la interfa. Aceasta component este legat de bariera
energetic ce trebuie s o nving la trecerea dintr-o faz n alta ce cuprinde
principial dou componente: schimbarea nveliului de solvatare i trecerea
prin cmpul de fore al interfeei.
| 3.5 Transferul interfacial i transmembranar _____________________
Transferul medicamentelor n organism este un transfer prin
membrane lipidice care separ dou medii apoase. Aceste transferuri se pot
descompune n trei etape: difuzia n faz lipidic i transferul la interfeele
ap / lipide i lipide / ap.
Un parametru determinant pentru cinetica i cantitatea de substan
activ transferate este solubilitatea substanei n mediul n
74

care se face transferul. Din acest motiv, este necesar ca substanele active
s fie suficient de solubile att n faza apoas ct i n cea lipidic, deci s fie
"amfifil". Practic toate moleculele active sunt amfifile. Cele, puine la
numr, care sunt ionice pot atinge concentraii utile doar dup administrarea
i.v. sau i.m., nu penetreaz in interiorul celulelor i sunt eliminate foarte
repede din organism. Citm ca exemplu n acest sens reactivatorii de
colinesteraz (piridostigmina, obidoxima, piridinaldoxima, HI6 etc.) care au
n molecul un atom de azot tetrasubstituit i nu pot trece ntr-o forma "baz"
cum se ntmpl cu multe anestezice locale (anestezina, lidocaina,
procainamida etc).
I 3.6 Transferul "coloidal"
Din structura amfifil, n conformitate cu legile generale ale
chimiei-fizice, rezult o orientare i o acumulare a moleculelor active la
nivelul interfeelor membranare, interfee care includ, n afara interfeelor
ap/lipide pe care le-am menionat, interfee lipide / proteine, interfee
proteine / ap, interfee "ap rigid" (moleculele de ap din imediata
vecintate a lipidelor) / "ap liber" etc.
Apa

Parte
hidrofila
Lipide

Parte
lipofila
Figura 13 - Orientarea moleculelor amfifile la nivelul interfeelor membranare

La concentraii superficiale mici moleculele adsorbite nu reacioneaz


ntre ele avnd o stare "gazoasa", dar pe msur ce concentraia lor (n
exces fa de cea din faza continu) crete, ele ajung s formeze un film
superficial n stare "condensat" (lichid sau chiar solid) care la un moment
dat se rupe. Concentraiile fiind n acest caz mai mari dect concentraiile
micelare critice, substanele active ajung s formeze micele care, dup cum
sunt orientate moleculele, ptrund n faza lipidic sau se ntorc n cea
apoas. n acest fel, pe lng transferul moleculelor individuale, apare i un
transfer de "grup". O dat ajunse pe faa opus a membranei, micelele se pot
dezorganiza i moleculele active se orienteaz la noua interfa, o parte din
ele trecnd n faza apoas intracelular.
75

Un acelai mecanism de transfer n "crua micelar" poate implica i


molecule active care nu formeaz ele nsele micele dar care pot forma
micele mixte cu unele substane tensioactive specifice cum ar fi acizii biliari
sau xenobiotice, administrate o dat cu medicamentul sau existente n
traiectul gastrointestinal n contextul aportului alimentar i al absorbiei
alimentelor. n chiar condiiile unui aport nul al moleculei active la structura
micelei, ea poate avea o afinitate pentru "miezul" acesteia i ca urmare s fie
transportat prin membran.
Sistemul cruilor sau altfel numii "vectorilor" coloidali este folosit n
terapia modern nu numai pentru mrirea transferului interfacial i a
absorbiei dar i pentru creterea timpului de via a medicamentelor n
organism, pentru creterea permeabilitii celulare la medicamente i, cel
puin la nivelul inteniilor, pentru o medicaie "intit". Ultimul obiectiv, altfel
destul de vag definit n msura n care de fapt nu se tie n general care este
locul aciunii substanei active n organism, este o preocupare constant,
major a ultimilor decenii, a dus la realizarea unei serii mari de vectori
coloidali, numii cu un termen mai adecvat "sisteme de transport" cum ar fi:
liposomi, microsfere, nanosfere, microemulsii, sisteme biodegradabile etc.
Obiectivul intirii a fost poate atins poate numai n cazul cnd se dorete
tratarea macrofagelor care de regul fagociteaz aceste sisteme urmare a
caracterului hidrofob al nveliului lor. n rest, cert este c s-a realizat de
multe ori obiectivul creterii cantitative a transferului interfacial al
medicamentelor cu consecine benefice asupra absorbiei i penetrrii lor n
celule.
Altfel, faptul c n prezena substanelor tensioactive este mrit
absorbia medicamentelor, este un lucru cunoscut de foarte mult timp n
farmacie, dar rmas neexploatat pn n ultimele doua decenii.
Un lucru mai puin cunoscut n literatura farmaceutic, dar foarte mult
cercetat de ctre biofizicieni pe parcursul ultimelor trei decenii este creterea
fluxurilor transmembranare n prezena unor antibiotice. Pentru anumii ioni
s-au gsit creteri ale fluxurilor transmembranar de circa 5 ordine de mrime.
n particular unele antibiotice ciclice, de tip valinomicina 34 sau tetralide
macrociclice (monactina, nonactina, eniantina B, etc) includ n interiorul lor
ioni i alte molecule mici hidrofile35. Un transfer asemntor este utilizat n
farmacie pentru transferul medicamentelor incluse n molecule de
ciclodextrine, dar acesta se refer n principal la molecule hidrofobe, la fel ca

34

Mueller P, Rudin DO. Development of K+-Na+ discrimination in experimental bimolecular lipid


membranes by macrocyclic antibiotics. Biochem Biophys Res Commun. 1967 Feb 21;26(4):398-404.
35
Dobler M, Dunitz JD, Krajewski J. Structure of the K+ complex with enniatin B, a macrocyclic antibiotic
with K+ transport properties. J Mol Biol. 1969 Jun 28;42(3):603-6.
76

i majoritatea vectorilor coloidali. Problema transferului substanelor foarte


hidrofile, care este cu adevrat o problem ntruct acestea se absorb foarte
prost i se elimin foarte repede, se pare c nu a putut fi rezolvat n nici un
caz concret.
| 3.7 Transferul prin canale _____________________________________
Un caz particular al transferului moleculelor mici, hidrosolubile, prin
membrane este transferul prin canale apoase la nivelul membranelor
lipidice. Existena acestora este aproape unanim acceptat dup
experimentele de acum 50 de ani fcute de Hodgkin i Huxley36 (care le-au
adus autorilor i premiul Nobel) privind curenii de membran la axonul
gigant de Loligo. Curenii de sodiu, potasiu i calciu formeaz baza
potenialului de aciune care este elementul elementar al transmiterii
informaiei la nivelul sinapselor i al plcilor motorii.
Dac la nivelul acestor canale, altfel foarte specifice (se admite c
exist canale separate pentru sodiu, potasiu i calciu) se poate face i
transfer de molecule active mici, este discutabil. Cert este ns c la nivelul
membranelor, att artificiale ct i naturale, s-a reuit experimental formarea
de canale tranzitorii, ceea ce a dus la creteri semnificative a fluxurilor
transmembranare ale substanelor active medicamentoase sau a toxicelor.
3.8 Antibiotice formatoare de canale
Analog cu solubilizarea n micele putem considera "micele de
antibiotice" care au dou caracteristici aparte i anume:
- nu mai au o simetrie sferic ci una cilidric formnd aproximativ un
canal,
- nu mai migreaz prin membran ci se fixeaz un timp mai mare n
aceasta, formnd un canal sau "por" temporar.
Formarea unei pnze cilindrice cu exterior hidrofob, cum a fost
propusa37 pentru amphotericina B, n soluie apoas este puin probabil,
dar se presupune c acest fenomen apare n zona interfacial, prin fluctuaii
ale filmului de antibiotic adsorbit i ptrunderea lui n membran.

36

Hodgkin AL, Huxley AF. A quantitative description of membrane current and its application to
conduction and excitation in nerve. 1952. Bull Math Biol. 1990;52(1-2):25- 71
37
Finkelstein A, Holz R. Aqueous pores created in thin lipid membranes by the polyene antibiotics
nystatin and amphotericin B. Membranes. 1973;2:377-408.
77

Figura 14 - Fluctuaii ale interfeei membran/mediu cu formarea de


canale temporare

Fluctuaiile pot fi ale membranelor nsei iar antibioticul s fie cel care
stabilizeaz porii formai sub influena factorilor mecanici sau electrici. Astfel
se poate ncadra i acest fenomen ntr-o clas mai larg ce cuprinde
electroporarea bistraturilor lipidice, diviziunea i fuziunea celulelor, care au
fost tratate ca fenomene mecanice de ncovoiere 38 cu formarea unor
complexe intermediare metastabile, ca n teoria vitezelor absolute de
reacie.
Fixarea porilor de antibiotic se face prin legtura hidrofob ntre
acesta i lipidele membranei. Aici apare o alt caracteristic a fenomenului:
efectele sunt remarcabile atunci cnd antibioticul are mai multe duble
legturi conjugate (este "polienic") i cnd n membrana exist i nuclee
sterolice (din acest motiv ele sunt active ca antibiotice numai mpotriva
fungilor i altor celule ce conin n membran colesterol).
Exist i o diferen de proprieti fizico-chimice ntre antibioticele
transportoare i cele formatoare de pori. Cele dinti sunt lipofilice i foarte
solubile n hidrocarburi, iar nistatin i amfotericin sunt amfipatice, foarte
puin solubile n ap i hidrocarburi.
Mai recent s-au studiat antibiotice formatoare de canale active39att
mpotriva germenilor Gram-pozitivi ct i mpotriva celor Gram negativi.
Cecropinele - obinute din viermele de mtase Hyalophora cecropia, sunt
ncrcate pozitiv i se pot lega de membrane att prin poriunea terminal
hidrofob ct i prin fore electrostatice, a doua poriune terminal fiind
ncrcat pozitiv.
n prima etap se produce o asociere a micelei de cecropin cu
membrana, prin fore electrostatice. Fluctuaii n orientarea i distana fa de
interfa pot duce la o apropiere suficient a prii hidrofobe a cecropinei cu
lipidele, rezultatul fiind trecerea la o stare mai stabil cu manifestarea i a

38

Chimadzev Y. Structural rearrangements in lipid bilayer membranes, in Electrified Interfaces in


Physics, Chemistry and Biology. Kluwer Acad. Publ. Dordrecht, Boston, 1992, 491-507
39
Christensen B, Fink J, Merrifield RB, Mauzerall D. Channel-forming properties of cecropins and related
model compounds incorporated into planar lipid membranes. Proc Natl Acad Sci U S A. 1988
Jul;85(14):5072-6.
78

interaciunii hidrofobe (etapa II). n momentul aplicrii unui potenial pozitiv


pe partea pe care este adsorbit molecula de antibiotic, se produce o
mpingere a sarcinii pozitive de la suprafa mai spre interior, cu formarea
unui canal cu interior ncrcat pozitiv.
Sarcina pozitiv a canalului (8 sarcini pozitive pentru fiecare molecul
de cecropin) explic selectivitatea canalului pentru anioni. Selectivitatea va
crete cu scderea triei ionice i va fi maxim cnd lungimea Debye
(extinderea stratului dublu) va fi mai mare dect diametrul porului (deci cnd
acesta se extinde dincolo de mijlocul canalului).
Conductivitatea depinde slab de concentraia de cecropid, ceea ce
reprezint un argument pentru faptul c antibioticul n soluie este agregat
sub forma de micelii. Dependena de voltaj este influenat de prezena
colesterolului, fie prin interaciunea direct cu cecropidul, fie prin efectele
colesterolului asupra fluiditii membranei.
Semnificaia acestor fapte este cu mult mai mare deoarece, dincolo de
faptul c se lmuresc unele mecanisme de aciune, exist o corelaie bun
ntre concentraiile la care apar efectele "in vitro" cu concentraia.
3.9 Aplicatii
3.9.1 Transport prin membrane permeabile
Se consider o soluie diluat supus aciunii unei fore exterioare n
care se plaseaz o membran poroas ce separ dou compartimente.
Membrana este strabatut de numeroi pori, presupui cilindrici i
perpendiculari pe suprafaa membranei. n cazul unei membrane permeabile
ideale se presupune c moleculele de solut sunt mici n raport cu diametrul
porilor.
Se consider o membran poroas format din n pori identici,
cilindrici, de raz a i lungime L [24]. Aceasta membran separ dou
compartimente, I i II, ce conin o soluie apoas a unui solut neutru (s),
coeficientul de difuzie D, concentraiile n cele dou compartimente C1 i C2
sunt presupuse egale. Membrana este total permeabil pentru solut. Se vor
studia unele aspecte ale transferului prin membran.
I. Fluxul de solut
Premise:
i. se presupune c nu exist diferen de presiune hidrostatic ntre
cele dou compartimente;
ii. se presupune c nu exist micare convectiv a lichidului la
traversarea membranei.

79

Figura 15.0 - Transport prin membrane permeabile

Expresia densitii fluxului de solut ntr-un punct oarecare, n


dC
interiorul porului, este dat de legea I a lui Fick : j s = - D -
6tX

Pentru starea staionar s-a descris legea de variaie a concentraiei


solutului n por i s-a trasat curba C(x) pentru C1 > C2,
dC
In stare staionar = 0.
dt

80

Din ecuaia de conservare, dC

dj

0 ^ js(x) = constant.

dt dx dx

Din
legea a II-a Fick, dcL = Dd C"
2
dc

d C,
dc

dt

= 0.

dC
Prin integrare = A o C ( x ) = A x + B , unde A i B sunt
dc
constante de integrare ce se determin din condiiile limit. C.L.1. x =
0, C(0) = C1 ^ B = C1 C.L.2. x = L, C(L) = C2 ^ A = (C2 -C1)/L
Ecuaia ce descrie evoluia concentraiei n

por

C - C
este: C ( x ) = 2 _ 1 x + C j .
C
M
Ci
c2 .. - .. " |

Figura 16.0 - Variaia concentraiei solutului n por

innd cont de expresia concentraiei, se obine pentru densitatea fluxului


de solut ntr-un por urmtoarea expresie:
dC C2 - C DAC
j =- D --- = - D---- = ---Js
dx
L
L
Expresia densitii fluxului de solut ntr-un por n funcie de A C = C1 -C2.
Densitatea fluxului de solut la traversarea membranei este j*s(x) = PdAC.
Densitatea fluxului de solut la traversarea membranei
tiind c sunt n pori pe unitatea de suprafa i fluxul care traverseaz un
por este js
DAC
j *s = jsn *m = nrn ; = Pd A C,
L
2D
P d = n rd n
L
1

22

81

II. Flux volumic - flux convectiv de solut


Premise:
i. exist o diferen de presiune hidrostatic A P = P1 -P2 > 0 ntre cele
dou compartimente. Va aprea un flux de lichid la traversarea fiecrui por.
ii. curgerea n fiecare por este considerat laminar. Coeficientul de
vscozitate al solventului este n .
Expresia debitului de solvent Qp la traversarea unui por n funcie de AP, n,
a i L.
ntr-un por cilindric de dimensiuni mari comparativ cu cele ale particulelor de
fluid se poate considera c este o curgere laminar i se poate aplica legea lui
Poiseuille: na 4 AP
Q = -------- , unde Q este debitul de fluid ce traverseaz un por.
^ 8 nL
Expresia densitii fluxului volumic la traversarea membranei j*v= PhAP, Ph
este permeabilitatea hidraulic.
Deoarece sunt n pori pe unitatea de suprafa, densitatea fluxului volumic
este:
nrn4 AP
nrn4
jj * = - -P- -h - - P= hp A P P = - - - - - 8 nL
'
8 nL
Expresia densitii fluxului de solut la traversarea membranei dac
concentraia este identic n ambele compartimente (v - viteza medie de curgere a
fluidului).
Dac v este viteza medie de curgere printr-un por,
v

= Q = a 2 AP
V
= S ~ 8 nL
cantitatea de solut transportat n unitatea de timp printr-un por de seciune
S, este: C(x) Sv dt.
Densitatea fluxului convectiv printr-un por, pe unitatea de timp i de
suprafata, este js = C(x) v.
Densitatea fluxului convectiv de solut ce strbate membrana:

n na 4 A P
j * = Cv * n * na = C ---------- = CPh A P = C * j * v
J v
J s
8 nL h
III. Studiul general al membranei
Premise:
i. exist diferen de presiune hidrostatic;
ii. exist gradient de concentraie.
Expresia general a densitii fluxului de solut ntr-un punct oarecare, n
interiorul porului, este suma densitilor fluxului
^ dC
difuzional i a fluxului convectiv, js(x) = -D- + Cv .
2
2

82

dx
Variaia concentraiei solutului n interiorul porului n starea staionar:
n regim staionar, dC/dt = 0 i din legea de conservare rezult c djs/dt = 0,
deci js este constant i independent de x.
Legea de variaie a concentraiei se afl prin rezolvarea ecuaiei difereniale.
Soluia general a ecuaiei generale:

Prin integrare se obine: C = Kevx/D


tiind c js este constant, o soluie particular a ecuaiei se obine pentru
dC/dx=0 Cp = js / v
Soluia ecuaiei este C = Kevx/D + .
v
Constanta de integrare K se determin din condiiile iniiale:
x=0, C(0)=C1 ^ K=C1- js/v
Deci, C ( x ) = C1evx/D +(l - evx/D).
vv
'
Pentru C1, C2 fixe, se exprim desitatea fluxului de solut la traversarea unui
por n funcie de C1, C2, v, D i L.
Pentru a afla fluxul de solvent printr-un por se integreaz relaia pe lungimea
porului

js L

(C

= -D

C1) + v{ C(x)dx

83

Se definete concentraia medie a solutului n por prin:


12
C

=L

jL C( x) dx
1

Se obine densitatea fluxului de solut printr-un


Densitatea fluxului
de
solut
la traversarea
j * s = n * na' * js = n * na' (C1 - C 2 ) + n * na vCm
membranei:
por: js = - (Ci - C2) + vC,
D
^ VI ^ T7VY ^ 7 VI ^ T7VY
L
2

j *s = Pd AC + j *vCm
Densitatea fluxului de solvent prin membran depinde liniar de concentraie
i de densitatea fluxului volumic de solvent.
3.9.2 Transportul oxigenului din capilarele sanguine n mediul tisular
Respiraia reprezint una dintre funciile vitale ale organismului uman, fiind
un proces continuu, reflex. Oprirea duce ntr-un timp foarte scurt la moartea
celulelor, organismul nedispunnd de rezerve de oxigen, iar acumularea de CO2
este toxic pentru celule. Aerul atmosferic este introdus n plamni prin procesul
de ventilaie pulmonar, reprezentnd primul aspect funcional al respiraiei. La
nivelul alveolelor pulmonare, mai precis la nivelul membranei alveolo-capilare are
loc schimbul de gaze respiratorii dintre aerul alveolar i sngele venos . Acest
schimb se face pe baza legilor difuziunii gazelor i depinde de presiunea parial
pe care acestea o dezvolt de o parte i de alta a acestei membrane. Oxigenul
strbate aceast membran prin difuziune i se va fixa pe hemoglobin ajungnd
n vasele capilare unde are loc cedarea sa ctre esuturi .
Sngele curge prin capilare de lungime l, cu vitez uniform v, i antreneaz
molecule de oxigen dizolvat ce difuzeaz din capilare spre mediul tisular datorit
gradientului de concentraie. Capilarele au raza r i permeabilitatea oxigenului
este Pd.

84

I. Se presupune c sngele este imobil n capilare.


Fie N0 numrul de molecule de oxigen din capilar la momentul t
Nc i Nt numrul de molecule de oxigen din capilar i respectiv din esuturi la
un moment oarecare t.
= 0,
Probleme
*

1. S se exprime J s fluxul de molecule de oxigen spre esuturi n funcie de


Nc i de diferena de concentraie AC = Cc - Ct .
2. S se arate c, constanta de timp T care descrie trecerea oxigenului spre
esuturi este: T = r / 2Pd (se presupune c volumul tisular este mult mai mare dect
volumul capilar).
II. Pentru ca oxigenul s se repartizeze uniform n esuturi, distana d dintre
capilare trebuie s fie de acelai ordin de mrime cu distana pe care oxigenul
difuzeaz n timpul T (timpul de omogenizare a concentraiei). S se stabileasc
expresia d n funcie de coeficientul de difuzie a oxigenului n esuturi, D, de raza
capilarului, r, i de Pd.
III. n prezena curgerii, pentru ca oxigenul s difuzeze eficient spre esuturi,
trebuie s staioneze n capilare un timp t > 2T. S se gseasc expresia vitezei
maxime a sngelui n capilare .
IV. n realitate, pentru a studia difuzia oxigenului n plmni trebuie s se
in cont i de captarea sa de ctre esuturi . Pentru simplificare se consider
numai difuzia pe direcia Ox. Se noteaz consumul de oxigen: f O2
dC d2 C
Legea de variaie a concentraiei este: ----------- = D^ - fa
n capilare concentraia este constant, C0.
S se arate c, n starea staionar, concentraia n esutul situat ntre dou
capilare aflate la distana d are expresia:
2
1 - ' d fa* d

8DCC(x) = 1 - C
cnd originea axei x se afl la jumtatea distanei
dintre capilare. S se traseze curba pentru diferite valori ale f O2 .

85

capilar

tesut

capilar

Js
Cc

ct
Figura 17 - Transpotul oxigenului in tesuturi

I. Conform legii I Fick,


densitatea fluxului de
-d/2 particule este:
d/2
dC
j
=-^
n regim staionar gradientul concentraiei este constant n
unde Ax este
peretele capilar i relaia devine: js = - D
grosimea peretelui capilar.
Dac n este numrul de pori pe unitatea [C( t)- Ce ] de suprafa a
Ax
peretelui i a raza unui por, atunci densitatea
fluxului
spre
esuturi este:
j*s = n*na2*DAC/Ax = Pd AC, (Pd = n*na2*D /Ax)
Fluxul prin ntreaga suprafa a peretelui capilar este:
J*s = 2nrl j*s = 2nrl Pd AC
Aceast cantitate reprezint numrul de molecule de oxigen care
traverseaz membrana n unitatea de timp: J*s = -dNc/dt.
NN
2. Concentraia n capilar este: C = - = 2- ^ N = Tir2IC
c
c
V Tir l c
nlocuind aceast expresie n cea a fluxului: J*s =
2nrl Pd AC =- nr2ldCc/dt
2P
Ecuaia diferenial
-(Cc - Ct) are soluia:
dt
dt
r

dCc d(Cc - C t )
Cc - Ct = Ke r
2Pd/r reprezint o constant i se noteaz cu T.
II. Distana pe care difuzeaz oxigenul: d2 = 2DT = Dr/Pd
III. Sngele trebuie s strbat capilarul n timpul 2T, viteza maxim
fiind :

l*P
vm = l * 2 T = - - - m
r
Viteza sngelui n capilar este n mod normal 0.5mm/s.

86

IV. In stare staionar


dC
dC
= 0 ^ D - fa? = 0 o
dt

dc

dC

dc

O2

dC

O2

D x+A

dx

1 fo
2 D

Prin integrare se obine :


Integrnd i a doua oar ^ C =

x + Ax + B

unde A i B sunt constante de integrare care se determin din


condiiile limit.
Astfel, pentru x = d/2 , C = C0
1 fo, d2
d
C.L.1. x =0 d/2 ^ C =
+ A- + B 2 D 4 2
C.L.2. x = - d/2 ^ C0 =1 ^ - A + B
0
2D4 2
1 fO d2
2

Se obine A = 0 i C0 *02D 4
Revenind
la
expresia
concentraiei :
8D1
1 fO
C = -^ x2 + C0 - d- ^
x
= C,
d 12.
2D

C( x) =
C0

1 -

=
B
d2 fo2 x 1
--- +

8 DC0 2 DC0

d2 fo2_
8 DC0

Reprezentnd grafic aceast funcie se obine o familie de parabole


pentru diferite valori ale raportului d2fO2/ 8DC0. Funcia prezint un minim,
care este cu att mai jos cu ct consumul de oxigen, fO2, este mai mare.

87

2
C( x) d fO
=1. C y 8 DC0
C(x)/C0 1
2

-d/2

d/2

Figura 18 - Variaia concentraiei oxigenului

88

3.9.3 Hemodializa
Se consider un model simplificat al unui rinichi artificial3. Fie dou
compartimente separate printr-o membran permeabil pentru uree, a crei
suprafa este S = 1m2. n compartimentul I se gsete un volum Vi de snge
de epurat, iar n compartimentul II - un volum V2 de lichid de dializ.
Concentraia ureei n lichidul de dializ se consider neglijabil n timp.
Permeabilitatea membranar a ureei este
Pd = 4 * 10-6 ms-1.
Probleme:
1. Debitul masic iniial de uree extras de la un bolnav care are
uremia 4 gl-1.
2. Expresia clearence-ului n funcie de Pd.
3. Variaia concentraiei ureei n snge C1(t) n funcie de concentraia
iniial i de Cl.
4. Volumul V1 de epurat corespunde volumului total al apei din corp i
este egal cu 50. l. n ct timp uremia va ajunge la valoarea normal, 0.4g/l?
1. Masa de uree care traverseaz membrana permeabil n unitatea
de timp este:
dm
= PSAC = pds ( C - C 2 )
Deoarece V2 >> V1 i C2 se neglijeaz, C2 0 ^
dm
= P,SCA = 4*10 *1*4*103 = 16*10-3[ g / s]
dt d lt= 5
2. Clearence
Concentraia ureei n snge este C1, iar din snge trece n lichidul de
dializ, n unitatea de timp o cantitate dm de uree
dm

Cl

CT
C

1 C1

crL

Pd S

4 * 10-6 [m3 / s]

240[ml / min]

3. Se exprim debitul masic n funcie de volumul V1


dm d (V1C1) V C1
dt dt dt
dm
Dar 1= ClC .
dt
dC1
Se obine o ecuaie diferenial V L1 + ClC
, = 0 care are soluia:
dt 1
1

89

Clt

Cj (t ) = A^.
Constanta de integrare A se determin din condiia iniial: t = 0, C1(0)
= A.
Clt

Variaia concentraiei ureei n snge este C1 (t) = C1 (0 )e .


Determinarea timpului n care uremia ajunge la valoarea normal:
d C ( t ) -Clt. C ( t ) = C
(0 )e~V o C^ = O
V

V 1 t C (0) 50 * 10-3 4
= ---------- rln = 28750[ s] =L J8 h
Cl C (t) 4*10-6 0.4
Modelul este mult simplificat. S-a presupus c cele dou
compartimente conin volume foarte mari de lichid i sunt statice dar, n
realitate, cele dou compartimente sunt mult mai reduse i fluidele sunt n
micare.
t

FARMACOCINETIC

4. ANALIZA FARMACOCINETIC

Analiza farmacocinetic realizeaz modelarea matematic a profilului


unui medicament n organism (absorbie, distribuie, biotransformare,
excreie). Modalitatea clasic de descriere a cineticii medicamentelor n
organism utilizeaz reprezentarea organismului sub forma unuia sau a mai
multor compartimente, chiar dac aceste compartimente sunt lipsite de
corespondent fiziologic sau anatomic 40 . O abordare alternativ,
farmacocinetica fiziologic, reprezint organismul printr-o serie de ecuaii de
echilibrul de mase, care descriu fiecare organ sau esut pe baza unor
consideraii fiziologice. Farmacocinetica clasic are la baz cteva ipoteze
care nu sunt necesare n cazul modelelor fiziologice. n condiii ideale,
modelele fiziologice au putere predictiv a concentraiilor tisulare, ceea ce
reprezint un avantaj fa de modele clasice. Frecvent ns, parametrii
modelelor fiziologice au valori inexacte sau necunoscute.

40

Craig CR, Stitzel RE, Modern Pharmacology with Clinical Applications, 5th ed., 2005.

90

4.1 Farmacocinetica clasic


- modele farmacocinetice compartimentale __________________
Obinerea de concentraii biologice tisulare ale unei anumite substane
n vederea corelrii sale cu tipul, intensitatea i durata activitii biologice
sau farmacodinamice induse este frecvent dificil. Cea mai simpl i mai
puin invaziv metod de obinere de date asupra absorbiei, distribuiei,
biotransformrii i excreiei unui compus este prelevarea de probe de snge
total sau plasm. Dac se presupune existena unui echilibru dinamic ntre
concentraia n fluidul biologic prelevat i concentraia la nivel tisular, orice
modificare la nivel tisular se reflect ntr-o modificare proporional n fluidul
prelevat. Aceste modificri pot fi descrise utiliznd modele matematice
relativ simple.
Modelele farmacocinetice compartimentale sunt constituite dintr-un
compartiment central reprezentat de snge, plasm sau esut, n care
distribuia uniform i echilibrarea cu substana administrat se realizeaz
rapid 41 . Compartimentul central este interconectat cu mai multe
compartimente periferice reprezentnd esuturi n care echilibrarea se
realizeaz mai lent.
Substana este administrat la nivelul compartimentului central i se
distribuie ntre compartimentul central i compartimentele periferice.
Procesul de eliminare se realizeaz la nivelul compartimentului central, care
se presupune c include esuturi cu perfuzare intens, capabile de
eliminarea substanei (de ex. ficat, rinichi). Unul din avantajele modelelor
farmacocinetice compartimentale care deriv din aceast descriere o
reprezint faptul c nu necesit informaii despre structura anatomic sau
fiziologic implicat. Analiza compartimental permite evaluarea i
prezicerea cantitativ a concentraiilor plasmatice ale unei anumite
substane, a evoluiei sale la nivelul organismului pentru diferite doze i
scheme farmacografice, precum i a proceselor de acumulare ce nsoesc
administrrilerepetate.
4.1.1 Descrierea modelului monocompartimental ________________
Analiza farmcocinetic cea mai simpl presupune determinarea
concentraiei plasmatice a unui xenobiotic la diferite momente de la
administrarea prin injectare n bolus. Dac valorile concentraiilor obinute, n
reprezentare semilogaritmic funcie de timp sunt fitate de o dreapt,

41

Mazumdar J: An Introduction to Mathematical Physiology and Biology, 11-32, (1989).


91

cinetica poate fi descris de modelul monocompar- timental42. Este cazul


medicamentelor pentru care procesele de distribuire uniform i echilibrare
a concentraiei ntre snge i segmentele tisulare periferice se desfoar
cu o vitez mult mai mare dect procesul de eliminare. Modelul
monocompartimental descrie astfel organismul ca o singur unitate
omogen relativ la substana administrat. Nu presupune o concentraie
omogen a medicamentului n ntreg organismul, ci doar c modificrile
sesizate la nivelul sngelui sunt proporionale cu modificrile produse la
nivelul esuturilor, ntre cele dou stabilindu-se rapid un echilibru
dinamic43.
n acest caz, profilul farmacocinetic este descris de urmtoarea
ecuaie:
C = C,e -; ( -krC-, {f -K, S d)
unde C este concentraia substanei n fluidul biologic prelevat, la
momentul t, C0 este concentraia iniial (imediat dup administrare, t=0), iar
kel este constanta de eliminare de ordin 1 (uniti timp"1).

Figura 19 - Evoluia concentraiei plasmatice a unui


medicament i calculul kel - model monocompartimental

4.1.2 Descrierea modelului bicompartimental _____________


Administrrea i.v. n bolus a unor medicamente conduce frecvent la
obinerea unui profil farmacocinetic neliniar. Este cazul substanelor pentru
care distribuia periferic i realizarea echilibrului dinamic reprezint procese
mai lente. Curbele obinute prin reprezentarea semilogaritmic a
concentraiilor funcie de timp impun o abordare multicompartimental,
utiliznd ecuaii matematice multiexponeniale44.
42

William S.: Mathematical Techniques for Biology and Medicine, 161-208, (1996).
Aiache J.M, Besner J.G, Buri P., Leblanc P.P., Lesne M.: Traite de Biopharmacie et
Pharmacocinetique, ed., 44 - 47, (1990)
44
William S.: Mathematical Techniques for Biology and Medicine, 84-109, 161-208, (1986).
43

92

n cazul modelului bicompartimental, evoluia concentraiei este


descris de doi termeni monoexponeniali
C = A ea + B e ~pt unde A i B sunt constante
de proporionalitate, iar a i p sunt constantele de vitez ale proceselor de
distribuie i eliminare de ordin 1. De remarcat c profilul farmcocinetic
cuprinde n acest caz dou segmente ce corespund celor dou faze de
evoluie: faza de distribuie i faza de post-distribuie - eliminare. Evaluarea
corect a fazei de distribuie este dependent de schema de prelevare a
probelor biologice. Distribuirea rapid n teritorii tisulare periferice este
sesizat doar prin prelevare la intervale scurte de timp post- administrare, n
caz contrar datele indicnd eronat o evoluie conform modelului
monocompartimental (kel n modelul monocompartimental este echivalentul
p n modelul bicompartimental).

Figura 20 - Evoluia concentraiei plasmatice a unui medicament i calculul kel - model


bicompartimental

Frecvent sunt sesizate cazuri n care procesul de distribuie n


compartimente tisulare superficiale este urmat de procese de redistribuire n
compartimente tisulare profunde24. Procesul de eliminare p este astfel urmat
de o eliminare trzie Y (este cazul aminoglicozidelor care sufer o
redistribuire i fixare la nivel renal, proces responsabil de nefrotoxicitatea
acestor antibiotice). n aceste cazuri sunt utilizate modele
multicompartimentale deschise, principiile de analiz farmacocinetic fiind
similare modelului bicompartimental, ns expresia matematic devine mult
mai complex (C (t) = A-e~a-t + B-e~p-t + D-e ~y-t +...).
4.1.3 Eliminarea
Eliminarea medicamentelor din organism se realizeaz prin procese
de biotransformare i excreie. n cazul modelului monocompartimental,
eliminarea reprezint un proces de ordinul 1, viteza de eliminare fiind
proporional cu cantitatea de medicament existent n organism n acel
moment.
93

Ecuaia monoexponenial descris n cazul modelului


monocompartimental C = Co - e-ke'4
conduce prin logaritmare la o ecuaie de ordinul 1, y = a - x + b:
log C = log Co - (kel / 2.303) -1 sau ln C = ln C0 - k e l - t
Reprezentarea grafic a lnC n funcie de timp este o dreapt care se
determin prin metoda celor mai mici patrate, cu panta k el i ordonata la
origine lnCo.
Matematic, fracia de medicament remanent n organism la momentul
t, C/C0, este determinat dup determinarea kel, utiliznd ecuaia:
Co /C = antilog[(-kel /2.303) -1] sau Co /C = antiln(-kel /1)
De remarcat dependena fraciei remanente de constanta de
eliminare, kel, i independena fa de doza administrat.
4.1.4 Volumul aparent de distribuie____________________________
Reprezint un parametru care coreleaz doza administrat cu
valoarea concentraiei determinat de administrarea acestei doze n
organism52,53. Conform definiiei, este un spaiu (volum) virtual, n care
medicamentul se distribuie uniform, aproape instantaneu, realiznd o
concentraie egal cu concentraia n fluidul biologic (plasm, snge). Are
uniti de msur l sau ml pe kg corp. Prin analogie, volumul unui rezervor
de capacitate necunoscut umplut cu un fluid poate fi determinat prin
dizolvarea i determinarea consecutiv a concentraiei unei substane
perfect solubile n fluidul respectiv. Este un volum aparent, necorelat direct
cu parametrii fiziologici ai organismului, fiind puternic influenat printre altele
de caracteristicile de distribuie (intravascular, interstiial, intracelular),
caracteristicile lipo / hidrofile sau de procentul de legare proteic ale
substanei administrate.
Volumul aparent de distribuie nu reprezint deci un volum biologic
real. n cazul substanelor cu afinitate i fixare tisular crescut, Vd
depete volumul total de snge i chiar volumul apei totale (n cazul
digoxinei, 500 l). n cazul substanelor cu legare proteic crescut, volumul
de distribuie prezint valori foarte mici.
Expresia volumului aparent de distribuie este urmtoarea:
Doza,.,

Vd

P - ASC

unde Dozaiv. reprezint doza administrat i.v., respectiv cantitatea de


medicament presupus / evaluat la momentul administrrii (t=0), p este
constanta de eliminare, iar ASC0 este aria de sub curba concentraie timp
94

extrapolat la infinit (produsul


medicamentului n fluidul

ASCg

reprezint

concentraia

53

biologic)45. Astfel, volumul aparent de distribuie mai poate fi definit ca raport


ntre doza administrat i concentraia pe care o determin n organism.
Pentru modelul monocompartimental, cu administrare intravascular:

Vd = Doza'v- , C0 fiind obinut prin extrapolarea curbei ce


C

descrie profilul farmacocinetic pentru t=0. Dac parametrul k el poate fi utilizat


n cazul modelului monocompartimental pentru evaluarea fraciei de
medicament remanent ntr-un anumit moment n organism, Vd este utilizat
pentru evaluarea cantitii remanente, Vd-Cp(t), unde Cp(t) reprezint
concentraia plasmatic la momentul t.
4.1.5 Clearance
Reprezint un parametru farmacocinetic deosebit de important,
ntruct descrie viteza de eliminare a medicamentelor n organism.
Clearance-ul sistemic, total (CIT), este definit ca volumul de fluid din care
medicamentul a fost epurat, n unitatea de timp (uniti volum / timp / kg corp,
ml/min/kg sau l/h/kg). CIT este suma contribuiilor tuturor sediilor de epurare
din organism: ClT = cl + ClH + ClP + ClR +... = Clj + Clri = ClH + ClnH = ClR +
ClnR = ...
unde Cl i / H / p / R / ...este clearance-ul intestinal, hepatic, pulmonar,
renal etc.
De remarcat c, n cazul n care un anumit anumit organ are
contribuie major la epurarea medicamentului de organism (medicamente
cu eliminare preponderant renal sau pulmonar etc.), CIT poate fi exprimat
ca sum a clearance-ului organului respectiv i a contribuiilor minore
specifice celorlalte organe (Cl renal - nonrenal etc.).
Consecutiv administrrii i.v. in bolus:

ClT =Doza, , respectiv ClT = V d - k e l pentru modelul


ASC0
monocompartimental,
i ClT = Vd - p pentru modelul bicompartimental.
v

45

Mehvar R., Interdependecy of pharmacokinetic parameters: A chicken-and-egg problem? Not!,


J.Pharm.Pharmaceut.Sci., 9(1): 113-118, (2006).
95

Clearance-ul plasmatic (Clp) este definit ca volumul de plasm din care


medicamentul a fost epurat, n unitatea de timp (uniti volum / timp, ml/min
sau l/h).
Clearance-ul unui anumit organ (Cl^) indic eficiena n procesul de
epurare a plasmei. Este descris de formula:
C-C
=
q
Cl
a

org ^

c
a

'

unde Ca i Cv reprezint concentraiile aferente i eferente organului


respectiv, prin intermediul arteriolelor, respectiv venulelor care conecteaz
organul respectiv la sistemul circulator, iar Q este fluxul sangvin la nivelul
organului respectiv.
Gruparea termenilor din expresia de mai sus permite definirea a nc
doi termeni:
- vepurare= Q - (Ca - Cv), viteza de epurare a plasmei de ctre organul
respectiv;
C-C
- Eorg= ----- , coeficientul de extracie al organului respectiv.
C

Corelat cu Clorg, este utilizat clearance-ul intrisec (Clint sau Cli), un


estimator al capacitii intrinseci de epurare, specific organului respectiv
(parametru important n realizarea scalrilor alometrice)28. Clorg este
dependent astfel att de capacitatea sa intrinsec de epurare, ct i de
perfuzare:
Cl
Cl
Clorg = Q ------- ^, respectiv Clint = Q -------------org
Int
Clmt + Q v
^Q - Clorg
Cnd Clint << Q, Clorg este independent de valoarea fluxului sangvin.
Cnd Clint >> Q, Clorg este dependent de valoarea fluxului sangvin (fr
a depi aceast valoare), distribuirea medicamentului ctre organul de
epurare putnd constitui etapa limitant a vitezei de
54

epurare46.
4.1.6 Timpul de njumtire
Timpul de njumtire este definit ca timpul reducerii cu jumtate a
concentraiei plasmatice. Este un parametru farmacocinetic compozit,
dependent att de volumul aparent de distribuie, ct i de clearance53.
V,
d

46

Wilkinson GR., Shand DG. A physiologic approach to hepatic drug clearance. Clin Pharmacol Ther
18 , 77-90, 1975.
96

T1/2 = 0.693

Cl
Astfel, n interpretarea valorilor T1/2, trebuie inut cont de
caracteristicile i factorii care influeneaz procesele de distribuie i
eliminare. pentru o valoare dat a volumului aparent de distribuie, valori
crescute al Cl induc valori reduse ale T1/2, iar pentru valori fixe ale Cl, Vd este
nsoit de un T1/2 mare.
T1/2 poate fi calculat din reprezentarea grafic logC=f(t), n cazul unei
cinetici de ordin 1 timpul necesar scderii cu jumtate a concentraiei
plasmatice fiind constant. De asemenea, poate fi calculat dup evaluarea
constantei de eliminare:
T1/2 = 0.693 kel = 0.693 p
n cazul cineticii de ordin 1 (cineticii liniare de eliminare), un
medicament nu este niciodat eliminat complet din organism, iar T 1/2 este
independent de doza administrat. Din punct de vedere practic, dup 7 T1/2,
este eliminat 99.2% din medicamentul administrat, ceea ce poate fi
considerat o eliminare complet47.
4.1.7 Cinetici de saturare
Distribuia i eliminarea reprezint procese de ordinul 1 n cazul
majoritii medicamentelor administrate n doze uzuale. Creterea dozei
poate determina n anumite cazuri modificri ale Vd sau Cl, datorate saturrii
unor verigi ale proceselor pe care le exprim cantitativ. Metabolizarea,
transportul activ sau legarea proteic reprezint procese ce pot fi saturate.
Saturarea determin transformarea cineticii tipice de ordin 1 n cinetic de
ordin 0. Este nsoit de modificri calitative i/sau cantitative ale
parametrilor farmacocinetici sau ale rspunsului farmacodinamic (creterea
timpilor de reziden, creterea concentraiei la locul de aciune, creterea
intensitii sau duratei de aciune, modificarea rspusului biologic sau
farmacodinamic etc.). Un exemplu tipic este depirea valorii Km
(concentraia care determin desfurarea procesului enzimatic cu o vitez
egal cu jumtate din rata metabolic maxim, Vmax), caz n care se constat
tranziia de la cinetica de ordin 1 ctre o cinetic combinat, de tip
Michaelis-Menten, cu o faz tipic de
platou ( = - Vmax - C ).
dt Km + C
Indicii ale unei cinetici de saturare:
47

Perrier D., Gibaldi M.. Clearance and biological half-lives as indices of intrinsec hepatic metabolism. J
Pharmacol Exp Ther 191,17-24,1974
97

-scderea concentraiei nu este exponenial;


-lipsa de proporionalitate ntreASC i doza administrat;
-triada kel (P), Vd, Cl se modific prin creterea dozei (sunt dependente
de doz);
-modificri calitative sau cantitative ale produilor de excreie, prin
creterea dozei;
-autoinhibiia, autoinducia, inhibiia sau inducia ncruciat
suspectate n cadrul proceselor de biotransformare sau transport active;
-modificri neproporionale ale curbei doz-efect prin creterea dozei
peste nivelul la care saturarea devine evident.
Prin saturare, cinetica de eliminare de ordin 1 se transform n cinetic
de ordin 0.
Caracteristicile proceselor ce se desfoar conform unei cinetici de
ordin 0:
-aspectul liniar al reprezentrii grafice C=f(t); -cantitatea de substan
eliminat sau viteza de eliminare sunt constante, independente de doz sau
de fracia remanent; -nu pot fi evaluate valori ale TI/2 sau ke.
Caracteristicile proceselor ce se desfoar conform unei cinetici de
ordin 1:
-aspectul liniar al reprezentrii grafice logC=f(t); -viteza de eliminare
este direct dependent de cantitatea sau de fracia remanent;
-triada kel (P), Vd, Cl sunt independente de doz; -fracia
de substan eliminat este constant n timp.

98

Cl

C
l
Doza

Doza'

l'.'l

Doza

Doza

Doza /fr

Doza

Figura 21 - Evoluia valorilor parametrilor farmacocinetici kel (P), Vd, Cl prin trecerea de la o cinetic
de ordin 1 (A) la o cinetic tipic de saturare (B)

4.1.8 Evaluarea biodisponibilitii ______________________________


Biodisponibilitatea reprezint un parametru farmacocinetic specific
fiecrei substane, exprimat prin cantitatea i viteza cu care aceast substan
(condiionat ntr-o form farmaceutic sau nu) consecutiv administrrii la un
anumit nivel, este eliberat i absorbit n circulaia sistemic. Experimental,
biodisponibilitatea poate fi evaluat pe baza criterilor farmacocinetice
(determinarea evoluiei concentraiei n fluide biologice, n timp, consecutiv
administrrii) sau farmacodinamice (cuantificarea efectelor n timp, consecutiv
administrrii). Dozele administrate nu trebuie s conduc la cinetici de saturare
sau doz-dependente54
Biodisponibilitatea se exprim uzual ca raport al ariilor de sub curba
concentraie-timp obinute dup administrarea pe o anumit cale de
administrare raportate la o cale de administrare de referin. Calea de referin
absolut, cu biodisponibilitate maxim, este calea intra-arterial, substana fiind
introdus direct n sngele circulaiei arteriale i evitnd astfel etapa de
absorbie sau de prim-pasaj. Frecvent se utilizeaz administrarea intravenoas,
mai uor de abordat48.

48

Grecu I., Sandulescu R., Echivalenta medicamentelor, Ed.Dacia (1985). 104

Prin urmare, biodisponibilitatea dup administrarea oral este definit ca:


ASCpo
Doza

F=

ASC

po

ASC

po' D o z a n

Dozapo -ASCv
Dozaiv
unde:
ASCpo - aria de sub curba obinut dup administrarea oral;

vv

Dozapo - doza administrat oral;


ASC - aria de sub curba obinut dup administrarea intravenoas;
Doza - doza administrat intravenos;
Biodisponibilitatea (F) reprezint astfel un parametru adimensional,
fracia de medicament ce ajunge la nivelul circulaiei sistemice, cu valori ntre 0
i 1 (sau 0% i 100%), Coreleaz doza administrat cu concentraia la nivelul
substratului efector. Pentru o absorbie oral complet, F=1. Pentru majoritatea
medicamentelor ns, F<1, ntruct nglobeaz influena formulrii
farmaceutice, a caracteristicilor substanei i a barierelor fiziologice ale
organismului.
v

100

4.2 Rezolvarea ecuaiilor farmacocinetice


Ecuaiile farmacocineticii liniare sunt ecuaii difereniale ce descriu
evoluia concentraiei medicamentului n organism pe baza a 2 ipoteze:
Hi: Medicamentul se distribuie n organism ntre diferite volume numite
compartimente. n cadrul fiecrui compartiment concentraia nu depinde de
spaiu, fiind aceeai n tot compartimentul. Orice perturbare a concentraiei
ntr-un punct se propag rapid prin difuzie n ntreg compartimentul.
H2: Echilibrul ce se stabilete este dinamic, transferul la frontiera ntre
compartimente producdu-se permanent n ambele sensuri. Cantitatea de
substan activ care prsete un compartiment este proporional cu
concentraia n acesta.
4.2.1 Modelul monocompartimental - administrare intravenoasa 4.2.1.1
Administrarea rapida "bolus"
- modelul este cel mai simplu cu putinta ____________________

Figura 22 - Model monocompartimental - administrare i.v. "bolus"

Concentratia la momentul initial este egala cu raportul intre doza


administrata D si volumul de distributie Vd:
c (0) = ce = D
Ecuatia diferentiala asociata este:
dc
= -k c dt e
aplicarea transformatei Laplace, devine

PC

care, dupa
k
= - ec .

-c

101

ke

Rezolvand in raport cu c se obtine:


p + ke
c0
c=

Deoarece originalul functiei ------------ este

c(t)=ce e-et

Validitatea modelului se verifica foarte usor - dupa logaritmare

lnc( t) = lnc0 -ket


si reprezentarea ln c in functie de t. Daca datele se inscriu pe o
dreapta - panta acesteia este -ke, iar ordonata la origine lnc0.
4.2.1.2 Cazul administrarii in perfuzie lenta. ___________________
Presupunerea ca medicamentul este administrat in perfuzie o
perioada mai mare de timp - T, cu o rata constanta q (masa / timp)

(snge)

Ke
Figura 23 - Model monocompartimental - administrare in perfuzie lenta

c0 este acum zero si deci ecuatia diferentiala asociata modelului este:


dc q = - kc
dt V
1
Aplicand transformata Laplace si tinand cont ca (1)=, se obtine:

pc - 0 =

kc

Vdp
si deci

102

e ket vom avea

q
C

V P

'

P (p + ke )
Cautam o descompunere de forma:
q
Vdp = A + B
P (p + e ) P P + e
k

Aducand la acelasi numitor si egaland numaratori se obtine

A(P

k ) + BP

y e)

Vdp

Pentru p = 0 se obtine Ake deci A


e
VdP

keVd
q

iar pentru p = - ke se obtine B = - ke Vd


AB
Dar, originalul functiei + ----------- este A + Be~ket, deci
P P+ke
C (t ) = _!_ (1 - e" ^) W V d P { ' Atunci cand t tinde
la zero se obtine c(0) = 0. Cand t concentratia nu creste indefinit, ci tinde
asimptotic
la o valoare de "stare stationara" .
VdP
Se pune problema determinarii constantelor ke si Vd din datele
de concentratie plasmatica obtinute dupa administrarea medicamentului in
perfuzie cu rata q. Scriem C (t) in forma:
W

kV KVd
Dar, din evaluarea valorii asimptotice a lui C (t) se poate estima constanta:
q

S=
kV
nlocuind in expresia lui C (T) se obtine:

103

Avand S si ke, se poate estima Vd:


=-q-

^ vd= -qkeVd d keS


Cunoscand aceste constante pentru un pacient dat, se poate calcula rata
perfuziei pentru a asigura o concentratie de echilibru dorita. Perfuzia nu poate
dura prea mult si, dupa un interval de timp T ea este oprita. Dupa oprire
concentratia scade exponential pornind de la valoarea la momentul T:
S

4.2.1.3 Administrarea bolus plus perfuzie


Am aplicat pana acum principiul superpozitiei solutiilor, adica ipoteza ca
dozele administrate separat se.elimina independent.
In cazul administrarii bolus plus perfuzie cu rata q, concentratia va data de
suma celor doua solutii prezentate anterior:

4.2.2 Modelul monocompartimental


-administrare extravasculara
Se considera un medicament administrat extravascular (intramuscular,
subcutan, rectal sau oral) care se distribuie numai in compartimentul central,
apos, intra si extracelular. Intre sange si apa intra si extracelulara se stabileste
foarte rapid echilibrul si se poate aproxima ca medicamentul urmeaza un model
farmacocinetic monocompartimental, reprezentat in figura 24.

104

Figura 24 - Modelul monocompartimental cu


administrare extravasculara

De la locul administrarii substanta activa, pentru a ajunge in plasma ,


sufera un proces de absorbtie. Se considera ca este un proces de ordinul si
viteza lui este exprimata prin constanta aparenta de absorbtie, k a. Aceasta
constanta, ka, exprima viteza cu care substanta activa este indepartata din
depozitul creat la locul de administrare si totodata viteza cu care ea apare in
plasma.
Se considera ca la locul administrarii concentratia initiala este c0, iar in
sange, fiind la prima administrare concentratia initiala este 0.
ci(0) = c0 , c2(0) = 0.
Conform axiomelor farmacocineticii liniare, cantitatea de substanta activa
ce paraseste un compartiment este proportionala cu cantitatea existenta in acel
compartiment si deci variatia concentratiei in timp poate fi descrisa de
urmatoarele ecuatii diferentiale:

^ = -kacx dt a 1
dcn
= k c -k c

(1)

a1e2

dt
Sistemul va fi rezolvat prin metoda transformatei
Definitia transformatei Laplace este:

Laplace.

( f ( ) ) = f ( ) - Ptdt = F ( P )
Deoarece functia cu care lucram este concentratia c(t) iar c si C sunt mai
greu de distins (cel putin in prezentarile scrise de mana) vom schimba notatia
uzuala si vom scrie in continuare
L(f (t )) = f (p ) = f
Aplicand direct definitia se verifica doua proprietati de care avem nevoie
in rezolvarea ecuatiilor farmacocineticii si anume: transformata unei functii
derivate este:

105

L(c (()) = pc - c(o)


iar transformata unei functii exponeniale este:
L(e)

Aplicand transformata Laplace sistemului (1) se obtine:


= ka i l^fa +

\ Pci c0
IPc2

a ci

e c2

[- k a'

a )c1
G

e K

= 0J
c

Din prima ecuatie rezulta c1 = .


P + ka
Stiind ce 1/(p+a) este transformata Laplace a functiei e-at se obtine
0

(t )
i

-kt

= c0 e

adica la locul administrarii concentratia scade exponential. Pentru


a afla c2 se rezolva sistemul cu regula lui Cramer:
k

P+
c2 =

+
k

ka

ka

a c0

)(

P + k e)

ke

Pentru a afla functia original se cauta o descompunere de forma:


A
B
c

2 =-' ------------------------------------ ^ +
(

) (

+ ke

k a c0
A
B
deci -7 ------- ^r0 ------ r ^^ -------- T + (
P + k a XP + e ) (P + ka ) (P + e ) Aducand la acelasi numitor si egaland
numaratorii se obtine identitatea:
Vp a c0 = A(P + e X + B(P + ka )
Dand in particular lui p valoarea -ka se obtine imediat valoarea
lui A:
A = a c0
ke - ka
kc
Similar pentru p = -ke rezulta B = --------------- = -A si deci am
ke - ka
obtinut:
k

A c.
(

P + ka X (P + ke
Deci
Si, deoarece

X k

e ~ ka l(P B

ac0

+ a ) P + e
(

este transformata lui eX.

P+ )

(e - kat - e -ket

k c

^2 (

ke a- 0ka

tX

Reprezentarea grafica (figura 25) a acestei functii


duce la o curba care porneste din 0, creste pana la o
valoare maxima, apoi scade "exponential" spre 0, curba
numita in practica farmacocinetica curba absorbtie -

eliminare.

Timp
Figura 25 - Curba absorbtie - eliminare

Solutia obtinuta, desi este derivata in conditii foarte restrictive (in fond
foarte putine medicamente urmeaza un model monocompartimental) este
foarte des aplicata in practica si constituie baza pentru aproape toate
calculele de individualizarea tratamentului medicamentos in functie de
parametrii farmacocinetici individuali in cadrul serviciilor de farmacie clinica.
4.2.3 Modelul bicompartimental deschis cu administrare
extravasculara
Considerarea organismului ca un singur compartiment reprezinta o
simplificare drastica. Astfel, pentru a se absorbi bine, substantele
medicamentoase ar trebui sa fie solubile in membranele celulare si deci
lipofile, iar pentru a ramane in sange in concentratii mai mari, ar trebui sa fie
hidrofile. Practic toate medicamentele sunt amfifile, avand o parte hidrofila si
o parte lipofila. Ca urmare a 112

107

caracterului partial lipofil, ele se vor repartiza si in lipidele organismului si nu


vor mai respecta modelul monocompartimental. Se considera un
medicament administrat extravascular care se distribuie in doua
compartimente, pe care le vom numi generic sange si lipide .
Schema modelului bicompartimental este prezentata in figura 26.

Figura 26 - Modelul bicompartimental deschis cu administrare extravascular

Se noteaza cu c1 - concentratia substantei active la locul administrarii,


cu c2 - concentratia substantei active in sange si cu c3 - concentratia in lipide.
Conditii initiale :
Se considera ca la locul administrarii concentratia initiala este c0, iar in
sange si in lipide concentratiile initiale sunt 0 (consideram cazul primei
administrari).
ci(0) = co , c2(0) = 0, c3(0) = 0.
Conform axiomelor farmacocineticii liniare, variatia concentratiei in
timp se exprima prin urmatoarele ecuatii diferentiale:
dc
= -kc
dt dc
23 ) 2 + 32 3
(2)
dt dc
1

k C

(k

= a 1 e+

23 C2 k 32 C3

dt
Dupa aplicarea transformatei Laplace se obtine sistemul:
pC

P
pC

aC1

((

a C1

23 )c2 +

23 C2 k32 C3 (P +

k
a

32 C3

a C1

23 C2

(p >
+

(p

k
e

32 )c2 - k32 C3 = 0

+ k32 )c3 = 0

)C

1 = C0

Din prima ecuatie rezulta C1

= ^ c1(t) = c0 e-kat

adica la locul administrarii concentratia substantei active scade exponenial.


Prin rezolvarea sistemului cu regula lui Cramer se obtine:
+k
C
p

2 =

- k32

A2
A

p+

= - ka C (p + k32 )

32

+ ke

32 -

(p

a)p

0)p

+ r)

k
32

23

32

Pentru a afla functia original se cauta o descompunere de forma:

ABC

al carei

original este cunoscut:


C

2=

( p + a ) ( p + 0) (p + Y)

( t ) = Ae ~at + Be ~0t + Ce

Se determina constantele A, B, C din identitatea obtinuta prin aducerea


la acelasi numitor si identificarea numaratorilor, valabila pentru Vp,
- k a C o ( p + k 3 2 ) = A(p + 0\p + y) + B ( p + aPp + y) + C (p + aPp + 0)
Atunci, pentru p = -a ^ A = kaC(k32 a)
(0 -

pentru p = -0 ^ B =

a)y-a)

-k C

a (k32 - P)

(- 0 + a) - 0)
-k C

a (k32 - Y )

pentru p = -y ^ C =

(-r+aX-r + fi)

Deci,
=

,(t

- k

(k

32

-a)

e -a |

- k C

(k

32

- 0)

e -0

P+

(k

32

Y)

ka

- k C

+
( p - a ) r - a ) ( a - p iy - p ) ( P - / )* - / )

- k

-k

23

32

k C k
= n -a L ' 23

-k ap

+ ke

32

(p

a ) p + P)(p + r )

k
32

-k

32

23

unde -a, - 0 s i - y sunt respectiv radacinile ecuatiei A = . 114


109

Pentru a afla functia original se cauta o descompunere de forma:


_ A B' C1
( p + a ) ( p + P) ( p + r )
3

c3 (t)_ A e-at + B e-0t + C' e Se determina constantele A',


B', C' din identitatea valabila pentru Vp,
- kac0 (p + ^32) _ A(p + 0)(p + r) + B(p + a j p + r) + C ( p + a)(p + 0 )
kck
Atunci, pentru p = -a ^ A_ 7 ------------a 0 r(0-a
Kr-a)
k cn k23
pentru p = -0 ^ B' _ 7 ---------- ------------- r
(-P + atr-P)
k c k
pentru p = -r ^ C' _ kacn k
(-r + aX-r + P)
23

23

Si , deoarece 1r este transformata lui e~at


(
P + a)
c (t ) _ a n 23 e ~at + ________________________ a n 23
+ a n 23
k

3W

-yt

(p-a)r-a) (a-p)r-P) (p-r)a-r)

Trebuie mentionat faptul foarte important ca, daca in cazul modelului


monocompartimental valorile -a, si -0 se puteau calcula ca functii de
parametrii farmacocinetici de transfer care au o semnificatie fizicochimica si
fiziologica, valorile -a, -0 si -r nu se mai au o semnificatie fenomenologica
directa. In cazul solutiei obtinute, daca obtinem din analiza datelor
experimentale parametrii -a, -0 si -r si valorilor coeficientilor A, B si C, se pot
calcula,
in functie de acestia, constantele fenomenologice k v care pot fi
"validate" si prin modele in vitro, mult mai accesibile experimental. Aceasta
validare se impune im primul rand din motivul ca solutiile obtinute pentru
parametrii fenomenologici plecand de la cei "empirici' de regula nu sunt
solutii unice.

110

4.3 Determinarea parametrilor farmacocinetici


4.3.1 Modelul farmacocinetic monocompartimental, cazul
administrarii i.v. in bolus

Doza D

la t=0

r > V, C

ke

Figura 27 - Modelul monocompartimental, administrare i.v. in


bolus

4.3.1.1 Determinarea C0 si ke
Variaia concentraiei n timp este descris de funcia:
C (t)_ Cn e ^M,
unde: C0 - concentraia plasmatic a substanei active la momentul t =
0, [mg/l]
ke - constanta de eliminare, exprimat de obicei n minute-1 t timp[minute].
Variaia concerMel in tmpdupa administfane i>,in bolus

Variaia toncenlratiei in timp, reprezentare logarimita

Figura 28 - Modelul monocompartimental, variatia


concentratiei in timp dupa administrare i.v. in bolus

Prin logaritmarea expresiei de mai sus se obine


ln C _ ln Cn - ket

111

reprezentarea grafic a InC n functie de timp este o dreapt care se


determin prin metoda celor mai mici ptrate, cu panta ke i ordonata la origine
lnC0.

Figura 29 - Modelul monocompartimental, reprezentarea grafic a C i InC n funcie de


timp

Determinare constantei de eliminare se poate face prin determinarea


pantei dreptei ce trece prin dou puncte experimentale date (ti, CI), (t2, C2):

ln C, = ln C - k ,
1

U e 1

lnC2 = lnC0 -

ket1

_lnC,-lnC2

ti t2 "t
Figura 30 - Modelul monocompartimental,
determinarea constantei de eliminare

4.3.1.2 Determinarea timpului de njumtire ________________


Timpul de njumtire (t1/2) este intervalul de timp n care concentraia
substanei active ajunge la jumtate fa de concentraia inial.
Considernd c C2 = C1/2 i t1/2 = t2-t1 * ln
_
lnQ
ln
C
k
2 _ C2 _ ln2 _ ln2

_ =~=*_

Cl

112

4.3.1.3 Calculul valorilor de echilibru ale concentraiei


9

dup administrri repetate, n cazul unui model


_______ monocompartimental, administrare i.v. ___________________
Se consider c se administreaz i.v. o cantitate D dintr-o substan
activ. Concentraia substanei active la momentul iniial este C0 = D/Vd, la t =
0, (Vd - volumul de distribuie).
Concentraia substanei active la un moment t, este C(t) = C0 ekt e.
Se noteaz cu T intervalul dintre dou administrri. nainte de a doua
administrare, n organism se ajunge la o concentraie minim a substanei
active, C(T_) = C0 e-keT.
Imediat dup a doua administrare, (se administreaz aceiai cantitate D
din substana activ), concentraia substanei active devine: C(T+) = C0 + C0 eV =
C0 (1 + e-V)
n cazul celei de a treia administrri, la momentul 2T, concentraiile
substanei active nainte i dup administrare vor fi: C(2T_) = C(T+)e-keT = C0(1 +
e-keT) eV = C0 (e-V + e-2V) C(2T+) = C0 + C(2T_) = C0(1 + e-keT + e-2keT) La momentul m,
concentraiile substanei active nainte i dup administrare sunt:
1-e
-k T (n-1)k T) e-k^T _
C(nT_) = C0 (1 + e-keT + ...+
-k T
-(n-l
-nk
er
e V) e V = C0 e Ye

1 - e -( n+1)keT
C(nT+) = C0 + C(nT_) = C0(1 + e-V +....+ e-nV)
= C0

-nk

\_

- - k eT

Pentru n ^ ^ (n cazul unui numr foarte mare de administrri),


e-nkeT ^ 0.

Figura 31 - Calculul valorilor de echilibru ale


concentraiei dup administrri repetate, n cazul unui
model monocompartimental, administrare i.v

113

n aceste condiii, expresiile concentraiilor minim i maxim sunt:


e

- Kt

CX = C,
mm ~0 i

ket

1-ee
C

0
^0

ix

cmax =
1 _ e -e
Dac se consider c a doua administrare se face cnd concentraia
substanei active este o fracie q din concentraia iniial, C0.
-k x
C(T) = qC0 cum C(T) = C0 e e , din ultimele dou relaii rezult eV = q.
Concentraia maxim atins n snge la echilibru va fi
CC
C x = ^0
^0
1 - e-ket 1 - q
max

k t

max

Pentru q ^ X se obine Cx = C0.


max

Pentru a afla dup cte administrri se atinge cu aproximaie starea


de echilibru se calculeaz raportul ntre concentraia maxim dup n
administrri i concentraia maxim dup un numr foarte mare de
administrri X.
1 - q"+1

C
C"

1-q

max ___

H=

1 - n+1
q

max

1-q

4.3.2 Modelul farmacocinetic monocompartimental, cazul administrarii


extravasculare
Se consider, n particular, expresia concentraiei ca funcie de timp
n cazul unui model monocompartimental, cazul administrrii extravasculare
C (() = A^ (e-M - e -V )
k

- k

unde ka - constanta de absorbie i ke - constanta de eliminare.

114

Figura 32 - Modelul monocompartimental, cazul administrrii


extravasculare

4.3.2.1 Determinarea constantelor de absorbie i eliminare


Considernd ka > ke, pentru t suficient de mare ^

kat >> ket ^ -kat << -ket ^ e~kat <<< e-ket


i se poate aproxima ca C(t) = k^k e ^ = Ae ^
Prin logaritmare rezult InC = InA - ket a crei reprezentare grafic este
o dreapt cu panta ke i ordonata la origine A. Revenind la expresia lui C,

C(t)=

t e ~ a
se noteaz
0

-k t

-k t

C j ( ( ) = ^^ (e -ket e)e-kat) =
kkkk

k C

(e- V

ka a -e k

a e

Cj (() = ln A - kat
k

a C0 ( e -k e t

e -k a t

)=

a C0 e - k e t

C(()

Dac se reprezint grafic lnC1 n


funcie de timp, panta dreptei este chiar

ka.
Se obin rezultate satisfacatoare pentru ka/ke >5.
4.3.2.2 Determinarea tm
n cazul funciei considerate C (t ) =

kkC
^0 -(e~Kt -e~kJ) se
a

ke

calculeaz timpul la care se atinge concentraia maxim.

115

Tmax se obine ca timpul pentru care se anuleaz derivata.

116

C=0
dt
dC

= kaCo (- k e

et max

+ke

at max

dC

) = 0 ^ -k e

et max

ke~k
ea

t max

at max

=0o

\ -k t

i
-kt -k t
ea
dt ka - k^
C

+ke

= k e ~ k J m a x o = e(

))max

-katm

o ln = ( k p - k a ) o

e a max

ln
t =
(ke

k
ka)

4.3.2.3 Determinarea ariei de sub curb (ASC) ____________

Determinarea ariei de sub curb prin metoda


trapezelor

(C
ASCT

Cm

tt)

2
ASQ^ = AS^T + ASCT

JT C (t )t
Deci ASC^ ==,C + ^y - ^) + JX C(t)dt
2
n cazul modelului monocompartimental, cu administrare
extravascular,

ASCT

a 0
J: C (<)=JT ^ ~ ( e ka - ke

e -kat) =

k C ( e ~ket

kT \

a0

117
Timp

ti i,

T Timp

Figura 33 - Determinarea ariei de sub curb (ASC) prin metoda trapezelor

4.4 Modele farmacocinetice degenerate cazul metabolitilor nicergolinei


Nicergolina sufera un efect de prim pasaj considerabil, fiind aproape in
intregime
transformata
in
doi
metaboliti
activi:
MELUOL
(10a-metoxi-1-metil-9,10-dihidro-lisergol)
si
LUOL
(10a-metoxidihidro-lisergol).
Luand in considerare si faptul ca nicergolina are un LogP de
aproximativ 3 si deci se distribuie obligatoriu mai mult in lipide, cel mai
simplu model farmacocinetic al nicergolinei si a celor doi metaboliti ai sai
activi ar fi urmatorul

Figura 34 - Modelul bicompartimental cu administrare extravasculara pentru nicergolina si


metabolitii sai

unde ka este constanta de absorbtiei a nicergolinei, kf constanta sa de


eliminare renala,
jN

k reprezinta coeficientul de transfer intre compartimentul


sl

tM

apos si cel lipidic al nicergolinei,

ksl reprezinta transferul MELUOL intre

kLe

aceleasi compartimente,
este constanta de eliminare renala
a LUOL, cS este concentratia MELUOL in sange,

c M , c L sunt concentratiile celor trei componenti activi in lipide, km

este constanta de metabolizare a nicergolinei la primul metabolit, km


constanta de metabolizare mai departe a acestuia la LUOL, etc.

118

Pentru o mai buna ilustrare a relatiilor intre componente,


compartimentul central a fost reprezentat de trei ori. In fapt avem in total
numai trei compartimente: intestinul plus doua compartimente de distributie sangele si lipidele.
In mod surprinzator, desi modelul farmacocinetic pentru fiecare
metabolit in parte este deosebit de complex, modelarea datele noastre
experimentale au putut fi "fitate" foarte bine cu solutia unui model
monocompartimental. In vedera explicarii acestui cmportament
"pseudomonocompartimental", practic pentru amandoi metabolitii am
incercat o serie de modele simplificate, in anumite ipoteze privind ierarhiile
intre constantele de transfer, intre constantele de metabolizare precum si
intre toate aceste constante "de reactie de ordinul 1".
Intr-o prima instanta am eliminat compartimentul lipidic, in primul rand
deoarece concentratiile in acesta nu pot fi masurate si analiza datelor este
mult prea complexa daca il luam in considerare. Din cauza ca metabolitii
sunt mai putin lipofili decat nicergolina, in cazul lor aceasta aproximare este
mai buna decat in cazul nicergolinei. Pe de altas parte nicergolina se
metabolizeaza foarte rapid, inainte de a ajunge in circulatia generala si
numai o mica parte din ea poate sa mai ajunga in lipide.
In acest caz modelul se simplifica si devine:

Figura 35 - Modele simplificate pentru nicergolina si metaboliti

Dintr-un punct de vedere restrictionat la farmacocinetica MELUOL, am


putea contopi absorbtia, metabolismul si eliminarea

119

120

nicergolinei intr-un psudo proces de absobtie, caracterizat de o constanta k'a


sau, si mai mult, sa contopim toate procesele premergatoare aparitiei LUOL
in sange si sa consideram o "absobrtie aparenta" caracterizata de k"a.
Aceste contopiri se pot face numai in anumite conditii si numai pentru
perioade scurte de timp.
Experimentele noastre au confirmat datele din literatura privind
ierarhia concentratiilor: concentratia LUOL este mai mare decat concentratia
MELUOL si mult mai mare decat concentratia Nicergolinei. Ipoteza care ar
explica aceasta ierarhie este: - km1 > ke - km >ke
Nicergolina conform acestui model trece practic direct din intestin in
metabolitul principal MELUOL , absorbtia ca faza contopindu-se intr-adevar
cu metabolizarea.
Aceasta semnifica faptul ca , in mod practic, nicergolina se
metabolizeaza mult mai repede decat se elimina si modelul care ar explica
evolutia concentratiei celui de al doilea metabolit, LUOL, se simplifica si
devine cel din figura 2 b.
Deci csN ( concentratia medicamentului parinte in sange) trece in
intregime in csM si ke = kf + kl.
Concentratia MELUOL va
fi data in acest caz de
functia:
e-

(k

N _ k l ) ) _ e - k at

1 ( t ) coka
"

+k2

2)

intrucat eliminarea se face pe cai paralele.


Mai departe incluzand si keM intr-o pseudoconstanta de
absorbtie k'a (neglijand deci si primul pas al metabolismului din
aceea ca viteza metabolizarii de la MELUOL la LUOL, este mare), obtinem
un model de forma 2c.

cL

__

s ,2
kl _ (kl + k; j

))
e_

(k

l _kl

_e t
_kl

121

FARMACOCINETICA
FIZIOLOGIC

122

5. INTRODUCERE N
FARMACOCINETICA FIZIOLOGIC

Definirea farmacocineticii fiziologice FARMACOCINETICA


FIZIOLOGIC ESTE TIINA CARE PERMITE PREDICIA
CLEARANCE-ULUI MEDICAMENTELOR LA OM DIN EXPERIMENTE
IN VITRO I EXPERIMENTE IN VIVO PE ANIMALE.
Farmacocinetica fiziologica modern ncearc prezicerea
absorbiei, distribuiei, metabolizrii i eliminrii unui medicament pentru
elaborarea schemelor de tratament pentru acesta. Pasul urmtor ar fi
farmacocinetica fiziopatologic.
Farmacocinetica populaional ncearc prezicerea absorbiei,
distribuiei, metabolizrii i eliminrii unei substane la grupuri de indivizi
care au caracteristici comune (tineri, btrni, subieci cu diferite tipuri de
afeciuni, subieci cu particulariti de metabolizare etc).
Farmacocinetica fizico-chimic combin farmacocinetica fiziologic
i proprietile fizico-chimice ale substanelor active (solubilitate, disociere,
coeficient de partiie etc), rezultnd modele complexe care permit prezicerea
absorbiei, distribuiei, metabolizrii i eliminrii pentru un medicament dat i
elaborarea schemelor generale de tratament. Farmacocinetica
fizico-chimic este un echivalent al relaiilor de tip cantitativ ntre structura i
activitatea biologic (QSAR). nlocuind activitatea biologic (notat A) cu
proprietile biofarmaceutice (notate B), se obine c farmacocinetica
fizico-chimic este un echivalent al relaiilor de tip cantitativ ntre structura i
proprietile biofarmaceutice (QSBR). n acest scop s-au ntocmit baze de
date farmacocinetice i fiziologice i s-au creat soft- uri specializate.
Rezultatele pozitive sunt foarte numeroase, dar i insuccesele sunt
remarcabile. Se poate afirma c toate prediciile, inclusiv folosind softuri
complexe i avansate, sunt asemntoare obinerii unui diagnostic cu
ajutorul calculatorului (mult mai precis dect omul, dar implic i riscul unor
erori foarte grave).

5.1. PARAMETRI FIZIOLOGICI AI FARMACOCINETICII


| 5.1.1 Fluxul sanguin __________________________________________
Fluxul transmembranar al unei substante medicamentoasre poate fi
dependent de perfuzarea sanguin (fluxul sanguin) sau de coeficientul de
permeabilitate a membranei. In primul caz, coeficientul de permeabilitate
123

pentru un anumit medicament este mult mai mare dect debitul sangvin la
nivelul compartimentului respectiv. Difuzia medicamentului n cadrul
compartimentului este limitat de viteza de furnizare a acestuia la nivelul
membranei, nu de viteza de traversare a membranei.
5.1.2 Coeficientul de partiie
Transferul prin interfee este limitat de regul c, la echilibru,
activitile moleculei active n cele dou faze trebuie s fie egale. Aceasta
duce la concluzia, altfel verificat i experimental, c indiferent de cantitatea
total de substan activ, la echilibru concentraiile n cele dou faze se vor
gsi ntr-un raport constant, numit coeficientul de partiie al substanei
respective ntre fazele n contact.
Coeficientul de partiie este un parametru foarte important n practic
n corelrile cantitative ntre structura chimic i activitatea biologic (QSAR
- Quantitative Structure-Activity Relationships) ntre care cea mai cunoscut
este relaia Hansch49.
Dac vom considera o serie de compui de structur R-X, putem
asocia fiecrui substituent X, un numr oX definit prin relaia Hammet:
oX _ ln
k

49

Hansch C, Muir R, Fujita T, Maloney P, Greyger F, Streich M. The Correlation of Biological Activity of
Plant Growth Regulators and Chloromycetin Derivatives with Hammett Constants and Partition Coefficients.
J. Am. Chem. Soc., 1968, 85 (18), 2817-24 128

unde kH este constanta de vitez a reaciei standard n care este


implicat produsul de baza R-H iar kX este constanta de viteza a reaciei dup
nlocuirea lui H cu X.
Descoperirea fundamental a lui Hammet este aceea c, dac
schimbm reacia standard, noii parametri sigma sunt proporionali
cu cei din reacia anterioar ax = pax ceea ce ne permite, atunci
>

cnd cunoatem vitezele pentru una din reacii, s prezicem constantele de


vitez pentru toi compuii n a doua reacie, dac tim constanta de
proporionalitate.
Toate ncercrile de a aplica acelai model la prezicerea activitii
biologice au dat gre pn n momentul n care Hansch a adugat i un
"parametru de lipofilicitate":
i P xx
nx = ln
P
1

unde n reprezint coeficientul de partiie ap/octanol. Aceasta a


condus n final la un model cu o valoare predictiv foarte mare pentru
rspunsul biologic (RB) n forma:
ln BR = a n2 + b a
Explicaia importanei coeficientului de partiie n determinarea
rspunsului biologic deriv din faptul c moleculele farmacodinamic
active ajung la locul aciunii lor dup un ir lung de transferuri
interfaciale unde, dup cum am spus coeficientul de partiie este cel
care caracterizeaz "rezultatul final" al procesului de transfer.
I 5.1.3 Clearance-ul
Clearance-ul este unul din cei mai importani parametri
farmacocinetici, el fiind definit n analogie cu clearance-ul creatininic, un
parametru definitoriu al functionalitii rinichiului.
Clearance-ul unei substane (endogene sau medicament) este definit
ca fiind volumul de snge epurat de substana respectiv n unitatea de
timp. Epurarea se realizeaz la nivelul rinichiului sau la nivelul altor organe.
Clearance-ul este numeric egal cu volumul de snge care conine cantitatea
de substan care este epurat n unitatea de timp.
Dac se noteaz r (t) - rata de eliminare (catitatea de substan
eliminat n unitatea de timp) i c(t)-concentraia substanei n snge, din
definiia clearace-ului unei substane se poate scrie formula astfel:
ci

_
c(t)

125

De exemplu, dac se consider c pentru o substan dat cantitatea


epurat ntr-un minut este r (t ) _ 0,1 ^g/minut, iar concentraia sa n snge
este c(t ) _ 0,1 mg/ml, clearance-ul va fi:

Cl _ r _ 0,1 ^g/minut _ 100 ml/minut c(t ) 0,1


mg/ml
valoarea obinut fiind aproximativ egal cu clearance-ul normal al
creatininei.
Msuratorile clearance-ului se fac pentru intervale de timp mult mai
mari de 1 minut, deci este necesar calcularea clearance-ului mediu. Pentru
intervale de timp mari, formula anterioar a clearance- ului devine:
Cl (t)_ rlM
v;
c(t) dt
Clearance-ul pentru un interval de timp definit, ntre momentele t1 i t2,
poate fi scris sub form de integrale astfel:
t

J r (t ) dt
Ci (t )_ i -------J c(t ) dt
t

Deoarece cantitatea de substan eliminat n intervalul cuprins


t

ntre ti i t2,

Jr(t ) dt, poate fi scris i sub forma Q(t1, t2), unde Q


t

este notaia pentru cantitate (quantity), formula clearance-ului poate fi scris


i astfel:
Ci (t)_ M

J c(t) dt
n cazul unui medicament, care se administreaz n doza D, cel mai
simplu interval pentru care se poate calcula clearance-ul este cel cuprins
ntre momentul administrrii substanei (notat momentul 0) i
momentul eliminrii substanei (considernd c eliminarea se face la n
aceast situaie, clearance-ul mediu al substanei va fi:

a(t)=Q^
Jc(t) dt
X

Deoarece

Jc(t) dt este concentraia din snge de la momentul


o

126

0 la ceea ce corespunde la AUCiv, clearance-ul mediu se poate scrie ca


raportul dintre doza administrat i AUCiv.

Cl = = Cl
mediu AUC

sistemic

n cazul administrrii orale a unei substane, doar o fraciune f din doza


D administrat ajunge n circulaia sistemic. Clearance-ul se scrie sub
forma:
f
Cl = J = Cl
mediu

sistemic
AUC

po

Clearance-ul sistemic este considerat a fi suma clearance-ului renal,


clearance-ului prin metabolizare, clearance-ului biliar etc.
Cl = Cl + Cl + Cl +
sistemic

renal

metabolizare

biliar ...................

n sensul celor de mai sus, dup modelul eliminrii creatininei, vorbim


despre o eliminare total din organul respectiv. Putem ns s ne gndim i
la o generalizare de la un organ la un compartiment, i la o generalizare de
la "eliminare" la transfer ctre alt organ sau alt compartiment. n acest
context mai general, trebuie s distingem, n mod natural, clearance-ul
reversibil de cel ireversibil, n contextul recirculrii substanei n i ntre
organe, ceea ce ar permite aplicarea unor modele i rezultate din fizic i din
ingineria chimic.
Proprietile clearance-ului ___________________________________
Dac organul n care se face eliminarea este n particular i
compartiment, concentraia substanei ce se elimin este uniform (nu
depinde de spaiu) n tot organul i, din definiie rezult direct pentru
cantitatea eliminat n unitatea de timp
r (t) = Cl c(t) r(t) fiind deci rata eliminrii
substanei din organ.
Dac vom considera un interval de timp [t, t + dt], avem Cl c(t) dt
= r (t) dt de unde, prin integrare se poate obine cantitatea total de
substan eliminat n intervalul de timp de la t1 la t2 :

(2)
Aici trebuie s nu uitm c nimic nu ne garanteaz c rata de
eliminare, concentraia i clearance-ul sunt constante n timp. Totui, dup
cum tim din fiziologie, dac nu ne referim la intervale de timp prea mari,
127

clearance-ul creatininic este o "constant' fiziologic. Dac se ntmpl


acelai lucru i cu substana noastr, putem scoate Cl n afara integralei i
scrie:

C
l
(3)
Aceast expresie poate fi interpretat, n cazul n care clearance-ul nu
este constant n timp, ca definiie a "clearance-ului mediu", pe care l vom
nota, pentru a fi clar c suntem n cazul unei valori medii, prin <Cl>. Deci

(4)
Dac n plus, organul nu este un compartiment, i deci concentraia nu
este aceiai n tot organul, putem scrie aceleai ecuaii, dac ne restrngem
la un volum elementar v, n cadrul cruia putem aproxima concentraia ca
fiind constant, cantitatea de medicament epurat ntr-un interval de timp dt
va fi c V dCl dt = dr (t) dt
Pentru a calcula cantitatea eliminat din organ ntr-un interval de timp
mai mare, va trebui s integram i n raport cu timpul i n raport cu volumul:

128

Q(t 1 2) = (J cv (t) dCl)dt


1

(5)

n practic nu vom putea niciodat ti dependena de volum a


concentraiei, drept care vom utiliza o concentraie medie n volumul V, la un
moment de timp dat t, definit ca raportul ntre integrala n raport cu
clearance-ul n volumul V i clearance-ul total din acel volum:
J c v (t ) dCl
c (t)>=^"C
<6)
Integrala dubl va deveni n acest caz o integral simpl
Q(t 1 2) = f2 Cl{c v (t )) dt
1
(7)
Dac Cl nu depinde de t (ceea ce se ntmpl ntotdeauna pentru
intervale de timp nu prea mari), el va fi egal cu
Q(t1, t2)
Cl = f 2 ( cv (t)) dt
1
t
(8)
Atunci cnd clearance-ul total depinde de timp, egalitatea de mai sus
devine definiia clearance-ului mediu (n timp) n volumul V, pornind de la o
concentraie medie a substanei
Q(t1, t2)
2
f ( cv (t ^ dt {Cl) =
1
1 ^v (t ^ dt
(9)
Determinarea clearance-ului
Jt

n determinarea practic a clearance-ului se folosete formula (3) n


ipotezele menionate, dar se ia de regul tx = 0 si t2 = ^
Q(0,)
Cl =
J c(t)dt
(10)
Numrtorul se consider a fi egal cu cantitatea total de medicament
absorbit F D, cu D doza administrat i F fracia absorbit. Integrala de la
numitor este obinut prin extrapolarea ariei de sub datele experimentale
ntr-un experiment de farmacocinetic.
Verificarea constanei clearance-ului se poate face de exemplu prin
meninerea concentraiei n snge constant printr-o rat de perfuzie
adecvat i determinarea cantitii de substan eliminat

129

Cl

= g(t2) - 6(0

(t

-t )
l

*c
Schimbnd intervalele de timp, va trebui s obinem un raport
aproximativ constant.
Un caz special este cel al substanelor endogene58,59. Organul care
elimin substana nu face distincie ntre originea ei endogen sau exogen.
Pe de alt parte, organul care produce substana, i regleaz producia n
raport cu cantitatea de substan aflat n snge. n momentul unui aport
exogen, printr-un mecanism homeostatic, se produce i o inhibare a
produciei endogene. n concluzie, expresia Q=F D ridic n mod natural
ntrebri privind metodele de evaluare pentru F.
Scalarea clearance-ului _______________________________________
Autoritile europene recomand i "normalizarea" clearance- ului prin
mprire la greutatea corporal, recomandare care nu are neaprat un
suport tiinific. n fapt, clearance-ul nu este proporional cu greutatea
corporal, n studii privind corelrile interspecii fiind gsit 50 o relaie de
forma: Cl = a W b
unde a este o constant ce depinde de substan, W greutatea corporal, iar
b o constant ntre 0.69 i 0.89.
n locul scalrii prin mprire la greutatea corporal, care normalizare
nu are o semnificaie fenomenologic, A Rescigno51propune ca, n definiia
clearance-ului Cl*c(t) = r(t) s nmulim i s mprim cu volumul organului
considerat, s zicem spre exemplu plasma Cl

C V c(t) = r (t)
care se poate
scrie n forma

50

K Krishan, ME Andersen, Interspecies Scaling in Pharmacokinetics. In New Trends in


Pharmacokinetics, edited by A Rescigno and AK Thakur (Plenum Press, New York, 1991), pp. 203-226
51
A Rescigno: Foundation of Pharmacokinetics, Kluwer Academic, New York, 2oo3 134

Cl = r (t) V
~ V c(t)
(11)
care n membrul drept are inversul constantei de turnover al substanei.
Este drept c nu cunoatem volumul plasmei cu precizia cu care
cunoatem greutatea corporal, dar l putem estima i obine ceva care are
ct de ct un sens, lucru de preferat unei estimri precise a ceva care nu
semnific nimic.
Modele clearance
n domeniul farmacocineticii n 1970 au aprut 3 articole .Unul dintre
ele realizat de Gibaldi i colaboratorii si descria o metod simpl de
determinare a fraciei de medicament care a fost absorbit din tractul
gastro-intestinal i care ajunge n circulaia sistemic. Astfel se ajunge la
formula ratei de absorbie:
Qh
Qh + clo

unde
F=fracia din medicamentul printe absorbit din tractul gastrointestinal
n circulaia sistemic
QH=fluxul sangvin hepatic(90L/or) D=doza de medicament
administrat p.o. ASCpo =aria de sub curb dup administrarea p.o.
Cl0=clearance-ul aparent oral.
S-a presupus c medicamentul sufer doar metabolizare hepatic
dup o cinetic linear.
Pentru a se demonstra aceast formul s-a luat n lucru un model
tricompartimental:

131

Figura 36 - Model tricompartimental cu metabolizare hepatic dup o cinetic


linear

Dac administrarea se face direct n compartimentul I (asemntor


administrrii i.v.) ASC-curba concentraie funcie de timp se poate calcula
d astfel:

c
dt
d
c

12c1

12c1 k21c2 ke 2

21c2

dt

q(t)

c 2 (t

0 = k12

c (t)dt

+ k21 J0 c2(t)dt

c (t)dt

- (k21 + ke )J0 c2(t)dt

)
=

(1)
132

) ASC

12 ASCS-iv

+ 21 ASCH-iv
k

12 ASCS-iv

- (k

21

- c 0 = -k e ASC H _ lv => ASCH-iv=

c
(k

21

e
k

12 ASCS-iv

_ (k21 + ke K _ (k21 + ke )

^ ASCs-iv=

12ke

12ke

c0

133

Dac administrarea se face direct n compartimentul II, situaie


asemntoare celei administrrii prin vena port hepatic comparabil cu
administrarea p.o. ASC se calculeaz astfel:
dc
dt
d
e
c2
dt
k

12 1 + 21 2

12 1 21 2

C1(t

0 k12

C (t)
0

dt

21

J0

C (t)

dt

C (t)dt - (k21 + k e )J0


C (t)dt

0 12

C 2 (t
k

0 -k l2 ASCs-po + k 2 1
ASCh- po ^ ASCH-PO=T 2 ASC

S-po

H - po
H-po

21

(k

o 12 ASCS-po 21 + ke ) ASC.

12 ASCS

(k

- (k

21 + Te )

T2

k
ASC

S-po
k

21

kk
12 - k21 k Te

ASC

S - po

21 k21

C k D k
ASC 0 21 x "'21
kkVkk
S-po

ek12 V2 kek12

Dac se face raportul celor dou arii se obine:


p_ S - po 21
k

ASC

ASC

(2)
(3)

S-iv 21 + eZ

unde F reprezint cantitatea de medicament care administrat n


compartimentul II ajunge n circulaia sistemic.

134

Cu toate c se determin astfel raportul ariilor, constantele ratelor de


absorbie nu se pot determina. Dac se pornete de la anumite ipoteze se
poate obine un rezultat general ce poate fi folosit pentru un medicament dat.
Dac ecuaia (3) se nmulete cu V2 se obine:

135

F=

21V2

+ KV
Dac se presupune c n cele 2 compartimente Cl-urile sunt egale
rezulta c k21V2=k12V1.
k

21V2

Prin substituirea lui k12V1 cu k21V2 se obine :


F=. k12^ '
k12^ + kj2
Dac se presupune c transferul ntre cele dou compartimente este
limitat de debitul de snge atunci se poate presupune c k12V1=debitul(Q)

Q
Deci F=Q + kj2

Dk

Din ecuaia (2) rezulta c kelV2= 21


k

12 ASCS- po

Dar cum k12V1= k21V2 rezulta c


. .. Dk 21 D kelV2= - --------------------- =
21

21

ASC

S-po ASCS-po

Qh _____ = QH

Deci F=

Q +
h

QH

Cl

ASC s po
Urmtoarele dou lucrri publicate de Perrier i Gibaldi respectiv de
Wilkinson i Shand au introdus conceptul de clearance intrinsec(Clint) i
modelul "ficatului bine agitat"( adic a concentraie egale n tot
ficatul).Coeficientul de extracie hepatic EH este o masur a Clint i a fraciei
de medicament nelegat (fu).Produsul dintre Clint i fu este reprezentat de Clo
cnd medicamentul este metabolizat n exclusivitate n ficat.
EH=1-F=1

Q
Cl
Cl f
-------- Qh = -o = Cl (4)
Qh + Cl o Qh + Cl o Qh + Clf
inJu

Cl

Mai departe se ncearc obinerea formulei de calcul pentru


Clint:
(4) ^

EHQH+ EHCI intfu=Cl intfu ^ EHQH=

Clint(fu-EHfu)
_ EhQh

^ Clint=
fu (1 - EH )

136

^ Clint= ^ .

Ff

Formula astfel determinat este foarte important pentru studiile de


bioechivalen deoarece Clint poate fi determinat cunoscnd valoarea Cl0 din
studii iar fracia nelegat a unui medicament are o valoare constant ce
poate fi gsit n literatura de specialitate.
Ulterior au fost dezvoltate din ce n ce mai multe modele
farmacocinetice pentru a se lua n calcul i metabolismul de la nivel intestinal
nu numai cel de la nivel hepatic,dar date din studiile practice erau
insuficiente. S-a ajuns la concluzia c modelul simplu este funcional i n
situaia cnd exist mai muli metabolii sau cnd apar reacii de faza I sau II
ale metabolismului i chiar i atunci cnd se formeaz metabolii la nivelul
peretelui intestinal.
I 5.1.4 Volumul de distributie i factorul de dilutie
1
~

Volumul de distributie initial

Considerm c injectm rapid un medicament intravenos i, dup


cteva minute, necesare pentru distribuirea lui n tot sngele, i msurm
concentraia. Dac am gsit concentraia c0 i doza administrat a fost D,
raportul D/c0 reprezint volumul sngelui sau mai precis al ntregului
compartiment apos din care face parte sngele. n practic ns, acest
volum difer foarte mult de la medicament la medicament i reprezint mai
curnd un parametru ce caracterizeaz medicamentul dect compartimentul
apos. Astfel, medicamentele lipofile i n general toate medicamentele greu
solubile n apa au volume de distribuie cu mult mai mari dect valorile
fiziologice, ajungnd chiar la sute de litri. Explicaia apare din aceea c
aceste medicamente se distribuie foarte rapid n compartimentul lipidic
i/sau se leag n mare proporie de proteine nainte chiar de a se amesteca
complet cu sngele. Dac se ntmpl ca la administrarea de mai multe
doze din acelai medicament, volumul obinut s fie aproximativ constant
V

(1)
V
IN
C (0)
'
atunci el este efectiv un invariant i se numete volum iniial sau volum de
distribuie iniial. Pentru a obine o mai bun aproximare a

137

lui V, se face n practic o extrapolare a concentraiei la momentul zero:


D
(2)
lim

t^0

c(t)

Figura 37

Pcatul acestei definiii este acela c se bazeaz pe ipoteza c difuzia


i amestecarea medicamentului se fac foarte rapid. O determinare
independent de aceast ipotez, pentru ceea ce se cheam pur i simplu
volumul de distribuie se poate face pornind de la cunoaterea clearance-ului
i a timpului de recirculare a medicamentului respectiv n snge sau n alt
organ:
V=TCl
(3)
n cazul n care amestecarea este efectiv foarte rapid, cele dou
valori coincid.
Dac ne vom referi la ntregul organism, ar trebui ca raportul ntre
cantitatea total aflat la un moment dat n organism i concentraia din
snge s defineasc un volum pe care putem s-l numim
Q(t volum aparent
V= )
(4)
app
c(t)
Definiia nu este consistent din aceea c att numrtorul ct i
numitorul depind de timp de o manier complicat. Dac se ntmpl ns ca
raportul s aib o limit pentru t tinznd la infinit, vom defini n acest fel
volumul la echilibru (stare staionar):
Q(t)
Vs = lim,
c(t)
Facem observaia c, n general,
V<V<V
in

app

ss

138

Factorul de dilutie
Factorul de diluie al unui compartiment dat se definete ca raportul ntre
cantitatea de medicament aflat n organism i cantitatea de medicament n
acel compartiment. Deoarece att cantitatea de medicament din organism ct
i cea din compartiment depind de timp, definiia este consistent doar atunci
cnd se stabilete o stare staionar sau atunci cnd considerm intervalul de
timp pn la infinit. n acest din urm caz definim factorul de diluie prin limita
raportului
* r Q(t ) S lim.
m(t )
dac aceasta exist.
Dac nmulim relaia de definiie cu volumul compartimentului
S. V lim

lim _ m
m(t )/ V
C(t )
se obine o legtur ntre factorul de diluie, volumul compartimentului i
volumul la starea staionar:
S. V V ss
Relaia are un sens i un rost n cazul administrrilor multiple, deoarece
n cazul unei singure administrri cantitile tind la zero.

| 5.1.5 Timpul de recirculare (turnover time) _______________________


Timpul de recirculare al unui organ este definit ca timpul mediu petrecut
de medicament la trecerea prin respectivul organ.
r (t )
Dac lum definiia clearance-ului Cl ^^, o rsturnm i
9
'
C(t)
V . C(t) V
multiplicm cu V, obinem --------------- . Dar V*c(t) reprezint
r (t) Cl
cantitatea de medicament aflat n organ iar rezultatul mpririi ei cu viteza de
eliminare, ne d timpul neceasr eliminrii totale al medicamentului n organ
sau altfel spus, timpul ct acesta a rmas n organ. Deci putem s definim
timpul de recirculare T:
T=V
a
(1)
Dac suntem n situaia n care concentraia este constant (dar nu
neaprat uniform) Q/r nu va mai fi timpul necesar eliminrii medicamentului,
ci timpul necesar eliminrii unei cantiti egale cu cea aflat n organ, deci
realmente timpul necesar pentru trecerea prin organ

139

_O
. r (2)
n cazul general concentraia nu este nici uniform i nici constant i
putem s ne referim doar la timpul T petrecut de medicament ntr-un volum
elementar dV _ dV c(t ) _ dV_ _ c(t ) dCl ~ dCl
Efectund o integral de volum obinem V _ J T dCl
T

Dac mprim volumul total al organului epurat la clearance, care este


volumul epurat n unitatea de timp, obinem timpul necesar eliminrii
substanei din organ
J T dCl
T _-V -------J dCl
Jv
(3)
care este aceiai definiie cu (11).
Determinarea timpului de recirculare ___________________________
Dac volumul organului i clearance-ul sunt cunosculte, timpul de
recirculare poate fi calculat dupa definiie, dar aceasta se ntlnete totui rar.
n unele situaii particulare timpul de recirculare se poate msura direct. Dac
de exemplu medicamentul a fost administrat n bolus, la momentul zero,
ecuaia care descrie evoluia n timp a cantitii m de medicament n organ,
este
dm 1
m(t ) + r (t)
dt T
m/T fiind rata eliminrii medicamentului din organ i r rata revenirii.
mprind cu V, trecem la concentraii i, dac inem cont c la momentul iniial
r=0, obinem

T _ limt.0 ^ '
dc / dt
(4)
Deci T poate fi determinat din poriunea iniiala a curbei concentraiilor
plasmatice.
Noiunea de timp de recirculare se poate extinde de la un organ la un
compartiment, T fiind n acest caz timpul necesar medicamentului pentru a
trece prin compartiment. Indiferent de compartiment i de legturile sale,
bilanul de materiale poate fi scris in forma:
dm
..
-Km(t) + r ( t )
dt
unde m(t) este cantitatea de medicament n compartiment, K este fracia
eliminat n unitatea de timp iar r(t) este rata de producere a acestuia din surse
140

externe i/sau prin recirculare. Timpul de recirculare este inversul fraciei


eliminate n unitatea de timp
T

'

(5)
De exemplu, dac ntr-o or se elimin 20%, n cinci ore, n cazul n care
eliminarea este constant cantitativ i nu ca procent, medicamentul va fi
elimiminat n cinci ore. Altfel putem gndi c fracia eliminat este constant n
timp dar, n acest caz, timpul de recirculare ar fi infinit, indiferent de substana
considerat. Trebuie s remarcm ns c ecuaia noastr consider c rata
de eliminare este constant, deci, n prima or se elimin 20 %, n a doua or,
20% din ceea ce a rmas, deci 16 % din cantitatea iniial i aa mai departe.
m(t)
Dac amplificm in definiia lui T cu x(t) obinem T
'
K m(t)
nc o dat raportul ntre cantitatea existent i cea eliminat, deci T ar fi
natural de caracterizat drept timpul mediu necesar eliminrii medicamentului
din compartiment, iar K se va defini ca rata de eliminare.
n cazul n care avem mai multe compartimente, ne putem pune
problema timpului de reciclare al "sistemului de compartimente". De exemplu,
pentru dou compartimente, avnd volumele V1 i respectiv V2 i constantele
de eliminare Ki, K2, clearance-ul primului compartiment este V1 K1 iar al celui de
al doilea V1 K2. Conform cu definiia (1), vom avea
V + V2

tot

VK + V2 K 2
Dac sistemul include mai mult de dou compartimente, timpul de
recirculare total al sistemului este dat de formula
T ot _ T i + --- (T j - T ) 1 - r
unde Ti este timpul de recirculare al compartimentului n care intr
medicamentul, T, - timpul necesar ca un sistem de particule s fac
62 63

un ciclu complet i r reprezint fracia de particule recirculate 52


Rata de recirculare K se definete ca inversul timpului de recirculare

K _ 1/T

(6)

52

A Rescigno, H Bushe, A B Brill, M Rusckowski, T W Griffin, D Hnatowich, Pharmacokinetic


Modellind of Radiolabeled Antibody Distribution in Man, Am J Physiologic Imaging
5,141-50 (1990)
141

Numrul de recirculare
Numrul de recirculare este numrul de reveniri ale unei particule n
sistem. Dac particula nu se mai ntoarce, el este egal cu unu.
Pentru un compartiment, dac integrm ecuaia general care descrie
transferul de mas, obinem:

m (<x>) - m(0) _ -J K m(t)dt + J r (t)dt


n cazul n care sistemul este deschis medicamentul este n final eliminat
complet i m(~) = 0 i deci
J K m(t)dt _ m(0) + J r(t)dt
Observm c expresia din membrul stng d cantitatea total de
medicament care este eliminat din sistem iar cea din membrul drept,
cantitatea intrat iniial n sistem, la care se adaug ceea ce a intrat ulterior prin
recirculare. n lipsa recirculrii, membrul stng este egal cu m(0) deoarece
numrul de particule care intr este egal cu cel al particulelor care pleac.
Dac am recirculare, deoarece particulele care recircul sunt cele care au fost
introduse iniial n sistem, numrul de recirculri este egal cu raportul ntre
numrul particulelor ce prsesc sistemul, mprit la numrul celor introduse
iniial n sistem

142

J K m(t)dt
--------------m(0)

(7)
Dac nmulim numrul de recirculri cu timpul petrecut de o particul n
sistem ntr-un ciclu, obinem timpul de permanen al acesteia n sistem.
| 5.1.6 Timpul de permanen _______________________________________
Timpul de permanen este media timpului total petrecut de medicament
n trecerile sale ntr-un compartiment dat. Deci el este egal cu produsul ntre
timpul de recirculare i numrul de recirculare:
P T .v
Dac la momentul t=0 au fost introduse n compartiment m0 particule iar
la momentul t, se afl m(t) particule, m0 / m(t) reprezint
fracia de particule aflate n compartiment la momentul t, iar dt

m (t )
m (0)

este timpul estimat de permanen a tuturor particulelor n compartiment.


Timpul mediu petrecut de toate particulele n compartiment va fi dat de
integrala
^ m(t ) ,
I dt
0
m (0)
| 5.1.7 Timpul de reziden _________________________________________
Timpul de reziden R este timpul petrecut de un medicament
administrat ntr-un organ, n trecerile sale printr-un alt organ. Dac m(0) este
numarul de particule administrate n primul organ la momentul t=0 i m2(t)
numrul de particule aflate la momentul t n al doilea organ, m 0 / m2(t)
reprezint fracia de particule aflate n al doilea organ la momentul t.
Similar ca mai sus m2dt este timpul petrecut n al doilea organ
m(0)

n intervalul de timp t, t+dt, de ctre particulele intrate n primul organ

m (t

m(0)

dt media timpului respectiv.

143

5.1.8 Timpul de ieire


Timpul de ieire dintr-un organ, notat cu Q , se definete ca timpul de la
intrarea n organism pn la ieirea din organ. Observm c timpul de
recirculare i timpul de permanen se refer la perioade de timp petrecute de
medicament n organ n timpul uneia sau mai multe treceri prin acesta, timpul
de ieire include i timpul petrecut n organism nainte de intrarea n organ,
plus timpul petrecut n afara organului ntre diferite treceri prin acesta. Deci,
avem n general
Timpul de recirculare < Timpul de permanen < Timpul de ieire Cnd nu
avem recirculare prin organ i deci numrul de recirculare este 1, avem
Timpul de recirculare < Timpul de permanenta Iar cnd msurarea
concentraiei se face n chiar organul n care se face administrarea
Timpul de permanen < Timpul de ieire Cantitativ, timpul de ieire s-ar putea
calcula prin formula
/O

J t K m(t)dt
Q_

K m ( t ) dt

Cnd rata de recirculare este constant, se poate face


simplificarea i timpul de ieire se poate calcula ca raportul ntre momentul de
ordinul unu i momentul de ordinul zero al concentraiei, deci ca momentul
"relativ' de ordinul 1:
I t m(t)dt
Q _ 0
J0

(hO

/a

m(t)dt
Atunci cnd ne referim la un compartiment, deoarece se poate simplifica
cu volumul, n definiia timpului de ieire, se poate nlocui direct masa, m, cu
concentraia, c.
(ho

i t c(t)dt
Q

c(t )dt
0

Raportul definit n acest fel se numete n literatur "


0 timpul de reziden mediu n circulaia sistemic" dar aceasta
este adevarat numai atunci cnd medicamentul este distribuit uniform.
Independent de aceast ipotez, raportul ar trebui definit ca "vrsta
medicamentului " n organ.

144

De exemplu, ceea ce msurm noi n snge se poate foarte bine s fie,


n funcie de metoda de extracie, concentraia aparent n grupul de
compartimente ("pool") ser, proteine, eritrocite. n general, dac ne referim la
dou compartimente i i j, putem calcula
/OT

/OT

J t m(t)dt J t (mi (t) + m j (t))dt

OTOT

J m(t)dt J (mi (t)

+ m j (t))dt

n fapt, timpul real de ieire din grupul de compartimente va depinde de


dou constante de turnover referitoare la cele dou compartimente i care n
general nu sunt egale ntre ele:
OT
(k
( k m(
1
J

i0
m t )+ j0 j t ))dt
0
Q

OT
J0 (ki 0mi (t) + k j0mj (t))dt
5.1.9 Timpul de transfer__________
S presupunem c medicamentul intr n compartimentul j numai din
compartimentul i (deci i este singurul precursor pentru j). n acest caz definim
timpul de transfer de la i la j Tij:

T j Q j -Q i
Putem defini deci timpul de transfer de la i la j ca timpul trecut de la
ieirea din i pn la ieirea din compartimentul j.

145

5.2 MODELAREA FARMACOCINETICA FIZIOLOGICA


Att farmacocinetica fiziologic ct i cea compartimental empiric pot
fi derivate din modelul Teorell care este n esen un model fizico-chimic bazat
pe legea I a lui Fick. Conform acestei legi, fluxul de substan printr-o unitate
de suprafa ntr-o soluie este proporional cu gradientul de concentraie la
nivelul suprafeei.
5.2.1. Modelarea fizico-chimic Teorell
Pentru un caz general, corespunzator la n compartimente ecuaiile
Teorell de modelare fizico-chimic pentru evoluia concentraiei substanei n
funcie de timp sunt:
dC 1..."

Zh,(C -C,), , "


j

, 1,2,..., n,

dt

dC
unde L este evoluia concentraiei n funcie de timp, Cj, Ci sunt
dt
concentraiile din compartimente, iar hy sunt constante independente de timp
i de concentraie.
Dac notm cantitatea de substan activ dintr-un compartiment cu A
de la amount" sau cu M de la mas", concentraia dintr-un compartiment va fi
C t AjV 1 , iar ecuaiile corespunztoare, n cantiti, vor fi:
dA 1-n
j A" v i V
f

,
(2)
hV dt % 11 1
dA
unde - este evoluia cantitii de substan n funcie de timp, hy
dt
sunt constante independente de timp i de concentraie, Aj, Ai sunt
cantitile de substan din compartimente, iar Vj i Vi sunt volumele n care
se distribuie cantitile respective de substan.
V
Dac mai departe, pentru simplitatea scrierii notm k tj h^y- i
1...n

K. Z h , atunci ecuaia anterioar devine:


l

146
j *l

y>

1...n

hV
dt 1 1

A, A ^

1...n

_Z k A - KA

VV

(3)
Dup cum se observ, s-a ajuns la forma
ecuauzual de scriere a iilor farmacocinetice n cantiti"
v11y

1...n

^ _y
kA - kA
1 11
dt

(4)

unde kij i ki sunt considerate constante independente una de cealalt.


n particular, n cazul n care exist dou compartimente reprezentate
de dou lichide nemiscibile, ntre cele dou compartimente suprafaa de
separare este o interfa, iar fluxul dintre compartimente este proporional cu
diferena de concentraie dintre cele dou faze, considerate omogene din
punct de vedere al concentraiei.
Compartiment 1

Compartiment 2

Ci

C2

Figura 38 - Reprezentare schematic a dou compartimente cu


concentraiile C1 i C2

Pentru acest caz particular, ecuaiile evoluiei concentraiilor n timp


pentru fiecare din cele dou compartimente vor fi:
pentru compartimentul 1:
hj2 (C2 - C1), respectiv

dCl

dC

corespunztoare,

MM
1

_ K

21 (C1 C2 ) .

(5b)

dt

pentru compartimentul 2:
Ecuaiile

(5a)

dt

cantiti, vor fi:

1 dM,

V dt 1

dM
pentru compartimentul 1: pentru V 2 dt

(6a)

r MM

V
(6b)

VV
' 1 '2

compartimentul 2:
_

147

148

5.2.2 Modele empirice

dC
La echilibru, cnd L 0 (unde i=1,2), cele dou concentraii
dt
(plasmatice sau sanguine) din compartimentele 1 i 2 se egalizeaz.
Aceasta corespunde realitii cnd suprafaa este o interfa virtual
n cadrul unei faze omogene.
Atunci cnd avem de-a face cu dou faze nemiscibile, la
echilibru concentraiile C1 i C2 vor fi ntr-un raport constant, numit
coeficient de partiie ntre cele dou faze.
Ecuaia 6a se mai poate scrie:
dM 1 , V 1 , , , , , - h nTTM 2 - h,M
(7)
dt 12 V2
sau
dM 1
= k 2l M 2 - KM 1
(8)
dt
unde coeficienii k21 si k12 se consider independeni unul de cellalt,
ei fiind determinai prin fitarea datelor experimentale cu o sum de
exponeniale (tipul soluiei sistemului dat). Din acest punct de vedere,
modelul care iniial pleca de la considerente fizico-chimice, devine
independent de acestea i reprezint, n esen, modelul analizei
compartimentale".
Din faptul c toi coeficienii sunt considerai independeni ntre ei i
pot fi determinai numai pe criteriul potrivirii unei sume de exponeniale peste
datele experimentale, modelul analizei compartimentale este n esen un
model empiric. O astfel de abordare are avantajul c duce la soluii ce pot
prezice evoluia concentraiei pentru un sistem dat, pentru un organism,
pentru un subiect dat etc.
n afara utilitii unor astfel de modele, n ceea ce privete prezicerea
concentraiei n timp, mai exist i avantajul c pentru determinarea
coeficienilor este suficient s cunoatem doar o serie de concentraii n
plasm.
Coeficienii, n fapt nu sunt independeni pentru c, dac vom
considera la echilibru:
dM 1 7 ^, 7 ^,
-r- K X M 2 - k u M 1 0 dt (9)
raportul ntre coeficieni va fi:
k 2L _ m_ _ CJ V_ Cl Vl _ pk
M C

ll 2 (10) unde p12 este coeficientul de partiie ntre


compartimentele 1 i 2.
k

12

2 2

12

149

Luarea n consideraie a relaiei ntre cei doi coeficieni, complic


foarte mult problema matematic a potrivirii soluiei sistemului de ecuaii cu
datele experimentale, care devine o problem neliniar, de minim cu
restricii.
Cele prezentate mai sus justific utilizarea extensiv a acestei
metode. Avantajele majore ale modelelor empirice sunt:
1. este o problem matematic rezolvabil,
2. permite individualizarea tratamentului medicamentos, n msura
n care coeficienii pot fi determinai ca parametri farmacocinetici
individuali.
Aceste modele au permis de-a lungul timpului elaborarea schemelor
generale de tratament pentru un medicament dat, precum i individualizarea
pentru un medicament dat i un pacient dat. Aceast metod a permis
comparaii utile ntre farmacocinetica unor substane active dintr-o serie de
compui omologi i determinarea unor relaii calitative sau chiar cantitative
ntre structura i proprietile fizico-chimice.
Parametrii determinai prin aceste metode cum ar fi: concentraiile
maxime (plasmatice sau sanguine), timpii de njumtire (a i P) i volumul
de distribuie sunt informaii care se regsesc, n ultimii ani, n toate
prospectele medicamentelor.
Dezavantajul principal al modelelor empirice, este acela ca,
parametrii determinai nu pot fi corelai direct cu modificri fiziologice i
fiziopatologice curente cum ar fi: insuficiena circulatorie, schimbri n masa
organelor, legarea de proteine, raportul ntre masa muscular i grsimi,
modificri metabolice etc.
| 5.2.3 Modele farmacocinetice fiziologice ________________________
Farmacocinetica fiziologic descrie evoluia substanelor active n
organism n termeni de fluxuri de snge prin organe i schimburi de
substan activ.
1. Partiia esut - snge a medicamentului total __________________
Organele sunt o combinaie ntre esuturi i vasele de snge care le
irig. Sngele este n echilibru rapid cu apa extracelular, cele dou
componente formnd de fapt un singur compartiment - compartimentul apos.
n urma transferului substanelor prin membranele celulare, se stabilete un
echilibru i cu apa intracelular. Stabilirea acestui echilibru este mai lent,
fiind condiionat n primul rnd de transferul prin membrana esenial

150

lipidic. Teoria lui Benga64,65 (pentru care a luat Agre53 premiul Nobel) privind
transferul rapid al apei prin proteine "aqua pori" poate privi unele fenomene
fiziologice specifice dar nu ofer o alternativ de "echilibru rapid ntre
concentraiile extracelulare i cele intracelulare", la transferul prin difuzie n
mediu lipidic, avnd o pondere mult mai mic fa de acesta din urm. n
fond, disputa poate fi tratat prin analogie cu transferul prin piele. La nivelul
pielii transferul se face att direct prin stratul cornos (lipidic), ct i prin anexe
(glande sudoripare, pori etc), dar acest din urm transfer este de numai
cteva procente din cantitatea total transferat. Transferul prin fluxul de
ap transepidermic (Trans Epidermic Water Loss - TEWL) este n esen un
transport dinspre organism n afara sa i ponderea lui poate fi evaluat prin
creterea concentraiilor de substane active la nivelul pielii i a sngelui n
urma ocluzrii pielii i anulrii fluxului menionat.
n urma schimburilor ntre snge i celulele esutului, concentraia
substanei active din snge scade i vorbim de o concentraie n sngele
venos.

53

Smith BL, Agre P: Erythrocyte Mr 28,000 transmembrane protein exists as a


multisubunit oligomer similar to channel proteins, J BiolChem, 266, 6407-6415

151

Ca
flux
ci
o
sange
se
arterial

Cv
Ihix de sange consider c i
venos

Dac
acest echilibru

se

stabilete

Figura 39 - Reprezentare
schematic a fluxurilor de
snge spre esut (concentraie
arterial Ca) i dinspre esut
(concentraie venoas Cv)

relativ rapid (dar evident mult mai lent dect echilibrul n interiorul
compartimentului apos), putem postula trei concentraii "compartimentale":
concentraia arterial (Ca), concentraia venoas (Cv) i concentraia tisular
(CT).

II

ca

A
Figura 40 Reprezentarea
schematic a
concentraiilor: fig A
- iniial, fig B - dup
un interval de timp

Consider
nd c ntre sngele arterial i cel venos nu sunt diferene de concentraie
deoarece doar o cantitate mic de substan rmne n esut, atunci putem
utiliza CB n loc de Ca i Cv.
Raportul concentraiilor dintre snge i esut este numit coeficient de
partiie ntre "snge i esut", sau ntre "snge i organ",

PT =
C
B

(11)

notat cu P T sau cu R T ( de la "ratio").


n acest caz, ecuaiile farmacocinetice pentru un esut T dat ar fi
de forma:

152

d (VTCT

= QT (CA - CV )= Q

) dt

C - C
pT J

(12)

n cazul n care organul respectiv este i organ de


eliminare, se adaug un termen ce definete rata de eliminare (cantitatea de
substan activ eliminat n unitatea de timp) ca produs ntre "clearance" i
concentraia n organ.
n rinichi n special, substana activ este n snge, drept care scriem
ClbCb sau ClpCp sau CluCu dup cum putem msura concentraia n snge
total (blood), n plasma sau concentraia fraciei libere (unbound) din snge.
2. Partiia esut - snge a medicamentului liber
Foarte multe substane active care ajung n snge se leag de
proteine n procente variabile, uneori pot atinge chiar i 99%. Aceleai legri
pot aprea i n esuturi. Ca urmare trebuie s lum n considerare cinetica i
gradul de legare n modelele farmacocinetice ce privesc aceste substane.
Dac vom considera c fraciile libere (f) n snge (B) i n esut (T) sunt
de fapt substana n componenta apoas a acestora, vom avea: [Csjf =
[Cjjf
(13)
[Csjf = fs [CB]
(14)
[Cjjf = fi [CT]
(15)
Coeficientul de partiie de care am vorbit mai sus este de fapt raportul
ntre concentraiile totale n snge i esut:

P = = ___________ fT ___ = L^ = R

(16)

PT

C B ICBLI^ fB L B
Cnd eliminarea se face n ficat prin metabolizare, fluxul la ieirea din
ficat este suma fluxurilor ce vin dinspre tractul gastrointrestinal, splin i
fluxul direct.
Trebuie subliniat c acest model consider c transferul prin
membrane este rapid i avem practic tot timpul un raport al concentraiilor
egal cu coeficientul de partiie ntre snge i esut. ntruct etapa limitant de
vitez n acest lan de fenome este transferul (fluxul) sngelui, modelele de
mai sus se numesc "blood

153

flow limited". Ele se confirm experimental prin aceea c raportul ntre


concentraiile n snge i cele n esut sunt relativ constante pe un intervalul
terapeutic de concentraie. De exemplu pentru metotrexat67,68 raportul este
constant, la obolan, ntre muchi i plasm pentru concentraii ntre 0.01 i
10^g/ml. Nu acelai lucru se poate spune ns despre concentraiile n rinichi
i ficat. n acest caz avem model de tipul "diffusion limited".
Modelele fiziologice sunt, n fapt, tot modele compartimentale, dar
ncearc s coreleze parametrii farmacocinetici empirici cu parametrii
fiziologici i fiziopatologici care influeneaz procesele de absorbie,
distribuie, legare, metabolism i eliminare.
Deci, luarea n calcul a masei i volumului organelor, a fluxului de
snge n diverse organe ar permite teoretic prezicerea farmacocineticii la un
subiect particular dat. n practic, ns, determinarea acestor parametrii
fiziologici pentru un subiect dat nu este nici simpl i nici justificat din punct
de vedere etic, n msura n care presupun i metode invazive de evaluare.
Considernd n locul parametrilor fiziologici individuali, parametrii
medii pentru o specie dat, modelele de farmacocinetic fiziologic permit
extrapolarea parametrilor farmacocinetici de la o specie la alta.
Predicii acceptabile n ceea ce privete volumul de distribuie, au fost
obinute pe baza modelelor fiziologice, dar din pcate, volumul de distribuie
are o mai puin semnificaie terapeutic. Fcnd corelaii cu greutatea
corporal i sperana de via n acelai timp, s-au obinut pentru unele
medicamente, corelaii liniare log-log sau log-lin acceptabile i pentru
clearance-ul intrinsec. Desigur c aproape toate corelaiile log-log sunt
liniare, dar astfel de corelaii au un rol predictiv foarte limitat.
ntruct nu avem alte alternative mai bune, estimrile parametrilor
farmacologici i mai ales farmacotoxici la om se fac pe baza modelelor
fiziologice. Mai mult, n ultimii ani s-au dezvoltat o mulime de soft-uri i
modele de corelaii in vitro - in vivo care, n foarte multe cazuri, prezic
toxicitatea sau activitatea unei substane active date, pornind de la
parametrii fiziologici medii i de la date in vitro. Succesele sunt, ns,
contrabalansate i de insuccese rsuntoare, ceea ce dovedete c, n lipsa
cunoaterii concentraiilor i caracteristicilor fizico-chimice i biochimice ale
locului aciunii (numit de multe ori, impropiu, receptor) orice model rmne o
potrivire empiric a posteriori, valabil pentru compui foarte apropiai n
ceea ce privete proprietile fizico-chimice i parametrii farmacologici
apropiai de cei standard.
5.2.3.1 Corespondena ntre modele fiziologice i
compartimentale

154

Se consider un model cu dou compartimente sngele (blood) i un


esut, cu administrare i.v. sau oral, cu eliminare renal. Folosind notaiile
uzuale din farmacocinetica fiziologic prezentate anterior i din analiza
compartimental, modelul va fi reprezentat n cele dou variante de
diagramele de mai jos:
1

1B CL,

kui

B (blood sange)

B (blood = sange) VB CB

VB CB fB

fu

QT

QT
r

T (tesut)
V

CT

T (tesut) Vt C

FJ

tj

A. Model fiziologic
B. Model compartimentai
Figura 41 - Reprezentarea schematic comparativ: A. Modelul fiziologic, B. Modelul
compartimental, unde, C reprezint concentraia n compartiment, V - volumul compartimentului,
f - fracia liber a compusului activ, QT - fluxul de snge prin esut, ClI - clearance-ul intrinsec, iar
k12 i k21 sunt constante independente.

n cazul administrarii i.v. n bolus cu eliminarea doar a fraciei libere,


ecuaiile difereniale n concentraii sunt urmtoarele:
- n compartimentul snge: vBddcB = -QTCB + Q^CT - fBCL .CB (17)
dt
RT
'
- n compartimentul esut: V.^ = QTCB-CT

(18)

155

unde VBC. este evoluia n funcie de timp a cantitii de substan


dt
care este transferat din snge, V este evoluia n funcie de
T
dt
timp a cantitii de substan care este transferat din ficat, Q T C B este
cantitatea de substan care este transferat din snge n esut,
C T este cantitatea de substan care rmne n esut, f B CL .C B
Rt
'
este cantitatea de substan sub form de fracie liber care se elimin.
Semnul plus semnific faptul c acea cantitate intr n compartiment, iar
semnul minus semnific faptul c acea cantitate prsete compartimentul.
Prin nmulirea numitorilor i numrtorilor termenilor din membrul drept
al fiecreia dintre ecuaiile (17) si (18) cu volumele corespunztoare
compartimentelor respective i folosind notaia V B C B = Ab i V T C T = At (A de la
amount), acestea devin:
AT - ^ AB (19)
VB
T

(20)

dt V B " RTVT "

dA B =

I T
Q

- Q^ A ,

dA
B
dt
RTVT funcie de timp a cantitii de
B
unde B este evoluia n
Q
=
SLA
,
dA
TA
substan din
dt
dt
V
RTVT
B
dA,,
snge, - este evoluia n
funcie de timp a cantitii de
substan
dt
V

din ficat, A D este cantitatea de substan care este transferat din


VB
B

snge n esut,
RTVT

A T este cantitatea de substan care rmne n

f B CL,
esut, este --------- -A, cantitatea de substan sub form de fracie
V
B

liber care se elimin.


Pentru modelul compartimental empiric, ecuaiile difereniale
sunt:
- n compartimentul snge: ^ = -K A + k21 AT -k10AB (21)
b

156

dt

157

dA
- n compartimentul tesut: - = k i2 A B -k 2i A T
dt
A doua ecuatie se poate scrie i sub forma:
T T = k VC - k VC
V

(22)

dC

""ir B B

J.

2V

TT

dt

(22a)

sau sub forma:


= i2VB

dC

C - k VC = k' C - k' C
"-2V

dt C

T T "12^B 21 T

(22b)
Deci, n esent ecuaiile farmacocinetice scrise n cantiti sunt aceleai
cu ecuaiile scrise n concentraii, dar constantele de transfer au semnificaii
diferite.
Identificnd coeficienii din ecuaiile (19) i, respectiv, (20) cu cei din
ecuaiile (21) i, respectiv, (22) se obin urmtoarele relaii:
'
k = QtT

12

= V

k
21

(23)

b
= Qt
=

RTVT

(24)

t
IbCL,
k

i0 =

b
(25)
Prin determinarea experimental a C B i C T n funcie de timp i fitarea
datelor experimentale cu o biexponenial, se pot estima valorile coeficienilor
ki2, k2i i k i0 . Determinnd raportul ntre
concentraiile ntre cele dou compartimente la echilibru, se poate estima RT:
C

B
(26)
Se pot calcula i restul de parametri fiziologici dup cum urmeaz:
Q

T = VBki2

(27)
Qt
VtRt =
2i (28)
k

f CL
B i'

= VB i0 =
k

AUC

iv
(29)
n particular, atunci cnd esutul este de fapt ficatul (liver) i dac medicamentul
se elimin numai prin metabolizare,
158

'

fsCL t .= CL m = CL s

(30)

5.2.3.2 Model fiziologic Rowland pentru


substane active care se elimin exclusiv prin metabolizare69,70
Dac notm compartimentul snge cu B (de la blood) i
compartimentul ficat cu L (de la liver), se obine un model bicompartimental
care poate fi reprezentat schematic astfel:
IV

-------
D la t=0

(blood sange)

B (blood = sange)

D ta t=0 VB Cb fu Ac
VB

CB

QL

AB
L

ko
j

QL

po

L (liver =

-------
D la t 0

IV

VL

po

ficat)

CL

fi.

AL

D la t=0

L (liver = ficat}
V,

Cl I

i r kio

fnCU

B. Model clasic modificat pentru fraciile libere


A. Modei fiziologic

Figura 42 - Reprezentarea schematic comparativ: A. Modelul


fiziologic, B. Modelul compartimental, unde, C reprezint
concentraia n compartiment, V - volumul compartimentului, f - fracia liber a compusului activ, A cantitatea de substan din compartiment, QL - fluxul de snge prin ficat, ClI - clearance-ul intrinsec
al fraciei libere, iar k12 i k21 sunt constante independente.

Se pot scrie coeficientul de partiie (RL) i rata metabolic (RM):


R

L = B I fL = CLss lCBss

lL

M = f L CLt' CL =

fn
CL ,
R

(31)

(32)
n cazul administrrii i.v. n bolus cu eliminarea doar a fraciei libere,
ecuaiile difereniale sunt urmtoarele:

159

V d B = - Q C +QC
dt

dC

dt

QC - QC - B
f

(33)

CL

' C t J?
L

LB

J?

r
l
l
(34)
Deoarece masa (Amount) este egal cu produsul dintre volum

i concentraie, V B C B = A B i V L C L = A L , dac nlocuim C B cu i

Vb
A

C L cu dintre ecuaiile (33) i (34), se obines:


V

dA B_ Ql A , Q
dt Vb B VlRl L

(35)

A = 0A - Q^A - f B CL r A
dt Vb B VlRl L VlRl L
(36)
Ecuaiile difereniale pentru modelul clasic corespunztor sunt
urmtoarele:
dA
B

= ki2 Ab + k2i AL

dA

dt
(37)

= ki2 AB - k2i AL - k20 AL

dt

"~"~
(38)
Prin identificarea coeficienilor termenilor A B i A L din ecuaiile (35) i
(36) cu (37) i respectiv (38) se obin relaiile:
ki2 = Ql/Vb

''

(39)

K = QJVlR
i

SbCLv

f L Ci v

(40)

k 20 =
20

VlRl

(41)
Vl

V7

160

5.3 IDENTIFICAREA PARAMETRILOR FIZIOLOGICI


. .1 Euarea ertrac^ hepatice dup administrare p..

5 3

Considernd acelai caz particular al medicamentelor care se elimin


exclusiv prin metabolizare hepatic, rezolvarea ecuaiilor unor modele
fiziologice se realizeaz prin aplicarea transformatei Laplace n ecuaiile
difereniale ale modelelor.

Figura 43 - Model fiziologic


(unde D este doza administrat la momentul
t, Vb este volumul de snge, VL este volumul
ficatului, CB este concentraia de substan
din snge, Cl este concentraia de
substan din ficat, f este fracia de
substan liber n snge, Ab este cantitatea
de substan din snge, AL este cantitatea
de substan din ficat, Ql este debitul de
snge prin ficat)

Modelul fiziologic din figura 43 consider organismul format din dou


compartimente: sngele (notat cu B de la blood) i ficatul (notat cu L de la liver).
Eliminarea se face numai prin ficat, ca urmare a metabolizrii (Q L este
debitul de snge prin ficat). A este cantitatea, C este concentraia de substan
activ, iar f fracia de substan activ liber din snge.
Se consider dou cazuri diferite:
- cazul administrrii orale;
- cazul administrrii i.v.

161

5.3.1.1 Calculul AUCi


Ecuaiile difereniale asociate modelului sunt:
ompartimentul snge: <dAdt b l l
........ .................. ^ - L _ QL QL \" f B CL.
VlRl
Ql A + Ql
este evoluia
unde
Vb VlRl
cantitii de
Q
Ql
lA
substan din
timp,
snge n funcie
Vb B
VlRl
de
dA
d A

(1)

este evoluia cantitii de substan din ficat n funcie de

dt
dA

(2)

f
dt timp, iar R _ este raportul dintre fracia de medicament liber din
L
f

ficat i din snge.


Aplicnd transformata Laplace, n modelul din figur i notnd L
(AB)=aB, pentru ecuaiile 1 i
2, se obine:
QL
D _- Ql
a B +
Vb b
QL
V

RlVl
a

(3)

f CL,

L--

RlVl

este:
Q. _
5+
Vb

A_

-a r

VlRl
Determinantul
A
sistemului,
,

B
'

-ar

VR
l

5 +VD

5 +Q
- L + f B CL

Q _. QL + FBCL T VD

5+-

RLVL

(4)

\QL

1 \ Ql 1

LVB I_RlV
J
J

VLRL

_5 +

5+

_(

QL . QL .
5
4
+ 4 )( + 2 )

F CL

Q
L,

fBCL

(5)

VLRL

VB RLVL RLVL

162

unde:

A + A =TT +
(6)
AA

Ql
^B

(7)

Ql , fbcli
RlVl

RL^L

Vb RlVl

Ql + fbcl

Transformata Laplace
pentru cantitatea din
snge, aB, este:

RlVl

D
QL
VlRl
0 s + QL + fBCLi'
VlRl

D s+-

aB =

(s + \)s + A)

(8)

Deoarece limL(f) = [ f (t)dt i pentru c A B /V B = C B , atunci


s^o

a
lim
s^0 V

] Cb (t )dt = AUC v

Ql + fbcl, RlVl

ac
AUC, = lim

s-0 Vb Ql B

f CL

Vb
Vb RlVl

163

Ql + f B CL v

AUC po = D
po
QfCL

(9)

Prin definiie, clearance-ul sistemic este


D QJbCL,
definitie

Ql + fbcli

CL^= AUC

(10)

Observm c procesul cel mai lent este cel care determin viteza total:
_ n cazul n care Q L f B CL V , atunci Cl S = f B CL V , - n
cazul n care f B CL V Q L , atunci CLS = QL.

D
= D Ql + fbcl,
qfcl,

adic

164

p
o

5.3.1.2 Calculul AUC

Ecuaiile diferenialele asociate modelului sunt:


dA
a
= -k a A a
aa
dt
dA = - Ab + Ql 'A r

(11)

dt

RlVl

f B CL A --------- -A r

dA

dt

= kA + Q- Ab - Ql
aa

JT

(12)

RlVl

(13)

VlRl

(14)
(15)

V
b
Ql
Vb

unde Aa, AB, AL, sunt cantitile de


substan la locul de absorbie din
compartimentul central, ficat, la
momentul t. Aplicnd transformata
Laplace :
a
saa D - kaaa
Ql
Ql kl
Ql + fbcli sa = ka +^ L a T} + a RlVl
QL

165

sa = ka + L a RlVl
Reorganiznd ecuaiile 14, 15 si 16:

(S +

a )aa

0a

aB -

s+
V
b

- ka -

(16)
0 aL = D
Ql
a

aB -

(14a)
(15a)
(16a)

Q
l
Vb

0a+
RlVl

s + Ql + f bCL, . VlRl
Determinantul A al matricei formate din ecuaiile 14a, 15a i 16a este :
0
0

s + k
A

= 0
ka

Ql
s +V
b
Ql
Vb

Ql
RlVl
s + Ql + f bCL,
VlRl

(17)

166

Ql
s + Vb

(s +
ka)

" Ql ' " Ql '

Ql + IbCLv

(
(
)
= s + a ) s + \s + 2 (18)
L
Vb
L
RlVl
VlRl
J
J
unde - 1 si -2 sunt soluii ale ecuaiei A=0.
Transformata Laplace a cantitii din compartimentul sanguin, aB:
s+k D
0

s+-

00
Ql
RlVl

-k 0 s +
a

Dk \ Q

Ql + f. bCLi
RlVl

1
L

RlVL

(19)

J
(s +
Q

s+V

lim

s+

Ql

+ f.bCL, VlRl

Vn

Ql

a )(s + 4 )(s + ^2 )
Ql Ql + /bCL,' ql

= K^ = a
k

RlVl

Vb VlRl
VbVl

ka Ql fb CL ,

Deoarece V V r
(
vom avea pentru
b

l l

aria de sub curb, AUC:

(s + ka )

Ql
Dk
a
AUC po = lim = ,
s^0 V k Q' f B CL., f CL
r b V ^ ' J B i'
B

= D , adic

po

L J B

V.V'Rl

AUC =
f. bCLi
D

(20)

po

Egalitatea se mai poate folosi i ca algoritm de calcul al clearance- ului


intrinsec pornind de la valorile experimentale ale D i AUCpo:

f B CL ,= D
' AUC o

(21)

167

5.3.1.3 Estimarea fraciei metabolizate


Aplicaia cea mai important a acestor modele o reprezint formula de
calcul, din datele experimentale, a fraciei de medicament ajuns n
circulaia general dup administrarea oral F i metabolism first pass".
Pornind de la relaiile 9 i 23: AUC iv = D
D

AUC oo =
fCL

^QL + f BCL
QJbCL,

po

Q,
, se ajunge pentru fracia absorbit la formula:

F =

AUC

AUC v Ql + f B CL r
(22)
D

Prin definiie CL = i deoarece AUC = , rezult:


' p0 AUCo
Bi'

po

f B CL v

(23)
QL

L ,
QL + CL
i
' ~ p0 .
Notnd ficatul cu indicele H

(24)

H
(25)

168

CLpo = f B CL
F =

sau

F=
D
QH +

AUC po

(26)

169

Not: rezolvare mai comod a ecuaiilor modelului


(11) Rowland
Riegelman folosind notaiile farmacocineticii compartimentale
Se determin AUCiv. pentru modelul bicompartimentat cu eliminare
numai prin metabolizare folosind notaia clasic.
d
k

A B = 12 B + 21 T
dt
d 12 B 21 20 T
A p S$b ki2 + ^21 sQ
dt
( s + k u ) c%b &21 a T
A

Ak

(27)

(28)
&21

(29)

^^t ^20

(30)

12aB + (s + k21 + k20 ) aT = 0

D
0s
a

(31)

k
=

21

20
D

s+k
s

21

(s + k21 + k20 ) (s +

A )( +

(32)

A)

+ 21 + 20

12

( k21 + k20 )
D

f,C
Lr
VT

20

s 0V

(33)

kAUC... lim OL = D (k21 + k20)


V

^ B

(k21 + k20 )

B^1^2

12 (k21

20 ) k12 k21

Bk12 k20

K,r, =
VH
K

21 =

= QL

(34)
(35)

RLVL

(36)
D
AUC iv -

f f'

CL

i<

, QL

37)

170

D (R L f L CL t ,+ QL)= D(CL^Q^
Q, f' CL i R, V
V
VR

Q L f B CLi
Q L f L CL,.R L

171

f B CL v
JBCLV / (QL + FBCL,)
E = "20
F = 120- E
+ =21
---------------------- L
_
Ql + f bCL
5.3.2. Determinarea extraciei hepatice
pentru medicamente lipofile, cu eliminare
exclusiv prin metabolizare
k

(11)

(39)

A. Model fiziologic
B. Model tricornpnrlimental
Figura 44 - Reprezentarea schematic comparativ: A. Modelul fiziologic, B. Modelul
compartimental, unde, C reprezint concentraia n compartiment, V - volumul compartimentului, f
- fracia liber a compusului activ, QT - fluxul de snge prin esut, ClI - clearance-ul intrinsec, iar k12
i k21 sunt constante independente.

Modelul fiziologic a fost descris de ctre Gibaldi i Koup54, dar ecuaia


care descria clearence-ul sistemic era incorect, deci i

54

Gibaldi M, Koup JR. Pharmacokinetic Concepts. Drug Binding Apparent Volume of Distribution and
Clearance, Eur. J. Clin. Pharmacol, 1981, 20, 299-305

172

unele exemple prezentau erori. Tratarea prezent este, de fapt, datorat lui
Wagner55.
Ecuaiile difereniale pentru modelul fiziologic sunt:
q c
c
a
^ = - b b+% t+% l
T
_ Qt

(55)

dC

Ai T B J? T

r
t

at
V

dC

QC L C B i C t
Q

f CL

dt
dA

dt

(56)
L

A,
VB

LB

r
l

Transformnd

concentraiile

RlVl '

cantiti se va obine:

V R

Vb ^
dt
dA L - Q L A -

VB

Qt-Ab - Qt A

dt

(57)

+ L CL

dA

J? J?

t t

Ql + f BCL,

(58)

VlRl

(59)
' (60) Ecuaiile difereniale pentru modelul tricompartimentat, n cazul
administrrii iv:
dA dt
~~7T
12 + 13 B + 31 T + 12 L
(61)
(k

dA

13 AB k31 AT

12

(k

dt

20

)A

(62)
+

21 ) AL

dt

(63)
Prin identificarea coeficienilor din ecuaiile fiziologice i cele
compartimentale se obine:
k

12
13

q v

(64)

q v

(65)

li b
t/ b

b ql + qt
k21 ql/rlvl
q

(66)
(67)

55

Wagner JG. Pharmacokinetics for the Pharmaceutica Scientist, Technomic Publ. Co, Lancester, Base,
1993
173

q
= t/w fCL
k^r, _ '
VlRl
k

(11)

3i

(69)

12 + k13 = Qb/VB

(70)
k

QL + FBCL

20 + 21 =

(71)

VlRl

Aplicnd ecuaiilor compartimentale transformata Laplace se pot


obine urmtoarele relaii pentru compartimentul sanguin:
-

-(
s

b_
AB_

*31

+ k31 )

(72)
k

-(s

0
A

12

13

-(s

21

+ k13 )

20

+ k21)

+
k

31

21

s
-

LUC,

0
+ k31 )

12

-(
s

_ LIM-^- _

D
(s-

( + k31 )k12

-(
s

+ k20

hk21

s
+

31 )(

+ k20

+ k21 )

20 +

+ k21 )[( + k12

*31 )-

+ k13 )( +

^Ol _ _L* ___________________________________ -Dk31 ( k20 + k21 )

b vb 21 31 12 " ( 20 + 21 ) [( 12 + 13 ) 31

( 20 + 21 ) _

-k

13k31 ] 1 * - Dk31 (k20 + k21 )

_ 1 * -Dk31

(73)

B k21k31k12 (k20 + k21 )k12k31 VB k12k31 (k21 - k20 - k21 ) 1 D (k20 + k21 )

^ k12k20

Ecuaiile difereniale pentru modelul tricompartimentat, n cazul


administrrii orale (po):
^L _ - k L
174

dt
dL
dt

(74)
_ kaLa - (k12 + k13 ) LB + k31 LT + k21 LL

(75)

^ _ k13 LB - k31 LT

dt

(76)

175

d = 12 B ( 20 +
A
dt s + k a-D

21 )AL

(82)
k

00
00

31

-(s
0 -

( S + k20 + k2l)

-k a 0
S

aD =

+ a

+ k13 )

( + k12

0
0

13

12

(S + ka ) [k21 (S + k31) k12 - (s + k20 + k21) [(S + k12 + k13 ) (S + k31) - k13k31

31

]]

-(s + 31)
0
0-S

( + 20 + 21)

____________________________________________ Dk k
S
k
a 21 ( + 31)________________________________

k,

D 0
-ka

0- S

( + k20 + 21)

(S + ka ) [k21 (S + k31) k12 - (S + k20 + k21) [(S + k12 + k13 ) (S + k31)


- Dk k

(78)

a 21 31

-k

13 31 ]

AUC = lim ^ = 1
+ 21 ) ( 12 + 13 ) 31
^ _____________________ a 21 31 ____________ ________ =
]
[
]
B a [ 21 31 12 ( 20 + 21 ) 12 31 B 12 31 21 ( 20 + 21 )
= _L*
V

B VB

Dk k

[k

- k

21k31k12 -(k20

[ k

-k

13k31

- Dk

]]
21k31

= (79)

B 20 12

Se observ c expresiile pentru clearence sunt identice pentru


modelul tricompartimental i pentru modelul fiziologic al lui Rowland. Se
vor obtine:
(AUC L=D
(80)

D
CL s =

(40)

Bk12 20 20 +

176

AUC

),

k
21
20 + k21 VB 12
k

20

(81)

ko
(AUC) = k k
\
> po V
20 12

(11)

Vkk
B 12 20

CL

21

(AUC) k
E - k20
po

(83)

20 + 21

(84)

k 21

F -1 - E
k

20 + k21

(85)

Vkk
CL o po

^^o
k

- QLE

20 + k21

nlocuind
constantele
farmacocinetice corespunztoare

AUC , - fiziologice se obine:


QL + .//L
Ql/bCL D - QL/BCL,
CL QL + /BCL
AUC,.
Asemntor i pentru
calea oral:
AUC po - D

(86)
cu constantele

(87)
(88)

po

(89)

/bCL

(90)

CLpo - /B CL''

5.3.3 Estimarea volumului de distributie la echilibru (VS)


Considerm modelul anterior n care administrarea substanei active
se face n perfuzie, cu rata R0.
La starea staionar concentraiile n compartimente sunt constante i
deci derivatele lor se anuleaz. Ecuaiile difereniale ale modelului sunt:
- pentrusscompartimentul B (snge):
dC

177

VB^ - -QLCBB +Q-CL + R- 0

dt

- pentru compartimentul L (ficat):

178

(40)

Rl
(82)

-C ss
Vl

c
L CR = - Ql BB + ^Cl + CL, f L Cls = 0
-

dt

(11)

Aceleai ecuaii, scrise n cantiti, devin: pentru compartimentul B (snge):


-AB

- = -QlASs +-Q^ABs +R0

=0
RlVl
- pentru compartimentul L

dt

(42)

(ficat):

=^ L A s : - dA S

Ql a.

RlVl

Ql_Ass

IlAls = 0

(43)

CL

dt V

Adunnd ecuaiile 45 i 46 se obine formula pentru rata R0 de perfuzie:


CL V
R = fiALS
L
(44)
A ss + A ss
Deoarece prin definiie V- s = -------- , cutam s exprimm cele trei
V

y^SS
C

mrimi extensive n funcie de mrimi "intensive", fiziologice.


f

DeoareceR L = , putem nlocui pe f L cu . Se obine


f

A LL

f B CL
= R0 =
A

(45)

R
1

i deci
VlrlR0

^ss L

VlRl

fBCLv Din ecuaia 45:

(46)

179

(47)
(82)

R0 = QlABs Q^As;
RlVl
ss
B

^ABss =- ^A L + R0 =
V B RlVl l
VlRlIBCLv ^ fBCLi
i deci

180

(40)

Cutam expresia lui A


Ql A = Ql
VlRR
+Ro = Ql

Ass

= Ql

+ R0 (48)

A SS =

QlYC^+ Ro
Jb cli'
Bss =

C=
^ Bss

Vb

QL

= Ro 1 1

11

= R0VB

(11)

fBCLr QL

(50)

QL JBCL,

nlocuind n definiie valorile obinute anterior pentru cele trei mrimi se


obine
VlRLRO

11
+ QL JBCL,

AL =
= VlRlQl

BCLr

= VlRl

BCLiQL

(51)

CB

fBCLffBCLr
R

Ql Ql + JbCL,

AS s + AS s

i, innd cont c A B /C S B =
VB
*-L

V=

Cs

* SS

^c

arta mai departe:

, iz r>

= Vb + VlRl
Ql + jbcl,

ntruct, dup cum se va

(52)

Ql

=F
Ql + JbCL,

avem:

(53)
(54)

V ss = Vb + VLRLF

5.3.4 Estimarea coeficienilor de partiie


Fenomenele de partiie au un rol esenial n farmacocinetica fiziologic
care se bazeaz pe transportul substanelor active i transferul acestora
ctre esuturi.
Am definit anteror un parametru de partiie ntre snge i esut, PRT,
prin relaia:
181

C
P
Rt =
T
C
T

Aparent, acest paramentru poate fi determinat din coeficienii


microscopici de transfer ky din fitarea cu sume de exponeniale a
concentraiilor plasmatice.

182

capitolul

privitor

la
Q

T = VB 12

21

corespondena modelelor fiziologice i


compartimentale, am obinut relaiile:

kk
Rezult de aici c dac am determinat parametrii 12 i 21, i dac tim
volumele compartimentelor, putem determina cu uurin
R
pe t .
n practic, lucrurile nu stau n acest fel, deoarece din considerente, n
primul rnd matematice i care nu fac obiectul acestei lucrri, soluiile la
problema fitrii datelor de concentraie plasmatic nu sunt unice i altgoritmii
de obinere a acestor constante ky nu sunt stabili.
Suplimentar, partiia ntre snge i esut este un fenomen mult mai
complex, o rezultant a partiiei ntre medicamentul liber n plasm i
medicamentul legat de proteine, a partiiei ntre apa extra- i intracelular,
ntre apa intracelular i componente lipoproteice i proteice din celul. Ideea
de constant de partiie provine din termodinamic i este legat esenial de
fenomenele de echilibru.
Este greu de anticipat cinetica de realizare a acestui echilibru i daca
acesta s-a atins sau nu.
Avnd n vedere considerentele de mai sus, estimarea coeficientului de
partiie snge/esut trebuie fcut prin mai multe metode in vitro i in vivo.
1. Faptul c cele mai bune corelaii structur - activitate biologic se obin
pornind de la coeficientul de partiie ap/octanol (corelaiile Hansch),
suntem indreptii s credem c exist un paralelism ntre fenomenele
de transfer i echilibrele la aceast interfa i echilibrele in vivo. Metoda
prezint avantajul major c partiia la interfaa ap/octanol se poate
evalua prin mai multe metode analitice i mai mult dect att, coeficientul
de partiie ap/octanol se poate estima prin calcul pornind de la structura
substanei active i unele proprieti moleculare globale ale acesteia,
relativ uor de evaluat. Restricia major a metodei este aceea c ea
modeleaz, se aplic n primul rnd la partiia ap/lipide i, n particular,
snge/membrane i numai indirect se poate aplica la repartiia apstructuri intracelulare.
2. O metod in vitro realizabil ceva mai uor, const n punerea n contact
a unei soluii apoase a substanei active (care simuleaz starea
termodinamic a substanei active nelegat n snge), cu un omogenat
183

de organ. Desigur ns, c organul mort i maltratat

184

nu se va mai comporta identic cu cel in vivo. Din acest motiv i aceast


metod este privit ca o metod de estimare a distribuiei in vivo. 3. Una
din partiiile ceva mai uor de evaluat este cea ntre ap i proteinele
plasmatice. Legarea de proteine aceasta se poate face dat fiind prezena
n moleculele proteinelor de grupri ionizabile, de atomi de hidrogen, de
poriuni hidrofobe, neexistnd un model unic, specific, de legare.
Experimental, evidenierea fixrii medicamentelor pe proteine ct i
evaluarea cantitii fixate se poate face prin dializ printr-o membrana ce nu
este permeabil pentru proteine i este permeabil pentru substanele
amfipatice, prin ultracentrifugare, prin ultrafiltrare, vscozimetrie,
electroforez etc.
S-au studiat interaciunile unor sruri cuaternare de amoniu
9

bactericide cu monostraturi de gliadin (proteina principal din peretele


bacteriilor Gram negative) i cefalin (fosfolipid cu multe grupri acid i, n
consecin, ncrcat negativ) care apar n compoziia acelorai membrane.
Faptul c la filmele de gliadin se modific i presiunea interfacial i
potenialul transinterfacial pledeaz pentru ptrundere i ancorare la presiuni
mici i adsorbie prin legtura hidrofob la presiuni mari, cnd probabil
radicalul alchil al substanei bactericide se leag de protein.
Interaciunea ionic cu aminoacizii duce in vivo la ruperea membranei.
La filmele de gliadin - cefalin, ce vin s simuleze peretele bacteriilor
Gram negative, nu mai apare asocierea, sarea cuaternar de amoniu fiind
exclus la presiuni mari, rmnnd totui ancorat de cefalina. Deci, cefalina
ar fi cea care confer protecie bacteriilor Gram negative fa de substanele
bactericide din grupul srurilor cuaternare de amoniu. Adugarea de
protamin - ncrcat pozitiv - care interacioneaz cu cefalina, nltura
aceasta protecie.
Asocierea cefalin - sare cuaternar de amoniu este sugerat i de
faptul c o soluie n care sunt amndou prezente are o conductivitate
electric mai mic dect soluiile care conin numai una din cele dou
componente.
Uneori legarea de proteine este indirect, referindu-se mai curnd la
apa inclus n moleculele proteice i ducnd la modificarea solvatrii
proteinelor. Toate substanele amfipatice se adsorb la interfaa proteine plasm avnd o afinitate mai mare pentru interfa dect apa, ceea ce are
urmri importante asupra farmacocineticii acestor molecule.
Ele se vor adsorbi i n membrane la interfaa lipide-proteine cu
consecine asupra stabilitii i functionalitii acestora. Aceste din urma
interaciuni sunt ns mai greu de evaluat datorit solubilitii reduse n ap,
att a lipidelor ct i a majoritii proteinelor.
185

Aceste interaciuni capt o deosebit importan atunci cnd


proteinele respective sunt enzime. De exemplu interaciunea mai multor
substane amfipatice cu ribonucleaza A duce la o scdere dramatic a
activitii acesteia cnd concentraia substanei amfipatice atinge un anumit
prag56. Mecanismul ar putea fi tot prin modificarea "hidratrii proteinelor",
hidratare care este responsabil se pare de stabilizarea lor, dup cum o
sugereaz studiile de asociere a aminoacizilor in diveri solveni. Astfel ntre
grupele NH i grupele C=O se stabilesc legturi de hidrogen att direct ct i
prin intermediul moleculelor de ap, proporia ntre cele dou tipuri de legturi
depinznd n primul rnd de concentraia aminoacizilor respectivi:
NH...H2O + OH2...O=C ^ NH...O=C + H2O liber
Aceste legturi au fost puse n eviden57 n cazul N-metil acetamidei n
cloroform, dioxan i ap.
Asocierea crete astfel cu creterea concentraiei de aminoacid i cu
creterea polaritii solventului.
Claude Bernard nsui a emis idea unei "coagulri reversibile" a
proteinelor ca fiind cauza unor schimbri de conformaie reversibile Acesta ar
putea fi mecanismul prin care sunt influenate procese enzimatice cum ar fi
oprirea mitozei de ctre narcotice58
Fenotiazinele se leag de albumina seric bovina, existnd o corelaie
foarte bun ntre raportul medicament legat/medicament liber i coeficientul
de partiie ap/octanol al medicamentului.
Excepii de la aceasta regul fac prometazina i trimeprazina probabil
datorit faptului c se leag de partea hidrofob a albuminei numai prin unul
din cele dou inele benzenice.
O deviaie n sens contrar o reprezint o serie de derivai de penicilin
care se leag prin dou grupri de albumin: prin radicalul

56

MN Jones, BiologicalInterfaces, ElsevierPubl. Comp., 1975


C Klotz , J Franzen, Hydrogen bounds between model peptide groups in solution, J Am. Chem.
Soc., 84, 3461, 1062
58
J Nun, Jlovis, K Kmbal, Arrests of mytosis by halothane , Brit. J. Anesth., 43, 524, 1971
57

186

hidrocarbonat i prin gruparea -C(CH3)2 radicalul R fiind att alifatic ct i


aromatic59.
4. O metoda mixt in vivo - in vitro ar putea consta n administrarea in vivo a
medicamentului la animale de experien, urmat de sacrificarea
acestora, separarea organelor i msurarea concentraiei active n
acestea. Rezultatele sunt, probabil, mai aproape de situaia real in vivo,
dar nu avem garania c la momentul sacrificiului animalelor se atinsese
starea de echilibru. Deci metoda este n principal aplicabil pentru
substanele pentru care bnuim c acest echilibru se atinge foarte rapid
comparativ cu fenomenele de transport asociate fluxului sangvin.
5. O metod de tip esenial in vivo este cea prezentat anterior de
administrarea continu n perfuzie, pn la obinerea unei concentraii
relativ constante n snge. n acest caz se poate msura efectiv
concentaia la stare staionar" n snge i estima indirect concentraia
la stare staionar" n organ.
6. Exist evident o legatur ntre volumul de distribuie i fenomenele de
partiie ntre compartimentul apos i alte compartimente. Faptul c la
foarte scurt timp (de ordinul minutelor) dup administrare, concentraia
unor substane active n snge este foarte mic, indic o distribuie
foarte rapid a acestora cu atingerea echilibrului. Concentraia iniial"
dedus prin calcul, reprezint o concentraie de echilibru.
7. Calculul unui coeficient de partiie farmacocinetic" definit, prezentat n
continuare.
Transferul intercompartimental este dat de legea lui Fick:

=t

h (- C )

unde hij sunt constantele de permeabilitate ntre compartimentele i i


j;
Concentraiile Ci se pot scrie ca raport ntre cantitile de substan
activ i volumele compartimentelor. Ecuaiile de transfer devin n acest caz :
f

^ A,. ^

dA
v

Z hV

-t &
Definim n continuare parametrii:

59

R Rekker, Hydrophobic aspects of binding, in "Biological Activity and Chemical Structure


", IUPAC - IUPHAR Symposium, ed. JA Keverling Buisman, Elsevier Pub Comp, 231-250, 1977
187

V
-A
k.. = h^ i K = y h. .
i i v ii i
1

j i*j

dA
Ecuaiile de transfer se pot scrie: L = y k j i A j ( t ) - K 1 A 1 (t) .
n

dt

i* j

Aceste ecuaii pot fi interpretate stochastic, kij fiind probabilitatea ca


particulele din compartimentul i s treac n compartimentul j. Dac vom
ignora relaia ntre ky i kji vom considera implicit cele dou probabiliti
ca fiind independente. Modelul este mult mai general, dar i pierde o parte
din semnificaia fenomenologic, deoarece se pierd volumele
compartimentelor, iar constantele de transfer nu mai sunt n acest caz legate
de activitile termodinamice ale substanei active n cele dou
compartimente, i i j. Deoarece la echilibru activitile n compartimentele
nvecinate sunt egale, constantele kij i kji nu sunt independente, raportul lor
trebuind s fie egal cu coeficientul de partiie al substanei active ntre cele
dou compartimente, coeficient pe care l putem numi coeficient de partiie
farmacocinetic. Pierderea de informaie este compensat de uurarea
calculelor pentru identificarea parametrilor de transfer, cu ajutorul metodelor
de tip cele mai mici ptrate" fr restricii. Pe de alt parte, este de menionat
c parametrii kji pot fi interpretai ca fracia de substan din compartimentul i
care se tranfer n unitatea de timp, n compartimentul j.

5.4 APLICAII I LIMITRI


ALE FARMACOCINETICII FIZIOLOGICE

Modelele farmacocineticii fiziologice referitoare la concentraia i


distribuia tisular se bazeaz pe datele de anatomie i fiziologie.
n cazul cnd sunt implicate mai multe specii, modelele fiziologice pot
estima farmacocinetica unui medicament doar n momentul n care exist
date din studiile de la animale de laborator. Modelele fiziologice pot descrie
modificri n legarea medicamentelor de proteinele plasmatice, n partiia
medicamentului la nivel tisular i n clearance-ul intrinsec hepatic.
Majoritatea studiilor farmacocinetice sunt modelate pe baza probelor
de snge venos, dup administrarea medicamentului pe cale intravenoas
sau per os.
| 5.4.1 Scalarea ntre specii _____________________________________
Pentru compararea ntre specii a toxicitii i farmacocineticii unor
substane au fost utilizate diverse metode. Scalarea ntre specii este o
metod utilizat n toxicocinetic i pentru extrapolarea la om a dozelor
188

terapeutice obinute din studiile pe animale de laborator. Toxicocinetica este


partea farmacocineticii care are aplicabilitate n toxicologie.
Scalarea ntre specii se bazeaz pe presupunerea c exist similariti
din punct de vedere anatomic, fiziologic i biochimic. Se pornete de la
presupunerea conform creia constante fiziologice, cum ar fi clearance,
frecvena cardiac, greutatea unor organe i procese biochimice, sunt
dependente de greutatea sau suprafaa corporal a speciei respective
(inclusiv pentru om). De asemenea se presupune c toate mamiferele
utilizeaz aceeai surs de energie (oxigenul) i aceleai sisteme de
transport energetic.
Scalarea ntre specii utilizeaz o variabil fiziologic, notat y, care
este reprezentat grafic n funcie de greutatea corporal a speciei, ntr-un
sistem de axe logaritmice care permit transformarea datelor ntr-o relaie de
tip linear. Ecuaia general alometric este de forma:

y = bW a
unde y este parametrul farmacocinetic sau fiziologic de interes, b este un
coeficient alometric, iar a este exponentul alometric. Alometria studiaz
mrimea.
Att a, ct i b variaz n funcie de medicament. n cazul a cinci specii
de animale s-a gsit c pentru metotrexat exist urmtoarea relaie ntre
volumul de distribuie i greutatea corporal60:

V p = 0,859B0'918
Metoda alometric furnizeaz o ecuaie empiric, dar care permite o
scalare aproximativ ntre specii, pe baza mrimii speciei. Ecuaia nu ine
cont de o serie de diferene ntre specii cum ar fi genul, starea de nutriie,
calea de administrare, modificrile fiziopatologice, polimorfismul. n unele
cazuri, unele dintre aceste condiii, de exemplu, diferenele fiziopatologice
dintre om i animale, pot mpiedica prediciile farmacocinetice sau
alometrice.
Scalarea ntre specii a fost mbuntit prin luarea n considerare a
vitezei de mbtrnire i a speranei de via a speciei. n termeni fiziologici,
fiecare specie prezint sperana de via proprie, potenialul su maxim de
speran de via (numit MLP sau maximum life-span potential), care este
determinat genetic. Abordarea alometric a fost aplicat medicamentelor
care sunt eliminate n principal prin clearance intrinsec hepatic, deoarece
exist o variaie invers ntre viteza de mbtrnire sau sperana de via a
speciei i multe dintre procesele biochimice consumatoare de energie,

60

Boxenbaum H. Interspecies scaling, allometry, physiological time, and the ground plan of
pharmacokinetics. J Pharmacokinet Biopharm. 1982 Apr;10(2):201-27.
189

inclusiv metabolizarea medicamentelor. De exemplu, datele de clearance


intrinsec hepatic al biperidenului obinute la oarece, iepure i cine au fost
extrapolate la om pe baza unei ecuaii care include greutatea corporala i
MLP.

CL.

0 892

x MLP = 1,36 x 10 x B '


unde MLP este maximum
life-span potential al speciilor, B este greutatea corporal a fiecrei specii, iar
Clint este clearance intrinsec hepatic al fraciei de medicament libere61.
Aplicarea MLP la farmacocinetic a fost descris de ctre Boxenbaun,
n 1982. Iniial s-a luat n consideratie relaia ntre clearance-ul intrinsec
hepatic i volumul sau greutatea corporal. Reprezentarea grafic a
logaritmului clearance-ului medicamentului n funcie de greutatea corporal,
n cazul diferitelor specii de animale, a dus la obinerea unei corelaii
aproximativ liniare (o linie dreapt). Totui, dup corectarea clearance-ului
hepatic intrinsec, cu ajutorul MPL, s-a obinut o mbuntire a reprezentrii
grafice log lineare a clearance-ului hepatic intrinsec al fraciei libere de
medicament n funcie de greutatea corporal, pentru un numr mai mare de
substane. Animalele cu MLP scurt prezint un metabolism bazal crescut, un
clearance hepatic intrinsec mult mai mare i o metabolizare mai rapid a
medicamentelor.

5.4.2 Limitri ale farmacocineticii fiziologice


Modelele necesit un complex de informaii n vederea implementrii.
De asemenea, expresia matematic este frecvent mult mai complicat, iar
valorile anumitor parametrii sunt uneori greit evaluate sau nu sunt
disponibile n cazul anumitor rase, specii sau stri patologice.

6. BIBLIOGRAFIE
Aiache J.M., Besner J.G., Buri P., Leblanc P.P., Lesne M., Traite de Biopharmacie et
Pharmacocinetique, ed., 44 - 47, (1990)
Amidon G.L., Lennernas H., Shah V.P., Crison J.R., A theoretical basis for a
biopharmaceutic drug classification: the correlation of in vitro drug product dissolution and in
vivo bioavailability, Pharm Res., 12(3):413-20, (1995).
Beetge E., du Plessis J., Muller D.G., Goosen C., van Rensburg F.J., The influence of
the physicochemical characteristics and pharmacokinetic properties of selected NSAID's on
their transdermal absorption, Int J Pharm.,193(2):261-4, (2000).

61

Nakashima E, Yokogawa K, Ichimura F, Kurata K, Kido H, Yamaguchi N, Yamana T. A physiologically


based pharmacokinetic model for biperiden in animals and its extrapolation to humans. Chem Pharm Bull
(Tokyo). 1987 Feb;35(2):718-25.
190

Benga G., Popescu O., Borza V., Pop V.l., Muresan A., Mocsy I., Brain A.,
Wriggleworth J.M., Water permeability of human erythrocytes. Identification of membrane
proteins involved in water transport, Eur J Cell Biol, 41, 252-262, 1986
Benga G., Popescu O., Pop V.l., Holmes R.P., p-(chlormercury) benzensulfonate
binding by membranes proteins and the inhibition of water transport in human
erythrocytes,Biochemistry 25, 1535-1538, 1986.
Bischoff K.B., Dedrik R.L., Zaharko D.S., Longstreth J.A., J Pharm Sci, 60, 1129,1971.
Bischoff K.B., Dedrik R.L., Zaharko D.S.: Preliminary model for methotrexate
pharmacokinetics, J Pharm Sci, 59, 149-154, 1970.
Blank I.H., Scheuplein R.J., in Progress in Biological Sciences in Relation to
Dermatology, A Rook, R Champion eds, Univ. Press Cambridge, England 1964.
Bogaert M.G.: Clinical Pharmacokinetics of Glyceryl Trinitrate Following the Use of
Systemic and Topical Preparations, Clin Pharmacokinet 12, 1-11, 1987
Boxenbaum H., Interspecies scaling, allometry, physiological time, and the ground plan
of pharmacokinetics. J Pharmacokinet Biopharm. 1982 Apr;10(2):201- 27.
Chimadzev Y.. Structural rearrangements in lipid bilayer membranes, in Electrified
Interfaces in Physics, Chemistry and Biology. Kluwer Acad. Publ. Dordrecht, Boston, 1992,
491-507.
Chow, S.C. & Liu, J.P., Design and analysis of bioavailability and bioequivalence
studies. New York, Marcel Dekker, 1992.
Christensen B., Fink J., Merrifield R.B., Mauzerall D., Channel-forming properties of
cecropins and related model compounds incorporated into planar lipid membranes. Proc Natl
Acad Sci U S A. 1988 Jul;85(14):5072-6.
th
Craig C.R., Stitzel R.E., Modern Pharmacology with Clinical Applications, 5 ed., 2005
Deuticke B. Transformation and restoration of biconcave shape of human erythrocytes
induced by amphiphilic agents and changes of ionic environment. Biochim Biophys Acta. 1968
Dec 10; 163(4):494-500.
Dobler M., Dunitz J.D., Krajewski J., Structure of the K+ complex with enniatin B, a
macrocyclic antibiotic with K+ transport properties. J Mol Biol. 1969 Jun 28;42(3):603-6.
Feldman R.J., Maibach H.I., J Invest Dermatol, 52,89,1969
Finkelstein A., Holz R., Aqueous pores created in thin lipid membranes by the polyene
antibiotics nystatin and amphotericin B. Membranes. 1973;2:377-408.
Florence A.T., Attwood D., Physicochemical principles of pharmacy, 334 - 342, (1993).
Flynn G., Yalkowski S., Roseman T.J.: Mass transport phenomena and models:
theoretical concepts, J Pharm Sci, 63(4), 479-509, 1974.
Forsov A.A., Piotrovski V.K., Methods for estimating drug bioavailability parameters,
Part 3: Peculiarities of pharmacokinetic analysis in assessment of bioavailability, Die
Pharmazie, 41, 7, 457 - 465, (1986).
Gibaldi M., Boyes R.N., Feldman S., Influence of first pass effect on availability of drugs
on oral administration. J Pharm Sci: 60: 1338-40,1971
Gibaldi M., Koup J.R.. Pharmacokinetic Concepts. Drug Binding Apparent Volume of
Distribution and Clearance, Eur. J. Clin. Pharmacol, 1981, 20, 299-305.
Gibaldi M., McNamara P.J., Apparent volumes of distribution and drug binding to
plasma proteins and tissues, Eur J Clin Pharmacol., 13(5), 373-80, (1978).
Goldman P., Effect of bioavailability on dose-response relationships, Am J Med.,
77(5A), 47-51, (1984).
Goodman & Gilmans, The Pharmacological Basis of Therapeutics, 11 th edition, 2006.
Grecu I., Sandulescu R., Echivalenta medicamentelor, Ed.Dacia (1985).
Guentert T.W., Stebler T., Banken L., Defoin R., Schmitt M., Relative biavailability of
oral dosage forms of tenoxicam, Arzneimittalforschung, 44(9), 1051-4, (1994).

191

Hansch C., Leo A., Mekapati S.B., Kurup A., QSAR and ADME, Bioorganic & Medicinal
Chemistry, 12, 3391-3400 (2004).
Hansch C., Muir R., Fujita T., Maloney P., Greyger F., Streich M., The Correlation of
Biological Activity of Plant Growth Regulators and Chloromycetin Derivatives with Hammett
Constants and Partition Coefficients. J. Am. Chem. Soc., 1968, 85 (18), 2817-24
Hansch C., Muir R., Fujita T., Maloney P., Greyger F., Streich M., The Correlation of
Biological Activity of Plant Growth Regulators and Chloromycetin Derivatives with Hammett
Constants and Partition Coefficients. J. Am. Chem. Soc., 1968, 85 (18), 2817-24.
Hidalgo I.J., Assessing the Absorption of New Pharmaceuticals, Current Topics in
Medicinal Chemistry, 1, 385-401(2001).
Higuchi T.: Mecanism of sustained action medication. Theoretical analysis of rate of
release of solid drugs in matrices, J Pharm Sci, 52(12),1145-9, 1963
Higuchi T.: Rate of release of medicaments from ointment bases containing drugs in
suspension, J Pharm Sci , 50(10), 874-875, 1961
Hodgkin A.L., Huxley A.F., A quantitative description of membrane current and its
application to conduction and excitation in nerve. 1952. Bull Math Biol. 1990;52(1-2):25-71.
Hodgson E., A textbook of Modern Toxicology, 3rd edition, 2004.
Ionescu M., Mircioiu C., Voicu V.: Inhibition of the percutaneous absorption of o,
o-dimethyl -o - dichlorvinyl phosphate by adsorptive powders, "Perspectives in Percutaneous
Penetration", (K. Brain, V. James, K. Walters edts) STS Publishing, Cardiff, vol. 5B,
pp.258-260, 1998
Jensen K.M., Mikkelsen S.: Studies on the Bioavailability of Glycerol Trinitrate after
Sublingual Administration of Soray and Tablet, Arzneim - Forsch/Drug Res, 47(I), nr. 6, 716-8,
1997
Jones M.N., Biological Interfaces, Elsevier Publ. Comp., 1975.
Klotz C., Franzen J., Hydrogen bounds between model peptide groups in solution, J
Am. Chem. Soc., 84, 3461, 1062.
Kopelman R.: Fractal reaction kinetics, Science 241, 1620-1626, 1988
Krishan K., Andersen M.E., Interspecies Scaling in Pharmacokinetics. In New Trends in
Pharmacokinetics, edited by A Rescigno and AK Thakur (Plenum Press, New York, 1991), pp.
203-226.
Langenbucher F.: Linearization dissolution rate curves by the Weibull distribution, J
Pharm Pharmacol, 24, 979-981, 1972.
Leucuta S., Farmacocinetica n terapia medicamentoas, Ed.Medicala (1989).
Leucuta S., Pop R.D., Farmacocinetica, Ed.Dacia (1981).
Lin JH and Lu AY (1997) Role of pharmacokinetics and metabolism in drug discovery
and development. Pharmacol Rev 49:403-449.
Lipinski C.A. et all, Lipinski rule of five, Adv. Drug Deliv. Rev., 23, 3-25, (1997).
Macheras P., Dokoumetzidis A.: On the heterogenity of drug dissolution and drug
release, J Pharm Res, 17(2), 108-112, 2000
Macheras P.: Characterization of the plasma profile: Wht are the choices?, APV
Workshop on Bioequivalence, Frankfurt, 9 March, 1999.
Marinez M., Amidon G., A Mechanistic Approach to Understanding the Factors
Affecting Drug Absorption: A Review of Fundamentals, J. Clin. Pharm., 42:620-643, (2002).
Marzo A., Rescigno A., Pharmacokinetics of endogenous substances: some problems
and some solutions, Eur J Drug Metab Pharmacokin, 18, 77-88, (1993).
Mauvais-Jarvis P., Kuttem F., Wright F.: La progesterone administree par vois
percutanee, Ann Endrocrin (Paris) 36, 55-62, 1975
Mazumdar J., An Introduction to Mathematical Physiology and Biology, 1132, (1989).

192

Mehvar R., Interdependecy of pharmacokinetic parameters: A chicken-and- egg


problem? Not!, J.Pharm.Pharmaceut.Sci., 9(1): 113-118, (2006).
Mircioiu C., Perju A., Grau E., Calin G., Neagu A., Enachescu D., Miron D.S.:
Pharmacokinetics of progesterone in postmenopausal women: II. Pharmacokinetics following
percutaneous administration, Europ. J. Drug Metab. Pharmacokin., 23(3), 397-402, 1998.
Mircioiu C.: Release of drug from an infinite reservoir. An alternative method to derive
the square root (Higuchi law), 6th International Perspectives in Percutaneous Penetration
Conference, Leiden, (1998).
Mircioiu C.: Transfer phenomena in pharmacokinetics, International symposium on
Bioavailability, Pharmacokinetics and Toxicokinetics in Drug Development, (1999).
Miron DS, Mircioiu C.: Seminarii de matematici aplicate in farmacie, Bucuresti, edit.
Tehnoplast, 76-103, (2000).
Mueller P., Rudin D.O. Development of K+-Na+ discrimination in experimental
bimolecular lipid membranes by macrocyclic antibiotics. Biochem Biophys Res Commun. 1967
Feb 21;26(4):398-404.
Murgulescu I.G., Segal, E.: Introducere in chimia fizica. Teoria cinetico - moleculara a
materiei, vol. II,1; 92-98, Edit. Academiei, Bucuresti, (1979).
Nakashima E., Yokogawa K., Ichimura F., Kurata K., Kido H., Yamaguchi N., Yamana
T., A physiologically based pharmacokinetic model for biperiden in animals and its
extrapolation to humans. Chem Pharm Bull (Tokyo). 1987 Feb;35(2):718-25.
Nun J., lovis J., Kmbal K., Arrests of mytosis by halothane , Brit. J. Anesth., 43, 524,
1971.
Olkkola T., Brunetto A.V., Mattila M.J., Pharmacokinetics of oxicam nonsteroidal
anti-inflamatory agents, Clin.Pharmacokinet., 26(2), 107-20, (1994).
Perrier D., Gibaldi M., Clearance and biological half-lives as indices of intrinsec hepatic
metabolism. J Pharmacol Exp Ther 191,17-24,1974.
Quintus: Phenomenes de transport, Hermann, , 14-25, 55-74, 217, (1990).
Polli J.E., Crison J.R., Amidon G.L., Novel approach to the analysis of in vitro-in vivo
relationships, J Pharm Sci., 85(7):753-60, (1996).
Rekker R., Hydrophobic aspects of binding, in "Biological Activity and Chemical
Structure ", IUPAC - IUPHAR Symposium, ed. JA Keverling Buisman, Elsevier Pub Comp,
231-250, 1977
Remington, The Science and Practice of Pharmacy, editia a-19-a, Mack Publishing
Company, Easton, Pennsylvania, vol I., 206, 260, (1995).
Rescigno A., Bushe H., Brill A.B., Rusckowski M., Griffin T.W., Hnatowich D.,
Pharmacokinetic Modellind of Radiolabeled Antibody Distribution in Man, Am J Physiologic
Imaging 5,141-50 (1990)
Rescigno A., Foundation of Pharmacokinetics, Kluwer Academic, New York,
2003.
Rescigno A., Gurpide E., Estimation of average time residence, recycle and
interconversion of blood-borne compounds using tracer kinetics, J Ckin Endocrinol Metab, 36,
263-76 (1973).
Rescigno A., Lambrecht R.M., Duncan C.C., Mathematical methods in the formulation
of pharmacokinetic models, in Lambrecht, Rescigno (eds.), Tracer kinetics and physiologic
modeling, Berlin, Springer-Verlag, 59-119.
Rescigno A., Segre G.: Cinetica dei farmaci e dei traccianti radioattiv, Boringhieri,
Torino, 1961.

193

Rescigno A., Lambrecht R.M., Duncan, CC : Mathematical methods in the formulation


of pharmacokinetic models , in Lambrecht, Rescigno (eds.), Tracer kinetics and physiologic
modeling, Berlin, Springer-Verlag, 59-119.
Rescigno A., Thakur A.K., Marzo A., On definition and use of term bioavailability,
Arzneim.-Forsch,44, 1167-1169, (1994).
Rowland M., Benet L.Z., Graham G.G.: Clearance concepts in Pharmacokinetics J.
Pharmacokin. Biopharm. 1.123 - 136, 1973.
Rowland M., Riegelman S., 168. "Pharmacokinetics of Acetylsalicylic Acid and Salicylic
Acid after Intravenous Administration in Man,"J. Pharm.Sci., 57:13131319.
Sathe P.M., Tsong Y., Shah V.: In vitro dissolution profile comparison: statistics and
analytics, model dependent approach, Pharm Res 13, 1799-1803, 1996.
Sawada Y., Hanano M., Sugiyama Y., Iga T., Prediction of the disposition of nine
weakly acidic and six weakly basic drugs in humans from pharmacokinetic parameters in rats,
J Pharmacokinet Biopharm., 13(5):477-92, (1985).
Scheuplein R., Blank I.: Permeability of the skin, Physiol Rev, 51,702, 1971.
Schmidt D., Lynch J., MultiScreen Filter Plates for PAMPA and Permeability Assays,
Data review and optimization of PAMPA and Permeability Assays, Millipore Corporation Inc.,
(2003).
Sheetz M.P., Singer S.J. Biological membranes as bilayer couples. A molecular
mechanism of drug-erythrocyte interactions. Proc Natl Acad Sci U S A. 1974 Nov;
71(11):4457-61.
Smith B.L., Agre P.: Erythrocyte Mr 28,000 transmembrane protein exists as a
multisubunit oligomer similar to channel proteins, J BiolChem, 266, 6407-6415.
Sugano K., Nabuchi Y., Machida M., Aso Y., Prediction of human intestinal permeability
using artificial membrane permeability, Int J Pharm., 257(1-2), 245-51, (2003).
Teorell T., Kinetics of Distribution of Substances Administered in the Body, Arch Int
Pharmacod Ther 57, 205-25, (1937).
Timmerman P.M.M.B.L., de Vries R. and Ingelse B.A., Tailoring Bioanalysis for PK
Studies Supporting Drug Discovery, Current Topics in Medicinal Chemistry, 1, 443-461
(2001).
Veber D.F., Johnson S.R., Cheng H.Y., Smith B.R., Ward K., Kopple K., Molecular
Properties That Influence the Oral Bioavailability of Drug Candidates, J. Med. Chem., 45,
2615-2623, (2002).
Vickers C., Arch. Dermatol. 88, 20,1963.
Voicu V., Mircioiu C. - Mecanisme farmacologice la interfete membranare. Interactiuni
finite medicamente - interfete biologice, Ed. Academiei Romane, Bucuresti, 1994.
Voicu V., Mircioiu C., Jiquidi M., Gref R., Olteanu M.: Studies concerning some effects
of drugs, colloid vectors for drugs and decorporators on some physicochemical parameters of
blood, in T. Sohns, V. Voicu (edts): NBC Risks. Current Capabilities and Future Perspectives
for Protection, Kluwer Academic, Amsterdam, 1999, p. 311-330.
Wagner J.G., Pharmacokinetics for the Pharmaceutica Scientist, Technomic Publ. Co,
Lancester, Base, 1993.
Wilkinson G.R., Shand D.G., A physiologic approach to hepatic drug clearance. Clin
Pharmacol Ther 18 , 77-90, 1975.
William S., Mathematical Techniques for Biology and Medicine, 84-109, 161208,
(1986).
Yuksel N., Karatas A., Ozkan Y., Savaser A., Ozkan S.A., Baykara T., Enhanced
bioavailability of piroxicam using Gelucire 44/14 and labrasol: in vitro and in vivo evaluation,
Eur. J. Pharm. Biopharm.,56(3):453-9, (2003).

194

*** - European Pharmacopeia, European Directorate for the Quality of Medicines


(EDQM), Council of Europe, The fifth edition, Strasbourg, Cedex 1, France, 2005.
*** - The United States Pharmacopeia, The United States Pharmacopeial Convention,
12601 Twinbrook Parkway, Rockville, MD 20852, 29, 2006.

7. CUPRINS
| PREFATA

| BIOFARMACIE

| INTRODUCERE IN BIOFARMACIE SI FARMACOCINETICA

| 1. DIZOLVAREA. CINETICI SI METRICI DE DIZOLVARE


1.1 Dizolvarea substantelor din cristale sau din tablete
1.2 Cinetici de dizolvare
1.3 Dizolvarea din matrite inerte. Legea radicalului
1.4 Metrici. Similaritate si Disimilaritate. Masuratori
1.5 Normalizarea datelor
1.6 Prevederi generale ale USP 26 si EP 4
privind testarea parametrilor de dizolvare
1.7 Aplicatii
| 2. ABSORBTIA MEDICAMENTELOR

10
10
10
16
18
20
91 21
34
38

2.1 Aspecte generale

38

2.2 Biodisponibilitatea

39

2.3.1 Factori dependenti de substanta medicamentoasa


2.3.2 Factori dependenti de forma farmaceutica
2.3.3 Factori fizio-patologici
2.3.4 Factori metabolici

2.4 Mecanisme de absorbtie


2.4.1 Difuzia pasiva
2.4.2 Transportul activ
2.4.3 Transportul facilitat
2.4.4 Transportul prin perechi de ioni
2.4.5 Pinocitoza
2.4.6 Modele combinate de absorbtie

40
40
40
40

41
42
43
44
45
45
45

2.5 Influenta caracteristicilor structurale asupra


fenomenelor de absorbtie

46

2.5.1 Coeficientul de partitie apa/lipide


2.5.2 Regula lui Lipinski - Regula celor 5
2.5.3 Permeabilitatea
2.5.4 Sistemul de clasificare biofarmaceutic - BCS

46
47
52
55

AR

195

2.6 Sisteme micelare i rolul lor in procesul de absorbtie

56

2.6.1
2.6.2
2.6.3
2.6.4
2.6.5

56
57
59
60
62
65
65
69
69
69
69

Sistemele micelare
Concentratia micelara critica
Determinari calitative asupra sistemelor micelare
Tensioactivi endogeni
Rolul tensioactivilor in absorbtie

2.7 Caracteristici ale cailor de administrare


2.7.1
2.7.2
2.7.3
2.7.4
2.7.5
2.7.6

Absorbtia orala
Absorbtia parenterala
Absorbtia intramusculara
Absorbtia vaginala
Absorbtia percutana
Modele teoretice privind absorbtia.
Modele experimentale in-vitro pentru studiul absorbtiei

70

3. TRANSFERUL INTERFACIAL
SI DISTRIBUTIA MEDICAMENTELOR
3.1 Cmpul de forte al interfetelor
3.2. Limitele termodinamice ale transferului

73
73
75

3.2.1 Coeficientul de partitie

75

3.3
3.4
3.5
3.6
3.7
3.8
3.9

76
77
77
78
80
81
83

Transferul prin difuzie in faze continue


Transferul prin difuzie la interfata
Transferul interfacial i transmembranar
Transferul "coloidal"
Transferul prin canale
Antibiotice formatoare de canale
Aplicatii

3.9.1 Transport prin membrane permeabile


3.9.2 Transportul oxigenului din capilarele sanguine
in mediul tisular
3.9.3 Hemodializa

83
87
91

FARMACOCINETICA ______________________________________________ 93_


4. ANALIZA FARMACOCINETICA

4.1.1 Descrierea modelului monocompartimental


4.1.2 Descrierea modelului bicompartimental
4.1.3 Eliminarea
4.1.4 Volumul aparent de distributie
4.1.5 Clearance
4.1.6 Timpul de injumatatire
4.1.7 Cinetici de saturare
4.1.8 Evaluarea biodisponibilitatii

95

96
97
98
99
10
0
10
2
10
2
10
4

196

4.1 Farmacocinetica clasica


- modele farmacocinetice compartimentale

9
5

197

4.2 Rezolvarea ecuatiilor farmacocinetice

106

4.2.1 Modelul monocompartimental - administrare intravenoasa


106
4.2.2 Modelul monocompartimental
109 -administrare extravasculara
4.2.3 Modelul bicompartimental deschis
112
cu administrare extravasculara

4.3 Determinarea parametrilor farmacocinetici

116

4.3.1 Modelul farmacocinetic monocompartimental,


cazul administrarii i.v. in bolus
4.3.2 Modelul farmacocinetic monocompartimental,
cazul administrarii extravasculare

116
119

4.4 Modele farmacocinetice degenerate 122 cazul metabolitilor nicergolinei


FARMACOCINETICA FIZIOLOGICA_________________________________ 125_
5. INTRODUCERE IN FARMACOCINETICA FIZIOLOGICA

127

5.1. Parametrii fiziologici ai farmacocineticii

128

5.1.1
5.1.2
5.1.3
5.1.4
5.1.5
5.1.6
5.1.7
5.1.8
5.1.9

Fluxul sanguin
Coeficientul de partitie
Clearance-ul
Volumul de distributie i factorul de dilutie
Timpul de recirculare (turnover time)
Timpul de permanenta
Timpul de rezidenta
Timpul de ieire
Timpul de transfer

128
128
128
139
141
145
145
146
147

5.2 Modelarea farmacocinetica fiziologica

148

5.2.1 Modelarea fizico-chimica Teorell


5.2.2 Modele empirice
5.2.3 Modele farmacocinetice fiziologice

148
150
151

5.3 Identificarea paarametrilor fiziologici

161

5.3.1 Evaluarea extractiei hepatice dupa administrare p.o.


161
5.3.2 Determinarea extractiei hepatice pentru medicamente lipofile, 168 cu eliminare
exclusiv prin metabolizare
5.3.3 Estimarea volumului de distributie la echilibru
172
5.3.4 Estimarea coeficientilor de partitie
174

5.4 Aplicatii si limitari ale farmacocineticii fiziologice

180

5.4.1 Scalarea intre specii


5.4.2 Limitari ale farmacocineticii fiziologice

181
182

6. BIBLIOGRAFIE _______________________________________________ 183_


7. CUPRINS
188
1
A Rescigno, G Segre: Cinetica dei farmaci e dei traccianti radioattiv, Boringhieri, Torino, 1961.
9
Leucuta S., Farmacocinetica n terapia medicamentoas, 1989 42
15
Timmerman P.M.M.B.L., de Vries R. and Ingelse B.A., Tailoring Bioanalysis for PK
Studies Supporting Drug Discovery, Cur. Topics Med. Chem., 1, 443-461 (2001).
16
Veber D.F., Johnson S.R., Cheng H.Y., Smith B.R., Ward K., Kopple K., Molecular Properties
That Influence the Oral Bioavailability of Drug Candidates, J. Med. Chem., 45, 2615-2623,
(2002).
198

19

Olkkola T., Brunetto A.V., Mattila M.J., Pharmacokinetics of oxicam nonsteroidal antiinflamatory agents, Clin.Pharmacokinet., 26(2), 107-20, (1994).
20
Guentert T.W., Stebler T., Banken L., Defoin R., Schmitt M., Relative biavailability of oral
dosage forms of tenoxicam, Arzneimittalforschung, 44(9), 1051-4, (1994).
30

P Mauvais-Jarvis, F Kuttem, F Wright: La progesterone administree par vois percutanee, Ann Endrocrin (Paris) 36,
55-62, 1975
52

Rescigno, A ; Lambrecht, RM ; Duncan, CC: Mathematical methods in the formulation of pharmacokinetic


models, in Lambrecht, Rescigno (eds.), Tracer kinetics and physiologic modeling, Berlin, Springer-Verlag,
59-119.
58
A Marzo, A Rescigno: Pharmacokinetics of endogenous substances: some problems and some solutions,
Eur JDrugMetab Pharmacokin, 18, 77-88 (1993)
59
A Rescigno, AK Thakur, A Marzo: On definition and use of term bioavailability,
Arzneim.-Forsch, 44, 1167-1169, (1994)
62
A Rescigno, E Gurpide, Estimation of average time residence, recycle and interconversion of
blood-borne compounds using tracer kinetics, J Ckin Endocrinol Metab, 36, 263-76 (1973)
64
Benga G, Popescu O, Pop Vl, Holmes RP: p-(chlormercury) benzensulfonate binding by
membranes proteins and the inhibition of water transport in human
erythrocytes,Biochemistry 25, 1535-1538, 1986
65
Benga G, Popescu O, Borza V, Pop Vl, Muresan A, Mocsy I, Brain A, Wriggleworth JM
: Water permeability of human erythrocytes. Identification of membrane proteins involved in
water transport, Eur J Cell Biol, 41, 252-262, 1986
67
Bischoff KB, Dedrik RL, Zaharko DS: Preliminary model for methotrexate
pharmacokinetics, J Pharm Sci, 59, 149-154,1970;
68
Bischoff KB, Dedrik RL, Zaharko DS, Longstreth JA, J Pharm Sci, 60, 1129,1971
69
Rowland, M. And S. Riegelman. 168. "Pharmacokinetics of Acetylsalicylic Acid and Salicylic
Acid after Intravenous Administration in Man," j. Pharm. Sci., 57:1313-1319
70
Rowland M., Benet L. Z., Graham G.G.: Clearance concepts tn Pharmacoktnettcs J.
Pharmacokin. Biopharm. 1.123 - 136, 1973

199